宁玉草莓茎尖组培快繁技术研究
江西农业学报２０１４，２６（３）：１６～１７ Ａｃｔａ Ａｇｒｉｃｕｈｕｒａｅ Ｊｉａｎｇｘｉ
宁玉草莓茎尖组培快繁技术研究
夏瑾，赵密珍，孟宪凤
（江苏省农业科学院园艺研究所，江苏南京２１００１４）
摘要：以宁玉草莓匍匐茎为外植体，进行消毒灭菌、茎尖分化、继代增殖和生根培养基筛选研究，结果表明：最佳消毒 方法为７５％乙醇４０ Ｓ＋０．１％升汞６—８ ｍｉｎ；草莓茎尖分化培养基：ＭＳ＋６一ＢＡ ０．５ ｍｓ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｓ／Ｌ；继代增殖培养 基：ＭＳ＋６一ＢＡ ０．５ ｍｓ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｓ／Ｌ，其增殖系数为９；生根培养基：１／２ＭＳ＋ＮＡＡ ０．０５ ｍｓ／Ｌ，生根率可达９６．６％。 关键词：宁玉草莓；组织培养；快繁技术 中图分类号：￥６６８．４文献标志码：Ａ文章编号：１００１—８５８１（２０１４）０３—００１６—０２
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｓｔｅｍ－—ｔｉｐ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｒａｐｉｄ Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ｏｆ Ｓｔｒａｗｂｅｒｒｙ“Ｎｉｎｇｙｕ’’
ＸＩＡ Ｊｉｎ，ＺＨＡＯ Ｍｉ—ｚｈｅｎ，ＭＥＮＧ Ｘｉａｎ—ｆｅｎｇ （Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００１４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｓｔｏｌｏｎｓ ｏｆ ｓｔｒａｗｂｅｒｒｙ ｖａｒｉｅｔｙ“Ｎｉｎｇｙｕ”ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｅｘｐｌａｎｔｓ．Ａｆｔｅｒ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ。ｗｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｔｈｅ ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉａ ｆｏｒ ｓｔｅｍ—ｔｉｐ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ｓｕｂｃｕｈｕｒａｌ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｏｏｔｉｎｇ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｕｓｉｎｇ ７５％ｅｔｈａｎｏｌ ｆｏｒ ４０ Ｓ ｐｌｕｓ ０．１％ＨｇＣ１，ｆｏｒ ６～８ ｍｉｎ：出ｅ ｂｅｓｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ＭＳ＋０．５ ｍｇ／ Ｌ ６一ＢＡ＋Ｏ．１ ｍｓ／Ｌ ＮＡＡ；ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒａｌ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｗａｓ ＭＳ＋０．５ ｍｇ／Ｌ ６一ＢＡ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，ａｎｄ ｉｔｓ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｗａｓ ９；ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｒｏｏｔｉｎｇ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ １／２ＭＳ＋０．０５ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ．ａｎｄ ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｒａｔｅ ｒｅａｃｈｅｄ ９６．６％． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：“Ｎｉｎｇｙｕ”ｓｔｒａｗｂｅｒｒｙ；Ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；Ｒａｐｉｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
