培养基的配方
培养基配方

1. LB培养基:10 g/L胰蛋白胨(进口),5 g/L酵母提取物(进口),10 g/L NaCl。
若配制固体培养基,加入15 g琼脂粉;
2. YPD培养基:22 g/L的一水合葡萄糖,20 g/L胰蛋白胨(进口),10 g/L酵母提取物(进口)。
若配制固体培养基,加入20 g琼脂粉;
3. SC-Ura培养基:22 g/L含一水合葡萄糖,6.7 g/L YNB(无氨基酸酵母氮源),1.224g/L 氨基酸粉末(除Leu , Trp , His , Ura, Ade, Lys, Met以外的),配制相应缺陷型则补加其他7种氨基酸。
4. YPX 培养基:蛋白胨,20 g/L;酵母粉,10 g/L;木糖,20 g/L或50 g/L。
5. YPD+G418:G418:1ml/L
Leu(亮氨酸)0.38 g/L,
Ura(尿嘧啶)0.076 g/L,
100xHis(组氨酸)7.6g/L,加入10mL/L
100xTrp(色氨酸)7.6g/L, 加入10mL/L
100xAde(鸟嘌呤)7.6g/L 加入10mL/L
100xLys(赖氨酸)7.6g/L 加入10mL/L
100xMet(甲硫氨酸、蛋氨酸)7.6g/L 加入10mL/L
加入碱液调节pH至6.10左右。
若配制固体培养基,加入20 g琼脂粉;
全部氨基酸:。
几种培养基的配方

几种培养基的配方培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物。
根据微生物的特性和应用需求,可以设计出不同成分和配方的培养基。
以下是几种常见的培养基配方:1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)的配方:-牛肉膏:5g-蛋白胨:5g-水解酵母膏:1.5g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将牛肉膏、蛋白胨和水解酵母膏溶解在蒸馏水中,添加纯化琼脂,混合并加热直至溶解,然后倒入培养皿中。
2. EMB(Eosin Methylene Blue)培养基的配方:-蛋白胨:17g-明胶胨:3g-乳糖:10g-酵母提取物:3g-果糖:1g- Eosin Y:0.4g-亚甲蓝:0.065g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将蛋白胨、明胶胨、乳糖、酵母提取物和果糖溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加Eosin Y和亚甲蓝,最后加入纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
3. 铡锰培养基(Sabouraud Agar)的配方:-葡萄糖:40g-酵母膏粉:5g-水解麦粉:15g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将葡萄糖、酵母膏粉和水解麦粉溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
4.胰蛋白酶-大豆酪蛋白肉汤培养基(TRYPTICASE™SOYBROTH)的配方:-胰蛋白酶胨:15g-大豆酪蛋白胨:5g-食盐:5g-葡萄糖:20g-蒸馏水:1000mL将胰蛋白酶胨、大豆酪蛋白胨、食盐和葡萄糖溶解在蒸馏水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温。
5. M9盐碱培养基(M9 minimal medium)的配方:-磷酸一氢二钾:3g-硫酸镁:0.5g-氯化钠:0.5g- 氨氯化铁:7.5mg-葡萄糖:4g-去离子水:1000mL将磷酸一氢二钾、硫酸镁、氯化钠和氨氯化铁溶解在去离子水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温后添加葡萄糖。
这只是几种常见的培养基配方,实际上还有很多不同成分和配方的培养基。
常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
这些是一些常用的培养基配方,适用于细菌和真菌的培养。
常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基(Culture medium)是一种用于细菌、真菌、植物细胞、动物细胞和其他微生物的繁殖和生长的营养物质。
