培养基制备的基本方法和注意事项
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告本次实验的目的是制备培养基，为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
下面将从实验的步骤、注意事项、结果及讨论等方面进行介绍。
一、实验步骤1、准备物质：本次实验需要的物质有蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂、蔗糖、粉红色指示剂等。
2、称量：按照配方称取所需要的物质，放置于烧杯中。
3、加水：将溶液加到烧杯中，使用热水搅拌溶解。
4、调pH值：使用磁力搅拌器搅拌溶液，同时加入酸、碱溶液调整其pH值。
5、加入琼脂：琼脂在液态时将其加入培养基中，在0.5小时后，将烧杯放入水浴中，加热至琼脂溶解。
6、灭菌：将培养基热量至65℃进行灭菌处理。
二、注意事项1、称量精准：由于配方中各种物质的比例不同，所以在称量时应该特别注意精准。
2、调pH值准确：必须要根据实验要求，合理的加入酸、碱溶液，使pH值调整在适宜的范围内。
3、琼脂的加入和热力均匀：琼脂的加入需要在液态状态下进行，加入方法应该温和，慢慢地注入。
在加热的过程中也需要注意热力的均匀分布。
4、灭菌时间和方法：都应该根据实验要求进行相应的调整和安排，保证灭菌的效果。
三、结果及讨论培养基制备完成后，我们使用其进行实验，成功得到了所需的细菌菌落。
同时我们也根据实验结果对制备过程中的一些问题进行了总结和讨论。
1、物质的准确称量对实验结果影响较大。
2、pH值的调整应详细了解各个物质对呈酸、碱性的影响。
3、琼脂的加入要在合适的液态下进行，加热过程要均匀。
4、灭菌的方法和时间应根据实验要求进行相应的调整和安排。
综上所述，本次实验是制备培养基，为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
实验过程中我们按照步骤并严格注意了一些细节问题，最终得到了满意的结果，更加深入了我们对实验的了解。
培养基制备的注意事项
培养基制备的注意事项
培养基是微生物学实验中必不可少的实验手段之一、培养基主要由碳源、氮源、生长因子以及必要的微量元素组成，是用于培养菌种和研究细菌生长及代谢特性的一种基础实验仪器。
制备培养基是进行微生物学实验必要的步骤之一，而在制备培养基时，需要注意以下几个方面：
1.材料的选择：选择高纯度、无菌、符合质量标准的化学品，特别是硫酸铵等重要化学品更应特别注意，要严格遵守操作规范。
2.制备条件的控制：在制备培养基的过程中，温度、时间、pH值等因素的控制都需要考虑。
如不同菌种需要的生长温度不同，因此在选择培养基的成分及温度时就需注意菌种的生长特性。
3.配比和加热：正确的配比是制备成功的前提，需要按照配方比例加入处理过的水中，不要有误差。
同时，加热是制备培养基的常规操作，在加热时需要加盖，以确保不会产生污染。
4.灭菌：制备好的培养基必须进行灭菌处理，以防止培养基中存在的其他细菌污染影响实验结果，常见的灭菌方法有干热灭菌、高压灭菌和紫外线灭菌等。
5.保存：制备好的培养基必须被储存在质量好、密闭的容器中，并储存于低温恒温室等合适环境中，避免外界因素造成污染和变质。
综上所述，制备培养基是进行微生物学实验前的基础步骤之一，对实验结果的可靠性有着重要的影响。
因此，在制备培养基的过程中，需要严格按照操作规范进行，并根据实验需求选择适合的配方成分、温度、时间和pH值等因素进行精确的控制，以确保培养基的质量及制备效果符合实验要求。
常用培养基的制备及注意事项
常用培养基的制备及注意事项一、实验目的了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法;二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物;培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水;根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法;牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基;由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供微生物生长繁殖之用; 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果;三、试剂与器材1.器材试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等;2.试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂四、实验内容1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌五、关键步骤及注意事项1.要严格按配方配制;2.调pH不要过头;3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧,注意温度的时间控制,70oC以下放物、取物;4.高压灭菌要注意物品不要过多,加热后排除冷空气,到时降压回零取物;5.过滤除菌要注意各部件灭菌,压滤时,压力要适当,不可太猛太快,滤膜要注意清洗保存;。
