DNA倍体项目简介1
DNA倍体
菱形或舟状，Ф 30～60mm。核居中，Ф 5～8mm 。 疏松，胞质明如婵翼样，浅蓝色或绿色。核浆比约
角化前表层细胞 多边形或多角形，Ф 40～60mm。核Ф 5～8mm 质较疏松，胞质蓝色或淡红色。 角化表层细胞
多边形或多角形，Ф 40～60mm。核固缩，有时 失，胞质红色或橘红色。
良性反应性细胞改变
“三阶梯”检查
病理组织检 查
宫颈细胞 学
阴道镜检 查
宫颈脱落细胞形态学
复层鳞状上皮（stratified epithelium）
内底层细胞 圆形或卵圆形，Ф 12～16mm。核居中，染色质细而 胞质为深蓝色，核浆比约 1：0.5~1
外底层细胞 圆形或椭圆形，Ф 15～25mm。核圆形，居中位，染 松细颗粒状。胞质较内底层淡染呈浅蓝色。核浆比约 中层细胞
5.94. 5.4- 2. 1 6. 个5.3DNA 含量的一半为 c。 10.5 7-5 6.1 88 50 7.23 母 0.6 6 5.913.00
DNA（含量） 7.6 pg
正常细胞(即DNA二倍体细胞，2C细胞)及肿
瘤细胞在生长增
殖时,细胞核内DNA结构及含量都会发生变 化。正常细胞增 殖周期DNA指数的改变在1-2之间。而肿瘤 细胞常≥2.5。
通过对细胞核内DNA含量的测定及特征的
分析能了解正常
宫颈癌是怎么发 生的？ 宫颈癌是由人类乳头瘤病毒
（ human papilloma virus ，HPV） 特别是高危型病毒引起，其发展 是一个缓慢的过程，一般要通过 宫颈癌前疾病到原位癌（0期）， 发展到浸润癌（Ⅰ-Ⅳ期）。 从宫颈癌前疾病发展到浸润癌一 般需要5-10年的时间，期间宫颈 细微变化都可以通过细胞学方法 检测出来。
液基细胞学检查(TCT)细胞DNA倍体定量分析与阴道镜联合应用在子宫颈癌筛查中的应用
液基细胞学检查(TCT)细胞DNA倍体定量分析与阴道镜联合应用在子宫颈癌筛查中的应用液基细胞学检查(TCT)是一种常用的子宫颈癌筛查方法，通过对子宫颈细胞进行细胞学检查，可以有效筛查出潜在的癌前病变和早期子宫颈癌。
TCT在筛查过程中也存在一定的假阴性和假阳性率，因此需要结合其他检查手段来提高筛查的准确率。
近年来，细胞DNA倍体定量分析和阴道镜联合应用在子宫颈癌筛查中逐渐受到关注，可以提高子宫颈癌的早期筛查诊断效果。
细胞DNA倍体定量分析是通过对细胞DNA含量进行测量和分析，判断细胞的DNA倍体情况，来进行子宫颈癌的筛查和诊断。
研究表明，子宫颈癌细胞的DNA含量与细胞的恶性程度呈正相关关系，DNA多倍体细胞的出现往往意味着潜在的癌症细胞存在。
细胞DNA倍体定量分析可以作为TCT的补充，起到一定的辅助诊断作用。
细胞DNA倍体定量分析还可以帮助医生评估患者的癌前病变程度，指导治疗方案的制定。
细胞DNA倍体定量分析和阴道镜联合应用在子宫颈癌筛查中还具有更为灵敏的特点。
对于一些难以观察和诊断的早期子宫颈癌病变，细胞DNA倍体定量分析和阴道镜联合应用可以提高对异常情况的检出率，减少漏诊率，对患者的早期诊断和治疗起到关键作用。
细胞DNA倍体定量分析和阴道镜联合应用在子宫颈癌筛查中还具有操作简便、创伤小等优点。
细胞DNA倍体定量分析可以通过细胞标本或组织活检标本进行检测，操作简单方便，且对患者无创伤。
而阴道镜检查也只需在外阴进行观察，不会对患者的生活和工作带来太多影响，同时也能提供更为可靠的诊断信息。
细胞DNA倍体定量分析和阴道镜联合应用在子宫颈癌筛查中具有一定的科学理论基础和临床应用前景。
遗憾的是，目前这种技术在临床中的普及程度仍然比较有限，需要在未来的研究和实践中得到更多的关注和推广。
