产单核细胞李斯特菌PPT课件
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内科学_各论_疾病：利斯特菌病_课件模板
内科学疾病部分：利斯特菌病>>>
诊断：
利斯特菌病鉴别诊断_如何诊断利斯特菌 病
应与流感、粟粒性结核、伤寒、传染 性单核细胞增多症、败血症等鉴别。脑膜 炎者与其他细菌感染引起者鉴别，与其他 宫内感染性疾病相鉴别，均依赖实验室检 查结果确诊。
内科学疾病部分：利斯特菌病>>>
并发症：
利斯特菌病并发症_利斯特菌病有哪些并 发症
内科学疾病部分：利斯特菌病>>>
症状及病史：
激征，部分病人有惊厥、易激惹及定向力 障碍，症状类似其他化脓菌所致脑膜炎， 重症可于24～48h内昏迷。少数起病慢、 病程长而有反复。约1/4患者有局灶性神 经损伤。多数患者脑脊液中白细胞数为 (0.1～10)×109/L，其中2/3为多形核， 半数葡萄糖含量<2.8mmol/L，蛋白质含量
内科学各论疾病部分 利斯特菌病
内容课件模板
内科学疾病部分：利斯特菌病>>>
别名： 李氏杆菌病,李司忒菌病,李司忒氏菌病。
内科学疾病部分：利斯特菌病>>>
身体部位： 全身。
内科学疾病部分：利斯特菌病>>>
科室： 传染科。
内科学疾病部分：利斯特菌病>>>
简介：
利斯特菌病(listeriosis)又译为李司忒 菌病，是由单核细胞增多性李斯特菌[或 译为产单核细胞性利斯特菌病(listeria monocytogenes)]引起的急性传染病。患 者多在免疫功能低下时感染发病，主要见 于新生儿、老人、孕妇及免疫缺陷病人。 利斯特菌病是李斯单胞菌所致感
此外多脏器的播散性脓肿成肉芽肿, 呼吸或循环衰竭。重症可发生后遗症，肢 体瘫痪、共济失调、失语、眼球运动麻痹、 面肌麻痹、括约肌功能紊乱等。
单核细胞增生李斯特菌检验 ppt课件
产等。它广泛存在于自然界中。肉类、蛋类、禽类、海产品、乳制品、蔬菜等都可被污染。 该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。 其易感人群主要为孕妇、老人、新生儿和免疫缺陷人群。大多数发达国家人类李斯特菌病 发生率约为每一百万人2-15例，死亡率为13-34% 加拿大由单增李斯特氏菌污染肉制品引发李斯特菌病暴发，导致十几人死亡。很多国家都 已经采取措施来控制食品中的单增李斯特氏菌，并制定了相应的标准。
按2009年国家食源性疾病检测网的工作手 册
1.定性检测 2.定量检测
检样 25 g(ml)样品+LB 增菌液225 mL，均质
1
30 ℃±1 ℃，24 h 0.1 mL+10 mL LB 增菌液
2 30 ℃±1 ℃，18 h～24 h
科玛嘉李斯特菌显色培养基 36 ℃±1 ℃，24 h～48 h
表1 单核细胞增生李斯特菌在选择性平板 上的菌落特征
选择性琼脂平板单核细胞增生李斯特菌科 玛嘉显色培养基菌落为:蓝色，周围有白色 晕圈.
PALCAM琼脂菌落:为灰绿色，小的圆形菌落 ，周围有棕黑色水解圈，有些菌落有黑色 凹陷
L.M在 Chromagar培养基生长特征
L.M在OXA培养基生长特征
协同溶血试验 (cAMP):
在血平板上平行接种金黄色葡萄球菌和马红球菌 (R.equi), 在它们中两者之间垂直接种可疑李斯特菌 , 但不要触及它们, 于30℃培养24h～48 h, 检查平板 中垂直接种点对溶血环的影响。靠近金黄色葡萄 球菌接种点的单核细胞增生李斯特菌的溶血增强, 斯氏李斯特菌（L.seeligeri）的溶血也增强, 而伊氏 李斯特菌（L.ivanovii）在马红球菌附近的溶血增 强。
PALCAM琼脂
按2009年国家食源性疾病检测网的工作手 册
1.定性检测 2.定量检测
检样 25 g(ml)样品+LB 增菌液225 mL，均质
1
30 ℃±1 ℃，24 h 0.1 mL+10 mL LB 增菌液
2 30 ℃±1 ℃，18 h～24 h
科玛嘉李斯特菌显色培养基 36 ℃±1 ℃，24 h～48 h
表1 单核细胞增生李斯特菌在选择性平板 上的菌落特征
选择性琼脂平板单核细胞增生李斯特菌科 玛嘉显色培养基菌落为:蓝色，周围有白色 晕圈.
