肺脾气虚动物模型造模方法
中医证的动物模型
中医“证”的动物模型
中医“证”的模型是在动物身上复制临床不同的症候，以不同的证型表现出来。
（一）阳虚模型
肌注醋酸氢化考的松，口服地巴唑，羟基脲或手术切除双侧肾上腺。
（二）阴虚模型
喂饲甲状腺片、皮下注射L-甲状腺素钠盐，人工高位小肠侧瘘手术。
（三）脾虚模型
喂饲含大黄、玄明粉、番泻叶的低蛋白饮食，或皮下注射利血平。
（四）寒证模型
三联疫苗腹腔注射，口服寒凉泻。
（五）热证模型
口服或注射温热药。
（六）里实证模型
强毒细菌注入狗阑尾肌层。
（七）血瘀模型
皮下注射10%高分子右旋糖酐，家兔剂量1.5g/kg；家兔静脉注射10%葡聚糖生理盐水，5ml/kg体重；大鼠皮下注射0.1肾上腺素0.2ml/次，日2次，加水刺激5分钟处置1～2日。
（八）血虚模型
于实验第1、4、7天皮下注射2%乙酰基苯肼生理盐水溶液，每100g体重第1次注1ml，第2、3次注0.5ml。
小鼠隔日1次放血，共7次，放血量每次量为总血量的20%，以后各次均为0.5ml，限食。
（九）肝郁模型
选用大鼠，以艾叶注射液2ml (含生药2.0g)，腹腔注射，每日1次，半月后改为隔日1次。
小鼠注射艾叶注射液0.6ml（含生药0.3g）腹腔内注入，每日1次。
均约注后40天左右形成模型。
脾气虚证动物模型造模方法综述
脾气虚证动物模型造模方法综述季婧２００２２０７１３７上海中医药大学摘要：脾气虚证动物模型是重要的动物模型之一，其主要的造模方法有泻下法、偏食法（偏食醋法、偏食酒加醋法、偏食苦味法）、饮食失节法（限制饮食法、肥甘过度法、饥饱失常法）、耗气破气法、现代医学造模法（利血平法、秋水仙碱法、环磷酰胺法、Ｘ射线法）、综合法（耗气破气加苦寒泻下法、耗气破气加饮食失节法、劳倦过渡加苦寒泻下法、劳倦过度加饮食失节法、劳倦过度加饮食失节加苦寒泻下法、病证结合造模法）等。
本文对这几种方法作了介绍，并讨论了现存的一些问题。
关键词：脾气虚动物模型综述中医的现代研究离不开动物实验，而辩证是中医的特点之一，因此中医证动物模型的应用已成为中医科研方法体系的一个重要组成部分，是开展中医证候及中药新药实验研究的一个重要方法。
脾气虚证模型是重要的动物模型之一，近几年来不断发展和规范，现将目前主要的脾气虚证模型的造模方法作一综述。
１．泻下法李东垣在《脾胃论》中有苦寒之药损其脾胃，泄泻致虚的论述。
根据这一理论，采用苦寒泻下法来制造脾气虚证模型。
常用药物为大黄、番泻叶等。
例如有学者给ｌ８～２０ｇ的雌雄昆明种小鼠喂饲大黄水煎剂，剂量为１．２ｇ／ｋｇ，连续用药１Ｏ天①；给２００～３００ｇ的ＳＤ大鼠灌服１ｇ／ｍＬ的生大黄煎剂，剂量为２０ｍｌ／ｋｇ，每天２次，连续用药１８天②；给２２０～２５Ｏｇ的雄性ｗｉｓｔａｒ大鼠灌服１０～２０％的番泻叶水浸剂３～４ｍｌ／ｄ，连续用药１２天③；给１８０ｇ的雄性Ｗｓｉｔａｒ大鼠喂饲药物饲料（大黄：芒硝：普通饲料＝０．８５：０．１５：９．００），连续用药２２天④等来复制脾气虚证动物模型。
２．偏食法中医理论认为，五味入五脏，偏嗜五味，损伤五脏。
据此产生了不少偏食法塑造脾虚证动物模型的方法。