近年来，我国草莓栽培面积逐年扩大，效益显著，
在生产中草莓育苗通常采用匍匐茎无性繁殖，该方法 繁殖系数低、速度慢，产量低，已不能满足规模化生产
的需求。采用组织培养可以实现快繁，满足规模化生
产的需求。
宁玉是江苏省农业科学院园艺研究所２００５年以 抗白粉病、耐低温能力比丰香强，且果实品质优的幸香
为母本，以优良草莓品种章姬为父本杂交获得的草莓 新品种…，该品种株型适中，果实成熟早；果形美观，风
味香甜，产量高，较耐贮运，商品性好；植株抗病虫能力 和适应性强，已在江苏、安徽、浙江、上海、湖南、江西、
贵州、福建、山东、黑龙江等省区栽培应用。目前，有关 组培快繁技术研究已有很多报道 ，但尚未建立宁
玉草莓种苗的快繁技术体系，这势必会影响其推广。 因此，本试验通过对宁玉草莓茎尖灭菌方式和茎尖分
化、继代增殖、生根等培养基等进行筛选研究，建立宁
玉草莓茎尖组培快繁技术体系，为其进一步研究和推
广应用奠定基础。
１材料与方法
１．１材料匍匐茎茎尖采白江苏省农业科学院园艺 研究所宁玉草莓大棚生产苗，采集时间为４月份。 １．２茎尖消毒方法从植株上剪取新长出来的匍匐
茎，带回实验室进行消毒处理，取１．５ ｃｍ左右的茎尖
用流水冲洗１ ｈ左右，先用７５％乙醇消毒４０ Ｓ，接着无
菌水冲洗２遍，然后按照以下处理分别进行消毒：处理
１：７５％乙醇４０ Ｓ＋０．１％升汞６ ｍｉｎ；处理２：７５％乙醇 ４０ Ｓ＋０．１％升汞８ ｍｉｎ；处理３：７５％乙醇４０ ｓ＋０．１％
升汞１０ ｍｉｎ；处理４：７５％乙醇４０ Ｓ＋１０％次氯酸钠１０
ｍｉｎ；处理５：７５％乙醇４０ Ｓ＋１０％次氯酸钠１５ ｍｉｎ；处
理６：７５％乙醇４０ Ｓ＋１０％次氯酸钠２０ ｍｉｎ；处理７：
７５％乙醇４０ Ｓ＋１０％双氧水５ ｍｉｎ；处理８：７５％乙醇４０
Ｓ＋１０％双氧水１０ ｍｉｎ；处理９：７５％乙醇４０ ｓ＋１０％双
氧水１５ ｍｉｎ，最后，每个处理消毒后用无菌水冲洗４～５ 遍，用灭过菌的镊子把茎尖接种到初代培养基里，每个
处理接种２１个茎尖，重复３次。接种１０ ｄ后调查茎尖
污染率和存活率，筛选出最适消毒方式。
１．３茎尖分化培养基剥取灭菌后宁玉匍匐茎茎尖，
切取茎尖生长点０．３～０．５ ｍｍ，接种到添加不同浓度
的６一ＢＡ和ＮＡＡ的ＭＳ基本培养基中，共９个处理：处
理１：６一ＢＡ ０．２ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０ ｍｇ／Ｌ；处理２：６一ＢＡ
０．２ ｍｓ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ；处理３：６一ＢＡ ０．２ ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ ０．２ ｍｓ／Ｌ；处理４：６一ＢＡ ０．５ ｍｓ／Ｌ＋ＮＡＡ ０ ｍｇ／
收稿日期：２０１３—０９—２６ 基金项目：农业科技成果转化资金项目（２０１２ＧＢ２Ｃ１００１５９）。 作者简介：夏瑾（１９８８一），女，江苏姜堰人，主要从事草莓组培及快繁研究。
３期 夏瑾等：宁玉草莓茎尖组培快繁技术研究 １７
Ｌ；处理５：６一ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｉ．＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ；处理６：６
一ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｉ￣＋ＮＡＡ ０．２ ｍｇ／Ｌ；处理７：６一ＢＡ １．０
ｍｇ／Ｉ￣＋ＮＡＡ ０ ｍｅ／１．；处理８：６一ＢＡ １．０ ｍｇ／Ｉ．＋ＮＡＡ
０．１ ｍｇ／Ｌ；处理９：６一ＢＡ １．０ ｍｇ／Ｉ￣＋ＮＡＡ ０．２ ｍｇ／Ｉ￣，