PALCAM琼脂菌落:为灰绿色，小的圆形菌落 ，周围有棕黑色水解圈，有些菌落有黑色 凹陷
L.M在 Chromagar培养基生长特征
L.M在OXA培养基生长特征
协同溶血试验 (cAMP):
在血平板上平行接种金黄色葡萄球菌和马红球菌 (R.equi), 在它们中两者之间垂直接种可疑李斯特菌 , 但不要触及它们, 于30℃培养24h～48 h, 检查平板 中垂直接种点对溶血环的影响。靠近金黄色葡萄 球菌接种点的单核细胞增生李斯特菌的溶血增强, 斯氏李斯特菌（L.seeligeri）的溶血也增强, 而伊氏 李斯特菌（L.ivanovii）在马红球菌附近的溶血增 强。
PALCAM琼脂
李斯特菌的检验ppt课件
2019
.
11
临床表现
• 感染LM的孕妇多表现有宫内感染并可发 生早产、流产、死胎，预后险恶。产下 的婴儿常在24~72h内死亡。
• 有时可侵犯上呼吸道而呈现咽峡炎的症 状，常伴有局部淋巴腺炎。
• 可引起人的心内膜炎，并可感染皮肤、 眼睛、泌尿道而引起皮肤损伤、结膜炎、 尿道炎等症状。
2019
.
12
18
李斯特菌鉴定
• 除个别菌外，触酶阳性，氧化酶阳 性，水解七叶苷，不水解尿素、明 胶和，其不它产种生类糖H2产S、酸吲。哚。发酵葡萄糖
• 属的鉴定：革兰染色，湿标本中的 翻转运动试验，触酶阳性，发酵D葡萄糖产酸，水解七叶苷，VP阳性， 甲基红阳性。
2019
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19
李斯特菌鉴定
• 种的鉴定：窄的β溶血环，CAMP表 现和金黄色葡萄球菌有协同溶血作 用，不发酵木糖，微量鉴定系统 API-Listeria（法国生物梅里埃）和 Micro-IDListeria（OrganonTeknika）， 菌落DNA探针杂交。
• 血清型分型确认。
2019
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20
致病力检测
• 动物试验可用于分离的李斯特菌的潜在 毒力，如小鼠腹膜内接种、兔眼结膜接 种（Anton）试验、鸡胚绒毛膜尿囊接种。 但并非是常规的，因为大多数刚分离出 的单核细胞增生性李斯特菌株都有毒力。
• 已经建立了一种敏感的免疫抑制小鼠模 型，少量的有毒力菌即可导致小鼠在3d 内死亡。
• 脑脊液中及组织中单核细胞增生性李斯特菌的DNA 能以PCR方法检测。应该在专门的实验室中操作， 方法的敏感性、特异性高，当抗生素的使用影响细 菌的分离时尤其有用。
2019
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41
LM的实验室检测方法
单核细胞增生李斯特菌检验 ppt课件
在李斯特氏菌属的六个种中，只有两种致病菌：单核增 生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌可以引起老鼠和其他动物 发病。但是，其中通常只有单核增生李斯特氏菌和人类的 李斯特氏菌症（listeriosis）相关。因此，李斯特氏菌中最 有检测意义的是单核增生李斯特氏菌。
单增李斯特氏菌能引起人、畜的李斯特氏菌病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和流
一方面血清是进口的，无国产的；另一 方面只存在“O”抗原因子血清，并且各 型之间含有多种共同的抗原因子，因此 其血清学上鉴别意义不大。
2.商业生化鉴定系统的应用 原国标中未涉及，FDA、AOAC标准使用API 10300、Vitek GNI（AOAC 989.13），这些方法都比较成熟，稳定性较好，已 被许多国家和组织的标准采用。
按2009年国家食源性疾病检测网的工作手 册
1.定性检测 2.定量检测
检样 25 g(ml)样品+LB 增菌液225 mL，均质
1
30 ℃±1 ℃，24 h 0.1 mL+10 mL LB 增菌液
2 30 ℃±1 ℃，18 h～24 h
科玛嘉李斯特菌显色培养基 36 ℃±1 ℃，24 h～48 h