比较成功的有偏食醋法、偏食酒加醋法、以及偏食苦味法。
《素问生气通天论》中有云：味过于酸，肝气以津，脾气乃绝。
因此有用食醋法制造脾气虚证动物模型。
脾虚证动物模型的研究进展及不足_刘越洋
・研究生论坛・脾虚证动物模型的研究进展及不足浙江中医学院2000级研究生(310053) 刘越洋 指导:周亨德 摘 要:分别从中医、西医、中西医结合3个不同的方面总结脾虚证动物模型的造模方法,并对其进行评价,提出脾虚证动物模型造模方法的不足及今后的发展趋势。
从1977年以来,脾虚证动物模型的研制已获得许多成功的经验,同时也存在一些不足之处。
本文将总结二十多年的研究进展,希望对今后的工作有所促进。
1 脾虚证动物模型的造模方法 1.1模拟中医传统病因建立脾虚证动物模型:此方法依据中医传统理论研制开发“纯”中医病证动物模型。
例如:最早问世的苦寒泻下法,以李时珍对大黄“其性苦寒,能伤元气耗阴血”及李杲“大忌苦寒之药损其脾胃”的论述为依据,运用大黄水浸煎剂[1]、大黄粉悬液[2]、大黄加蕃泻液或大黄加玄明粉水浸煎液[3]等苦寒泻下方药喂饲动物造成脾虚证动物模型。
与此同时根据“谷不入,半日则气虚,一日则气少”、“饥则损气”、“饮食自倍,肠胃乃伤”为依据,采用限量营养[4](饮食失节法和饥饱失节法)建立脾虚证动物模型。
随后,在苦寒泻下法基础上,进一步衍生了以《本草经疏》“脾虚忌下、降泄、破气"为根据的耗气破气法[5],避免苦寒泻下法伤阴亡阳之不足。
与上述方法类似,之后又相继出现根据《景岳全书》:“脾胃之伤于外者,惟劳倦最能伤脾”为依据的劳倦过度法[6]和根据脾喜燥恶湿为依据的伤湿法[7]建立脾虚证动物模型。
所有这些方法均为单因素造模,而复杂的病因是中医临床症候的一个特点,因此为弥补单因素造摸的不足又创建了劳倦过度加饮食失节法[8]、劳倦过度加饥饱失节法[9]、耗气破气加饥饱失节法[10]、苦寒泻下加饥饱失节法、苦寒泻下加劳卷过渡法、劳倦过度加饮食失节加苦寒泻下法[11]等复合因素造模法。
模拟中医传统病因建立动物模型是建立脾虚证动物模型最主要的方法,建立的模型病因、症状、客观指标和药物反应比较一致,其实验结果与中医理论较易吻合,较好体现中医辨证论治的理论。
脾虚模型的制作以及评价
脾虚模型的制作以及评价为了探讨动物脾虚的临床症状、病理变化以及通过对脾虚动物进行相关研究来评价脾虚模型的制作是否成功，我们进行了此次综合大实验。
脾位于腹内，其主要功能为主运化，统血，主肌肉四肢。
脾开窍于口，在液为涎。
脾的经脉络于胃，与胃相表里。
脾主运化，运指运输，化，即消化吸收，或者指转化，主要是指它有消化、吸收、运输营养物质及水湿的功能；脾主统血，是指脾有统摄血液在脉中正常运行，不致溢出脉外的功能；脾主肌肉四肢指脾可为肌肉四肢提供营养，肌肉四肢的生长发育及丰满有力，主要依赖脾所运化水谷精微的濡养。
脾气通于口，脾和则能知五谷，若脾失键运，则动物食欲减退。
若脾虚则运化功能失调，食欲不振，贫血，四肢无力，精神不振，脾虚泄泻，因此可以得知长时间的腹泻必然引起脾的虚弱。