在进行该项技术的实践过程中，还需要充分考虑到患者的隐私权和个人合法权益，加强对技术的合理应用和规范管理。
相信通过不断的努力和探索，细胞DNA倍体定量分析和阴道镜联合应用一定会在子宫颈癌筛查中发挥更加重要和有效的作用，为患者的早期诊断和治疗带来更多的希望和可能。
dna倍体染色液分类
dna倍体染色液分类DNA倍体染色液分类一、引言DNA倍体染色液是一种用于细胞遗传学研究的重要试剂，通过染色液的染色效果可以对细胞的倍体性质进行分类。
本文将从不同的角度对DNA倍体染色液进行分类，以期为读者提供更全面的了解。
二、基于染色效果的分类1. 鲜艳明亮类：这类染色液在细胞染色过程中，呈现出鲜艳明亮的色彩，使细胞在显微镜下更加鲜明。
这类染色液常用于细胞形态学研究，如血液细胞计数、染色体形态观察等。
2. 柔和温暖类：这类染色液在细胞染色过程中，呈现出柔和温暖的色彩，使细胞在显微镜下显得温馨而宜人。
这类染色液常用于细胞生长和分化的研究，如胚胎细胞发育观察等。
3. 深沉神秘类：这类染色液在细胞染色过程中，呈现出深沉神秘的色彩，给人以神秘而诱人的感觉。
这类染色液常用于细胞遗传学的研究，如基因突变检测、DNA分子克隆等。
三、基于应用领域的分类1. 医学领域：这类染色液主要应用于医学研究和临床诊断，如细胞病理学、肿瘤学等。
通过染色液的作用，医生可以观察细胞的形态和结构，从而诊断疾病。
2. 农业领域：这类染色液主要应用于农业生产和研究，如植物细胞遗传学、动物育种等。
通过染色液的染色效果，农业科学家可以对植物和动物的基因组进行研究和改良。
3. 生态学领域：这类染色液主要应用于生态学研究，如微生物生态学、海洋生态学等。
通过染色液的使用，科学家可以对微生物和海洋生物的群落结构和功能进行研究。
四、基于染色液成分的分类1. 酸性染色液：这类染色液的主要成分为酸性染料，如伊红、甲苯胺蓝等。
酸性染色液常用于细胞核染色，可以使细胞核呈现出红色或蓝色。
2. 碱性染色液：这类染色液的主要成分为碱性染料，如苏木精、伊红等。
碱性染色液常用于细胞质染色，可以使细胞质呈现出红色或粉红色。
3. 中性染色液：这类染色液的主要成分为中性染料，如嗜酸性染料、嗜碱性染料等。
中性染色液常用于细胞器染色，可以使细胞器呈现出不同的颜色。
五、结论DNA倍体染色液的分类可以从染色效果、应用领域和成分等方面进行划分。
流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期
【临床意义 临床意义】 临床意义
• 发现癌前病变，协助肿瘤早期诊断 发现癌前病变， • 在肿瘤的诊断、预后判断和治疗中的作用 在肿瘤的诊断、 • 在指导肿瘤化疗中的作用
乳腺癌DNA异倍体患者生存率
乳腺癌肿瘤细胞异倍 体患者长期生存率显 著下降
【临床病例】 临床病例】
AL 骨髓
Diploid: 46.75 % Dip G1: 97.54 % at 46.06 Dip G2: 0.58 % at 92.12 Dip S: 1.88 % G2/G1: 2.00 %CV: 2.26 Aneuploid 1: 47.55 % An1 G1: 93.05 % at 49.83 An1 G2: 0.00 % at 99.67 An1 S: 6.95 % G2/G1: 2.00 %CV: 2.13 DI: 1.08 Aneuploid 2: 5.70 % An2 G1: 94.97 % at 55.72 An2 G2: 5.03 % at 103.44 An2 S: 0.00 % G2/G1: 1.86 %CV: 4.52 DI: 1.21
