生活饮用水标准检验方法 微生物指标
5750.11-2006生活饮用水标准检验方法
5750.11-2006生活饮用水标准检验方法
5750.11-2006生活饮用水标准是我国国家标准，规定了生活饮
用水的质量要求和检验方法。
该标准的检验方法包括以下内容：
1. 外观检验：通过观察水样的颜色、悬浮物、浑浊度等外观特征，判断其是否符合要求。
2.pH值测定：使用酸碱指示剂或PH计来测定水样的酸碱度，确定其是否在要求范围内。
3.溶解性物质测定：通过对水样中的溶解性有害物质（如重金属、化学物质等）进行定性、定量分析，判断其是否超出标准限值。
4.微生物测定：通过检测水样中的总大肠菌群、大肠菌群、霉菌、腐生菌等微生物指标，判断其是否超出标准要求。
5.隐蔽性细菌测定：通过对水样进行浓缩培养，检测是否存在
隐蔽性致病菌，如沙门氏菌、副溶血弧菌等。
6.氯气含量测定：通过测定水样中的游离氯含量，判断其是否
符合要求。
7.总大肠菌群测定：通过对水样进行培养、计数，检测水样中
的总大肠菌群数目，确定是否超出标准限值。
8.氨氮测定：通过化学方法检测水样中的氨氮含量，判断是否
超出标准范围。
9.有机污染物测定：通过GC-MS、LC-MS等分析方法，检测水样中的有机污染物（如农药、药物残留物等），判断其是否超出限值。
10.无机污染物测定：通过化学分析方法，检测水样中的无机污染物（如重金属、无机盐等），判断其是否超出标准要求。
以上是5750.11-2006生活饮用水标准检验方法的一些主要内容，具体的检验方法还需参考该标准的具体规定。
我国生活饮用水卫生标准中微生物指标
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生活饮用水检测技术标准
生活饮用水检测技术标准
1. 化学参数，生活饮用水的化学参数包括但不限于pH值、溶解氧、氨氮、亚硝酸盐、硝酸盐、铁、锰等。
这些参数可以通过化学分析方法来检测，确保水质符合标准。
2. 微生物指标，生活饮用水中的微生物污染是一个重要的健康问题。
微生物指标包括大肠杆菌、菌落总数、霉菌和酵母菌等。
常用的检测方法包括培养法、PCR法等，以确保水中微生物数量符合卫生标准。
3. 重金属和有机物，生活饮用水中的重金属和有机物污染也是需要关注的问题。
常见的检测项目包括铅、镉、汞、农药残留等。
检测方法包括原子吸收光谱法、气相色谱法等。
4. 辐射指标，辐射污染对饮用水质量也有一定影响，常见的辐射指标包括放射性核素、氚等。
检测方法包括液体闪烁计数法、γ射线能谱分析法等。
这些技术标准的制定和执行对于保障饮用水安全至关重要。
通过严格的检测和监控，可以确保人们饮用的水源符合卫生标准，有
助于预防水源污染对人体健康造成的危害。
同时，不断完善和更新技术标准也是保障饮用水安全的重要手段，以适应新的污染物种类和检测方法的发展。
生活饮用水标准检验方法
生活饮用水标准检验方法在各种水体，特别是污染水体中存在有大量的有机物质,适于各种微生物的生长,因此水体是仅次于土壤的第二种微生物天然培养基。
水体中的微生物主要来源于土壤，以及人类的动物的排泄物及污染.水体中微生物的数量和种类受各种环境条件的制约。
一般认为，水中微生物以革兰氏阴性杆菌占有较大优势.与其他水体相比，河水及溪水中革兰氏阳性菌相对较多，这是因为陆地微生物冲洗污染的缘故。
《中华人民共和国国家标准生活饮用水标准检验法》提供了水质中细菌总数和总大肠菌群的检测方法。
1、国家标准中，细菌总数是指１ml水样在营养琼脂培养基中，于3７℃经24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。
对生活饮用水,直接吸取1ml水样于平皿中，加入营养琼脂后混匀，37℃培养２4ｈ,进行计数。
对水源水,根据情况对样品进行10倍梯度稀释，选择适宜稀释液１ml，加注平皿，营养琼脂混匀，３7℃培养2４h,进行计数。
按照规定格式报告每毫升水中细菌总数.2、国家标准中，利用总大肠菌群作为粪便污染的指标。