常用的培养基可分为发酵培养基、微生物培养基和细胞培养基。
下面列举了一些常用的培养基配方。
1. LB培养基(Luria-Bertani medium)成分:-牛肉提取物:10克-酵母提取物:5克-热可溶性淀粉:10克-氯化钠:10克-水:1升2. NB培养基(Nutrient broth)成分:-牛肉提取物或肉蔻精:8克-酵母提取物:4克-葡萄糖:4克-水:1升3. MacConkey培养基成分:-水解动物蛋白:17克-中和胆盐:1.5克-中性红:0.03克-水:1升4. TSB培养基(Tryptic soy broth)成分:-大豆胨:17克-酵母提取物:3克-水:1升5. BHIA培养基(Brain Heart Infusion Agar)成分:-脑心汤固体:37克-水:1升6.R2A培养基成分:-水解酵母提取物:0.5克-蛋白胨:0.5克-葡萄糖:0.5克-脱脂乳粉:0.5克-黄豆粉:0.5克-高氯酸钠:0.3克-多聚体1466:0.05克-水:1000毫升7.比尔斯氏培养基(BHI培养基)成分:-大豆胨:37克-脑心汤固体:2克-水:1升8. 培养基199(Medium 199)成分:-高锰酸钾:0.015克-硫酸:1.55克-磷酸一氢钠:0.184克-高氯酸钠:8.0克-溴酚蓝:0.4克-d-葡萄糖:5.55克-l-谷氨酸:40.525克-苏打粉:0.84克-水:1升9. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)成分:-苔藓胶原酸:1克-乳糖:1克- 谷氨酸:584mg- 水:1000ml这只是一小部分常见的培养基配方,实际上有很多种不同的培养基,它们根据不同的生物特性和培养需求来设计。
不同的培养基可以提供细菌、真菌、细胞等微生物生长需要的各种营养物质。
常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境,其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
下面是一些常用的培养基配方汇总。
1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一,其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。
其配方如下:-琼脂:15g-蔗糖:10g-牛肉膏粉:3g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化镁:0.5g-氯化钾:0.2g-高锰酸钾:0.0001g-蛋白胨:3g-酵母提取物:3g- 菜子油:0.5ml- 蒸馏水:1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基,其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。
其配方如下:-牛肉膏粉:3g-蛋白胨:5g-葡萄糖:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:2g-氯化镁:0.5g- 蒸馏水:1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基,其主要成分为紫砂和蔗糖。
其配方如下:-紫砂:15g-蔗糖:30g-蛋白胨:2g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基,其主要成分为麦芽粉和蔗糖。
其配方如下:-麦芽粉:10g-蔗糖:30g-蛋白胨:5g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g- 蒸馏水:1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基,其主要成分为铁蛋白和蔗糖。
其配方如下:-铁蛋白:10g-蔗糖:10g-蛋白胨:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:1g-氯化钙:0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良,以提高微生物的生长和培养效果。