再加入蔗糖３０ ｇ／Ｌ、琼脂６．５ ｇ／Ｔ，，ｐＨ值为６．０，每个处
理接种茎尖２５个，２０ ｄ后统计茎尖萌芽率和苗的生长
状况。
１．４继代增殖培养基以ＭＳ为基本培养基，加不同
浓度的６一ＢＡ和ＮＡＡ，共９个处理：处理１：６一ＢＡ ０．２
ｍｇ／Ｉ￣＋ＮＡＡ ０ ｍｇ／Ｉ￣；处理２：６一ＢＡ ０．２ ｍｇ／Ｉ￣＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｉ￣；处理３：６一ＢＡ ０．２ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．２ ｍｇ／Ｌ；
处理４：６一ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０ ｍｇ／Ｌ；处理５：６一ＢＡ
０．５ ｍｇ／Ｉ￣＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ；处理６：６一ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｉ￣＋
ＮＡＡ ０．２ ｍｇ／Ｉ￣；处理７：６一ＢＡ １．０ ｍｇ／ｒ，＋ＮＡＡ ０ ｍｇ／
Ｌ；处理８：６一ＢＡ １．０ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ；处理９：６
一ＢＡ １．０ ｍｇ／Ｉ￣＋ＮＡＡ０．２ ｍｇ／Ｌ。初代１个月后，选取
长势一致的健壮宁玉草莓组培苗，接入以上ｐＨ值为
６．０的继代增殖培养基中，每２５ ｄ继代１次。
１．５生根培养基宁玉草莓苗快繁到９月底时，选取
长势一致的健壮宁玉草莓组培苗，接人生根培养基中，
共４个处理：处理１：１／２ＭＳ；处理２：１／４ＭＳ；处理３：１／
２ＭＳ＋ＮＡＡ ０．０２ ｍｇ／Ｌ；处理４：１／２ＭＳ＋ＮＡＡ ０．０５ ｍｇ／
Ｌ，每个处理转接６瓶，每瓶５株，培养２５ ｄ后调查草莓
苗的生根率和平均生根数等。
１．６炼苗移栽打开生根试管苗保鲜膜，在室内放上
１～２ ｄ，然后取出洗净培养基，移栽到配制好的基质里
（泥炭：珍珠岩：蛭石＝４：１：１），保持湿度９０％左右，适
当遮阴，保持通风，增加光照，３周后调查出苗的成
活率。
２结果与分析
２．１不同消毒剂的消毒效果选用升汞、次氯酸钠、 双氧水３种表面消毒剂分别对草莓茎尖进行消毒，结
果表明，升汞消毒６和８ ｒａｉｎ的效果明显比其他２种消
毒剂好；升汞１０ ｒａｉｎ和次氯酸钠１０、１５和２０ ｒａｉｎ对外
植体的伤害比较大，褐化多，双氧水消毒剂对外植体消
毒不彻底，污染比较严重（表１）。
表１ 不同消毒剂对草莓茎尖的消毒效果 个
２．２不同激素６一ＢＡ和ＮＡＡ浓度配比对茎尖分化 的影响由表２可知，在添加６一ＢＡ的基本培养基中，
ＮＡＡ加与不加都可以出芽，在较高６一ＢＡ浓度（０．５—
１．０ ｍｇ／Ｌ）的情况下，ＮＡＡ浓度为０．１ ｍｇ／Ｌ的萌芽率
高于０．２ ｍｇ／Ｌ，高浓度ＮＡＡ不利于宁玉茎尖的分化； 培养基中加６一ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｉ￣＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ，茎尖萌
芽率最高为９６％，其次为６一ＢＡ １．０ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｉ．培养基，萌芽率达９２％。从苗萌芽后的生长情况
来看，６一ＢＡ加到１．０ ｍｇ／Ｌ时有玻璃化苗，叶片畸形。
因此，认为６一ＢＡ０．５ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ培养基为
宁玉的最适分化培养基。
表２不同激素６一ＢＡ和ＮＡＡ浓度配比
对茎尖分化的影响
２．３不同激素６一ＢＡ和ＮＡＡ浓度配比对继代增殖
的影响由表３可知，培养基中６一ＢＡ浓度为０．２ ｍｇ／
Ｌ的增殖系数为３．５～４．０，６一ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ的增殖系
数为７．５—９．０，６一ＢＡ １．０ ｍｇ／Ｌ的增殖系数为８．０～
８．５，出现少量玻璃化苗；６一ＢＡ有利于芽的增殖，但高
浓度６一ＢＡ会导致玻璃化苗的出现；培养基中有无