总大肠菌群是指一群需氧及兼性厌氧的,37℃生长时能使乳糖发酵，在２4h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
水样中总大肠菌群数的含量,表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。
国家标准物质提供了多管发酵法及滤膜法检测总大肠菌群的方法。
3、多管发酵法检测总大肠菌群,分为三步:初发酵试验，平板分离，复发酵证实试验。
初发酵试验,采用乳糖蛋白胨培养液３7℃培养24h，观察产酸产气情况。
对阳性管培养物，接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基，观察菌落特征,并进行革兰氏染色和镜检。
对典型和可疑菌落，接种于乳糖蛋白胨培养液，进行复发酵证实试验，并根据标准所附检数表报告结果。
其中，对生活饮用水，初发酵试验接种水样总量30０mｌ，即100mｌ接种2管，1０ml接种10管，采用两个稀释度,1２支发酵管.对水源水，初发酵试验接种水样总量55．5ｍl，即１0ml接种５管，1ml接种5管，0.1ml接种1０管，共采用三个稀释度，15支发酵管。
生活饮用水标准检验方法微生物指标
总大肠菌群三种方法的比较
多管发酵法 时间 验证试验 步骤 特殊设备 24-72h 需要 较繁 显微镜
粪大肠菌群
游离余氯
不得检出
水质非常规指标及限值
修订前
微生物指标 限值 微生物指标 贾第鞭毛虫/（个/10L） 隐孢子虫/（个/10L）
修订后
限值 <1 <1
小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值
修订前
微生物指标 限值 微生物指标 菌落总数/（CFU/100mL）
修订后
限值 500
生活饮用水水质参考指标及限值
Filta-Max®自动淘洗装置
FiltaMax Xpress 快速淘洗装置
Filta-Max xpress快速法淘洗流程
压缩 空气
滤器（带滤芯）放入淘洗装置 淘洗装置连接缓冲液及空气压缩机 加 4.0 巴(58 psi)压缩空气 按动F1钮
2分钟后收集400ml淘洗液
快速全自动
易感人群：3岁以内婴儿；免疫功能受损害者；旅游者。
重要的动物宿主 贾第鞭毛虫在自然界广泛存在，包括两栖动物；鸟类； 哺乳动物在内的40多种动物均可成为贾第鞭毛虫的宿 主。 调查表明，人排出孢囊可使狗、海狸、麝鼠、沙土鼠 及大鼠等动物感染。 一些生活在水中的动物可被来源于人的贾第鞭毛虫孢 囊感染，因此这些动物即使不是主要宿主也可能作为贾 第鞭虫的传播媒介。
滤膜法定义：总大肠菌群滤膜法 是指用孔径为0.45μm的微孔滤 膜过滤水样, 将滤膜贴在添加乳 糖的选择培养上, 37℃ 培养24h， 能形成特征菌落的需氧和兼性厌 氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检 测水中总大肠菌群的方法。 培养条件：37℃ 24±2h
最新国家生活饮用水卫生标准
最新国家生活饮用水卫生标准国家生活饮用水卫生标准是为了保障人们的身体健康而制定的，它规定了自来水的生产、输送和供应的标准和要求。
最新的国家生活饮用水卫生标准于2020年6月1日实施，下面是其中主要内容的简述。
一、基本标准国家生活饮用水卫生标准要求自来水的水质应符合以下标准：1.菌落总数不得超过1000CFU/mL。
2.大肠菌群数量不得检出。
3.氧化还原电位应在-50mV至-200mV范围内。
4.余氯含量不得低于0.2mg/L。
5.PH值应在6.5至8.5之间。
6.异味和异色物质含量应符合相关标准。
7.生活饮用水不得出现臭味、味道和色泽的异常现象。
二、感官要求自来水的感官要求包括外观、色泽、味道和气味等。
通过人的五感进行鉴别，了解自来水的品质情况。
三、微生物指标生活饮用水中微生物污染严重影响人们的身体健康，国家对自来水中的微生物指标做了明确的要求：3.致病菌和有害物质的含量应该在安全范围内。