大承气汤的组成是大黄、芒硝、枳实、厚朴，大黄是攻下药，芒硝是泻下药，枳实、厚朴都是理气药，其中芒硝药效更强为破气药，可以导致腹泻；番泻叶也是一种泻下药但效力于大承气汤不同，因此试验中决定设立两组实验组，一组小鼠灌服大承气汤，另一组小鼠灌服番泻叶，为了增加实验结果的可靠性，还要设立一个空白对照组，灌服生理盐水。
每组有五只小鼠。
作为一个综合大实验，实验过程所需时间长，而且是脾虚病理模型的制作，要导致脾虚也需要时间。
因此决定试验时间设定为五天，第一组小鼠每天灌服生理盐水1ml，第二组小鼠每天灌服大承气汤0.5ml，第三组小鼠每只灌服番泻叶浸出液1ml，每天观察小鼠的体温，精神状态，背毛的状况，食欲，饮水，粪便情况。
等到第五天灌药之后可以简单的通过一些实验来评价模型的制作是否成功。
脾虚之后会影响到小鼠的体力、抵抗力、免疫力。
考虑到现有的实验条件决定用耐疲劳试验（游泳试验）、耐缺氧试验（在密闭空间存活时间）、耐寒冷试验（环境低温存活时间）三个实验来评价脾虚模型是否成功。
一、药液的制备1、大承气汤的制备：其中大黄、芒硝、枳实、厚朴的成分比例为1；2；1：1，生药的含量要求是1g/ml，根据实验要求，以及实验过程中所需要的用量，称取大黄、枳实、厚朴各40g，芒硝80g，加入五倍量的水煎熬45分钟后将药液过滤进烧杯中，再加入适量的水在药渣中加热煮沸30分钟，将两次的药液混合在一起，过滤。
肺气虚证动物模型造模方法评析
病 证结 合造 模 的原理 为先 根据 西 医理论 复制 某种 疾
病模 型 ， 如慢性 支气 管炎 、 哮 喘等 ， 在该 疾病 模 型基 础 上 ， 再根据 中医理论复制证候模 型 ， 两 者结合起 来使西 医 的疾
病 中呈现出对应的中 医证 型。这种造模 方法 吸取 了中、 西 医在造 模方 面 的成 功经 验 ， 既与 中医理论 相联 系 ， 又与现 代医学 的某些疾病较一致 ， 有利 于中西 医结 合理论研 究 的
理上 ， 证候动物模型最符合 中医基础理论 。通 过对肺气虚证动物模 型造模 原理、 方法和评 价标准的探讨 ， 有利 于各种肺 系疾
病 的 实验 研 究。
关键词 ： 肺 气虚； 证候动物模型 ； 方 法评 价
中图分类号 ： Ｒ ２ ２ 文献标识码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ０—７ １ ５ ６ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ９－ ０ ０ ５ ６一 ｏ ３ 肺气虚证是哮病 、 喘证 、 咳嗽 、 肺 胀等 多种肺 系疾病 的 常见证型 ， 患病人 数多 ， 病 程长 ， 病 死率 高 ， 严 重影 响 患者 的生活质量 。实验动 物模 型是 医学 研究 中认 识 生命 科学 客观规律 的重要手 段 。肺 气虚 证 动物模 型属 于 中 医证候
动 物反 复 感 受 风 寒 燥 邪 ， 久 咳耗 伤 肺 气 而 形 成 本 证 型 。
《 医学心悟》 云“ 脾 虚不能 生肺 ” ， 脾为后 天之本 主运 化 ， 饮
食失节 、 情志失调 、 湿邪 困脾等致脾 虚运化无 力 ， 水谷精微