ＮＡＡ对芽增殖影响不大，但ＮＡＡ可促进生根。培养基
ＭＳ＋６一ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ为最适继代培
养基。 表３不同激素浓度配比对继代增殖的影响
２．４不同培养基对草莓生根的培养 选取长势一致
的健壮宁玉草莓组培苗，接种到生根培养基中进行对
比，２５ ｄ后调查生根率，结果表明，这４个处理的生根
率都达到９０％以上，其中以１／２ＭＳ＋ＮＡＡ ０．０５ ｍｇ／Ｌ
为最好，生根率达到９６．６％，而且根粗壮，单株平均生
根６．９条（表４）。 （下转第２１页）
草莓新品系妙紫的组培快繁技术研究
山东农业科学２０１２，４４（５）：１７～１９ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
草莓新品系妙紫的组培快繁技术研究
陈晓流，崔 美，陈学森，彭福田
（山东农业大学园艺科学与工程学院／作物生物学国家重点实验室，山东泰安２７１０１８）
摘要：从草莓杂交育种的后代群体中选择出优系妙紫，以其茎段和茎尖为外植体，研究了侧芽和茎尖诱
导培养及增殖快繁、生根的适宜培养基，以建立其组培快繁的技术体系。结果发现：（１）茎段和茎尖培养的适 宜培养基是ＭＳ＋０．５ ｍｓ／Ｌ ＢＡ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，芽都能诱导萌发，且新梢生长健壮。（２）适宜的增殖快繁培 养基是ＭＳ＋０．５ ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋０．０５ ｍｓ／Ｌ ＮＡＡ，增殖系数较高，可达ｌ０倍，增殖方式是以腋芽增殖为主，新梢生 长健壮。在激素水平增加的ＭＳ＋１．０ ｍｓ／Ｌ ＢＡ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ培养基上，虽然增殖系数可达２０倍，但芽丛 长势弱。（３）适宜的生根培养基是１／２ＭＳ＋０．５ ｍｓ／Ｌ ＮＡＡ，新梢平均生根数达４．５条。 关键词：草莓；品系；组织培养；增殖培养
中图分类号：Ｓ６６８．４０４ ．３ 文献标识号：Ａ 文章编号：１００１—４９４２（２ｏ１２）０５一ｏｏ１７—０３
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｒａｐｉｄ Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ
ｆ０ｒ Ｎｅｗ Ｓｔｒａｗｂｅｒｒｙ Ｌｉｎｅ Ｍｉａｏｚｉ
ＣＨＥＮ Ｘｉａｏ—ｌｉｕ，ＣＵＩ Ｍｅｉ，ＣＨＥＮ Ｘｕｅ—ｓｅｎ，ＰＥＮＧ Ｆｕ—ｔｉａｎ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ／ Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＣｒｏｐ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｔａｉａｎ ２７１０１８，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｈｅ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｓｔｒａｗｂｅｒｒｙ ｌｉｎｅ Ｍｉａｏｚｉ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｃｒｏｓｓ ｂｒｅｅｄｉｎｇ．Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ
草莓组培快繁技术及其示范推广
龙源期刊网
草莓组培快繁技术及其示范推广
作者：钱雯婕 张 静 王建春 吴婷 张黎凤 魏红英
来源：《现代农业科技》2019年第24期
摘要; ; 从脱毒苗培育、原原种培育、生产种苗扩繁等3个方面详细总结了草莓组培快繁技术，并介绍了该技术的示范推广情况，以期为草莓无病毒化生产提供借鉴。
关键词; ; 草莓;组培快繁技术;示范推广
中图分类号; ; S668.4; ; ; ; 文献标识码; ; B
文章编号; ;1007-5739（2019）24-0065-01; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;开放科学（资源服务）标识码（OSID）