四、化学指标生活饮用水中的化学物质对人的健康也有很大的影响。
国家规定了自来水中化学指标的安全标准和最大限量，我们需要注意生活饮用水中的以下指标：1.氟化物：不得超过1.5mg/L。
4.重金属：不得超过安全最大限量。
五、放射性指标水中的放射性物质会对人类产生致癌和基因突变的影响，因此生活饮用水标准也对水中放射性物质的含量做了监管和控制。
六、相关标准国家生活饮用水卫生标准涉及的内容非常广泛，对于水生产、输送、储存和供应等环节都有详细的规定。
和国家生活饮用水卫生标准相关的标准主要包括：1.生活饮用水中氯代烃和溴代烃类含量的限制标准。
2.自来水中少量有机物含量的检测标准。
3.水龙头材料和接头的规格和标准。
总之，国家生活饮用水卫生标准的实施是为了确保人们饮用安全的自来水。
我们应该认真学习掌握相关标准和指标，加强对自来水生产和供应的监管，从而保障自己的身体健康。
生活饮用水检验标准微生物指标
生活饮用水是人们日常生活中不可或缺的重要物质，其质量和卫生安全直接关系到人们的健康。
国家对生活饮用水的质量进行了严格的监管和检测。
其中微生物指标是评价生活饮用水卫生安全的重要指标之一。
以下将围绕生活饮用水检验标准中的微生物指标，进行详细的分析和阐述。
一、微生物指标的含义微生物指标是指生活饮用水中微生物的种类和数量。
微生物包括细菌、病毒、寄生虫等，在水中存在的微生物主要来自污染源，如粪便、废水等。
通过检测水中微生物的种类和数量，可以评估水质的污染程度，以及是否存在潜在的卫生风险。
二、生活饮用水检验标准中的微生物指标根据国家标准《生活饮用水卫生标准》，生活饮用水的微生物指标主要包括大肠杆菌、菌落总数、大肠埃希氏菌等。
这些微生物指标的含量和标准均是对水质卫生安全的重要保障。
1. 大肠杆菌大肠杆菌是一类常见的肠道微生物，在水中存在的数量和比例可以反映水质的卫生安全情况。
国家标准规定，每升生活饮用水中大肠杆菌的数量应当为0个。
这意味着生活饮用水中不应当存在大肠杆菌，如果水中发现大肠杆菌，就表明水质存在严重的卫生风险，不适宜饮用。
2. 菌落总数菌落总数是指水样中可增殖繁殖的微生物的总数目，通常用于评估水质的微生物污染程度。
国家标准对于生活饮用水中菌落总数的要求是每毫升不超过100个。
这表示生活饮用水的微生物污染应当控制在一个很低的水平，以保障水质的卫生安全。
3. 大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌是一类肠道病原菌，其存在可以直接威胁人体健康。
国家标准规定，生活饮用水中大肠埃希氏菌的数量应当为0个。
这也是对水质卫生安全的严格要求，意味着生活饮用水中不应当存在大肠埃希氏菌。
三、微生物指标的检测方法针对生活饮用水中微生物指标的检测，通常采用的是微生物培养法和分子生物学检测法两种方式。
1. 微生物培养法微生物培养法是通过将水样放置在适当的培养基上，利用微生物自身的代谢特性，培养出各类微生物菌落，然后通过计数和鉴定来确定其中的微生物种类和数量。
生活饮用水标准检验方法微生物指标
FiltaMax Xpress 快速淘洗装置
2020/5/20
压缩 空气
滤器＋滤芯
Filta-Max xpress快速法淘洗流程
• 滤器（带滤芯）放入淘洗装置 • 淘洗装置连接缓冲液及空气压缩机 • 加 4.0 巴(58 psi)压缩空气 • 按动F1钮 • 2分钟后收集400ml淘洗液 • 快速全自动
能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点： 优点： ➢可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌 ➢检测时间较短，只需18-24h，最长需要28h ➢无需确证试验 ➢操作简单，对试验条件和人员要求低 缺点： ➢检测成本高
2020/5/20
2020/5/20
2020/5/20
