替考拉宁血药浓度测定方法学初步方案
RP-HPLC法测定人血浆中替考拉宁的浓度
RP-HPLC法测定人血浆中替考拉宁的浓度江泓颖;曹薇;陈永刚;吴金虎;王雄【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2011(27)5【摘要】目的建立测定人血浆替考拉宁的HPLC法,供血药浓度监测用,指导临床安全合理用药.方法色谱柱为Wondasil C18柱(4.6 mm ×250 mm,5μm)；流动相为乙腈-0.05 mol/L KH2 PO4溶液(体积比28∶72,pH=3.2),检测波长为240 nm,流速为1.0 mL/min；柱温为25℃.结果替考拉宁在4～48 μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,检测限为2 μg/mL,方法回收率平均值为91.43％,提取回收率平均值为88.40％,日内、日间RSD值均小于6％.结论该方法操作简单快速,准确度高,适用于替考拉宁的血药浓度测定.%Objective To establish an HPLC method for determination of teicoplanin in serum, providing the basis for monitoring clinical plasma concentrations and rational administration. Methods HPLC was performed on a C18 column (Wondasil,4. 6 mm × 250 mm,5μm) with acetonitrile-0.05 mol/L monobasic potassium phosphate 28:72 as mobile phase. The wavelength was 240 run, and the flow rate was 1. 0 mL/min, colu mn temperature was 25℃. Results It showed good linearity in the concentration range of 4 -48 μg/mL,and the limit of quantitation was 2 μg/mL, The average method recovery was 91. 43% and the average extraction recovery was 88.40%. The inter-day RSD and intra-day RSD were both less than 6%. Conclusion The method was simple,quick and accurate,which could be used for the assay of teicoplanin in serum.【总页数】3页(P496-498)【作者】江泓颖;曹薇;陈永刚;吴金虎;王雄【作者单位】武汉市第三医院,湖北武汉430060;武汉市第三医院,湖北武汉430060;武汉市第三医院,湖北武汉430060;武汉市第三医院,湖北武汉430060;武汉市第三医院,湖北武汉430060【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.RP-HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度 [J], 于海燕;何粤红;胡冬竹;胥小叶2.RP-HPLC法测定人血浆中卡马西平浓度 [J], 王丽霞;陈清霞;杨红梅;梁小丽;刘伟忠3.RP-HPLC法测定人血浆中拉米夫定的浓度 [J], 朱旭;孙亚欣;邱枫;何晓静;赵明明;肇丽梅4.离心超滤结合超高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中替考拉宁游离浓度 [J], 付文倩;张敏新;姚囡囡;张丽丽;宋洪涛5.HPLC-UV法测定人血浆中替考拉宁药物浓度的方法学研究及其临床应用 [J], 王彦改;沈芊;苏甦;王雪梅;姜德春;闫素英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定替考拉宁组分和有关物质