草莓是一种营养价值和经济价值均较高的多年生草本植物，富含蛋白质、无机盐、VC等营养物质，在国内外市场备受青睐，被誉为“水果皇后”。草莓栽培多采用无性繁殖种苗，繁殖效率低，种苗易退化，果实渐小，且使病毒积累逐年加重，限制了草莓产业的发展。因此，利用组织培养获得大量脱毒苗是解决这一问题的有效途径[1-2]。笔者针对昼夜温差大、干旱少雨的新疆哈密地区草莓生长发育特性、生产特点以及所处的自然生态条件，采用茎尖脱毒、瓶内增殖、温室扩繁相结合的方法，使草莓栽培向无病毒草莓迈进，推动无毒种苗向专业化、生产化的方向发展，从而逐渐带动十三师乃至哈密地区的草莓生产向无病毒化迈进。
本文选用草莓优质品种妙香7号，它是由山东农业大学用红颜、甜查理杂交选育的暖地草莓品种，具有产量高、抗病性强、口感好等优点。通过确定最优培养基配方和培养条件，利用显微镜逐层剥离生长点接种后置于培养室中培养，经过培育，产生小芽丛苗再进行继代培养。草莓组培苗经历外植体接入瓶内增殖培养、生根培养、培养健壮的瓶内苗以及从瓶内移栽到营养钵中，从而初步建立草莓脱毒苗组培快繁技術体系。将营养钵中的组培苗进行病毒检测从而筛选出无病毒原种苗，之后便可大量繁育，初步建立草莓脱毒种苗三级繁育术体系。
《“香野”草莓茎尖组培快繁体系以及玻璃化法超低温保存体系的建立》
《“香野”草莓茎尖组培快繁体系以及玻璃化法超低温保存体系的建立》
香野草莓茎尖组培快繁体系及玻璃化法超低温保存体系的建立
一、引言
随着现代生物技术的发展，植物快繁技术以及超低温保存技术已广泛应用于草莓等果树的繁殖和保护中。其中，香野草莓以其果实大、甜美而深受人们喜爱。为满足市场需求并保障香野草莓的品质与供应，本研究的重点在于构建香野草莓茎尖组培快繁体系和玻璃化法超低温保存体系。这不仅对实现香野草莓的高效生产有着重大意义，也对保护其遗传资源、保持其优良品质具有深远影响。
二、香野草莓茎尖组培快繁体系的建立
1. 材料与方法
本研究采用香野草莓的茎尖作为外植体，利用组织培养技术进行快繁。在无菌操作条件下，将消毒后的茎尖切取并接种于添加适宜浓度生长调节剂的MS培养基上。在恒温恒湿的环境中培养，并定期观察记录其生长情况。
2. 结果与分析
经过反复试验与调整培养条件，我们发现在MS培养基中添加适量的生长调节剂，如细胞分裂素和生长素等，能有效促进香野草莓茎尖的生长与分化。同时，通过控制光照、温度等环境因素，显著提高了香野草莓的快繁效率。实验结果表明，该体系能在短时间内大量繁殖出健康、优质的香野草莓苗。
三、玻璃化法超低温保存体系的建立
1. 材料与方法
为保证香野草莓的遗传资源不受损失并保持其优良品质，我们采用了玻璃化法进行超低温保存。该方法通过将植物材料与玻璃化溶液混合，形成一种特殊的玻璃化状态，以降低冰晶的形成和细胞损伤。我们将处理后的材料保存在液氮环境中进行长期保存。
2. 结果与分析
实验结果表明，通过玻璃化法处理后的香野草莓材料在超低温环境下保存效果良好。经过解冻后，其生理生化指标与未处理的材料相比无显著差异，仍能保持其原有的优良品质和生长潜力。这为香野草莓的遗传资源保护和长期保存提供了有效的技术手段。
四、结论
本研究成功建立了香野草莓茎尖组培快繁体系和玻璃化法超低温保存体系。通过组织培养技术，我们实现了香野草莓的高效繁殖；通过玻璃化法超低温保存技术，我们成功保护了其遗传资源并保持了其优良品质。这些技术的建立为香野草莓的生产和保护提供了重要的技术支持，具有重要的实际应用价值。
《“香野”草莓茎尖组培快繁体系以及玻璃化法超低温保存体系的建立》 2
《“香野”草莓茎尖组培快繁体系以及玻璃化法超低温保存体系的建立》
香野草莓茎尖组培快繁体系及玻璃化法超低温保存体系的建立
一、引言
随着现代农业科技的不断发展，草莓的种植与繁殖技术也得到了显著提升。香野草莓作为市场上的热门品种，其繁殖效率及保存技术的改进尤为重要。本文旨在介绍香野草莓茎尖组培快繁体系以及玻璃化法超低温保存体系的建立，以期为香野草莓的规模化种植及保存提供技术支持。
二、香野草莓茎尖组培快繁体系的建立
1. 材料与设备
组培所需材料包括香野草莓的茎尖、MS培养基、蔗糖等；设备包括组培室、灭菌锅、接种工具等。
2. 操作流程
（1）选材：选择健康、无病虫害的香野草莓植株的茎尖作为组培材料。
（2）预处理：将选好的茎尖在无菌条件下进行表面消毒处理。
