土壤全氮测定法半微量开氏法
土壤全氮的测定-开氏法
土壤全氮测定 ——半微量开氏法【方法原理】样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机物，经过复杂的高温分解反应，转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。
碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出土壤全氮量（不包括全部硝态氮）。
包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮。
在高温下硫酸是一种强氧化剂，能氧化有机化合物中的碳，生成CO 2，从而分解有机质。
↑+↑+−−→−+22242222CO SO O H C SO H 高温样品中的含氮有机化合物，如蛋白质在浓H 2SO 4的作用下，水解成为氨基酸，氨基酸又在H 2SO 4的脱氨作用下，还原成氨，氨与H 2SO 4结合成为硫酸铵留在溶液中。
Se 的催化过程如下：O H SO SeO H Se SO H 22324222+↑+−→−+O H SeO SeO H 2232++−→−↑+−→−+22CO Se C SeO由于Se 的催化效能高，一般常量法Se 粉用量不超过0.1～0.2g ，如用量过多则将引起氮的损失。
4232432424)()(SO H SeO NH SeO H SO NH +−→−+↑+++−→−223324292)(3N O H Se NH SeO NH以Se 作催化剂的消煮液，也不能用于氮磷联合测定。
硒是一种有毒元素，在消化过程中，放出H 2Se 。
H 2Se 的毒性较H 2S 更大，易引起人中毒。
所以，实验室要有良好的通风设备，方可使用这种催化剂。
↑+↑+↑+−→−++∆O H CO SO SO Cu SO H C CuSO 222424242342234↑+↑+−→−+2244242222SO O H CuSO SO H SO Cu褐红色 蓝绿色当土壤中有机质分解完毕，碳质被氧化后，消煮液则呈现清澈的蓝绿色即“清亮”，因此硫酸铜不仅起催化作用，也起指示作用。
土壤全氮、全磷测定
土壤全氮的测定（半微量开氏法）一、方法及原理开氏法分为样品的消煮和消煮液中铵态氮的定量两个步骤。
（1）样品的消煮样品用浓硫酸高温消煮时，各种含氮有机化合物经过复杂的高温分解反应转化为铵态氮（硫酸铵），这个复杂的反应，总称为开氏反应。
上述消煮不包括全部硝态氮，若需包括硝态氮和亚硝氮的全部测定，应在样品消煮前，先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮，再用还原铁粉使全部硝态氮还原而转化成铵态氮。
由于土壤中硝态氮一般情况下含量极少，故可忽略不计。
（2）消煮液中铵的定量消煮液中的铵态氮可根据要求和实验室条件选用蒸馏法，扩散法或比色法等测定。
常用的蒸馏法是将含(NH4)2SO4 的土壤消煮液碱化，使氨逸出，用硼酸溶液吸收，然后用标准酸溶液滴定硼酸中吸收的氨。
计算土样中全氮的含量。
硼酸吸收NH3 的量，大致可按每ml 1%H3BO3 最多能吸收0.46mgN 计算。
如1ml 2%的H3BO3 最多可吸收1×2×0.46 ≈1mgN。
三、试剂配制（1）浓H2SO4 （分析纯、比重1.84）（2）10molL-1 NaOH 210g 分析纯分析纯NaOH 放入研质烧杯中加水约200ml，搅动，溶解后转入硬质剂瓶中，加塞，防止吸收空气中的CO2。
放置几天，待Na2CO3 沉降后，将清液虹吸到盛有约80ml 无CO2 的水的硬质瓶中，加水至500ml。
瓶口装一碱石棉管，以防吸收空气中的CO2。
（3）0.01molL-1HCl 标准溶液先将8.5ml 浓HCl 加水至1 升，用硼砂（Na2B4O7 ⋅10H2O）或160℃烘干的Na2CO3 标定其浓度（约0.1molL-1HCl）。
然后用水准确稀释10 倍后使用。
（4）溴甲酚绿—甲基红混合指示剂0.5g（或0.099g）溴甲酚绿、0.1g（或0.066g）甲基红于玛瑙研钵中，加入少量95%乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95%乙醇至100ml。
土壤—全氮的测定—半微量凯氏法
全氮的测定—半微量凯氏法1 范围本方法适用于土壤全氮的测定。
2 原理土壤氮分为有机态和无机态两部分，两部分之和称为土壤全氮，它不包括土壤空气中的氮。
氮素是作物生长的重要营养元素之一，在土壤肥力中起重要作用。