• 倍体（Ploidy）： 倍体（ ）：原指染色体数目。流式中用来描述总的 ）： DNA含量。 • 二倍体细胞有正常细胞的DNA含量但不除外染色体异常。 • DI为1.9-2.1 的细胞为四倍体（CV为5%时）。在二倍体和四 倍体区域之外的统称异倍体。
结果分析
• CellQuest、WinMDI等软件均可以进行分析，但需要手 工进行参数统计和计算； • 推荐使用ModFit分析软件（分析如下：） • 1、打开软件； • 2、在FL2-W/FL2-A散点图中设定单个细胞门（R1）， 去除聚集细胞，必要时可以设两个门。 • 3、在FL2-A直方图中显示R1中细胞的DNA含量直方图 • 注：该软件可以自动分析，也可手动分析；可以分析 凋亡、异倍体、各期比例等；结果均自动计算。
DNA 倍体分析
DNA倍体分析彭晓用流式细胞仪分析大量细胞的细胞周期和DNA倍体已经成为一种日益重要的方法，广泛地用于临床，为肿瘤的诊断、疗效评价和预后预测提供了重要的依据,在科研中也越来越多地用于细胞动力学、细胞调亡等观察。
正常人静止期体细胞有46条染色体，相当于7X10-12pg DNA/细胞核，我们称之为二倍体细胞，而正常增殖期细胞则有着不同的DNA含量。
在细胞周期（静止期G0，DNA合成前期G1，DNA合成期S，DNA合成后期G2，有丝分裂期M）的各个时期，DNA含量呈现周期性的变化：在G1期，细胞开始RNA和蛋白质的合成，但DNA含量仍保持二倍体；进入S期后，DNA的含量逐渐增加，介于G1和G2期之间；当DNA复制结束成为四倍体时，细胞进入G2期。
G2期细胞继续合成RNA 及蛋白质，直到进入M期。
单纯从DNA含量无法区分G2和M期；一旦有丝分裂发生，细胞分裂成两个子细胞，这两个细胞或者进入下一个细胞周期，或者进入G0期，而G0期从DNA含量上同样无法与G1期区分。
因此，从细胞的DNA含量上，整个复制周期可以描述为G0/G1，S，G2/M1期。
G0/G1 S G2/M亚二倍体二倍体四倍体八倍体DNA分析图例，横坐标为荧光强度，纵坐标为细胞数DNA指数（DNA index ,DI）是肿瘤样本G0/G1期细胞荧光值的强度（以“channel 道数”为单位）与正常人二倍体G0/G1期的荧光强度的比值。
DI为1意味着二倍体，四倍体细胞的DI为2，亚二倍体细胞的DI〈1，而超二倍体细胞的DI>1。
在二倍体和四倍体之外的统称为异倍体。
在恶性肿瘤，会出现多倍体(四倍体或八倍体)、超二倍体。
当细胞出现调亡时，会出现亚二倍体峰（调亡峰），其比例反映了细胞凋亡的程度。
S期细胞百分比反映了细胞的增殖状态，肿瘤组织的S期较高，化疗后S期的下降提示治疗有效。
有较高多倍体和异倍体存在的恶性肿瘤对化疗敏感。
肿瘤治疗中也可能出现DNA含量的增加。
DNA倍体分析在临床病理中的应用详细讲解
DNA倍体分析在临床病理中的应用详细讲解DNA倍体分析在临床病理中具有重要的应用价值。
DNA倍体即指细胞中DNA的含量及分布情况，可以用来评估细胞的发育程度、活跃程度以及细胞的异常情况。
在临床病理诊断中，DNA倍体分析可以用来辅助诊断和预后评估，在识别肿瘤恶性程度和治疗方案选择方面具有重要的指导作用。
DNA倍体分析主要通过流式细胞术进行。
流式细胞仪能够对细胞进行流式分析，可以快速测量细胞的DNA含量和分布情况。
通过将细胞与多种荧光染料共染，利用流式细胞仪可以将不同染料的荧光信号分离并测量，从而获得DNA含量和分布的数据。