（3）接种：将处理好的茎尖接种到MS培养基上，置于组培室内进行培养。 （4）观察与繁殖：定期观察培养情况，挑选生长良好的茎尖进行扩繁。
3. 快繁体系特点
香野草莓茎尖组培快繁体系具有繁殖速度快、保持品种纯度、节省空间等优点，为规模化种植提供了技术支持。
三、玻璃化法超低温保存体系的建立
1. 材料与设备
超低温保存所需材料包括香野草莓的组织块、玻璃化液、冷冻保护剂等；设备包括超低温冰箱、冷冻干燥机等。
2. 操作流程
（1）预处理：将选好的香野草莓组织块进行清洗、消毒处理。
（2）玻璃化处理：将组织块放入玻璃化液中，进行逐步替换冷冻保护剂的过程，直至完全玻璃化。
（3）超低温保存：将玻璃化后的组织块放入超低温冰箱中保存。
（4）复苏：需要时将保存的组织块取出，进行复苏处理，使其恢复活力。
3. 玻璃化法特点
玻璃化法超低温保存体系具有保存效果好、操作简便、对组织损伤小等优点，为香野草莓的长期保存及种质资源库的建设提供了有效手段。
四、结论 本文成功建立了香野草莓茎尖组培快繁体系及玻璃化法超低温保存体系，为香野草莓的规模化种植及长期保存提供了技术支持。茎尖组培快繁体系具有繁殖速度快、保持品种纯度等优点，可有效提高香野草莓的种植效率；而玻璃化法超低温保存体系则具有保存效果好、操作简便等优点，为种质资源的长期保存提供了有效手段。未来，我们将继续优化这些体系，以期为香野草莓的种植与保存提供更加高效、便捷的技术支持。
“宁玉”草莓设施栽培技术
农技推广 农业开发与装备２０１８年第３期
‘‘ｒｌ 丁 玉＂草莓设施栽培技术
陈迪娟，成英，高传清
（连云港市赣榆区农业科学研究所，江苏连云港２２２１ Ｏ０）
摘要： “宁玉”是设施草莓栽培的新品种，口感好、成熟早、产
量高。从土壤消毒、定植及病虫害绿色防控等方面介绍了“宁
玉”草莓设施栽培技术。
关键词： “宁玉”草莓；设施；栽培技术
０引言 宁玉草莓由江苏省农科院园艺研究所育成，属早熟草莓品
种，２０１０年通过江苏省鉴定，适宜江苏省设施栽栽培种植。
该品种植株生长势强，半直立。叶椭圆形，大而厚。雄蕊平
于雌蕊，花粉发芽力高，授粉均匀。果实圆锥形，着红色，光泽
强，种子分布稀且均匀，果面平整，坐果率高，畸形果少，外观
整齐漂亮。平均果重１５．５ｇ。果肉橙红，髓心橙色，风味极佳，甜
香浓，酸味很淡，可溶性固形物含量１０．７％，平均产２ Ｏ００ｋ￣６６７ｍ
以上。设施栽培一般８月底９月上旬定植，１Ｏ月中下旬现蕾，１ １月
下旬至１２月初果实初熟。
１土壤消毒，整地作垄
大棚草莓进入收获终期后（５月底），先挖除有病的草莓植
株，后将余下的草莓植株的地上部分茎叶割下均匀放到垄沟内，
再挖除植株的根系，然后将大棚密闭，对大棚内环境及土壤进行
为期１周的太阳能高温消毒。消毒结束后，撤除大棚膜，将未腐
熟的有机质（豆饼或菜饼１５０ｋｇ、羊粪等农家￣］Ｅ３ｔ）均匀撒施在
棚内，然后将棚内灌水，水位接近垄面，用拖拉机进行旋耕，
整平土面，水位高于土表１～２ｅｍ，保持约３０天；水淹３０天后，
将棚膜盖上并密封，或待水分增发后土表面略干时在地面上覆
盖农膜密封，处理约１５天，密封处理期间，土表干燥时，要进行
补水使土壤湿润。处理结束后，揭去农膜，深翻，施人４５％复合
￣ｌＥ５０ｋｇ／６６７ｍ ，起垄，做成高垄，垄宽５０ｃｍ、垄沟３０ｅｍ、垄高
３０ｅｒａ。 ２定植
８月２５日一９月５日前定植。定植６ ５００～７ ０００株／６６７ｍ ，每垄
草莓组织培养与快速繁殖技术
草莓组织培养与快速繁殖技术
作者：于超，孙秀霞，薛琳
来源：《新疆农垦科技》 2017年第2期
摘要：以“红颜”草莓的匍匐茎尖为外植体，选择附加不同激素组合的MS培养基为诱芽培养基和继代培养基，以1/2MS为生根培养的基本培养基，对“红颜”草莓的组织培养及快繁进行研究。结果表明：草莓茎尖在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L培养基上能很好地诱导不定芽形成，其诱导率高达80％；继代增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.5mg/L+IAA0.5mg/L+GA1.0mg/L时增殖系数较高；生根培养基为1/2MS+IAA0.5mg/L时生根率可达99％，移栽至田间后，成活率高且匍匐茎繁殖能力强。
关键词：“红颜”草莓；组织培养；激素；快繁技术