培养基制备的注意事项
培养基制备的注意事项培养基是一种供细菌、真菌、细胞或组织在实验室中生长和繁殖的营养液体或固体介质。
正确制备培养基对于实验结果的准确性和可重复性非常重要。
下面是一些培养基制备的注意事项：1. 材料准备：所有使用的实验器具和试剂必须是干净的，以避免污染。
使用无菌技术，如滤器、自洁灭菌器等对培养基进行无菌处理。
2. 配置培养基：按照配方将所需的试剂和溶液添加到适当的容器中，正确称量每种试剂，确保溶液的浓度和配方准确无误。
3. pH调节：培养基的pH值对于生物体的生长和繁殖至关重要。
使用pH计准确测量和调节培养基的pH值，添加酸或碱来调节。
4. 无菌技术：在制备培养基的过程中，必须保持无菌环境，以避免细菌、真菌或其他微生物的污染。
操作时要佩戴手套和口罩，使用无菌匙、试管和培养皿。
5. 消毒：对于固体培养基，可以使用高温烘箱或自洁灭菌器进行消毒。
对于液体培养基，可以使用高压灭菌器或滤过器进行消毒。
6. 搅拌和混合：在配制培养基时，搅拌和混合是必要的，以确保各种试剂充分溶解并均匀分布在培养基中。
7. 灭菌：对于固体培养基，可以在灭菌后将其分装到无菌的培养皿或试管中，迅速盖好或封闭，以防止再次受到污染。
8. 贮存和保存：正确贮存和保存培养基可以延长其有效期。
固体培养基应存放在阴凉干燥的地方，避免阳光直射。
液体培养基应贮存在冰箱或冷藏室中，避免温度过高或冻结。
9. 质量控制：每批新制备的培养基应进行质量控制，包括对培养基的外观、pH值和无菌状态进行检查。
10. 记录和标记：在制备培养基的过程中，要及时记录每个步骤的操作和实验条件。
对于贮存的培养基，要标明制备日期、配方、pH值和其他相关信息。
总之，培养基的制备需要严格遵守无菌操作、正确配方和消毒等注意事项。
做好培养基制备的工作可以确保实验的可靠性和重复性，为后续的实验提供可靠的基础。
培养基的制作方法
培养基的制作方法培养基是微生物学研究中常用的实验材料，用于培养和繁殖微生物。
正确的制备培养基对于保证实验结果的准确性和可重复性至关重要。
本文将介绍培养基的制作方法，以帮助读者掌握正确的制备技巧。
一、准备工作1. 清洗和消毒培养器具：包括量筒、容量瓶、烧杯、培养皿等。
使用去离子水或含0.1%次氯酸钠的消毒液进行清洗和消毒。
2. 准备所需试剂和培养基成分：包括碳源、氮源、无机盐、维生素、生长因子等。
根据实验需要选择合适的配方。
二、制备培养基步骤1. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。
精确称量或计量试剂，避免误差。
2. 将所需试剂分别溶解于适量的去离子水中，搅拌均匀。
注意溶解过程中的温度和pH值控制。
3. 将溶解好的试剂倒入容量瓶中，加入适量的去离子水，使总体积达到容量瓶标记线。
再次搅拌均匀。
4. 用适当的容器（如烧杯）接收制备好的培养基。
注意避免污染，避免气泡的产生。
5. 进行高温高压灭菌，通常为121摄氏度，压力为15磅，时间为20分钟。
确保培养基的无菌性。
6. 灭菌后，将培养基倒入培养器具（如培养皿、试管等），根据实验需要分装适量的培养基。
7. 将培养器具密封，避免外界污染。
存放于冰箱或低温冷藏室中，避光保存。
三、常见培养基的制备方法1. 营养琼脂培养基制备方法：a. 按照配方计算所需琼脂的质量。
b. 将琼脂溶解于适量的去离子水中，加热至完全溶解。
c. 加入所需营养成分，如葡萄糖、胰蛋白酶胨等。
搅拌均匀。
d. 倒入容器中，高温高压灭菌后分装。
2. 非琼脂培养基制备方法：a. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。
b. 将所需试剂溶解于适量的去离子水中，搅拌均匀。
c. 调整pH值至所需的范围，使用盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。
d. 倒入容器中，高温高压灭菌后分装。
四、培养基制备中的注意事项1. 注意实验室的洁净环境，避免外界污染。
2. 注意试剂的质量和纯度，避免影响培养基的质量。
3. 注意培养基的pH值控制，不同微生物对pH值有不同的要求。
制备培养基的操作要点和注意事项
制备培养基的操作要点和注意事项制作培养基就像微生物实验室的家常便饭，培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，培养基由于富含营养物质，易被污染或变质，配制过程中有多个注意事项和操作要点需要我们掌握。