同时,在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作,以避免试验的污染和杂质的干扰。
各种培养基配方

146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
各种培养基的制作方法

配方一萨氏(Sabouraud's)培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。
1、营养肉汤培养基牛肉膏 0.3克蛋白胨 1.0克NaCl 0.5克水 100毫升pH 7、0~7、2在烧杯中加水,称取牛肉膏、蛋白胨与NaCl,加热溶化后,调节pH值至7、0~7、2。
分装,加棉塞,高压蒸汽灭菌即成。
常用于培养细菌。
2、营养琼脂培养基在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。
常用于培养细菌。
3、肉汁蛋白胨液体培养基牛肉 500克蛋白胨 10克NaCl 5克pH 7、1~7、2取新鲜牛肉500克,去净脂肪、筋腱后,绞碎或剁碎,加水1000毫升浸泡,15℃下放置12小时或50℃下放置半小时。
用纱布将肉汁过滤,补足失水。
向肉汁中加入蛋白胨与食盐。
将肉汁加热,放入苏打(碳酸钠)至红色,调整pH值。
分装,高压蒸汽灭菌。
将上述已灭菌得培养基用棉花滤去凝集得蛋白质,制成液体培养基,如需制成固体培养基,可在每100毫升液体中加入2克琼脂,加热溶化后,分装,再次进行高压蒸汽灭菌。
常用于培养细菌。
4、高氏一号培养基(淀粉琼脂培养基)可溶性淀粉 2克K2HPO4 0.05克MgSO4·7H2O 0.05克KNO3 0.1克NaCl 0.05克FeSO4 0.001克琼脂 2克水 100毫升pH 7、2~7、4在烧杯中加水95毫升,加热至沸腾,取可溶性溶粉2克,用5毫升水调成糊状,倒入沸水中与匀。
再称取其它药品,陆续加入烧杯内(待一种药品溶解后,再加入第二种药品)。
待全部药品溶解后,停止加热,补足失水,调pH值至7、2~7、4。
分装后,高压蒸汽灭菌。
本培养基常用于培养放线菌。
5、马铃薯蔗糖培养基马铃薯 200克蔗糖 10克琼脂 20克水 1000毫升自然pH称取200克马铃薯片,加水1000毫升,煮沸半小时,用纱布过滤,补足失水。
常用25种培养基详细配方

一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl 5g琼脂15—20g水1000mlpH 7.0—7.21.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
二、淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基,培养放线菌用)可溶性淀粉20gKNO31gNaCl 0.5gK2HPO40.5gMgSO40.5gFeSO40.01g琼脂20g水1000mlpH 7.2—7.4配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,在火上加热,边搅拌边加水及其他成分,溶化后,补足水分至1000ml。
1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
三、查氏培养基(培养霉菌用,实验16)NaNO32gK2HPO41gKCl 0.5gMgSO40.5gFeSO40.01g蔗糖30g琼脂15—20g水1000mlpH 自然1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
四、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5gKH2PO41gMgSO4·7H2O 0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100ml琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800ml0.56kg/cm2(8磅/英寸2),112.6℃灭菌30分钟。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100ml,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