修订后的标准，微生物学指标增加为6项：菌落总数、总 大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和 隐孢子虫。
同时在资料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆 菌。
2020/5/20
2020/5/20
2020/5/20
2020/5/20
2020/5/20
2020/5/20
2020/5/20
2020/5/20
Cryptosporidium 隐孢子虫生活周期
子孢子
滋养体
Ⅰ型裂殖体
裂殖子
裂殖子
成熟卵囊 2020/5/20
合子
雌、雄配子体
Ⅱ型裂殖体
Cryptosporidium 隐孢子虫(染色后荧光显微镜下)
2020/5/20
Giardia 贾第鞭毛虫 ➢ 特点:单一细胞原生动物，大小约10-15m，含4对鞭毛和
培养条件：36±1℃ 培养4h 紫外灯：波长366nm，功率6W
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粪大肠菌群
游离余氯
不得检出
水质非常规指标及限值
修订前
微生物指标 限值 微生物指标 贾第鞭毛虫/（个/10L） 隐孢子虫/（个/10L）
修订后
限值 <1 <1
小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值
修订前
微生物指标 限值 微生物指标 菌落总数/（CFU/100mL）
修订后
限值 500
生活饮用水水质参考指标及限值
过滤器
滤芯
FiltaMax Xpress 快速系统-滤器及滤芯
Filta-Max : 滤芯结构（手动/自动法）
60 层环状海绵: 55mm x 10mm (18mm 中孔)
从60cm 压缩成 3cm
螺栓固定
Filta-Max xpress:快速法滤芯结构
40 层海绵: 55mm x 10mm (18mm 中孔) 39层海绵: 40mm x 10mm (18mm 中孔) 交互叠放 从79cm 压缩到 3cm 螺栓固定
五、贾第鞭毛虫子和隐孢子虫 贾第鞭毛虫和隐孢子虫是一类寄生于人和动物体 内的肠道原虫，可致人兽共患病。患此病的人和动物 从粪便中排出大量的卵(孢)囊污染环境，在地面水和 防护差的地下水及处理不良的自来水中都可检出卵(孢) 囊。随着社会发展，优质供水势在必行。对一些潜在 的危险因素加以限制很有必要。在此基础上，新标准 中增加了贾第鞭毛虫和隐孢子虫的检测方法。
—U.S.EPA
两虫的检测方法（免疫磁分离荧光抗体法）
检测程序： 水样过滤 洗涤 离心 免疫磁珠捕获卵囊 磁珠与 显微镜检
卵囊复合物的分离 查记述 结果报告
荧光标记和DAPI染色
检测问题：
方法操作复杂 检出率低 无法进行生物活性判定 不能进行属、种鉴定
价格高
IDEXX Filta-Max® 手动/自动系统 －滤器及滤芯
滤器＋滤芯
淘洗液收集
3.离心浓缩
1.将装有淘洗液样本的500mL离心管置2000g离心力下，离心15min。慢慢地减速 ，（不能使用制动装置！）以免搅起沉淀物。 2.用吸气装置将沉淀物上层8-10mL处的悬浮物小心吸出 （吸气装置的真空应小于3.3kPa）。
4.免疫磁珠捕获
捕获原理:
标记A抗体的磁珠
1.水样过滤
水样从两侧流经压缩的海绵膜汇集至中孔 “两虫”在滤芯表面被捕获
滤器连接套件
水样流向
滤器 滤芯（过滤模 块）
2.洗涤(淘洗)滤芯
洗涤管
滤芯置于洗涤管,并将 滤芯下部的压缩固定锣 栓解除 周律性地压缩/扩展海绵滤 芯
洗涤(淘洗)装置
过滤器
500ml锥 形离心瓶
Filta-Max®手动淘洗装置
水质常规指标及限值
修订前
微生物指标 细菌总数 限值 100 CFU/mL 微生物指标 菌落总数/（CFU/mL）
修订后
限值 100
总大肠菌群