一、什么是培养基？培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。
培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。
二、培养基的种类。
培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。
三、培养基配制须知。
培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。
培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。
配好后不宜久置，最好现配现用。
四、玻璃器皿的清洗在制备培养基的过程中，首先要使用一些玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。
这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。
有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。
1新购的玻璃器皿除去包装沾染的污垢后，先用热肥皂水刷洗，流水冲净，再浸泡于１～２％的工业盐酸中数小时，使游离的碱性物质除去，再以流水冲净。
对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上将水空干，即可使用。
2用过的玻璃器皿凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。
有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。
培养基的制备注意事项
培养基的制备注意事项培养基是细菌、真菌、植物等在实验室中生长繁殖的基础，制备好的培养基质量的优劣直接关系到后续实验的效果。
下面是制备培养基时需要注意的几个方面：1.原料选择：培养基的原料应选择优质的，可能污染的原料要经过严格的消毒处理。
一般情况下，培养基的基本成分有蛋白质源、碳源、氮源、矿物质盐和水。
一般可以选择酪蛋白、蛋白胨、肉蔻蛋白、玉米粉、葡萄糖、蔗糖、硝酸铵等。
2.无菌操作：培养基制备的过程中需要进行无菌操作，以免杂菌的污染。
在实验室的流水槽和工作台上进行消毒，使用一次性无菌胶手套、面罩和无菌吸管等。
还需要准备好高压蒸汽锅和高压反应釜来进行高温高压灭菌，以杀死培养基中可能存在的微生物。
3.配制方法：按照实验要求，将不同的成分按照一定比例配制成培养基。
在配制过程中，需要掌握好各种成分的化学性质和操作方法，在配制过程中遵循标准的步骤和操作规程，严格控制各种成分的加量和质量，确保培养基的稳定性和可靠性。
4.调节pH值：培养基pH值的调节是培养基制备中必不可少的一个步骤。
不同的微生物对pH值有不同的要求，一般细菌和真菌的培养基pH值在6-8之间比较适宜。
可以使用pH计或酸碱滴定法来进行准确的pH值测定和调节。
5.灭菌方法：经过上述步骤制备好的培养基需要进行灭菌处理，以杀死培养基中可能存在的微生物。
常用的灭菌方法有高温高压灭菌、滤器灭菌、化学灭菌等。
灭菌的时间和温度要掌握好，以避免对培养基成分的破坏。
制备培养基需要严格按照操作规程进行，注意消毒、无菌操作、配制比例、pH调节和灭菌等环节。
只有优质的培养基才能够提供良好的生长环境，确保实验的准确性和可靠性。
培养基的制作过程
培养基的制作过程培养基是细菌、真菌、细胞等生物体在实验室中进行培养和繁殖所必需的营养物质和环境条件的混合物。
制作培养基是生命科学实验中非常重要的一步，下面将从原材料、制备步骤、注意事项等方面详细介绍培养基的制作过程。
一、原材料1. 离子交换水或双蒸水：用于配制培养基时稀释各种试剂，保证试剂的纯度。
2. 蛋白胨：是从动物肉类或鱼虾等蛋白质含量高的食品中提取出来的，是常用的一种氮源，可供微生物生长使用。
3. 酵母提取物：是从酵母菌体中提取出来含有丰富氮源和多种维生素B族成分的营养液，常用于培养真菌和酵母等微生物。
4. 葡萄糖：是微生物进行代谢反应所必需的碳源。
5. 磷酸盐缓冲液：用于调节培养基pH值，以维持适宜的生长环境。
6. 硫酸镁：是微生物进行代谢反应所必需的微量元素，同时也可用于调节培养基pH值。
7. 染色剂：如溴甘酚、溴蓝等，用于检测微生物在培养基上的生长情况和形态特征。
二、制备步骤1. 称取所需试剂：按照配方要求，精确称取每种试剂，并将其分别加入离子交换水或双蒸水中。
2. 搅拌溶解：将试剂加入水中后，使用磁力搅拌器将其充分搅拌溶解，直至无明显沉淀出现。
3. 调节pH值：使用磷酸盐缓冲液调节培养基的pH值，通常在7.0-7.4之间为宜。
如果pH值过高或过低，会影响微生物的生长和代谢反应。
