国外主要分子诊断POCT概览
POCT介绍ppt课件
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3、血液相关疾病
（1）血栓与止血
（2）血红蛋白定量和血细胞计数
（3）全自动血液流变分析仪和全自动血沉仪
4、感染性疾病
快速口腔艾滋病检测技术（Oraquick），准确率可达99.6 %
5、内分泌疾病 （1）血糖监测 （2）糖化血红蛋白（HbA1c） （3）尿微量白蛋白
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6、发热性疾病
7、血液生物化学分析 （1）干化学 （2）电解质和血气分析 （3）Hs-CRP （4）胆固醇芯片
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与POCT相关的名词：
bedside testing(床边检测) near-patient testing(病人身边检测) physicians office testing(医师诊所检验) home use testing(家用检验) extra-laboratory testing(检验科外的检验) decentralized testing(分散检验)等。
8、优生优育
15 POCT的优势
快速检测
POCT的主要目的就是更快的得到实验结果。传统诊断中，大量时间被浪费在样本 运送、前处理、组织、标记、录入、分发等方面，核心反应及分析时间占比极 低。与之相比，POCT进行了步骤精简，依靠其便携及反应快速等优势，POCT仅 保留了诊断最核心的“采样-分析-质控-输出”步骤，从而极大地降低了诊断时 间，为患者在最佳时间窗口就诊获得了最大便利。
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3、急诊医学飞速发展的需要 最先进的设施和方法, 以最快的速度、最有效的手段, 尽最大可能挽救急危重症患者
的生命和最大限度地减轻患者的伤残。 4、科技进步的需要
后基因组时代的到来，使蛋白质组学分析技术蓬勃发展，分子诊断学技术有了突破性 的进展，简便、快速、准确、高通量检测成为可能。
分子诊断POCT调研v2
2016年12月15日，万孚生物发布公告，其全资子公司香港万孚认购Atlas Genetics Ltd公司新增发行的71845股D轮优先股股份，意味着万孚在poct免疫 诊断方面位于国内领先地位，获得io产品经销权将巩固万孚生物在国内poct行 业领先公司的地位。
中小型
4
是
Alere i
8-15min
中小型
4
否
Atlas Genetics io
30min
中小型，10.2kg
3
是
Mesabiotech Accula 30min 小巧轻便，＜1kg
3
否
QuantuMDX Q-POCTM 10-30min
小型
3
否
GenePOC revogene
70min
中小型
3
是
盖妊娠检测、传染病检测、毒品（药物滥用）检测、慢性病检测等领域
胶体金免疫层析、荧光免疫层析、生化胶乳试剂、化学发光和 心肌标志物、炎症标志物、肾脏标志物、血糖标志物、妊娠标志物、生化试剂和
诊断试剂原材料开发五大技术平台
Getein 系列荧光免疫定量分析仪、FIA 系列荧光免疫定量分析仪
诊断仪器主要为免疫分析 平台
2013年9月，法国生物梅里埃以4.5亿美元收购BioFire。
美艾利尔Alere i检测平台
Alere i系统是一种基于切口酶扩增反应的自动化快速体 外诊断测试平台。该技术此前已成功用于流感病毒检测 （Alere i influenza）和链球菌检测（Alere i Strep A）。2017年雅培宣布以53亿美元收购Alere。
POCT项目简介
一、POCT项目1 POCT检测项目试剂盒（荧光法）产品项目项目品名品名缩写方法炎症类降钙素原PCT 免疫荧光层析法炎症类C反应蛋白CRP 免疫荧光层析法心肌类心肌肌钙蛋白I cTni 免疫荧光层析法心肌类D二聚体D-dimer 免疫荧光层析法心肌类N末端B型利钠钛原NT-proBNP免疫荧光层析法心肌类肌红蛋白Myo 免疫荧光层析法心肌类肌酸激酶同工酶CK-MB 免疫荧光层析法早孕类人绒毛膜促性腺激素HCG 免疫荧光层析法甲状腺类促甲状腺激素TSH 免疫荧光层析法糖尿病类微量白蛋白mAlb 免疫荧光层析法糖尿病类糖化血红蛋白HbA1c 免疫荧光层析法1.1 POCT 检测项目试剂盒（荧光法）相关背景1.1.1 cTni检测试剂盒（荧光法）相关背景cTni是一种心肌蛋白，心肌受损后，cTni会以复合物的形式与肌钙蛋白C 和肌钙蛋白T一起释放到外周血中并且具有高度心肌专一性，心肌损伤后升高很快、升高后持续时间较长、检测方法快捷方便临床诊断符合率高的优点成为诊断AMI测定的金指标。