草莓是蔷薇科多年生草本植物，营养丰富、果实鲜艳、柔软多汁，且富含糖、蛋白质、磷、钙、铁及大量维生素和有机酸，被誉为“水果皇后”，是一种具有医疗价值的高档水果佳品，深受人民喜爱[1]。草莓繁殖主要靠匍匐茎分株提供种苗，效率低，速度慢，不能满足大规模生产的需求；而且在长期无性繁殖中，容易导致病毒感染严重，表现为植株矮化、畸形果比例增加，多伴随有花叶、黄边、斑驳等多种症状，产量低下，种苗退化，产量和品质下降。利用组织培养对草莓进行快速繁殖获得大量脱毒苗是解决这一问题的有效途径，它不仅可以快速繁殖大量优质草莓种苗，更有利于品种提纯和更新，减少病毒感染，提高产量和品质，是促进草莓产业化的有效途径[2]。
目前，有关草莓组培的报道很多，但不同品种草莓的特性不同，培养方法也有差异[3-5]。“红颜”草莓因其具有耐低温能力强、连续结果性强、抗病性强、产量高、果型大、口味佳、外观漂亮、商品性好等优点，普遍被认为是一个很有发展前途的优良品种。本文以“红颜”草莓的茎尖为外植体，进行组织培养，观察了草莓组织培养各个阶段的最佳生长条件，以期为“红颜”草莓试管苗的工厂化生产奠定基础。
草莓茎尖组织培养防褐化及玻璃化研究
草莓茎尖组织培养防褐化及玻璃化研究
付崇毅;姜伟;王建国;杜金伟
【摘 要】以草莓茎尖和分化形成的不定芽为试验材料，研究了不同防褐化措施对草莓茎尖愈伤诱导及抗褐化效果的影响，继代培养中逐代降低6-BA浓度对不定芽增殖及玻璃化的影响。结果表明：草莓茎尖诱导培养基6-BA最适宜浓度为1．5mg／L，在诱导培养基中添加50mg／L Vc可显著降低茎尖褐化率，黑暗预处理对防止草莓茎尖褐化效果不显著。在草莓组培苗继代培养基质中逐代降低6-BA浓度，可抑制草莓组培苗玻璃化。
【期刊名称】《北方农业学报》
【年(卷),期】2016(044)001
【总页数】6页(P46-51)
【关键词】草莓;组织培养;褐化;玻璃化
【作 者】付崇毅;姜伟;王建国;杜金伟
【作者单位】内蒙古农牧业科学院,内蒙古呼和浩特010031;;;;
【正文语种】中 文
【中图分类】S668.4
草莓属于蔷薇科草莓属多年生常绿草本植物，其生长周期短、果实成熟早,经济效益好，是我国栽培最早、面积最大的设施果品种类之一。目前，内蒙古自治区日光温室草莓种植面积已超过667 hm2，并呈迅速发展态势。近年来随着草莓组培脱毒苗的推广普及，草莓组培脱毒苗需求量增加。但因内蒙古自治区当地缺少专业的草莓育苗企业，加之内蒙古自治区科研单位对草莓组培脱毒苗繁育技术缺乏系统、连续性的研究，生产上所需草莓苗大部分由自治区外调入，草莓组培脱毒苗供应不足的问题日益严重。
目前，草莓茎尖组织培养是生产上获得脱毒苗的主要途径之一。有关草莓组培脱毒的研究报道很多，主要集中在脱毒方法及检测[1~3]，组培环境、营养及激素条件[4-5]，组培过程中细胞发育及生理[6]等方面的研究。本试验在国内现有研究基础上，对草莓茎尖组培快繁的生长条件进行了研究，尤其针对草莓组培过程中出现的褐化、玻璃化等问题，开展了大量研究，以期建立草莓组培脱毒苗的快繁体系，为内蒙古自治区草莓组培脱毒苗规模化快速培育种苗提供技术支持。
草莓的 组 织 培 养与快速繁殖
２００５年中国科协学术年会论文集—第１０分会场：现代农业工程与自然资源高效利用
草幕的组织培养与快速繁殖
于莉娟‘陈涛“黄敏“桑有顺今
成都市第二农业科学研究所生物技术实验室，６１１１３０
摘要：利用植物生物技术对生产上适栽苹毒品种进行茎尖剥离、脱毒。对适合草毒增殖、分化、生根的培养
基进行了系统的研究，建立了一套经济、高效的快繁体系。本文来用两种培养基进行草每红心的组
织培养快速繁殖的研究，将诱导芽分化和试管苗增技合二为一，缩短了培养周期，节约了大量人力、 物力，降低了生产成本，在短期内即可获得大童脱毒组培苗。获得的脱毒组培苗具有生长旺盛一致，
在同样的外界条件下产童高、省水肥的优点。脱毒组培苗的培育和大童生产，为大田生产优质草毒
提供了优良的种苗，大大提高了苹毒果实的产全和品质。在种质资源保存方面也有重要意义。本研 究成果为草毒的快速繁殖提供了一条新的途径。关健词：生物技术草毒组织培养快速繁技
近年来，草每作为经济作物栽培发展很快，随着栽培面积的加大，病毒病害日趋严重。国内专家研究证明，感染了病毒病的草毒果实逐年变小、畸形，品质差，生长缓慢，一般减产３０００－８００ｏ。解决这一问题有效