五、马铃薯培养基(实验16)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂15—20g水1000mlpH 自然马铃薯去皮,切成块煮沸半小时,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,溶化后补足水至1000ml。
1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
六、麦芽汁琼脂培养基(实验15)1.取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,置15℃阴暗处发芽,上盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
2.将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴锅中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。
血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。
用途:1.一般棉拭子均接种此培养基。
2.尿液,脓液3.分离细菌标本用。
基础培养基(肉膏汤BB)成份:蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。
用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
血液培养基(大管肉汤培养基)成份:1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕)1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升4 枸椽酸钠0.3g制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。
用途:作血,骨髓培养用。
肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)成份:蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25(22)克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0.5%美兰溶液20毫升制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。
(高压以后方可再加乳糖)用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。
1罗文斯坦培养基成份:磷酸二氢钾2.4克硫酸镁0.24克枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克纯甘油(丙三醇)12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升(约3公斤)2%孔雀绿水溶液20毫升制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。
可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。
2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。
3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。
4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。
质控标准:1 灭菌试验合格。
2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。
用途:作结核分枝杆菌培养用。
结核半固体培养基成份:磷酸氢二钠19克硫酸镁0.6克磷酸二氢钾2.5克天门冬素5克1%孔雀绿1.5克甘油20毫升吐温80(10%)5毫升水1000毫升枸椽酸钠2.5克动物血清100毫升琼脂1.5克(80小时用甲醇去脂)1%孔雀绿0.78毫升吐温80(10%)5毫升加动物血清100毫升制法:1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7。