种 >* 配成的流动相虽都能分离 !"#$% L !"#$/ 的五个 组分， 但要使前后杂质峰很好分离， 且峰形尖锐符合要 求， 选择 >*54 8 较适宜。 !" $" $ 流动相配比选择 配制流动相中乙腈含量为 试验结果证明选择 #/M 、 #?M 、 +8M 、 +#M 的不同比例， 乙腈配比为 +8M 较好。 !" $" % 磷酸二氢钠浓度选择 配制 DF*# C). 在流动 相 中 浓 度 分 别 为 84 8%、 84 8%/、 84 8#、 84 8#/、 84 8+/、 选 择 DF*# C). 浓 度 为 84 8/6:; < = 的 试 验 结 果 证 明 ，
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分析与质控
文章编号： /44/JBCBI 2 -44C 3 40J4/B1J40
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"#$% 法测定替考拉宁组分和有关物质
杨红 秦川萍
（中国医药集团四川抗菌素工业研究所， 成都 C/44*/ ） 摘 要：目的 建立 替考拉 宁组分和 有关物 质测定 的 9:;< 法。方 法 （-44>> O 1P C>>Q /4 #>） 使 用 M?N </B 柱 Q 流 动相为 替考拉宁在浓度 D4 7 104 #E F >’ 内与峰面 该方法快速、 简便、 准确， 可用于替考拉宁组
人凝血因子Ⅷ效价测定一步法
人凝血因子Ⅷ效价测定一步法1 试剂1.1样品稀释液：取1容积的3.8%枸橼酸钠液加入5容积咪唑缓冲液。
1.1.1 咪唑缓冲液称0.68g咪唑和1.17g氯化钠溶于100ml蒸馏水中，加入42.2ml 0.1mol/L盐酸，然后被加入蒸馏水至200ml,pH为7.3。
1.1.23.8%枸橼酸钠溶液称9.5g枸橼酸钠溶解于250ml蒸馏水中。
1.2 血小板代用品“兔（人）脑组织的氯仿抽提液”。
用前用生理盐水稀释至适当倍数。
1.3白陶土生理盐水混悬液称0.5g白陶土加生理盐水至100ml即可使用。
1.4 基质血浆取人凝血因子Ⅷ含量低于2%的血友病病人血浆或人工基质血浆，然后分装于5ml安瓿，冻干或-30℃保存。
1.50.05mol/L氯化钙溶液称111g氯化钙溶于1000ml蒸馏水中，配制成1mol/L氯化钙贮存液，用前进行20倍稀释，配成0.05mol/L氯化钙溶液。
1.6 人凝血因子Ⅷ标准品及标准血浆人凝血因子Ⅷ国家标准品或经国家标准品标化的工作标准（定量分装冻干，置-30℃保存，一般2IU/ml左右），用前取样品稀释液溶解成1IU/ml。
标准血浆系取30份新鲜正常人血浆等量混合后，分装于小瓶内，置-30℃保存。
自采血后至分浆冻结整个过程不得超过4小时。
1.7待测样品按标示量加入注射用水溶解，测定时稀释成1IU/ml。
2 测定2.1取2支试管，每管加入0.1ml基质血浆和0.1ml样品稀释液，混匀，再加0.1ml血小板代用品和0.1ml白陶土悬液，混匀，将试管置37℃水浴保温一定时间（一般2～6分钟），然后加入0.1ml0.05mol/L氯化钙溶液，记录凝固时间，2管平均值为基质血浆的“空白”值（一般应大于3分钟）。
2.2 标准品或标准血浆用样品稀释液分别进行10倍、20倍、40倍、100倍和200倍稀释，用不同稀释浓度标准品代替2.1项试验中样品稀释液，按上述方法分别测定凝固时间。
2.3 待测样品稀释成约0.02～0.04IU/ml，代替2.1项试验中样品稀释液，同时分别测定凝固时间。
试述血凝试验的操作步骤
血凝试验是一种常见的临床实验室检测方法，用于评估凝血功能和诊断凝血相关疾病。
下面我将为您详细介绍血凝试验的操作步骤。
一、试验前准备1. 准备所需材料：试验用血清管、试验管架、试验管塞、试管标签、离心机、凝血试剂盒等。
2. 检查仪器是否正常工作并校准，确保试剂未过期。
3. 打开试剂盒，按照说明书要求进行储存条件和试剂稳定性的确认。
二、标本采集和处理1. 无菌操作，使用无菌针头和注射器采集静脉血标本。
2. 将采集的静脉血标本放入无抗凝试管中，并轻轻倒置数次，使其与抗凝剂充分混合。
3. 离心采集的血液标本，以分离血浆和红细胞，将血浆转移到干净的试验管中。
4. 将试验管中的血浆再次离心，以去除悬浮的红细胞和其他杂质。
三、试验操作1. 取出准备好的试验管架，并按照试验方案标注试验管标签。
2. 将血浆样本平均分配到不同的试管中，每个试管的血浆量应保持一致。
3. 在试管中加入预先配置好的试剂。
根据实验要求和试剂盒的说明书，在不同试管中加入不同的试剂。
4. 轻轻摇晃试管，使血浆和试剂充分混合，确保试剂与血浆反应顺利进行。
5. 根据试剂盒的说明书，在适当的温度下孵育一段时间，以促进血浆的凝固过程。
6. 在孵育结束后，观察试管内血浆的凝固状态。
可以通过目视观察或使用特定仪器来进行血凝结果的判断。
7. 记录血凝试验的结果，包括凝血时间、凝血酶原时间等指标，并按照实验室标准进行解读和报告。