将7羊血琼脂平板底面划分为2025个小格从tsaye上挑取菌落刺种到血平板上每格刺种一个菌落并刺种阳性对照菌单增李斯特菌和绵羊李斯特菌和阴性对照菌英诺克李斯于35培养24h48h穿刺时尽量接近底部但不要触到底面同时避免琼脂破裂于明亮处观察洁净的血琼脂平板单增李斯特菌和斯氏李斯特菌在刺种点周围产生狭小的透明溶血环无害李斯特菌无溶血环伊氏利斯特菌产生大的透明溶血环
PALCAM琼脂
接种木糖、鼠李糖，36 ℃±1 ℃，24 h；同时于TSA-YE平板划线纯化，30 ℃±1 ℃，24 h～48 h
单增李斯特氏菌能引起人、畜的李斯特氏菌病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和流
一方面血清是进口的，无国产的；另一 方面只存在“O”抗原因子血清，并且各 型之间含有多种共同的抗原因子，因此 其血清学上鉴别意义不大。
2.商业生化鉴定系统的应用 原国标中未涉及，FDA、AOAC标准使用API 10300、Vitek GNI（AOAC 989.13），这些方法都比较成熟，稳定性较好，已 被许多国家和组织的标准采用。
按2009年国家食源性疾病检测网的工作手 册
1.定性检测 2.定量检测
检样 25 g(ml)样品+LB 增菌液225 mL，均质
1
30 ℃±1 ℃，24 h 0.1 mL+10 mL LB 增菌液
2 30 ℃±1 ℃，18 h～24 h
科玛嘉李斯特菌显色培养基 36 ℃±1 ℃，24 h～48 h
将7羊血琼脂平板底面划分为2025个小格从tsaye上挑取菌落刺种到血平板上每格刺种一个菌落并刺种阳性对照菌单增李斯特菌和绵羊李斯特菌和阴性对照菌英诺克李斯于35培养24h48h穿刺时尽量接近底部但不要触到底面同时避免琼脂破裂于明亮处观察洁净的血琼脂平板单增李斯特菌和斯氏李斯特菌在刺种点周围产生狭小的透明溶血环无害李斯特菌无溶血环伊氏利斯特菌产生大的透明溶血环
PALCAM琼脂
接种木糖、鼠李糖，36 ℃±1 ℃，24 h；同时于TSA-YE平板划线纯化，30 ℃±1 ℃，24 h～48 h
单核细胞增多性李斯特菌共38页文档
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢！
单核细胞增多性李斯特菌
1、战鼓一响，法律无声。——英国 2、任何法律的根本；不，不成文法本 身就是 讲道理 ……法 律，也 ----即 明示道 理。— —爱·科 克
3、法律是最保险的头盔。——爱·科 克 4、一个国家如果纲纪不正，其国风一 定颓败 。—— 塞内加 5、法律不能使人人平等，但是在法律 面前人 人是平 等的。 ——波 洛克
单核细胞增多性利斯特菌脓毒症措施护理课件
绐（dài）:欺骗
先是,庭中通南北为一。迨诸父异
爨，内外多置小门，墙往往而是。东
犬西吠，客逾庖而宴，鸡栖于厅。
迨（dài）:及，等到。
6．联想推断法
(1)课内知识迁移法 试题中出现的一些实词，大多在课文中出现过，
应联系课文对应文句相应迁移。
1、城之不拔者二耳 2、不以外夷见忽
1、其后秦伐赵，拔十城（攻取） 2、府吏见叮咛（我）
地方：土地方圆 中间：其中夹杂 响应：像回声那样应和 学者：求学的人 从而：从，跟从，追随；而，连词，且。 不必：不一定
• 8、邻字推断法 • 邻字帮助法是指根据相邻的字来推断词义的方法 。 • 1、曹操之众远来疲敝《赤壁之战》
• 2、今主上幼冲，贼臣虎据，雄才奋用之秋也 • 3、 而陋者乃以斧斤考击而求之 《石》 • 4 、成益愕，急逐趁之 《促》 • 5、冀幸君之一悟，俗之一改 《屈》
乐毅畏诛而不敢归，以伐齐为名，实欲连兵，南面而 王齐。
一是指“南边”，即表示方位的“南面”，在这个 意义上古人单说“南”而不说“南面”； 二是古代以面朝南为尊位，君主临朝南面而坐，因 此把为君叫做“南面为王”、“南面称孤”等。
句中的“南面” 是指乐毅想谋反后为君，用的是 古代的意义。
1、江东虽小，地方千里《项羽本纪》 2、中间力拉崩倒之声《口技》 3、天下云集而响应（《过秦论》） 4、古之学者必有师 5、吾从而师之 6、师不必贤于弟子
6．语境推断法 一个词一般有多个义项，然而在特定的语言环境