不 能输 布 ， 肺 失所养 ， 肺 气 虚 弱 。故 从 理 论 上 ， 也 可 通 过 引
动物实验中生理模型多用 作正 常对照 ， 病理模 型是在 中医
脾气虚动物模型
脾气虚证动物模型
脾主运化，为后天之本。在脾脏证
候中，多以脾气虚为病理基础，脾 气虚证模型在中医证候模型中占有 重要地位。
目前脾气虚证模型生物学特性与临
床的差异,包括功能和精气夺(能量) 两个方面，主要表现在“精气夺”。
脾气虚模型诊断标准
1.慢性形成。 2.症状体征:精神倦怠。嗜卧,懒动,拱背,扎堆,眼咪。 毛色枯黄,甚至稀少。耳尾色白。严重时出现受惊动时 无神,抓取时挣扎无力,腹面被毛憔悴。软便、便溏、泄 泻。受激排便率增高。舌淡苔少。体重增长减慢或体重 下降。造模时间较长体长可减少(参考)。体温不变或略 有降低(如体温明显降低则为脾阳虚证)。食量减少。游 泳时间缩短。 3.部分指标在负荷条件下检测。 4.自然恢复期长。
3.在耗气破气法的基础上运用降气法
厚朴:积实:生大黄按3:3:2比例,200%浓度煎剂。
煎药法:生大黄、厚朴、积实先浸泡40分钟,
然后煎沸20分钟,煎液两层纱布过滤。二煎煎
沸10分钟,过滤方法同上。合并二次煎液,于60℃ 水浴浓缩成200%浓度煎液,4℃保存。
给药方法:室温下灌胃,6ml/只/天,每天灌胃1次，造模12天。
劳倦耗气、饮食不节伤脾的理论模拟出脾气虚证动物模型
并在脾气虚的基础上，加用苦寒泻下药复制出脾阳虚模型 用大辛大热药复制出脾阴虚模型
根据气血津液学说理论模拟病机模型：
根据“劳则气耗”的病机理论，可使大鼠或小鼠游泳至 耐力极限，造成“气虚”动物模型。 根据“气为血之帅，血为气之母”
以及“气随血脱”的理论
思考：实验用什么方法可造“过思伤脾”模型？？？
（4）以整体观念为指导，完善动物模型
心
合小肠、 主血脉、
肺
脾虚证动物模型的建立及其实质的探讨
脾 气虚
.
证状
“
.
在复 制 出
四君 子汤
.
虚证
”
后
又 按照 中 医
,
虚 则 补之
,
的基
16 96
.
本 理论
士0
.
,
胃 饲 动 物 以 补 中益 气药
.
”
(19 1 / m
叮日 )
动 物 体 重 渐 增 〔由
3 克 (2 0 4 8 ) 增至 2
、
2
8 2
士 0
。
4 6 克( 8
14 ) 〕
,
上 述 虚 证 逐 步 消 失 并 恢 复正 常
,
。
。
本 实 验 应 用 体内
。
一 参 入 lH 胸 腺 喀 咤核 普 的 放 射 自显 影 方 法 就 脾 虚 证 动 物 十 二 指 肠 粘膜 上皮 细 胞 的 动 力 变
化 进 行 了 探 讨 脾 虚 动 物 模型 的 建 立 见 分 题 ( 一 ) 本实 验 共 用 小 白 鼠 5 7 只 虚 证 建 立 后和 对 照 动 物 同 时 腹 腔 注 射 叮 胸 腺 嗜嚏 核普
1
.
② 对 照 组 与 脾 虚 组 绒 毛 长度 差 异 显 著 (
士 0
.
值
9 8
。
6 ) 5
.
〔按 绒 毛 单 侧 细 胞 数 计 算 对 照 组 为 5 3 4 5
。
5 8
4 (
.
06 )
。
,
脾 虚 组
,
47
.