总大肠菌/（MPN/100mL或 每100mL水样中不得检出 CFU/100mL） 不得检出 耐热大肠菌/（MPN/100mL 每100mL水样中不得检出 或CFU/100mL） 不得检出 在与水接触30min后应不 大肠埃希氏菌/ 低于0.3mg/L,管梢末水不 （MPN/100mL或 应低于0.5mg/L CFU/100mL）
Filta-Max®自动淘洗装置
FiltaMax Xpress 快速淘洗装置
Filta-Max xpress快速法淘洗流程
压缩 空气
滤器（带滤芯）放入淘洗装置 淘洗装置连接缓冲液及空气压缩机 加 4.0 巴(58 psi)压缩空气 按动F1钮
2分钟后收集400ml淘洗液
快速全自动
Cryptosporidium
隐孢子虫
特点:单一细胞原生动物，约3-7m 。有微小隐孢子虫、 鼠隐孢子虫和贝氏隐孢子虫三种，寄生于人、牛等体内的 主要为微小隐孢子虫（C．parvum）。 宿主：人类、鸟类、鼠类、爬行类、鱼类 感染源:隐孢子虫主要寄生在被感染的动物体肠道内，卵 囊通过粪便排出体外污染环境。 易感人群：免疫缺陷者（如爱滋患者）、儿童、老人、医 务人员等 传播方式:以粪-口，手-口途径为主，污染的水源和空气 均可传播。
结果：5个10ml 管中阳性管数为0时， 结果：5个10ml 管中阳性管数为0时， MPN值为0（主要针对出厂自来水或 MPN值<2.2 需每天检验一次的水样）
滤膜法
修订前 修订后
滤膜法原理：用孔径为0.45μm 的微孔滤膜过滤水样,细菌被截留 在滤膜上,将滤膜贴在选择培养上, 经培养后,计数生长在滤膜上的典 型大肠菌群菌落数。 培养条件：37℃ 18-24h
易感人群：3岁以内婴儿；免疫功能受损害者；旅游者。
重要的动物宿主 贾第鞭毛虫在自然界广泛存在，包括两栖动物；鸟类； 哺乳动物在内的40多种动物均可成为贾第鞭毛虫的宿 主。 调查表明，人排出孢囊可使狗、海狸、麝鼠、沙土鼠 及大鼠等动物感染。 一些生活在水中的动物可被来源于人的贾第鞭毛虫孢 囊感染，因此这些动物即使不是主要宿主也可B5749-2006
生活饮用水标准检验方法GB5750-2006
微生物指标及微生物检验的介绍
广东省CDC微生物检验所
严纪文
我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB574985，标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用 水标准相比，主要差别在于微生物指标项目少，缺少有机 物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠 菌群2项，不能确切的评价水质的卫生状况。 修订后的标准，微生物学指标增加为6项：菌落总数、总 大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和 隐孢子虫。 同时在资料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆 菌。
滤膜法定义：总大肠菌群滤膜法 是指用孔径为0.45μm的微孔滤 膜过滤水样, 将滤膜贴在添加乳 糖的选择培养上, 37℃ 培养24h， 能形成特征菌落的需氧和兼性厌 氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检 测水中总大肠菌群的方法。 培养条件：37℃ 24±2h
酶底物法
酶底物法定义：总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β半乳糖苷酶的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体 使培养基呈现颜色变化，以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。 培养基：MMO-MUG培养基（Minimal Medium ONPG-MUG）。 本方法可分为定性和定量。 定量法：10管法、51孔定量法 培养条件： 36±1℃ 24h
修订前
微生物指标 限值 微生物指标