4. 灭菌：使用高压灭菌器或自制压力锅对培养基进行灭菌处理。
灭菌时间一般为20-30分钟，在121℃下进行高温高压处理。
灭菌后要及时冷却到室温。
5. 包装保存：将制好的培养基分装到无菌瓶中，并在瓶口处加上无菌棉塞或铝箔封口，避免外界污染。
储存温度通常为4℃，可保持较长时间的稳定性。
三、注意事项1. 原材料质量要求高：制备培养基的原材料必须是纯度较高、无污染的试剂，以避免影响微生物的生长和代谢反应。
2. 操作要严谨：在制备过程中要注意操作规范，遵守无菌操作规程，防止微生物污染。
3. 灭菌时间和温度要控制好：灭菌时间和温度是保证培养基无菌的关键因素之一，必须严格按照标准化程序进行操作。
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培养基制备的基本方法和注意事项1.培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同着作中常会有某些差别。
因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。
2 ．培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录，包括培养推各称，配方及其来源．和各种成份的牌号。
最终pH 值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。
3.培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱．最好一次完成，不要中断。
可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。
完全称取完毕后．还应进行一次检查。
4.培养基各成份的混合和溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。
使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。
最好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。
在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。
待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。
如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。
在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最后必须加以补足。
5.培养塞pH 的初步调整培养基各成分完全溶解后，应进行pH 的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH 会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低.而肠浸液pH 却会有显着的升高。
因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH ，保证培养基的质量。
pH 调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。
液体培养基必须绝对澄清，琼脂培养基也应透明无显着沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。
一般液体培养基可用滤纸过滤法，滤纸应拆叠成折扇成漏斗形，以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。
琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤。
亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。
新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去，再用滤纸反复过滤。
如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。
即将冷却至55-60℃的培养基放入大的三角烧瓶内，装入量不得超过烧瓶容量的1/ 2 ，每1000ml 培养基加入1-2个鸡蛋的蛋白．强力振摇3-5 分钟，置高压蒸汽灭菌器中、121℃加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。
若能自行沉淀者，亦可静置冰箱中1-2日、吸取其上清液即可。
7.培养基的分装培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。