根据细胞在荧光强度上的分布情况，可以将细胞分为DNA倍体整倍性和非整倍性。
DNA倍体分析在临床病理中的主要应用有两个方面：肿瘤诊断和预后评估。
首先是肿瘤诊断。
DNA倍体分析可以通过测量肿瘤细胞的DNA含量和分布，来评估肿瘤的恶性程度。
在正常组织中，细胞的DNA含量是相对固定的，称为二倍体。
而在恶性肿瘤细胞中，由于基因突变或异常，细胞的DNA含量会发生改变，出现多倍体现象。
通过测量肿瘤细胞的DNA含量及其变异程度，可以判断肿瘤的恶性程度。
一般来说，DNA倍体的分布越不均匀，恶性程度越高。
因此，DNA倍体分析可用于协助肿瘤的诊断和鉴别。
例如，可以用于进一步鉴别良性和恶性肿瘤、区分早期癌变和晚期癌变，以及判断肿瘤的分化程度等。
其次是肿瘤预后评估。
DNA倍体分析还可以用于评估肿瘤的预后。
研究发现，DNA倍体的非整倍性与肿瘤的预后相关，即非整倍性的肿瘤更具有侵袭性和恶性转化倾向。
通过测量肿瘤细胞的DNA倍体分布，并结合其他临床指标，如肿瘤大小、脉管侵犯等，可以对肿瘤的预后进行评估。
例如，一些研究表明，非整倍性的肿瘤与肿瘤的复发风险和预后相关。
因此，DNA倍体分析可以作为肿瘤预后评估的重要指标之一，并可辅助医生制定个体化的治疗方案。
此外，DNA倍体分析还可应用于其他领域，如病因学研究和药物研发。
细胞DNA倍体分析技术在妇科检测中的应用(齐齐哈尔)
G2 (分裂期)的二倍体细胞或3倍 体的增殖细胞
1c 2c 3c G0期的2倍体细胞 (with errors)
4c
6c
8c 细胞周期中的2倍体细胞 或G0期的非整倍体细胞
当DNA含量 > 5c （DI=2.5)，超过了正常细 胞分裂的倍体变化，应考虑为异常细胞
1c
2c
3c
4c 5c 6c
8c
DNA-ICM直方图示意DNA异倍体情况
diploid Dipolid 二倍体
阳性
Polyploid 多倍体 Aneuploid 异倍体
DNA报告的结果判读
DNA倍体与其他检测技术结合
• TBS+细胞DNA倍体 • HPV+细胞DNA倍体？
DNA定量分析+细胞形态学联合诊断
有效提高检测阳性率，减少漏诊
2012年全国妇科年会妇科肿瘤分会 数据对比
细胞学正常的HPV感染率
ASCCP指南：
二、细胞DNA倍体分析 （计算机辅助诊断技术）
通过DNA病变检测早期 肿瘤细胞，是一种定量的 检测技术。 2009年获得中华医学会病 理学分会认证。
采用细胞DNA倍体分析系统检测进行细 胞扫描。分析其染色情况，具备准确、 客观、简便、高效的特点。
巴氏：第一个建议通过测量细胞核DNA含量检测肿瘤细胞
死亡510年癌症宫颈癌病变时间历程高危型hpv感染细胞核dna改变细胞形态出现变化检测方法检测靶标检测意义特点巴氏涂片液基细胞学宫颈上皮细胞提示宫颈细胞已发生的病变情况形态学定性检测敏感性低hpv病毒检hpv病毒dna提示是否有高危病毒感染敏感性高特异细胞dna倍体检测细胞dna异倍提示早期细胞病变敏感显著高于巴氏涂片特异性高于hpv几种常见宫颈癌检测方法比较体细胞基因突变体细胞染色体紊乱蛋白表达改变细胞增殖分化异常细胞形态改变pcr基因芯片fish核酸原位杂交dnaicm定量fcm流式elisa免疫细胞组织化学western胶体金荧光标记生化检测hpv宫颈癌常规细胞学组织学组织学影像学致癌因素作用step1
DNA倍体分析在宫颈细胞检测中的应用
DNA倍体分析在宫颈细胞检测中的应用摘要：宫颈癌也称子宫颈癌，指发生在子宫阴道部及宫颈管的恶性肿瘤，是女性常见恶性肿瘤之一，发病率位于女性肿瘤的第二位。