1.1.2 D二聚体检测试剂盒（荧光法）相关背景当机体发生凝血时，凝血酶作用于纤维蛋白原，使其转变为交联纤维蛋白，同时，纤溶系统被激活，降解交联纤维蛋白形成各种FDP碎片。
由于r链的交联，便产生了包含r链相连的2个D片段，即D-二聚体。
D-二聚体测定是诊断活动性纤溶较好的指标，对血栓形成性疾病如弥漫性血管内凝血(DIC)、深静脉血栓形成、脑血管疾病、肺栓塞、肝脏疾病、恶性肿瘤、外科手术后、急性心梗等疾病均有重要的诊断价值，同时D-二聚体检测还可用于溶栓药物的治疗监测指标。
1.1.3 CRP检测试剂盒（荧光法）相关背景随着医学技术的不断发展，CRP的结构、来源、分布已逐步明确，在临床诊断和治疗技检测中得到了非常广泛的应用，特别是鉴别细菌的感染、监测病情、监控术后感染、抗生素疗效观察、预测心血管病危险等领域。
与传统的炎症鉴别指标相比，CRP具有升高时间早，升高速度快；不受病人个体差异、机体状态和治疗物的影响，因此成为检测发热项目的首选指标。
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节约综合成本
实验人员面临的最大问题是控制诊断的成本。从 “单个检验成本”方面考虑，
POCT相对较高；但在许多情况下POCT的应用不 仅可以改善实验结果而且可以降
低资源的占用病人住院的时间，采样时间，医护 人员的占用时间等
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➢.组织管理不够完善
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POCT的技术学分类
分类
方法原理
简单显色
直接观察/半定量
酶标记
免疫学反应
免疫渗滤和免疫层析
免疫学反应
生物传感器
光学和电学方法识别酶和抗体
电化学检测
电子探头对某些化学分子的敏感性
分光光度
光学吸光度
生物芯片
.
蛋白质之间相互作用
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POCT应用范围的界定
医院内(重点) 检验科、临床科室（急诊科、内分泌科 、心内科等）
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POCT的缺陷
➢检验成本偏高
POCT所采用的方法都是凝聚着物理、化学、 免疫、分子生物学、计算机科学等的尖端科技 ，同时POCT一般都是单个实验测试、单个项 目为主，这与传统的检验科（或中心实验室） 集中处理、组合处理病人样本相比，成本会高 出许多。
➢质量控制体系不完善
. 缺乏严密的对照实验，因而很难说明问题。而
P-- point（地点、时间） C-- care(保健) T-- testing（检验） PO.CT的主要标准是不需要固定的检测场所，试
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与POCT相关的名词：
bedside testing(床边检测) near-patient testing(病人身边检测) physicians office testing(医师诊所检验) home use testing(家用检验) extra-laboratory testing(检验科外的检验) decentralized testing(分散检验)等。
POCT概述
POCT的概念、基本原理及主要技术POCT是指在病人旁边分析病人标本的分析技术，或者说只要测试不在主实验室做，并且它是一个可移动的系统，就可以称为POCT。
“POCT”的组成包括：地点、时间（point)、保健、照料（care）、检验、试验（testing），point-of-care testing英文字面的意思是在受治疗者现场的保健检验。
POCT的基本原理是：把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料中，成为整合的干燥试剂块，然后将其固定于硬质型基质上，成为各种形式的诊断试剂条；或把传统分析仪器微型化，操作方法简单化，使之成为便携式和手掌式的设备；或将上述两者整合为统一的系统。
POCT主要技术包括：（1）简单显色（干化学法测定）技术将多种反应试剂干燥、固定在纸片上，加上检验标本（全血、血清、血浆、尿液等）后产生颜色反应，用肉眼观察定性或仪器检测(半定量)。
（2）多层涂膜（干化学法测定）技术多层涂膜技术是从感光胶片制作技术移植而来的。
将多种反应试剂依次涂布在片基上，制成干片，用仪器检测，可以准确定量。