分装量不得超过容器装盛量的2/ 3 。
容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还双用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。
分装时最好能使用半自动或电动的定量分装器。
分装琼脂抖面培养基时，分装量应以能形成2 / 3 底层和1/ 3 斜面的量为恰当。
分装容器应予先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。
每批培养基应另外分装20ml 培养基于一小玻瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基最终pH之用。
8.培养基的灭菌一般培养基可采用121℃ 高压蒸汽灭菌15分钟的方法。
在各种培养基制备方法中，如无特殊规定，即可用此法灭菌。
某些畏热成分，如糖类，应另行配成20% 如或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒，以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。
明胶培养基亦应用较低温度灭菌。
血液、体液和抗生素等则应从无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50℃ 左右的培养基中。
琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出、待冷至55-60℃时，摆置成适当斜面、待其自然凝固。
每批培养基制备好以后．应仔细检查一遍：如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。
并测定其最终pH。
将全部培养基放入36±1℃ 恒温箱培养过夜，如发现有菌生长，即弃去。
用有关的标准菌株接种1-2 管或瓶培养基，培养24- 48 小时，如无菌生长或生长不好。
应追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则该批培养基即应弃去，不能使用。
10.培养基的保存培养基应存放于冷暗处，最好能放于普通冰箱内。
放置时间不宜超过一周，倾注的平板培养基不宜超过3天。
每批培养基均必须附有该批培养基制各记录副页或明显标签。
培养基的常规配制程序一、目的要求了解培养基的配制原理。
了解培养基常规配制程序。
了解培养基配制过程各环节的要求和注意事项。
二、基本原理正确掌握培养基基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础，由于微生物种类及代谢类型的多样性，因而用于培养微生物培养基的种类也很多，它们的配方及配制方法虽各有差异。
但一般培养基的配制程序却大致相同，例如器皿的准备，培养基的配制与分装，棉塞的制作，培养基的灭菌，斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相向。
三、实验材科(一)药品待配各种培养的组成成分，琼脂，1mol/L NaOH溶液，1mol/l (升，统一用大写)HCl溶液。
(二)仪器天平或台秤，高压蒸汽灭菌锅。
(三)玻璃器皿移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
(四)其他物品药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸等。
四、实验内容(一)玻璃器皿的洗涤和包装1．玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中，用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡。
再用自来水及蒸馏水冲洗，洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
2．灭菌前玻璃器皿的包装(1)培养皿的包装培养皿由一盖—底组成一套。
可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
(2)移液管的包装在移液管的上端塞入—小段棉花(勿用脱脂棉)。
它的作用是避免外界及口中杂菌吹入管内，并防止菌液等吸入口中。
塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左有。
棉花自身长度约1-1．5cm。
塞棉花时，可用一外圈拉直的曲别针，将少许棉花塞入管口内。
棉花要塞得松紧适宜，吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。