74 士 0
(4 2 8 ) 〕
脾 虚 动 物 十二 指 肠 绒 毛 顶 端 常 呈 多 个 细 胞 同 时 脱 落
脾虚动物模型的造模方法及其病理改变
［０ 姚石安 ． 免疫性 不孕证 治有什 么特 点［］ １］ 女性 Ｊ． 中医杂志 ，９ ３ ３ １９ ，４
（ ：３ ． ７）４ ６
［ １ 夏桂 成． １］ 辨治妇女 免疫 陛不孕症 ５ ［ ］ ０例 Ｊ ． 中国医药学报 ，９ ０５ １９ ，
（ ）４ ． ６ ：３
副作用 ， 工授精一般 医院条件有限 ， 人 因此不 能有效开
［ ］ 云亮 ， ９方 张克连 ． 子抗体 阳性 的中医辨证论冶 ［］中国基层医 抗精 Ｊ＿
药 ，０ ４ １ （ ）２ ７ ２０ ， １２ ：０ ．
之一 。 男女双方或一方存在 Ａ Ａ ， ｓｂ 均可导致不孕不育或
造 成 反 复 流产 。 目前 ， 内外 学 者 多采 用 免 疫 抑 制 剂 或 国 人 工 授 精 等 法治 疗 。 期 使 用 糖皮 质 激 素 常 出 现 一定 的 长
［５ 袁少英． 阳助孕 方为主治疗女性抗 精子抗体阳性 不孕症 ４ １］ 抗 ２例
之间 ， 妊娠率在 ２ ％～ ６ ％之间［ １ 中医的显著疗效 ， ５ ５． ７ １９ ６］ －。
已经 得 到 了广 大 患 者 的认 可 ， 了 进 一步 提 高 中 医药 对 为 免疫 性 不 孕症 的疗 效 ， 必 要 加 强 对 此 病 的研 究 ， 根 有 如
徽中因 临床杂志 ，９ ７ ３ ：４ ． １９ （ ） １０
［ ３顾美娟． １］ 中西医结合治疗免疫性 不孕 １ 例［ ］ ８ Ｊ． 中医，９ ８ １ 江苏 １９ ， ９
（ ）２ ． ５ ：６
［４ 廉玉麟 ， １１ 赵贵捷 ． 中医针灸临 床与应 用丛书 ・ 中国针 灸妇产科治 疗学 ［ ． Ｍ］ 呼和浩特 ： 内蒙 古科学技术 出版社 ，９ ７ ２ １２ ２ １９ ：０ — ０ ．
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一、肺脾气虚动物模型的复制方法：
模型的建立方法：模型组采用<实用中医证侯动物模型学》之"烟熏法肺气虚证动物模型"复制法，并复合木瓜蛋白酶雾化吸人法复制SD大鼠"肺气虚证"模型。
番泻叶冷服泻下法复制"脾气虚证"模型。
具体方法如下：将以上3组大鼠分别置于特制的lm3烟室中。
用刨花、锯末、烟叶各30-50g，另加硫磺5-10g，点燃烟熏，每日2次，每次30分钟，注意适当通风，以防大鼠窒息。
造模期6o天。
并于造模开始后第3o、32、34、36天给以上各组大鼠木瓜蛋白酶雾化吸人，具体方法如下：在大鼠清醒状态下，每次将5只大鼠放入一40×40×40cm的与超声波雾化器相连的透明雾化箱中，通过雾化管向箱中喷入用0．9％Nacl液稀释为3g的木瓜蛋白酶，每次雾化量2ml。
造模第20天开始，以浓度为lg／ml冰冷的番泻叶浸液，按lml／100g体重的剂量给大鼠灌胃，每日1次，持续3o天。
正常对照组，分室常规喂养，不做任何处理。
参考文献：李亚光，曹柏龙，贾东岩.慢性阻塞性肺疾病"肺脾气虚证"复合证型动物模型的研究.内蒙古中医药,2005年第5期：18-19.