（3）免疫金标记技术胶体金颗粒具有高电子密度的特性，金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的标记处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，这一反应可以通过银颗粒的沉积被放大。
该类技术主要有斑点免疫渗滤法（DIGFA）和免疫层析法（ICA）。
（4）免疫荧光技术通过检测板条上激光激发的荧光，定量检测以pg/ml为单位的检测板条上单个或多个标志物。
检测系统通常由荧光读数仪和检测板组成。
检测板多用层析法，分析物在移动的过程中形成免疫复合物，通过检测区域、质控区域的荧光信号值的不同与分析物的不同浓度成一定的比例，获得定标曲线，可检测未知样本中分析物的浓度。
（5）生物传感器技术利用离子选择电极，底物特异性电极，电导传感器等特定的生物检测器进行分析检测。
该类技术是酶化学、免疫化学、电化学与计算机技术结合的产物。
POCT介绍
简单显色
方法原理
直接观察/半定量
酶标记
免疫渗滤和免疫层析 生物传感器 电化学检测 分光光度
免疫学反应
免疫学反应 光学和电学方法识别酶和抗体 电子探头对某些化学分子的敏感性 光学吸光度
生物芯片
蛋白质之间相互作用
POCT应用范围的界定
医院内(重点)
检验科、临床科室（急诊科、内分泌科、心内科等）
POCT简介
POCT概念
POCT，即时检验（point-of-care testing），指在病人旁边进行的临床检 （床边检 测bedside testing），通常不一定是临床检验医师来进行。是在采样现场即刻进行分 析，省去标本在实验室检验时的复杂处理程序，快速得到检验结果的一类新方法。 P-- point（地点、时间） C-- care(保健) T-- testing（检验） POCT的主要标准是不需要固定的检测场所，试剂和仪器是便携式的，并且可及时操作 国外对POCT的定义： “就在病人医疗现场对任何医疗措施所需进行的检验。不在中央检验室而在病人身边进 行的检验，其结果可改进病人的保健措施”。 “由临床实验室制订，但不在检验科对病人标本进行测定，不需要固定、专用的场所。 将试剂盒和仪器手提或运送到病人身边就地进行即刻检验
decentralized testing(分散检验)等。
POCT飞速发展的历史背景
1、检验医学发展的需要 1）自动化 2）简便化
2、减少住院天数,降低医疗成本的需要
缩短检验周转期(turn around time, TAT)是影响住院天数的重要因素，及时准确的检 验结果是提高诊断治疗质量的保障，针对每一个病人具体情况的个体化诊断是临床合理 用药的前提，而POCT则完全可能是实现这些目标的有效途径。
POCT综述.doc
ＰＯＣＴ介绍一POCT的定义及其特点POCT（point of care testing）是一种利用便携式设备在短时间内（数分钟到半小时）得出检验结果的一种检验方式，是近年来兴起并获得了大力推广的诊断方法。
由于目前还没有与之完全对应的中文名词，在国内依然以其英文缩写POCT称之。
POCT在国外曾有许多相关或类似的称谓，如bedside testing(床边检测)、near-patient testing(病人身边检测)、physicians`office testing (医师诊所检验)、home use testing (家用检验) 、extra-laboratory testing (检验科外的检验) 和decentralized testing (分散检验)等等。
每一个称谓都反映了这种诊断方法的部分特点。
总的说来，POCT的特点是快速得出结果，操作简便，容易使用和小型化。
POCT承担了医院的职能但又无需传统的医院实验室设备，使检测既可在内科诊所也可在开动的汽车上完成。
二POCT的产生POCT是检验医学自动化和简单化发展的产物。
传统的检验医学实现自动化以后，虽然在消除人工操作误差，提高工作效率并降低人员费用上都有了很大的进步，但由于步骤复杂，即使进行高通量的操作也无法缩短单个检验的时间，无法做到短时间反馈（short turnaround time, STAT）．于是，POCT--即时检验的技术应运而生。
POCT实验技术使仪器小型化，操作简单化，结果报告即时化，在近年得到了大力推广。
其主要原因是它适应当今社会发展高效快节奏的工作方式，满足了人们在时间上的要求，可使患者尽早得到诊断治疗。
此外，受益于当今高新技术的发展，POCT也得到了快速的发展，小小的一台POCT仪器及配套的卡、板、条试剂，集合了各个学科的新技术，因此POCT可视为检验高新技术的缩微。
三：POCT带来的革命1. POCT改变了诊断流程。
POCT概述