分析土壤全氮及其各种形态氮的含量是评价土壤肥力和合理使用氮肥的主要依据。
全氮的测定常采用凯氏消煮法，消煮时间较长。
现改进以硫酸铜、硫酸钾和硒粉作催化剂，加入浓硫酸消煮，在高温下将土壤中的含氮化合物转变为硫酸铵，然后用氢氧化钠碱化，加热蒸馏出氨，经硼酸吸收后，用盐酸标准溶液滴定而计算全氮量。
3 试剂3.1 混合催化剂，按100∶10∶1比例称取硫酸钾（K2SO4）、硫酸铜（CuSO4·5H2O）和硒粉（Se），混合，研细，过0.25mm筛孔。
3.2 硫酸（ρ 1.84g/mL）。
3.3 氢氧化钠溶液：称取400g氢氧化钠，溶于水，再加水稀释至1000mL。
3.4 甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：称取0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红，溶于100mL 乙醇中，变色范围pH4.4(红)―5.4（蓝），贮存期不超过2个月。
3.5 硼酸指示剂溶液：称取20g硼酸（H3BO3），溶于1000mL水中。
使用前每100mL硼酸溶液中加入2mL甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，以稀氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节溶液至紫红色(pH 4.5)，即为硼酸指示剂溶液。
3.6 盐酸标准溶液：0.02mol/L，每1000mL水中加入1.8mL盐酸（ρ 1.19g/mL），混匀。
标定：称取1.9068g硼砂（Na2B4O7·10H2O），精确至0.0001g，加水溶解后稀释至500mL，得0.0200mol/L硼砂标准溶液。
吸取20.00mL 0.0200mol/L硼砂标准溶液置于100mL锥形瓶中，加1滴甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，用盐酸标准溶液滴定至溶液由蓝色变为紫红色为终点。
同时做空白试验。
盐酸标准溶液的浓度按下式计算：式中：C——盐酸标准溶液浓度，mol/L；C——硼砂标准溶液浓度，mol/L；1V——硼砂标准溶液体积，mL；1V——盐酸标准溶液用量，mL；2V——空白试验消耗盐酸标准溶液体积，mL。
总氮测定
中华人民共和国国家标准土壤全氮测定法（半微量开氏法）中华人民共和国国家标准土壤全氮测定法（半微量开氏法）Method for the determinationof soil total nitrogen(Semi-micro Kjeldahl method)UDC 631.423GB 7173－87本标准适用于测定土壤全氮含量。
1 适用范围样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为铵态氮。
碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮）。
包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮。
2 仪器、设备2.1 土壤样品粉碎机；2.2 玛瑙研钵；2.3 土壤筛：孔径1.0mm（18目）；0.25mm（60目）；2.4 分析天平：感量为0.0001g。
2.5 硬质并氏烧瓶：容积50ml，100ml；2.6 半微量定氮蒸馏装置；2.7 半微量一管：容积10ml、25ml；2.8 锥形瓶：容积150ml；2.9 电炉：300W变温电炉。
3 试剂3.1 硫酸（GB 625－77）：化学纯；3.2 硫酸（GB 625－77）或盐酸（GB 622－77）：分析纯，0.005mol/L硫酸或0.01mol/L盐酸标准溶液；3.3 氢氧化钠（GB 629－81）：工业用或化学纯，10mol/L氢氧化钠溶液；3.4 硼酸－指示剂混合液；3.4.1 硼酸（GB 628－78）：分析纯，2%溶液（W/V）；3.4.2 混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG3－1220－79）和0.1g甲基红（HG3－958－76）于玛瑙研钵中，加入少量95%乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95%乙醇至100ml。
使用前，每升硼酸溶液中加入20ml混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）。