先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条，然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45度角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，右手将移液管压紧，在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。
上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌(见图5—1—1)。
(二)液体及固体培养基的配制过程1．液体培养基配制(1)称量一般可用1/100粗天平称量配制培养基所需的各种药品。
先按培养基配方计算各成分的用量，然后进行准确称量。
(2)溶化将称好的药品置于一烧杯中，先加入少量水(根据实验需要可用自来水或蒸馏水)，用玻棒搅动，加热溶解。
(3)定容待全部药品溶解后，倒入一量筒中，加水至所需体积。
如某种药品用量太少时，可预先配成较浓溶液，然后按比例吸取一定体积溶液，加入至培养基中。
(4)调pH 一般用pH试纸测定培养基的pH。
用剪刀剪出一小段pH试纸，然后用镊子夹取此段pH试纸，在培养基中蘸一下，观看其pH范围，如培养基偏酸或偏碱时，可用1mol/l NaOH或1mol/l HCl溶液进行调节。
调节pH时，应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱，破坏培养基中成分。
边加边搅拌，并不时用pH试纸测试，直至达到所需pH为止。
(5)过滤用滤纸或多层纱布过滤培养基。
一般无特殊要求时，此步可省去。
2．固体培养基的配制配制固体培养基时，应将已配好的液体培养基加热煮沸，再将称好的琼脂(1．5％-2％)加入，并用玻棒不断搅拌，以免糊底烧焦。
继续加热至琼脂全部融化，最后补足因蒸发而失去水分。
(三) 培养基的分装根据不同需要，可将己配好培养基分装入试管或锥形瓶内，分装时注意不要使培养基沾污管口或瓶口，造成污染。
如操作不小心，培养基沾污管口或瓶口时，可用镊子夹一小块脱脂棉，擦去管口或瓶口的培养基，并将脱脂棉弃去。
1．试管的分装取一个玻璃漏斗，装在铁架上，漏斗下连一根橡皮管，橡皮管下端再与另一玻璃管相接，橡皮管的中部加一弹簧夹。
分装时，用左手拿住空试管中部，并将漏斗下的玻璃管嘴插入试管内，以右手拇指及食指开放弹簧夹，中指及无名指夹住玻璃管嘴，使培养基直接流入试管内(图5—1—2)。
装入试管培养基的量视试管大小及需要而定，若所用试管大小为15×150 mm时，液体培养基可分装至试管高度1／4左右为宜；如分装固体或半固体培养基时，在琼脂完全融化后，应趁热分装于试管中。
用于制作斜面的固体培养基的分装量为管高1／5(约3—4m1)；半固体培养基分装量为管高的1／3为宜。
2．锥形瓶的分装用于振荡培养微生物用时，可在250 m1锥形瓶中加入50 ml的液体培养基，若用于制作平板培养基用时，可在250 m1锥形瓶中加入150ml培养基，然后再加入3g琼脂粉(按2％计算)，灭菌时瓶中琼脂粉同时被融化。
(四)棉塞的制作及试管、锥形瓶的包扎为了培养好气性微生物，需提供优良通气条件，同时为防止杂菌污染，则必须对通入试管或锥形瓶内空气预先进行过滤除菌。
通常方法是在试管及锥形瓶口加上棉花塞等。
1．试管棉塞的制作制棉塞时，应选用大小、厚薄适中的普通棉花一块，铺展于左手拇指和食指扣成的圆孔上，用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞，然后直接压入试管或锥形瓶口。
也可借用玻璃棒塞入，也可用折叠卷塞法制作棉塞(图5—1—3)。
制作的棉塞应紧贴管壁，不留缝隙，以防外界微生物沿缝隙侵入。
棉塞不宜过紧或过松，塞好后以手提棉塞，试管不下落为准。
棉塞的2／3在试管内，1／3在试管外(图5—1—4)。
目前也有采用金属或塑料试管帽代替棉塞。
直接盖在试管口上。
灭菌待用。
将装好培养基并塞好棉塞或盖好管帽的试管拥成一捆，外面包上一层牛皮纸。
用铅笔注明培养基名称及配制日期，灭菌待用。
2．锥形瓶棉塞制作通常在棉塞外包上一层纱布，再塞在瓶口上。
有时为了进行液体振荡培养加大通气量，则可用8层纱布代替棉塞包在瓶口上。
目前也有采用无菌培养容器封口膜直接盖在瓶口，既保证良好通气，过滤除菌又操作简便，故极受欢迎。
在装好培养基并塞好棉塞或包上八层纱布或盖好培养容器封口膜的锥形瓶口上，再包上一层牛皮纸并用线绳捆好，灭菌待用。
(五)培养基的灭菌培养基经分装包扎之后，应立即进行高压蒸汽灭菌，100Pa灭菌20min（灭菌条件根据培养基不同有所差异，含糖培养基105℃，30min）。
如因特殊情况不能及时灭菌，则应暂存于冰箱中。
(六)斜面和平板的制作1．斜面的制作将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒上，使成适当斜度，凝固后即成斜面(图5—1—5)。