POCT概述POCT概述即时检测（Point-of-care Testing，POCT）也称床边检测，指在患者身边，由非检验专业人员（临床人员或患者）利用便携式仪器快速分析患者标本并准确获取结果的分析技术，或者说测试不在主实验室而在一个可移动的系统内进行。
即时检测的优势：大型自动化仪器的补充节省分析前、后标本处理步骤缩短标本检测周期快速报告检验结果节约综合成本第一节POCT的基本原理及主要技术一、POCT的基本原理POCT技术的基本原理大致可分为四类：1、把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料中，成为整合的干燥试剂块，然后将其固定于硬质型基质上，成为各种形式的诊断试剂条；2、把传统分析仪器微型化，操作方法简单化，使之成为便携式和手掌式的设备；3、将上述两者整合为统一的系统；4、应用生物感应技术，利用生物感应器检测待测物。
二、POCT的主要技术1.简单显色（干化学法测定）技术将多种反应试剂干燥、固定在纸片上，加上检验标本（全血、血清、血浆、尿液等）后产生颜色反应，用肉眼观察定性或仪器检测(多为半定量)。
2.多层涂膜（干化学法测定）技术由感光胶片制作技术移植而来。
将多种反应试剂依次涂布在片基上，制成干片，用仪器检测，可准确定量。
3.免疫金标记技术胶体金颗粒具有高电子密度的特性，金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的标记处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，这一反应可通过银颗粒的沉积被放大。
4.免疫荧光技术通过检测板条上激光激发的荧光，定量检测以pg/ml为单位的检测板条上单个或多个标志物。
5.生物传感器技术利用离子选择电极，底物特异性电极，电导传感器等特定的生物检测器进行分析检测。
6.生物芯片技术生物芯片技术是最新发展起来的技术。
其特点是在小面积的芯片上同时测定多个项目。
7.红外和远红外分光光度技术此类技术常用于无创性检测仪器，如经皮肤检测血液中血红蛋白、胆红素、葡萄糖等成分。
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POCT设备携带方便，操作简单、检测时间短，使用成本低。
在美国，70%的临床检测均由POCT完成，以小于1%的检测费用影响了超过70%的临床决策，年产值超过百亿美元。
而在中国，这一比例不到10%，发展潜力极为巨大。
分子诊断从基因层次进行检测，检测对象为核酸，灵敏度和准确性高，可在感染初期识别病毒或者提早确认基因突变，基于PCR的分子诊断往往是医院对传染病诊断的“金标准”。
虽然目前市场份额较低，仅有5%，但分子诊断目前还处在行业技术的起步阶段，未来将有巨大的发展空间。
应用分子诊断方法的POCT凭借其灵敏度和准确度高、携带方便、操作简单、检测时间少、对环境无要求及成本低的优点，极有可能会成为未来体外诊断行业发展的主流。
然而POCT分子诊断系统技术门槛非常高，基本被Danaher、Roche、Biomerieux、Abbott等几大巨头垄断，国内很多公司想尽办法去copy这些产品都没有成功。
2013年生物梅里埃以4.5亿美元收购Filmarray，丹纳赫2016年更以40亿美元的天价收购Cepheid，而国内POCT的龙头企业万孚生物采用银行贷款的方式以1.25亿元人民币投资了POCT分子诊断公司Atlas Genetics，充分显示了POCT分子诊断平台技术的稀缺性。
本篇主要介绍国外几个主要的分子诊断POCT产品。
1. Cephid GeneXpert 平台
该平台运用半巢式qPCR+微流控技术，组建了多机并联检测系统，满足不同通量的检测需求。
已拥有17项FDA认证及23项欧盟认证的诊断项目，如：结核分枝杆菌、MRSA、难辨梭菌、碳氢霉烯耐药肠杆菌、甲流/乙流、B族链球菌、肠病毒脑膜炎、沙眼衣原体/淋病奈瑟菌、HPV、凝血二因子及五因子、BCR-ABL等，满足患者从常规传染病到癌症基因检测的各个领域。
包括取样、加样、检测三个步骤，手工操作时间不超过1分钟，但检测时间根据检测项目不同最少需要20min，最高则需要120分钟。
设备价格在5k-17k美元，17-35美元/test。
Cepheid的GeneXpert在欧美和中国已经建立起比较强的竞争优势，并且背靠丹纳赫这棵大树，不容小视。
2. Roche Cobas Liat平台
该平台将qPCR和气压式微流控技术相融合，采用非传统的微流控芯片结构，通过温控进行PCR扩增，全自动触摸屏导引操作。
检测项目主要有甲流/乙流，甲流/乙流和呼吸道合胞病毒，A组链球菌。
需要加样、扫描和开始3步操作，20分钟出结果。