四、结果分析与报告1. 根据试验结果，判断血浆的凝固功能是否正常。
根据实验室的参考范围，对结果进行解读，判断是否存在凝血功能障碍或异常。
2. 根据实验结果，提供凝血功能的定量指标，如凝血时间、凝血酶原时间等，以便医生进行临床诊断和治疗方案的制定。
3. 撰写实验报告，包括样本信息、试验方法、结果解读等内容，并及时提交给相关医疗专业人员。
血凝试验是一项复杂的实验室检测技术，需要严格的操作和仪器校准。
只有正确地执行每个步骤，才能确保试验结果的准确性和可靠性。
高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度及其在重症感染患者中的应用
中国临床保健杂志 ２０１９年 １０月第 ２２卷第 ５期 ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＨｅａｌｔｈｃ，Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１９，Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．５
高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度 及其在重症感染患者中的应用
·论著·
晨迪１，杨昭毅２，沈爱宗２，张圣雨２，苏丹２，宁丽娟２，杨本军２
［１．安徽中医药大学药学院，合肥 ２３００３１；２．中国科学技术大学附属第一医院（安徽省立医院）药剂科］
［摘要］ 目的 建立高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定替考拉宁血药浓度的方法，为重症感染患者合理使用替 考拉宁，制定个体化抗感染给药方案奠定基础。方法 建立及采用高效液相色谱法测定重症患者替考拉宁血 药浓度，以谷浓度为参考值分析浓度分布情况。结果 替考拉宁在 ３．１１４～９９．６５０μｇ／ｍＬ范围内线性良好，标 准曲线回归方程为 ｙ＝０．０３Ｘ＋０．００４，ｒ＝０．９９９８。批内、批间精密度 ＲＳＤ均小于 １５％；准确度均在 ９８．２６％ ～ １１１．５４％之间，定量下限为 ３．１１４μｇ／ｍＬ。共 ２３例患者，４６例次监测结果纳入研究；两次采血点的达标率分别 为 ５６．５２％和 ４７．８３％。结论 替考拉宁在实际临床中谷浓度达标率低，个体差异大，建议在必要时通过血药浓 度监测，使其维持安全有效的血药浓度。
替考拉宁属于糖肽类抗菌药物，可用于治疗各 种严重的革兰阳性菌感染，包括不能用青霉素类及 头孢菌素类抗生素治疗或用上述抗生素治疗失败的 严重葡萄球菌感染，或对其他抗生素耐药的葡萄球 菌感染。替考拉宁于 ２０００年 １２月进入国内，因其 抗菌作用强、肾毒性低等优势，临床应用日益增多， 特别是肾功能不全的老年严重感染患者。但由于其
［关键词］ 危重病人医疗；血药浓度；色谱法，液相；替考拉宁 ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２６７９０．２０１９．０５．０１１
20例重症患者测定替考拉宁血药浓度的临床意义
20例重症患者测定替考拉宁血药浓度的临床意义目的：探讨重症患者进行替考拉宁血药浓度监测的临床意义。
方法：对我院2012.5-2013.5间使用替考拉宁治疗并有测定谷浓度的患者情况进行回顾性分析。
结果：20例患者在起始时均给予负荷剂量，其中18例达到有效浓度>10mg/l，血浆白蛋白对血药浓度无明显影响，CRRT患者血药浓度水平低于未进行CRRT 治疗者。
行CRRT治疗者，在使用负荷剂量后400mg、qd更佳，但需进行血药浓度监测。
结论：替考拉宁血药浓度监测可以更好地提高用药的有效性，实现个体化给药。
标签：替考拉宁；血药浓度监测；CRRT替考拉宁是继万古霉素后研制的治疗格兰阳性球菌的糖肽类抗生素，由于化学结构上增加了脂肪酸侧链，而且相对分子质量增大，所以在药物代谢动力学方面显示了良好的特性。
替考拉宁组织穿透力强，能在细胞内浓集，半衰期显著延长。
替考拉宁通过抑制细菌细胞壁合成而抑制细菌生长，适用于治疗耐甲氧西林葡萄球菌（methicilin resistant staphylococcus aureus，MRSA）感染。
[1]MacGowan 等研究表明，治疗中重度感染，替考拉宁血药谷浓度（Cmin）应大于10mg/L。
[2]Matsumoto等进一步研究认为治疗MRSA感染，替考拉宁Cmin应大于13mg/L，[3]因为病人体质各异、肝肾功能不全等疾病的特殊性，药物的分布、代谢、排泄等也会发生很大变化，因此，我们需要对特殊人群进行治疗药物浓度监测（TDM），以明确替考拉宁是否达到有效治疗浓度。