22 分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。
3 待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。
4 去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。
质控标准:1无菌实验合格。
2琼脂硬度合适而清亮。
3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。
用途:培养结核杆菌用。
亚碲酸钾血琼脂平板成份:琼脂基础100毫升10%葡萄糖2毫升1%亚碲酸钾4.5毫升绵羊血10毫升制法:1将琼脂基础溶解好,加入羊血。
2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4.5毫升混合后倒入无菌平板,2凝固后存冰箱备用。
质控标准:接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。
用途:供培养及鉴别白喉杆菌用。
米培养基成份:白米20克水1000毫升琼脂20克吐温80 10毫升制法:1将20克米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好。
2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升。
3加琼脂20克,吐温-80 10毫升煮溶,分装中型管(每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用。
质控标准:1灭菌。
2要求清亮。
3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子。
用途:培养白色念珠菌用。
蛋白胨水培养基成份:蛋白胨1克氯化钠0.5克水加至100毫升PH调至7.8制法:把以上各物称好溶于水,调节PH7.6分装消毒备用。
质控标准:1 放置37℃无菌生长。
2 接种大肠杆菌24小时生长良好。
3 可作中国兰平板基础液。
可作靛基质基础液(作此试验需要色氨酸蛋白胨)。
血培养基成份:蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克葡萄糖3克枸椽酸钠3克MgSO4。
7H2O 20毫升0.5%PABA 10毫升酵母浸液10毫升0.2克(2%过滤)*酚红0.4% 6毫升水1000毫升琼脂0.5克*:作大BB,小BB时,不要加酚红和琼脂。
制法:1。
除PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调PH7.42。
调好PH后再加酚红。
3。
硫酸镁、PABA另外无菌再加入(亚细,小BB)沙氏培养基成份:蛋白胨1克水100毫升琼脂1.5克(琼脂粉1克%)葡萄糖或麦芽糖4克3制法:1将上述物质称好,放入水中煮沸溶解(不必调PH即有5左右)分中号试管(约4毫升)包扎,高压115℃20分钟。
2 趁热斜好,凝固备用。
质控标准:1无菌试验合格。
2接种霉菌比在其它培养基上生长良好,其它菌生长不好。
用途:作分离培养霉菌用。
注意:1 接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含12.5%氯霉素沙氏斜面培养基上。
2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麦芽糖。
肉渣培养基成份:牛肉渣牛肉浸液(牛肉膏)制法:将做牛肉浸液的牛肉渣,装入试管,高约3毫米,加入牛肉浸液或牛肉膏汤(PH7.6)约5毫升,比肉渣高一倍,液面上加入已溶解的凡士林,高约0.5厘米(不加也可),121℃高压灭菌20-30分钟后保存于冰箱内备用。
用途:用于厌氧菌培养。
注意:如无肉渣也可用牛、羊血等代替,将血块先放入水内煮沸,取出成小块,血块在加热后摇匀成碎颗粒状。
相关疾病:∙霍乱∙痢疾∙肺炎∙脑膜炎单糖发酵管培养基(半固体)成份: PH7.6-7.8蛋白胨水 1000毫升(0.3克/100毫升)1.2%酚红液 0.4毫升琼脂 0.4 - 0.5克10%糖或醇 10毫升制备:把蛋白胨水,琼脂加热溶解,然后加1.2%酚红液0.4毫升,10%糖10毫升,混匀,分装试管,每管约2-3毫升,经115℃高压灭菌20分钟后,分置于试管架上,贴上各类糖或醇类标签备用。