土壤全氮的测定-开氏法
土壤全氮测定 ——半微量开氏法【方法原理】样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机物，经过复杂的高温分解反应，转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。
碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出土壤全氮量（不包括全部硝态氮）。
包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮。
在高温下硫酸是一种强氧化剂，能氧化有机化合物中的碳，生成CO 2，从而分解有机质。
↑+↑+−−→−+22242222CO SO O H C SO H 高温样品中的含氮有机化合物，如蛋白质在浓H 2SO 4的作用下，水解成为氨基酸，氨基酸又在H 2SO 4的脱氨作用下，还原成氨，氨与H 2SO 4结合成为硫酸铵留在溶液中。
Se 的催化过程如下：O H SO SeO H Se SO H 22324222+↑+−→−+O H SeO SeO H 2232++−→−↑+−→−+22CO Se C SeO由于Se 的催化效能高，一般常量法Se 粉用量不超过0.1～0.2g ，如用量过多则将引起氮的损失。
4232432424)()(SO H SeO NH SeO H SO NH +−→−+↑+++−→−223324292)(3N O H Se NH SeO NH以Se 作催化剂的消煮液，也不能用于氮磷联合测定。
硒是一种有毒元素，在消化过程中，放出H 2Se 。
H 2Se 的毒性较H 2S 更大，易引起人中毒。
所以，实验室要有良好的通风设备，方可使用这种催化剂。
↑+↑+↑+−→−++∆O H CO SO SO Cu SO H C CuSO 222424242342234↑+↑+−→−+2244242222SO O H CuSO SO H SO Cu褐红色 蓝绿色当土壤中有机质分解完毕，碳质被氧化后，消煮液则呈现清澈的蓝绿色即“清亮”，因此硫酸铜不仅起催化作用，也起指示作用。
土壤全氮的测定 半微量凯氏法方法验证报告
土壤全氮的测定NY/T53-1987半微量开氏法验证报告1、目的通过对实验人员、设备、物料、方法，环境的能力确认，验证实验室均已达到各种要求，具备开展此实验的能力。
2、方法简介样品在催化剂的作用下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为铵态氮。
碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量（包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高猛酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化为铵态氮）3、仪器设备及药品验证情况3.1使用仪器设备：土样筛、分析天平、电热板、50ml酸式滴定管、锥形瓶250ml 、容量瓶100ml/250ml 、移液管1ml/25m/50ml、烧杯50ml、蒸馏装置、PH试纸、研钵。
3.2设备验证情况设备验收合格。
4、环境条件验证情况4.1本方法对环境无特殊要求。
4.2目前对环境的设施和监控情况天平室环境指标：温度:28℃;湿度53%。
4.3环境验证条件符合要要求5、人员能力验证5.1该项目人员配备情况有二名以上符合条件的实验人员。
5.2人员培训及考核情况通过培训，考核合格，相关记录见人员技术档案。
6、标准物质及试剂验证情况6.1方法所需标准（物质）溶液及试剂情况6.1表6.2配备情况6.2表7、方法验证情况7.1方法要求7.11检出限：方法无要求7.12 精密度：方法无要求7.13准确度：方法无要求7.2目前该项目本实验的精密度、检出限、准确度的实际水平。
7.21精密度表7.21测得相对标准偏差为0.62%。
7.22检出限表7.22空白测定结果此方法检出限为0.007%100m014.0)0(%⨯⨯⨯-=H C V V ）土壤全氮（ 式中：V ————滴定试液时所用酸标准溶液的体积，ml ； V0————滴定空白时所用酸标准溶液的体积，ml ； C H ————酸标准溶液的浓度mol/L 0.014————氮原子的豪摩质量； m ————烘干土样质量，g 。
土壤全氮磷钾快速测定实验方法