二、肺气虚动物模型的复制方法：
1. 造模方法：气管内注入脂多糖(LPS)并烟熏方法复制肺气肿/COPD肺气虚证大鼠模型。
(此法最常用)
具体方法：于模型复制的第1和14天用10％水合氯醛腹腔麻醉后，行气管内注入LPS200ug ／200ul，庆大霉素局部抗炎，缝合皮肤并消毒。
术后第2～13、15～28天，置于1 m×1 m ×1 m的烟室中，香烟(焦油量为12 mg，烟气烟碱量为1．1 mg)烟熏，每日30 min；自由进食、饮水。
对照组：将每只大鼠于第1、14天气管内注入0．9％氯化钠注射液200 u1；于第2～13、15-28天，置于无烟熏同样环境中饲养，余法同模型组。
参考文献：
王哲，王春田，任艳玲.肺气虚模型大鼠血ET、IL一1β及TNF-α含量的变化.中国老年学杂志,2008,12月第28卷:2414-2416.
刘向国，方志斌，蔡圣荣，肺气肿肺气虚证模型大鼠肺组织中基质金属蛋白酶表达的变化. 中国中医药科技,2006,13( 5):289-291.
刘茜，刘向国,武松. 肺气肿肺气虚证模型大鼠胸腺指数、脾脏指数变化的实验研究. 甘肃中医学院学报, 2006,23(1):20-22.
李泽庚,彭波,杰根.肺气虚证模型大鼠的建立. 北京中医,2005,24(1):53-55.
2．方法：用烟熏并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法复制COPD"肺气虚证"大鼠模型。
具体方法：动物造模采用《实用中医证候动物模型学》之"烟熏法肺气虚证动物模型"复制法，并复合木瓜蛋白酶雾化吸人法，复制SD大鼠"肺气虚证"COPD模型。
每5只大鼠置于自制透明塑料箱中，用刨花、锯末、烟叶各30～50g，另加硫磺5～10g，点燃烟熏，每日2次，每次30min，注意适当通风，以防大鼠窒息。
并于造模开始后第30、32、34、36天将超声波雾化器与透明塑料箱相连，通过雾化管向箱中大鼠喷人浓度为0．3％的木瓜蛋白酶，每5只大鼠2mL。
造模期60天。
正常对照组置于正常无烟环境中饲养。
参考文献：张葵,刘良丽, 欧江琴.COPD肺气虚证模型大鼠血清TNF-αIL-8的表达和意义，
辽宁中医药大学学报.2008,10(6):200-201.
3.造模方法：SO2吸入复制肺气虚模型。
具体方法：取本院动物房健康小白鼠(体重20～30 g)为造型对象，实验期间喂养等同实验前，实验分批进行。
每批5只，置于玻璃罩内，以1％SO 2吸入30秒／每次．1次／每天，连续20天。
设空白对照组．
参考文献：陆和屏，齐幼龄.肺气虚动物模型的实验研究. 中国病理生理杂志,1996,12,(6):622-622.
4. 造模方法：采用风寒和二氧化硫吸入综合刺激复制大鼠肺气虚证模型。
具体方法：采用风寒和二氧化硫(SO2)综合刺激。
SO2刺激量为200-250ppm，每日刺激1小时，持续13天。
风寒刺激用低于太鼠生活环境温度5℃的冷风，每日刺激15分钟，持续13天，每次在SO2刺激结束后即
进行风寒刺激。
肺气虚组和喂药组大鼠进行刺激，其余组大鼠不进行。
刺激在动物实验室进行，动物实验室温度为19-21℃，相对湿度为70-76% 。
参考文献：徐锡鸿，孔繁智. 大鼠肺气虚"证"模型的建立.中医杂志,1994, 35(4):230-232.
5、单纯烟熏方法复制肺气虚大鼠模型。
具体方法：将实验小鼠随机分为造型组和对照组造型组小鼠每日上午置于静式染毒柜内，用香烟烟熏，连续2支，每支香烟约燃烟10分钟，两支香烟之间间隔5分钟，每周连续6天。
对照组动物除不用香烟烟薰，其他条件与造型组相同，实验在室温(16℃～22℃)中进行。
参考文献：彭国瑞，许志奇，曾详国."肺气虚"型慢性支气管炎动物模型的实验研究.北京实验动物科学与管理, 1994, 11( 3: 31-33.