中，它的义项只有一个，因此，我们要善于将实词放 在特定的语言环境中，根据上下文推断词义。
参军郭景祥守和州，人言其子持槊欲杀父，帝将诛 之。后曰：“景祥止一子，人言或不实，杀之恐绝其
后。”帝廉之，果枉。 调查
先是,庭中通南北为一。迨诸父异
爨，内外多置小门，墙往往而是。东
犬西吠，客逾庖而宴，鸡栖于厅。
迨（dài）:及，等到。
6．联想推断法
(1)课内知识迁移法 试题中出现的一些实词，大多在课文中出现过，
应联系课文对应文句相应迁移。
1、城之不拔者二耳 2、不以外夷见忽
1、其后秦伐赵，拔十城（攻取） 2、府吏见叮咛（我）
地方：土地方圆 中间：其中夹杂 响应：像回声那样应和 学者：求学的人 从而：从，跟从，追随；而，连词，且。 不必：不一定
• 8、邻字推断法 • 邻字帮助法是指根据相邻的字来推断词义的方法 。 • 1、曹操之众远来疲敝《赤壁之战》
• 2、今主上幼冲，贼臣虎据，雄才奋用之秋也 • 3、 而陋者乃以斧斤考击而求之 《石》 • 4 、成益愕，急逐趁之 《促》 • 5、冀幸君之一悟，俗之一改 《屈》
乐毅畏诛而不敢归，以伐齐为名，实欲连兵，南面而 王齐。
一是指“南边”，即表示方位的“南面”，在这个 意义上古人单说“南”而不说“南面”； 二是古代以面朝南为尊位，君主临朝南面而坐，因 此把为君叫做“南面为王”、“南面称孤”等。
句中的“南面” 是指乐毅想谋反后为君，用的是 古代的意义。
1、江东虽小，地方千里《项羽本纪》 2、中间力拉崩倒之声《口技》 3、天下云集而响应（《过秦论》） 4、古之学者必有师 5、吾从而师之 6、师不必贤于弟子
6．语境推断法 一个词一般有多个义项，然而在特定的语言环境
中，它的义项只有一个，因此，我们要善于将实词放 在特定的语言环境中，根据上下文推断词义。
参军郭景祥守和州，人言其子持槊欲杀父，帝将诛 之。后曰：“景祥止一子，人言或不实，杀之恐绝其
后。”帝廉之，果枉。 调查
李斯特菌感染PPT课件
特点
• 1、季节性特点：春季可发生，而发病 率在夏、秋季呈季节性增长。
• 2、分布广：存在于土壤、水域(地表 水、污水、废水)、昆虫、植物、蔬菜、 鱼、鸟、野生动物、家禽。
• 3、生存环境可塑性大：能在2-42℃下 生存(也有报道0℃能缓慢生长)能在冰 箱冷藏室内较长时间生长繁殖。
• 4．适应范围大：酸性、碱性条件下都 适应。
防控措施
• 1、李斯特菌通常存在于潮湿区域和辅助 清洗设备中，例如：地面、排水沟、洗 涤池、天花板、冷凝水、拖把、海绵、 盐水冷冻设备及剥皮机。因此，控制李 斯特氏菌的数量对减少深加工过程中的 污染是很有必要的。
• 2、控制李斯特菌这类病原菌的最好方法 是降低交叉污染。使原料和成品操作分 离，保持区域干燥，以防细菌生长和减 少微生物扩散。
它主要以食物为传染媒介是最致命的食源性病原体之一李斯特菌属中仅有单核细胞增多性李斯特菌可引起人类的脑膜炎败血症流产及新生儿感染等疾病如果免疫缺陷者发生李斯特菌感染其病情严重病死率高达33
李斯特菌感染临 床观察
基本概述
• 李斯特菌（学名：Listeria monocytogenes），又名单核球增多性 李斯特菌、李氏菌，是一种兼性厌氧 细菌，为李斯特菌症的病原体。李斯 特菌是革兰氏阳性菌，属厚壁菌门， 取名自约瑟夫·李斯特。它主要以食 物为传染媒介，是最致命的食源性病 原体之一 。
3、清洗时可选用季铵组分和过氧化酸性杀 菌剂，其中季铵组分的杀菌剂对李斯特 菌非常有效；过氧化酸性杀菌剂可以去 除单增李斯特菌的生物被膜，有效杀死 李斯特氏菌。
•
谢 谢！
SUCCESS
THANK YOU
2019/7/11
• 每日对排水沟，地面，废物容器进行清洗； 每周对墙面，冷凝水滴盘，冷却器进行清 洗；螺旋速冻机至少半年彻底清洗一次。 用于原料和成品加工的器皿和温度计都必 须进行彻底消毒（在使用前后）。经常擦 洗地面以保持清洁。如果天花板上存冷凝 水，应该及时用真空装置或消毒过的海绵 拖把加以清除，如果在准备生产时，清洗 后的地板还没有沥干，就需采用真空装置 将其吸干或用拖把擦干。
核增生李斯特氏菌检测概述ppt课件
Api® Listeria或BAM等方法中的传统 鉴定中用到MICRO-