质控标准:细菌发酵糖类或醇而产生酸,能使培养基PH改变,指示剂由红变黄色,如因发酵产生气体则半固体内产生气泡,如有动力则半固体由清亮变混浊。
明胶培养基成份:肉浸液 1000毫升(牛肉浸膏5克)明胶 12克制法:100毫升肉浸液中,加入明胶12克,隔水加热煮化,校正PH7.2,分装小号试管,用阿诺氏间歇灭菌80℃30分钟,连续3日,或者108℃高压20分钟,冷却,贮存备用。
碱性蛋白胨水成份:蛋白胨 20克氯化钠 5克硝酸钾 0.1克结晶碳酸钠(NaclCO3.12H2O) 0.2克水 1000毫升4制法:将蛋白胨,Nacl,硝酸钾,结晶碳酸钠称好,溶于1000DW中,校正PH8.4分装试管,121℃高压灭菌15分钟后备用。
用途:用于霍乱弧菌培养。
葡萄糖蛋白胨水(M。
V用)成份:蛋白胨 5克葡萄糖 5克K2HPO4 5克水 1000毫升制法:将上述称好溶解分装试管,调PH7.4高压灭菌115℃ 灭菌20分钟,或者葡萄糖加热煮沸后再倒试管标准:灭菌试验合格。
接种大肠杆菌VP阴性,M阳性;接种产气杆菌VP阳性,M阴性。
用途:作鉴别肠道杆菌用。
枸椽酸盐培养基成份:磷酸二氢铵 0.1克硫酸镁 0.02克磷酸氢二钾 0.1克枸椽酸钠 0.23--0.5克(0.36)氯化钠 0.5克琼脂 1.5克0.5%溴麝香草酚兰2毫升(调PH6.8再加)制法:将上述称好,放入水中煮沸溶解,调PH6.8,然后分装中号试管,高压灭菌,趁热倒呈斜面,凝固后备用。
标准:1灭菌试验合格,培养基呈果绿色适宜。
2接种大肠杆菌,培养基上不生长,也不变色。
3接种产气杆菌,培养基呈深兰色。
用途:作鉴别大肠杆菌用。
双糖铁培养基成份:下层:蛋白胨 1克氯化钠 0.5克葡萄糖 0.2克琼脂 0.3-0.5克水 100毫升将上述物质混匀调PH7.6后加1.2%酚红0.4毫升上层:蛋白胨 1克氯化钠 0.5克乳糖 1克硫代硫酸钠 0.03克硫酸亚铁 0.02克琼脂 1克水 100毫升制法: 1将下层配好,分装中号试管(1毫升),塞好包扎,15磅高压灭菌半小时,使凝固后备用。
2制上层时,先将蛋白胨水制好,加入硫酸亚铁,硫代硫酸钠,加热溶解PH8.1,再加入酚红分瓶,(每瓶300毫升,称取琼脂包扎灭菌,趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112℃消毒15分钟)。
3取已制的下层管,每管用无菌法倒入上层液约1。
5毫升,边斜放置使成斜面,凝固后备用。
标准:无菌试验合格,接种大肠杆菌下层产酸产气,上层产酸。
尿素培养基成份:蛋白胨 0.1克氯化钠 0.5克磷酸二氢钾 0.2克尿素 0.2克(或10%2毫升)葡萄糖 0.01克(或10%葡萄糖0.1毫升)H2O 100毫升酚红(0.2%) 0.4毫升制法:1除葡萄糖,尿素外把其它药品称好放入水中煮沸,使溶解,调PH7.2过滤,15磅高压灭菌15分钟.2配制尿素(灭菌)液:每100毫升基液内加2毫升.3配制10%葡萄糖(灭菌)每100毫升加0.1毫升.4分装小试管待用.标准:1灭菌试验合格.2接种变形杆菌24小时呈红色.用途:鉴定变形杆菌用.胆盐中性红琼脂成份:蛋白胨琼脂PH7.2-7.4 5000毫升胆盐 2.5克乳糖 5.0克对氨基苯甲酸 25毫克1%中性红溶液 25毫升制法:将胆盐,对氨基苯甲酸,乳糖趁热加入已灭菌之蛋白胨琼脂中,待冷至50-60℃时,加入1%中性红液2.5毫升,混合后即倾注平皿,凝固待用.*:1%中性红:1克中性红加酒精60毫升,加水40毫升丙二酸盐培养基(缩苹果酸钠)成份:丙二酸钠 0.3克酵母浸膏 0.1克Nacl 0.2克硫酸铵 0.2克K2HPO4 0.06克 KH2PO4 0.04克水 100毫升PH6.8,高压灭菌备用.0.2%溴麝香酚兰乙醇 1.25毫升制法:与枸椽酸盐利用试验相类似,是测定细菌能否利用丙二酸盐与碳源.无机铵盐为氨源而生长,生长者使培养基变成碱呈兰色.鉴定:克氏杆菌(+)赫夫尼亚(+)沙门氏菌(—)痢疾杆菌(—)苯丙氨酸培养基成份:酵母浸液 1.5克 DL--苯丙氨酸 1克磷酸氢二钠(无水)0.5克(或L-苯丙氨酸 0.5克)氯化钠 2.5克琼脂 6克水 500毫升 PH7.4制法:1 将上述成份加热溶解,分装于12*125mm口径的试管中,每管约4毫升.2 高压灭菌15磅10分钟,趁热使试管斜置凝固后备用.3 接种时划斜面.