土壤全氮磷钾快速测定实验方法土壤全氮磷钾快速测定实验方法一般测定土壤全氮、磷、钾都是分开测定的，但是我们可以通过统一消煮、定容，然后再从定容液中分别取出一部分分别测定全氮、全磷、全钾，这样的话我们就节约了大量的时间。
而且消煮好的消煮液可以放两三天而不会影响测定结果。
消化：称量0.25mm 土样1.0000g 于消化管中，加少量蒸馏水湿润，加5ml 浓硫酸，再加6~8滴高氯酸，消化至消化液呈亮蓝色，定容至100ml ，待用。
一、全N(半微量开氏法)1 蒸馏定氮将消化液定量转入蒸馏瓶中，加水至约200ml 。
沿瓶内壁加30ml 浓碱，蒸馏20min ，以25mlH 3BO 3 溶液吸收(其中加2滴定氮混合指示剂)。
用硫酸标准溶液滴定。
同时做空白实验。
2 结果计算))(21(00.1400.14))(21(/)(0420421V V SO H c m V V SO H c kg g N -=?-=?-ω 二、全P1.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml 容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。
轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸(定量试纸)将溶液滤入干燥的100ml 三角瓶中。
同时做空白试验。
2.吸取滤液2—10ml 于50ml 容量瓶中，用水稀释至30ml ，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H 2SO 4)溶液调节pH 至溶液刚呈微黄色。
3.加入钼锑抗显色剂5ml ，摇匀，用水定容至刻度。
4.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm 的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P —mg/L 数。
5.工作曲线的绘制。
分别吸取5mg/L 标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml 于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml ，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。
即得0，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,mg/LP 标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。
土壤全氮测定-半微量凯氏定氮法
土壤全氮测定（半微量凯氏定氮法）1. 试剂配制：○1混合加速剂：K 2SO 4 CuSO 4 硒粉以100:10:1混合研细，过80网筛 ○2浓H 2SO 4 ○340%NaOH 溶液：400g NaOH 溶于1L 水中 ○4甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：0.5g 溴甲酚绿和0.1g 甲基红溶于100ml 乙醇 ○5硼酸溶液：20g 硼酸溶于1L 水中，使用前没1000ml 硼酸加10ml 甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，以稀NaOH 或者HCl 调成红色，PH=4.8，即为硼酸指示剂混合溶液。
○61mol/L 的HCl 溶液：量取84ml 的浓盐酸，用水定容至1L 。
○70.02mol/L 的盐酸标准溶液：吸取20ml 1mol/L HCl 溶液于1L 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，用0.02mol/L （1/2Na 2B 4O 7）标准溶液滴定。
0.02mol/L （1/2的Na 2B 4O 7）标准溶液：1.9068g 硼砂(Na 2B 4O 7 ·H 2O)溶于水中，至500ml 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。
吸取20ml 0.02mol/L （1/2Na 2B 4O 7）硼砂于100ml 锥形瓶中，加一滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，用掉标定的HCl 溶液滴定，溶液由蓝变红为终点，同时做3个重复。