设备价格大约20k 美元，约30美元/test。
该平台原本由IQuum 研发，2014年4月，IQuum 被罗氏以4.5亿美元收购。
3. BioFire FilmArray平台
该平台运用的是巢式多重PCR+微流控的技术，并使用试剂冻干粉预存储技术，使得操作极为简便。
可对同一个样品一次进行最多24种靶标的检测，检测项目主要有呼吸道感染、胃肠道感染、血液感染和细菌性脑膜炎感染，包括放置测试卡，加裂解液，加样和开始运行四步操作，检测时间为45min-60min。
BioFire在2013年9月被生物梅里埃宣布以4.5亿美元收购。
2016年，FilmArray销售额达到2.6亿美元，全球装机量4000台。
4. Alere i检测平台
该平台基于切口酶扩增反应技术（NEAR）和恒温扩增技术，利用含有PCR所需的全部冻干试剂的密封反应管，荧光标记的分子信标用于特异性检测扩增的靶标。
这种技术不需要进行耗时长且复杂的热循环来进行DNA扩增，故而NEAR技术可以进行非常快速的检测，在几分钟之内便得出结果。
目前Alere I 检测平台配套的芯片主要有三种：流感A和B检测芯片（15min），呼吸道合胞病毒(RSV)检测芯片（13min），A族链球菌（Strep A）检测芯片（8min）。
设备价格约25k美元，30美元/test。
Alere™i Influenza A & B 是世界上首个CLIA 豁免的分子POCT产品。
2016年的销售额约为23.7亿美金，占整个POCT市场（不包括血糖监测）份额的20%，是POCT行业的领导者，2017年雅培宣布以53亿美元收购Alere。
5. Atlas Genetics io检测平台
该平台采用了被标记的电化学物质探针来取代常规的荧光标记探针，与微流控技术相结合，主要用于性传播疾病和医院获得性感染的检测，如衣原体引起的性传播疾病，检测时间约30min。
由于不需要光学器件，该产品比需要荧光检测的设备更轻便，成本更低，具有很大的优势。
2016年12月，万孚生物以1.25亿元人民币持有了Atlas Genetics 13.63%的股权。
其他投资方还有诺华风投基金、强生、BB、Consort等知名公司。
6. Mesabiotech Accula Syetem平台
该平台采用了类似于Alere i的恒温扩增技术，设备小巧轻便，易于携带，操作简单，而且对实验环境无要求，目前主要检测项目有甲流/乙流和RSV，处于研发阶段的有A组链球菌和HSV 1+2/VZV。
取样，加样，开始检测三步操作，30分钟出结果。
设备价格约200美元，大约20美元/test。
2018年国内超低温冰箱龙头企业海尔生物则以设立新公司的形式与Mesabiotech达成合作，意欲进军体外诊断行业，海尔生物持股75%，Mesabiotech持股25%。
7．QuantuMDX Q-POC TM平台
可以通过对病原体的DNA分析在15分钟内检测出结果，检测对象主要有HPV、结核病和STIs。
将裂解、纯化、扩增和检测四个步骤融于一体，加样10-30min即可得到结果。
该设备体型小，操作简单，使用太阳能电池作为能源，检测成本低。
设备价格在2k美元左右，约30美元/test。
QuantuMDX于2008年成立，总部位于英国。
据该公司称，目前还没有一款投入市场的技术可以在癌症检测领域与Q-Poc匹敌。
8. GenePOC revogene平台
该平台使用了离心微流控技术，集成了传染性微生物裂解，稀释，扩增和检测靶核酸序列的功能。
在总共70分钟的时间内，revogene能够同时处理8个临床样本，每个样本检测多达12个遗传目标。
2017年6月，GenePOC GBSLB检测及其revogene仪器获得FDA批准。
以上搜集几个平台都是全自动一体化的基于PCR方法的核酸检测系统，操作简单，结果可视化，实现了样品进结果出的分子诊断的全自动化。
但是综合来说，能做到高通量的一般都是基于荧光定量PCR的优化，将裂解，稀释，扩增和检测合为一体，减去了普通qPCR 人工操作繁琐的步骤，检测时间比较长。
而检测时间短的平台如Q-POC和Alere i则从PCR 技术上创新突破，结合冻干技术，将PCR所需的试剂存放于密封的检测卡中，但由于技术壁垒目前还无法做到高通量检测。
总的来说，分子诊断POCT目前应用于微生物感染尤其是病毒感染的比较多，因为病毒结构简单，易于裂解提取核酸，某些细菌如艰难梭菌、strepA 也可以达到检测要求。
但人体基因突变引起的癌症对于分子诊断POCT仍有一定的难度，需要一定的时间去突破。
由于国内分级诊疗的实施，体外诊断正趋于去复杂化的趋势，未来操作简单、携带方便、检测时间短、灵敏准确的产品会逐渐从众多体外诊断产品中脱颖而出，成为市场主力。