的方法之一是利用草落茎尖分生组织离体培养获得脱毒苗，并在好的隔离条件下进行种苗繁育。 ２００。年以来，作者所在的生物实验室科技人员借鉴国内专家研究结果，对草薄茎尖分生组织脱毒苗的
培养进行了研究，摸清了脱毒苗繁育规程和速繁体系，已具备了生产脱毒种苗的成熟技术和条件，先后引进
了“甜蜜”、“红心”、“丰香”、“超甜”等优良草薄品种，采用热处理与茎尖分生组织培养相结合的方法，进行了规模化生产，成功地培育了数十万株脱毒苗。
１材料
取葡甸茎、茎基部茎段。
２草薄热处理
将草薄植株在３５－３８＇Ｃ条件下，持续处理６＾－８ ｈ，钝化了病毒的活性，使之不能增殖，降低感染能力。
３培养基及培养条件
１）芽诱导与增殖培养基ＭＳ十６－ＢＡＯ． ５ ｍｇ／Ｉ．
草莓茎尖培养快繁体系研究
草莓茎尖培养快繁体系研究
何欢乐;阳静;蔡润;潘俊松
【期刊名称】《上海交通大学学报：农业科学版》
【年(卷),期】2003(021)B12
【摘 要】以草莓“丰香”品种为材料，利用匍匐茎剥取茎尖，以不同大小茎尖接种到不同配方的茎尖诱导培养基中，观察草莓茎尖在各种培养基上的生长情况。实验结果表明草莓茎尖的成活率与剥取的茎尖大小有关，与培养基配方有关。在相同的培养基上，剥取茎尖越大，成活率越高。同样以0．5mm大小茎尖，在培养基MS+BA0．5mg／L上的成活率最高，达到66．7％；转接到各增殖培养基上后生长良好，并在MS+BA0．5mg／L培养基上增殖系数最高，为6．05；再生芽转接到生根培养基1／2MS上，培养20d左右，生根率达100％，平均生根6．13条／株。生根苗在全蛭石的基质上驯化，成活率高达98．33％，
【总页数】5页(P61-65)
【作 者】何欢乐;阳静;蔡润;潘俊松
【作者单位】上海交通大学农业与生物学院，上海201101;上海市白茅岭监狱，安徽242242
【正文语种】中 文
【中图分类】S668.4
【相关文献】 1.草莓茎尖培养快繁体系研究 [J], 何欢乐;阳静;蔡润;潘俊松
2.培养基和外源激素对‘章姬’草莓茎尖培养的影响研究 [J], 金真;王康丽;梁佳惠;梁树乐;
3.培养基和外源激素对‘章姬’草莓茎尖培养的影响研究 [J], 金真;王康丽;梁佳惠;梁树乐
4.红实美草莓茎尖培养快繁体系研究 [J], 王会
5.红实美草莓茎尖培养快繁体系研究 [J], 王会
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草莓脱毒苗组培快繁技术研究
中国南方果树
．‘０墙眷毡ｉ一诱导的愈伤组织转接 ＭｓＢ丹化
培养基上，塌化率乜较高。总体而言，虽然愈伤组织 的求 不吲，形志差异明显，但在分化培养基上的分
化蜘 和 化 腰同愈倘组织的形态之间 存在明 ２ ’话导培养基上产生的革莓愈伤经纽 矗不了 培养基上的表现 ２００２年第３】卷第２期
显的相关关系，邮在本试验中，ｉｔ非致密瓤ｊ｝｛＿栈愈伤
组织具有较高的分化潜力
３讨论
一般而言、植物离体培养产牛的愈悔组织可分 为胚性愈伤组织和阼 性愈伤主Ｉ王 一费扦呈致密颗
粒状，后者质地松软呈求渍牧 在多数情 下，桎性 愈伤组织比非胚性愈伤组织 有较高的植株再生能
力，即致密颗粒状愈伤组势｛具☆较高酌舒化能力 本试验结果袁明，虽然提高固化剂６ｅｌｒｉｔｅ浓度，能使
草莓花药愈伤组织呈致密颗粒状，Ｊｉ相对含水量Ｆ 降，但草莓花药愈伤组织的形态差异与其分化能力
之间不存在明显的相关关系 分化培养基固化剂浓
度对草莓花药愈伤组织分化频率也无明显影响．与 冯双华等的报道不一致，联系到率试验与冯双华等
试验的作物和固化剂种类不同，笔者认为．固化剂对 愈伤组织谤导和分化的影响可能固固化剂种类和作
物而异。在本试验条件Ｆ．Ｇｅｌｆｉｔｅ浓度改变了愈伤 组织的形态，但不提高它的分化频率，因此．有必要
进一步研究不同形志的愈伤组织的分化条件。．
草莓脱毒苗组培快繁技术研究
许淑琼
（剃北省农 科学院阿岂工程技术【ｆ＿心武汉４３００６４
草莓是一种非常容易受病害侵染的植物 据国
外研究发现，有２０多种病毒侵染草莓 长期大田丹 株繁殖容易使草莓植株中病毒积累．导致草莓品种 退化，表瑚为植株逐渐矮化．匍匐茎发生减少，产量
降低．果实峦小，严重影响经济收益。利用草莓茎尖
培育脱毒草莓苗已成为草莓业发展的必要环节 本 研究针对脱毒草莓苗快速繁殖技术进行探讨。
１材料与方法
试材为丰香草莓匍匐茎。无菌柑料的建立采用 Ｍｓ＋０．５ｒ 【６－ＢＡ＋Ｏ．０ｌｌ ｌ ＮＡＡ＋３０ ｌ蔗糖培养