[4-5]目前国内尚未对替考拉宁血药浓度开展常规监测，而且目前报道的文献也大部分为科研型，对临床实际用药后进行监测并对结果进行分析的资料很少。
本文通过对我院使用替考拉宁过程中有测定血药浓度的患者情况进行回顾性分析，更贴近临床实际，以期对临床用药提供参考。
1 资料与方法1.1 资料来源：2012.5～2013.5在温州医科大学附属第一医院因重症感染住院使用替考拉宁治疗的患者。
高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用
Strait Phannaceaticgt Jouviat Vol33Nog2021菇多糖的临床抗肿瘤应用提供了一定的循证证据，然而由于研究存在一定的发表偏倚和文献质量不高的情况，本研究的结果还有待更大样本量和更高质量的RCT试验来验证。
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脓毒症患者使用替考拉宁早期血药谷浓度分析
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广东汕尾，彭湃纪念医院急诊科
通信作者：何志捷，3A.)4：(/_()^)/`A.)4?<R<:?/1:?5*
物不良反应等。
根据用药时患者是否诊断为脓毒症 （参照脓毒
症 G?O 定义的诊断标准，严重感染且 CYZ9 评分
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分 ），将
L!
例患者分为脓毒症组（G$
例）及非脓
应用 KLKK =C?" 统计软件进行数据分析，两组 患者年龄、体质量、血药谷浓度、血清白蛋白、肌酐清 除率及 9L9'M3评分等计量资料以均数 标准 差（ ）表示，组间比较采用独立样本 检验；性 别、替考拉宁血药谷浓度分布及死亡构成比等计数 资料以例数表示，组间比较采用 ! 检验，以 J "?"D 为差异具有统计学意义。
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。在脓毒症患者中，
0BC9
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是主要的致病菌之一 。然而由于脓毒症患者
可能存在休克，或经过液体复苏，可能存在低蛋白血
症、多器官功能损害，替考拉宁的药物代谢可能发生
ห้องสมุดไป่ตู้
较大的变化，故脓毒症患者中替考拉宁的血药谷浓
度水平分布情况仍有待研究。本文总结分析中山大 学孙逸仙纪念医院重症医学科 L! 例静脉使用替考
替考拉宁具有很强的抗革兰染色阳性球菌活 性 ， 包 括 耐 甲 氧 西 林 金 黄 色 葡 萄 球 菌（A/-()5)44)* ,/<)<-.*- !"#$%&'()())*+ #*,-*+，0BC9），它具有明
显的抗生素后效应及较低的肾毒性，临床应用较为
D=!E
广泛 。替考拉宁的蛋白结合率约为
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替考拉宁血药浓度测定方法学初步方案
1．色谱条件：流动相二水合磷酸二氢钠：乙腈=72:28，pH=2.05 流速1ml/min
柱温30度
监测波长240nm
2. 标准品配置：替考拉宁标准溶液2.2mg/L
3.血浆样本前处理：精密吸取血清样品0.20ml，加入300μl乙腈，混悬20s，离心（10000r/min,5min）,取上清液300μl，加入氯仿200μl，混漩20s，离心（10000r/min,5min），取上清液20μl进样
4.专属性实验：分别取空白血清，患者血清+内标，替考拉宁标准品+内标+空白血浆三类样本，考察血清内杂质峰对替考拉宁的干扰
5.建立标准曲线
按样品预处理的方法，加入不同浓度的替考拉宁溶液_______，使其血清浓度为5，10,20,40,80,100mg/L，加入空白血清______μl，加内标（）,总体积____-μl
6.提取回收率
取高、中、低3个浓度标准品，分别加入空白血浆+内标，稀释溶剂+内标，配置成终浓度__________________样品，每个浓度各5份，进行记录峰面积，计算回收率
回收率=
7.精密度实验
取高、中、低3个浓度标准品，分别加入空白血浆+内标配置成终浓度_______________样品，重复测定5次，连续3天，进行日内及日间精密度计算
8.稳定性实验将浓度为5,20,80的替考拉宁血清样品若干份，分别置于室温放置稳定性（12H），长期冷冻稳定性（-20度保存15,30天），
冻融稳定性（反复冻融3次），9,。
检测限和定量限。