用途:鉴定沙门氏菌用.苯丙氨酸脱氨酶试验沙门氏菌阴性.双抗培养基成份:蛋白胨 10克牛肉膏 5克氯化钠 5克无水亚硫酸钠 3克柠檬酸钠 10克蔗糖 10克琼脂粉 20克水 1000毫升制法:1将上物称好,加热溶于水中.2调PH8.2—8.43 分装高压灭菌后备用.倾注平板前先加热溶解琼脂等冷至50℃左右,按无菌操作加入多、庆抗菌素充分摇匀,倾注平板,凝固后备用.(庆大霉素:150u/毫升,多粘菌素:1500u/毫升, 2毫升加至1000毫升培养基内,此相当于庆大霉素0.3u/毫升, 多粘菌素3u/毫升)O2培养基保存液:(文—腊氏液)A液:硼酸 12.405克 KCL 14.912克水 1000毫升取A液250毫升 0.8%NAOH 133.5毫升NACL 20克水 1000毫升分装高压灭菌.硝酸盐胨水成份:蛋白胨 1克硝酸钾(无NO2) 0.1克H2O 100毫升PH7.4,高压灭菌分装备用.(如无硝酸钾也可用硝酸钠0.02克,NACL0.05克,H2O100毫升)用途:硝酸盐还原试验用.原理:测定细菌能否还原硝酸盐为亚硝酸盐,后者在酸性条件下与a—萘胺和对氨基苯磺酸发生重氮反应,生成红色的1-萘-4偶氮苯对磺酸.制法:试剂甲液A对氨基苯磺酸0.8克溶于5N的醋酸100毫升.B:乙液a-萘酚0.5克溶于5N的醋酸100毫升中将细菌接种于硝酸盐水中37℃培养24--96小时,加入甲液0.1毫升,再加入乙液数滴,立即呈现红或紫色为阳性king氏培养基(能促进绿脓菌绿色素产生)成分:蛋白胨 2克 K2SO4 1克甘油 1克 MGCL2 0.14克琼脂 1.5克 H2O 100毫升KING氏培养基(能促进绿脓菌荧光色产生)成分:蛋白胨 2克甘油 1克K2SO4 0.15克 MGSO4 4.7克 H2O 0.15克琼脂 1.5克 H2O 100毫升调PH7.2 15磅20分钟消毒后使成斜面备用.七叶苷水解试验原理:粪链球菌能分解七叶苷(Escalin)其代谢产物与铁离子结合产生黑色沉淀,使培养基变黑.方法:将菌种接种在七叶苷或琼脂上37℃18小时,观察结果,培养基变黑色,其他链球菌能生长但不变黑色,肺炎链球菌不长.成分:七叶苷 0.1克胰胨 1.5克枸橼酸铁 0.2克琼脂 2.0克(0.5克/50毫升)胆汁 2.5毫升 H2O 100毫升PH7.0分装小试管内高压灭菌后备用(10磅20分钟)七叶苷又名桑树皮甙,七叶灵,Aesclin Escnlim Bicolorin等.为白色针状结晶.水溶液兰色荧光.)葡萄糖氧化发酵培养基(O/F)成份:蛋白胨 2.7克氯化钠 5.0克0.2%溴麝香酚兰 0.03克琼脂 3克KH2PO4 0.3克葡萄糖 10.0克水 1000毫升制法:以上成份除糖外,溶解调PH7.0,10磅高压灭菌20分钟后备用.方法:挑取少量培养物接种两管,其中一管接种后加液体石腊不少于1厘米厚,两管同时35℃,培养过夜,观察颜色的变化,若无颜色变化,需继续观察七天,每日观察刺层型别.用途:适用于微球菌科和非发酵菌的鉴定.麦康凯培养基成份:蛋白胨 20克氯化钠 5克乳糖 10克琼脂 20克H2O 1000毫升 1%中性红溶液 3--4毫升1%结晶紫 0.1毫升 PH7.4除中性红临时用时加入外,其余均高压灭菌备用.邻硝基酚半乳糖甙(ONPG)酶试验缓冲液:Na2H2PO4 6.9克溶于40DW中,用5NNOH调PH7.0,再加水到50毫升,冰箱保存.用前若有结晶可稍加温,溶解后再用.ONPG液:称取ONPG(邻硝基酚--B--D半乳糖苷)80毫克,溶于15毫升D.W中,再加上缓冲液5毫升,放入冰箱中保存.此液不稳定,如出现黄色即不能用.鉴别:脑膜炎球菌和乳糖球菌及沙门氏菌属与枸橼酸菌属及亚利桑那氏菌属.脑膜炎球菌和沙门氏菌属为阳性.乳球菌,枸橼酸菌属和亚利桑那菌属为阳性.半固体培养基成份:牛肉膏 3克蛋白胨 10克氯化钠 5克琼脂 2.5--4克水 1000毫升校正PH7.4,15磅高压15分钟.倾注平板,厚度约4mm,冷藏备用.氨基酸脱羟试验培养基成份:L-氨基酸 0.5克蛋白胨 0.5克牛肉膏 0.5克葡萄糖 0.05克吡多醛 0.5克水 100毫升2%溴甲酚紫乙醇液 0.5毫升 2%甲酚红 0.25毫升制法:除指示剂及氨基酸外,溶解,PH6.0,然后加入氨基酸(必要时重新调PH)及指示剂,混匀分装1毫升/管加10毫米厚石蜡油,高压10--15磅10--15分钟灭菌备用.