生化反应；协同溶血
ID® 、Api®、
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致病机理
• 单增李氏菌的抗原结构与毒力无关，它的致病性
与毒力机理如下： 1、寄生物介导的细胞内增生，使它附着及进入肠
细胞与巨噬细胞； 2、抗活化的巨噬细胞，单增李氏菌有细菌性过氧
化物歧化酶，使它能抗活化巨噬细胞内的过氧物 （为杀菌的毒性游离基团）分解； 3、溶血素，即李氏杆菌素O，可以从培养物上清液 中获得，有α和β两种，为毒力因子。
血清学检验；小鼠毒力试验*
筛选、鉴定都可以使 用快速方法
USDA
UVM （30±2℃，
22±2h）
FB （35±2℃， 26-48±2h）
MOX （35±2℃，26-
48±2h）
筛选用的快速方法必
初步鉴定：纯菌菌落形态；典型运动； 须经过确认后才可使
生化鉴定：MICRO-ID® Listeria或
用
30℃ 4hr
加入萘啶酮酸、盐酸吖锭黄、放线菌酮
30℃ 24hr和48hr
划线接种OXA平板
科玛嘉李氏菌显色培养基
35℃ 24hr-48hr
TSA-YE分纯
35℃ 24hr
35℃ 24-48hr
过氧化氢酶试验、革兰氏染色、溶血试验、糖发 酵试验（木糖、鼠李糖）
35℃ 18-24hr
API Listeria
27
动 力 试 验
28
血平板
单核增生李斯特氏 菌 ATCC 19117
36h，35℃培养
29
血平板
无害李斯特氏菌 ATCC 33090
36h，35℃培养
30
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35℃培养，在24h内科发酵多种糖类，如葡萄糖、果糖、麦芽糖和 水杨素，产酸不产气，甲基红和V-P反应阳性，触酶阳性，能水解精氨 酸产氨。不还原硝酸盐，不形成吲哚，不液化明胶和凝固血浆，不分 解尿素，能水解七叶苷，有时可产生硫化氢。
菌体及鞭 毛抗原不
同
1型
2型
3型
4型
1a型
1b型
1.3.4.分若干亚型，抗原结构与毒力无关
在土壤、粪便、和干草中能长期存 活。耐盐：200g/LNaCl溶液中长期存活， 耐碱：25g/LNaOH溶液中20Min才能杀 灭，不耐酸、热，60~70℃5~20Min可 死亡。对一般消毒剂敏感，70%乙醇 5min即可杀灭。
微生物学检验
直接涂片
200g/lNaCl心 脑浸汤增菌
标本
分离培养
血平板
生物学特性
1.形态染色 2.培养特性 3.生化反应
5.抵抗力
革兰阳性短小杆菌，幼龄菌呈阳性，在陈旧培养基 中呈阴性。大小：0.5-2um×0.4-0.5um,通常成双排列， 偶尔可见双球菌或丝状。有鞭毛，不产生芽胞，一般 不形成荚膜，在含血清的葡萄糖蛋白胨水中形成黏多 糖荚膜。
本菌为兼性厌氧菌，营养要求不高，在普通培养基上能生长。最是 生长温度为30~37℃。在4℃能生长故可进行冷增菌。在血琼脂平板上 于35℃经18~24h培养，能产生狭窄的β溶血环，菌落为灰白色，直径 1~2mm。在肉汤中均匀混浊生长，表面有薄膜形成。在半固体培养基 内，可出现倒伞形生长。
临床意义
产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种强致病性的食源性 病原菌,已被WHO列为4种主要的食源性疾病之 一
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SUCCESS
THANK YOU
2019/7/22
选择性平板
挑取可疑菌落
涂片镜检
半固体
普通肉汤
普通斜面
动物实验
触酶试验
U
2019/7/22
临床意义 产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种强致病性
的食源性病原菌,已被WHO列为4种主要的食源性疾病之一。广泛分布 于自然界，水、土壤、人和动物粪便中均可存在，常伴随EB病毒引起 传染性单核细胞增多症，也可引起脑膜炎，菌血症。近年来在发达国家， 常因为污染奶制品引起食物中毒。孕妇尤其容易感染李斯特菌病，通过 胎盘和产道感染给胎儿带来严重伤害。