盐酸标准溶液浓度C=02102.0V V V -⨯ 0.02为硼砂标准溶液浓度V 2为滴定硼砂用去HCl 标准溶液体积V 1为标准硼砂溶液体积2. 操作步骤○1称量2g 土放入100ml 凯氏瓶，加入混合加速剂2g ，加水润湿，在家5ml 浓H 2SO 4○2消煮： 380℃ 2.5h ○3蒸馏：稀释水15ml ，硼酸20ml ，NaOH 30ml 5mins ○4滴定：蓝绿→紫红3. 计算 N(%)=100014.0)(0⨯⨯⨯-烘干土重C V V（C 为HCl 标准溶液浓度）。
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CH── 酸标准溶液的浓度，mol/L； 0.014── 氮原子的毫摩质量； m── 烘干土样质量，g。
• 6.2 平行测定结果，用算术平均值表示， 保留小数点后三位。 6.3 平行测定结果的相差：土壤含氮 量大于0.1％时，不得超过0.005％；含氮 0.1～0.06％时，不得超过0.004％；含氮 小于0.06％时，不得超过0.003％。
• 5.3.3 或0.01mol/L盐酸标准溶液滴定馏出 液由蓝绿色至刚变为红紫色。
• 记录所用酸标准溶液的体积（ml）。
• 空白测定所用酸标准溶液的体积，一般 不得超过0.4ml。
• 6 测定结果的计算
6.1 计算公式
土壤全氮（％）＝〔（V－V0） ×CH×0.014/m〕×100
式中：V──滴定试液时所用酸标准溶液的体 积，ml；
• 3 试剂
3.1 硫酸（GB 625—77）：化学纯； 3.2 硫酸（GB 625—77）或盐酸（GB 622—77）：分析纯，0.005mol/L硫酸或 0.01mol/L盐酸标准溶液； 3.3 氢氧化钠（GB 629—81）：工业 用或化学纯，10mol/L氢氧化钠溶液；
• 3.4 硼酸-指示剂混合液； 3.4.1 硼酸（GB 628—78）：分析纯，2％
• 5.2 土样消煮 5.2.1 不包括硝态和亚硝态氮的消煮： 将土样送入干燥的开氏瓶底部，加少量无
离子水（约0.5～1ml）湿润土样后，加入2g加 速剂和5ml浓硫酸，摇匀。将开氏瓶置于消煮 炉上消煮2h。消煮完毕，冷却，待蒸馏。在消 煮土样的同时，做两份空白测定，除不加土样
外，其他操作皆与测定土样时相同。
• 5.3 氨的蒸馏 5.3.1 蒸馏前先检查蒸馏装置是否漏气，并
通过水的馏出液将管道洗净。 5.3.2 待消煮液冷却后，用少量无离子水将
消煮液定量地全部转入蒸馏器内，并用水洗涤 开氏瓶4～5次（总用水量不超过30～35ml）。
于150ml锥形瓶中，加入5ml 2％硼酸-指示 剂混合液，放在冷凝管末端，管口置于硼酸液 面以上3～4cm处。然后向蒸馏室内缓缓加入 20ml 10mol/L氢氧化钠溶液，通入蒸汽蒸馏， 待馏出液体积约50ml时，即蒸馏完毕。用少量 已调节至pH4.5的水洗涤冷凝管的末端
• 3.5 加速剂：100g硫酸钾（HG 3—920— 76，化学纯），10g五水合硫酸铜（GB 665 —78，化学纯），1g硒粉（HG3— 926—76）于研钵中研细，必须充分混合 均匀。
• 5.1 称取风干土样（通过0.25mm筛） 1.0×××g（含氮约1mg），同时测定土样 水分含量。
溶液（W/V）； 3.4.2 混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG3—
1220—79）和0.1g甲基红（HG3—958 —76） 于玛瑙研乙醇至 100ml。使用 前，每升硼酸溶液中加20ml混合指示剂，并用 稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）。此液放置 时间不宜过长，如在使用过程中pH值有变化， 需随时用稀酸或稀碱调节之。
土壤全氮测定法(半微量开氏法)
• 1 测定原理
样品在加速剂的参与下，用浓硫酸 消煮时，各种含氮有机化合物，经过复 杂的高温分解反应，转化为铵态氮。碱 化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标 准溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包 括全部硝态氮）。
• 2 仪器、设备
2.1 土壤样品粉碎机； 2.2 玛瑙研钵； 2.3 土壤筛：孔径1.0mm（18目）；0.25mm （60目）； 2.4 分析天平：感量为0.0001g； 2.5 硬质开氏烧瓶：容积50ml，100ml； 2.6 半微量定氮蒸馏装置； 2.7 半微量滴定管：容积10ml，25ml； 2.8 锥形瓶：容积150ml； 2.9 电炉：