注意:1 使用DL型AA时量加倍.2 最好同时接种空白管(即不含有AA的同样培养基)作对照.3 培养基超过24小时可出现假阳性.葡萄糖酸盐培养基成份:蛋白胨1.5克酵母浸液1克K2HPO4 1克葡萄糖酸钾40克DW 1000毫升溶解过滤分装,高压10磅15分钟.结果:加班氏试剂,加热观察结果.黄-橙色为阳性.无颜色变化为阴性.阿拉伯糖(单糖)液体培养基成份:蛋白胨1克氯化钠0.5克DW 100毫升(调PH7.6)1.6%溴甲酚紫乙醇溶液0.1毫升阿拉伯糖1克菌种保存培养基成份:琼脂10克DW 1000毫升浸10分钟加热溶解后,再加牛肉膏5克蛋白胨10克氯化钠3克Na2HPO4.12H2O 2克本培养基出自上海进出口商品检验局之处方,其最大优点为:细菌保存4年后,其形态菌属特点,生化反应,血清学试验等无变化.厌氧培养基(GAM肉汤)成份:大豆胨3克口胨10克消化血清粉13.5克酵母浸膏5克牛肉膏2.2克牛肝膏(粉)1.2克葡萄糖3克KH2PO4 2.5克可溶性淀粉5克L-半胱氨酸盐0.3克硫乙醇酸钠0.3克肉汤(牛心汤)1000毫升调PH7.2--7.4,10磅高压灭菌15分.用途:用于厌氧菌培养,是一般培养基的基础,此培养基营养最丰富,用时无需加血,可用于各类厌氧菌增菌用.GMA琼脂成份:蛋白胨10克大豆胨3克口胨10克消化血清粉13.5克酵母浸液5克牛肉膏2.2克牛肝膏1.2克葡萄糖3克KH2PO4 2.5克氯化钠3克可溶性淀粉5克L-半胱胺酸盐酸盐0.3克硫乙醇酸钠0.3克琼脂1.5克DW 1000毫升调PH7.2--7.4,10分钟高压灭菌.注意:1可溶性淀粉加热易成糊状凝块,最好先用水少许将淀粉混匀,再加沸水使成糊状,备用.2此培养基营养丰富,无需加促进物质.用途:用于分离培养厌氧菌.硫乙醇酸盐半固体琼脂成份:L-半胱氨酸0.25克葡萄糖6克胰蛋白胨17克大豆胨3克硫乙醇酸钠0.1克氯化钠2.5克亚硫酸钠0.1克琼脂0.7克DW 1000毫升调PH7.6,11磅高压15分钟.附:V—KL添加剂:液体培养基0.1ug/毫升或0.1单位/毫升.固体培养基最终浓度10ug/毫升,冷却后再加VitKL.淋球菌培养基:基础琼脂3.4克无菌抗凝羊血10毫升20%葡萄糖溶液1毫升万古霉素0.2毫升多粘菌素B 0.0375毫升水90毫升用法:1取基础琼脂浸泡于水中,加热煮沸溶解,121℃高压灭菌20分钟.2加入羊血和葡萄糖,于90℃水浴中加热,不时摇动使成咖啡色.3冷却至60℃,加入万古霉素和多粘菌素B溶液,摇匀倒入平板,凝固备用.醋酸铅试纸培养基(测H2S)成份:蛋白胨10克胱氨酸0.1克硫酸钠0.1克水1000毫升PH7.0-7.4 ,115℃高压灭菌20分钟.滤纸剪成0.5-1CM宽,用5%-10%的醋酸铅浸透,烘干,置平皿备用.厌氧培养基1 液体培养基多价蛋白胨20% 胰蛋白胨1%酵母浸出汁0.5% 氯化钠0.5%牛肉膏5% 半胱胺酸0.04%氯化血红素0.5% 溶剂(牛肉浸出液)溶解调PH7.42固体培养基:加琼脂粉2.25%作血平板.LISTER(100毫升)液体用:蛋白胨2% 牛肉膏5%氯化钠5% 酵母浸0.5%牛心浸液作溶剂琼脂粉0.8%调PH7.4,每瓶25-30毫升分装.固体用:同上,加温后加右旋糖苷20毫升或60℃左右加入明胶15%.指示剂1 NaOH 溶液:0.1N NaOH 6毫升DW 1000毫升2 0.015%美兰溶液:0.5%美兰3毫升DW 1000毫升3 6%葡萄糖溶液:葡萄糖6克DW 1000毫升以上1、2、3种溶液等量混合即成.指示剂硼酸二钠(10H2O)2.5克硫乙醇酸钠2.4克美兰25毫升DW 650毫升郭氏培养基成份:牛心浸液10毫升葡萄糖1克酚红(0.4%)1.3毫升1%乙酸铊2毫升调PH8.2-8.3 108℃20分钟.分装时加血清或血浆(灭活)20毫升,0.1%美兰适量.鞭毛染色法玻片处理:将玻片用洗衣粉煮沸10分钟,水洗,再用清洁液浸泡,加温10分钟,水洗,再放入95%酒精脱脂,同时取出凉干,可制成涂片.染色液的配制:20%的鞣酸溶液(加温溶解)2毫升钾明矾饱和液2毫升石碳酸饱和液5毫升10%碱性复红无水乙醇溶液1.5毫升将上述各液混合后放置2-3日,过滤后备用,此液使用不得超大型过5周.染色步骤:将细菌接种在琼脂平板上,培养8-18小时,(35-37℃),用无水乙醇浸泡过的而且干燥的新玻片加一滴无菌DW,用接种环挑取菌落,置DW液面上,然后自然干燥.滴加染色液染1-2分钟,水洗干后镜检.结果:鞭毛染成红色.。