修订后
限值
-
肠球菌/（CFU/100mL）
产气荚膜梭状芽胞杆/（CFU/100mL）
0
0
一、菌落总数
修订前
修订后
细菌总数 菌落总数 原理：细菌总数是指水样在一定 定义：水样在营养琼脂上有氧条 条件下培养后（培养基成分、培 件下37℃培养48h后，所得1ml水 养温度和时间、pH、需氧性质等） 样所含菌落的总数。 所得1ml水样所含菌落的总数。按 本规范规定所得结果只包括一群 能在营养琼脂上发育的嗜中温的 需氧的细菌菌落总数 培养条件：36±1℃ 24h 36±1℃ 48h
培养条件：36±1℃ 培养4h 紫外灯：波长366nm，功率6W
酶底物法定义：在选择培养基上能产生β-半乳糖苷酶分 解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，并能产 生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释放出荧光产物，使菌落 能够在紫外光下产生特征性荧光，以此技术来检测大肠埃 希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。 培养基：ONPG-MUG 结果判定：水样变黄色同时在366nm的紫外光下产生蓝色 荧光为阳性。水样未变黄色而有蓝色荧光产生不能判定为 阳性。
Giardia
贾第鞭毛虫
两虫感染的特点 贾第氏鞭毛虫(Giardia)/隐孢子虫(Cryptosporidium) / 感染后无特殊临床症状,无预防疫苗，绝大多数抗生素 无效，治疗依赖于自身抵抗力 大部份作为源水的江河及水库水等地表水是高危的,大 部分地下水都有被地表水污染的潜在危险 可以通过被污染的源水而进入供水系统,水源性感染已 成为最大的感染源，但孢/卵囊对传统的水处理法中氯化 消毒有抗性,氯不能渗透过卵囊，沙滤及膜过滤法也不能 完全去除 饮用水高温煮沸也并非有效 对氯消毒耐受、对热敏感、感染剂量低、感染率高
具有A抗原的C/G
DYNAL MIX 1混 合器
MPC-S磁极
MPC-1磁极
5.免疫磁珠与孢（卵）囊复合物的分离
60min
5min
10min
染色镜检
6.染色及镜检
单克隆免疫荧光染色（FA-异硫氰酸荧光素）
四、大肠埃希氏菌
检测方法：多管发酵法、滤膜法、酶底物法 大肠埃希氏菌多管发酵法定义：大肠埃希氏菌是指多管发酵法总大 肠菌群阳性，在含有荧光底物的培养基上44.5℃培养24h产生β-葡萄 糖酫酸酶，分解荧光底物释放出荧光产物，使培养基在紫外光下产生 特征性荧光的细菌，以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基：EC-MUG（4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖酫酸苷）。 培养条件：44.5±0.5℃ 培养24±2h。紫外灯：波长366nm，功率6W 大肠杆菌能产生β-葡萄糖酫酸酶分解MUG，菌落在366nm紫外光下产 生蓝色荧光 滤膜法定义：用滤膜法检测水样后，将总大肠菌群阳性的滤膜 在含 有荧光底物的培养基上培养，能产生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释 放出荧光产物，使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光，以此来检测 水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基：NA-MUG
能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点： 优点： 可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌 检测时间较短，只需18-24h，最长需要28h 无需确证试验 操作简单，对试验条件和人员要求低 缺点： 检测成本高