全世界每年大约有20万妇女死于这种疾病。
发病原因目前尚不清楚，早婚、早育、多产及性生活紊乱的妇女有较高的患病率。
初期没有任何症状，后期可出现异常阴道流血。
目前治疗方案以手术和放射治疗为主，亦可采用中西医综合治疗，但中晚期患者治愈率很低。
经临床追踪观察显示，从一般的宫颈癌前病变发展为宫颈癌大约需要10年时间。
从这个角度看，宫颈癌并不可怕，它是一种可预防、可治愈的疾病。
防治的关键在于：定期进行妇科检查，及时发现和治疗宫颈癌前病变，终止其向宫颈癌的发展。
如能落实防治措施，宫颈癌的治愈率很高。
关键词：DNA倍体分析；细胞周期；宫颈癌细胞检查1.什么是DNA倍体分析技术1.1什么是倍体分析DNA倍体是指遗传物质DNA的倍数。
正常人静止期的体细胞都有23对，共46条染色体，每条染色体上的遗传物质DNA，都有一个同样的备份，即等位基因。
也就是说，正常人的体细胞在非分裂情况下都是二倍体。
在一些疾病状态下，例如恶性肿瘤患者，由于肿瘤细胞的DNA含量出现异常，会导致超二倍体、三倍体，甚至四倍体、八倍体等多倍体的出现，就是DNA倍体的异常。
在几乎所有的癌症中正常细胞仍然是“整倍体”，而肿瘤细胞是“非整倍体”。
关键的一点是，非整倍体是一般癌细胞的特征，在子宫颈癌的例子中，非整倍体出现“癌前病变”的阶段以及后来的浸润癌。
一般来说，检测非整倍体细胞就是检测癌细胞。
1.2 DNA倍体检测技术DNA倍体测量的是细胞核的总DNA含量，不能识别或计数单个染色体，严格意义上讲，它不是DNA或基因检测。
测量到的每个细胞核的DNA含量与测量到的正常细胞群体的平均DNA含量进行比较，DNA含量是正常细胞2.5倍的细胞可靠地确定为非整倍体，虽然不能说细胞有115条染色体。
DNA倍体检测的核心理论就是比尔定律，与分光光度计测量DNA浓度的化学本质是相同的。
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细胞DNA 定量分析联合液基细胞学检查项目简介
宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，其发病率占女性生殖系统恶性肿瘤首位，在女性恶性肿瘤中排第二位（仅次于乳腺癌）。
细胞DNA定量分析技术通过对细胞核内遗传物质 (DNA )倍体定量检测，判断细胞的生理状态和病理改变。
可针对包括宫颈脱落细胞在内的多种妇科及非妇科临床细胞学标本进行检测，已广泛应用于欧美等发达国家的临床诊断。
临床意义
☐宫颈癌及癌前病变的诊断
➢在TBS分级的各级宫颈病变，均可发现DNA倍体异常细胞，即DNA指数大于2.5（5C）细胞，病变级别越高，DNA倍体异常细
胞核非整倍体细胞峰出现频率越大。
☐为肿瘤的恶性程度评估提供参考
➢非整倍体细胞愈多，非整倍体细胞峰越多，病变程度越重，预后愈差。
☐对宫颈疾病发展趋向的预测
➢DNA非整倍体在国际上已经是公认肿瘤细胞形成过程中的一个生物标记。
非整倍体细胞的出现，预示着CIN病变正在进一步
恶化；
☐和细胞学联合诊断，优势互补
➢细胞DNA定量分析方法是一种根据细胞核DNA含量改变所致的客观判断。
常规细胞学是医生根据形态的改变所做的判断，带
有一定的主观性。
而且病理医生无法在显微镜下观察到细胞癌
变早期核内DNA含量及其结构的改变，另一种原因可能是取材
不满意，标本中异形细胞数量过少，镜下容易漏诊。
☐对宫颈癌疗效的评估
➢浸润型宫颈癌中，非整倍体细胞愈多放疗敏感愈强。
标本采集要求
专用采样器及Motic保存液，标本采集后室温（22±5℃）保存。
临床项目收费标准。