三、脾气虚大鼠模型的复制：
1.方法：以大黄法、游泳力竭法、饥饿法三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型。
(此法最常用)
具体方法：每日上午以3ml/只灌服大黄制液，1次/d；每日下午将动物负重，于大鼠尾根部缠绕重量为大鼠体重10%的保险丝，放入水深50cm、水温20℃的水槽中游泳，以力竭为度，即大鼠鼻尖没入水面10秒，1次/d；控制饮食，每日上午8:00给食，下午8:00撤食。
正常组每天上午以3ml/只灌服生理盐水，1次/d，自由饮食，共21d。
参考文献：
胡久略，贺又舜.参苓白术散对脾气虚证大鼠血清胃泌素影响的实验研究.时珍国医国药,2010,21(12):3346-3347.
宋红,郑小伟,王颖.多因素复合建立脾气虚证大鼠模型及以方测证研究.浙江中医杂志, 2008,43(3):136-138.
郑小伟,王颖, 宋红.三种脾气虚证模型大鼠血清胃泌素及胃窦G细胞的比较研究. 中华中医药杂志,2OO6,21(6):338-340.
2. 运用小承气汤加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型
具体方法：脾气虚模型的建立与分组SD大鼠9O只，随机分为15组，每组6只。
空白组：生理盐水4 ml灌服，隔日1次，连续42 d；脾气虚证模型组：小承气汤煎液4 ml(1 ml药液含原生药0．25 g)隔日灌胃1次，喂药当日禁食，饮水不限，次日喂饲不限，连续42天，复制脾气虚模型；余为白术茯苓汤组；总多糖高、中、低剂量组；总络合物高、中、低剂
量组；白术内酯Ⅲ高、中、低剂量组，上述3组分配伍之高、中、低剂量组，均于第43天分别给予相应浓度药液4 ml，1次d／，连续7 d。
参考文献：罗云波，贾波，祝捷. 白术茯苓汤及水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠VIP受体的影响. 时珍国医国药,2010,21(5):1045-1046.
3. 方法：体质筛选、苦寒泻下加耗气破气降气法。
造模方药制作：方1：生大黄：厚朴：枳实=2：1：1，大黄后下，常规制成200％煎剂。
方2：广豆根：旋复花：槟榔=3：1：1，常规制成250％浓度煎剂。
药化饲料：用方1，常规制成浓度750g／600mL煎液。
每600mL药液加入6000g原饲料粉中，按SPF饲料规范制成药化饲料。
药化饮水：旋复花：槟榔= 1：1。
常规制成l6．7％(50g ／300mL)煎液。
造模方法：先采用游泳时间法测定体质，体质弱者用于造模(详后)。
方1和方2分别于4~C 交
替灌喂，4mid只，次，方1和方2灌喂次数按3／2比例，造模前18d 3次，d，后12d 4次，d。
每两次灌喂间隔≥3．5h。
同时以药化饲料自由喂饲，药化饮水自由饮用。
造模30d。
参考文献：周永生，樊雅莉，陈小野.脾气虚证动物模型规范化的初步研究--分免疫功能方面.实验动物科学与管理, 2003,20(2):1-5.
4.其他方法：
5种方法均造模12d。
大黄模型：生大黄，后下，常规制成200％煎剂。
室温下灌喂，每天6ml/只, d (1次)。
耗气破气模型：厚朴：枳实：生大黄=3：3：2，常规制成200％煎剂。
室温下灌喂，6ml/只，d(1
次)。
限量营养模型：按对照组食量的半量(9g／只，d，以笼为单位)饲料喂饲。
劳倦过度模型：游泳消耗体力法。
22℃水温，动物游泳至连续"冒泡"5次终止。
2次/d，两次间隔5h。
利血平模型：利血平注射液，腹侧皮下注射，0．15mg／kg, bw／d，1次／d。
参考文献：周永生，樊雅莉，陈小野.脾气虚证动物模型规范化的初步研究--分免疫功能方面.实验动物科学与管理, 2003,20(2):1-5.。