甲醛滴定法
氨基氮含量的测定—甲醛滴定法
氨基氮含量的测定—甲醛滴定法中性甲醛制备：量取200ml甲醛溶液至400ml烧杯中，用磁力搅拌器搅拌，边搅边用0.1mol/LNaOH溶液滴定至pH8.1。
取样品处理液1.0mL置于200mL烧杯中，加64mL去CO2水，开动磁力搅拌器，用0.1mol／L氢氧化钠标准溶液滴定至pH8.2；加入20.0mL中性甲醛溶液，摇匀。
再用0.1mol／L氢氧化钠标准溶液继续滴定至pH9.2，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积V l；取65ml水先用0.1mol／L氢氧化钠溶液调至pH 8.2，再加入20.0mL中性甲醛溶液，用0.1mol／L氢氧化钠标准溶液滴定至pH 9.2，作为试剂空白试验。
按照下列公式计算：氨基酸态氮(g／L) =(V1-V0)×C×1.4/V式中：V1——测定样品加入甲醛后消耗0.1mol／L Na0H溶液的体积(m1)；V o——测定空白加入甲醛后消耗Na0H标准溶液的体积(m1)；C——标定的氢氧化钠标准溶液物质的量浓度[C(NaOH)](mol／L)；V——样品体积(m1)；0.014——C(NaOH)=lmol／L氢氧化钠标准溶液lmL相当的氮克数。
方法来自：赵新淮，冯志彪。
蛋白质水解物水解度的测定。
食品科学，1994,11公式来自：徐鑫，何佳易。
小黄鱼抗氧化肽制备条件的响应面优化。
食品科学，2011,32（21）：165—170。
标准NaOH溶液的配制：称取110克氢氧化钠，溶于100毫升去二氧化碳的水中，置于300毫升锥形瓶中，不时振荡，溶解后用橡皮塞塞紧并静置数日直到碳酸钠全部沉到底部时，倾出上面清澈液备用。
取以上氢氧化钠浓溶液5.5毫升，加水至1000毫升，混匀，制成0.1mol/l氢氧化钠溶液。
标准氢氧化钠浓溶液的标定：准确称取水解度=游离氨基酸/总氮×100﹪。
氨基酸总量(氨态氮)的测定(甲醛滴定法)
氨基酸总量(氨态氮)的测定（甲醛滴定法）一、单指示剂甲醛滴定法：(一)原理：氨基酸具有酸、碱两重性质，因为氨基酸含有-COOH 基显示酸性，又含有-NH2基显示碱性。
由于这二个基的相互作用，使氨基酸成为中性的内盐。
当加入甲醛溶液时，-NH2与甲醛结合，其碱性消失，破坏内盐的存在，就可用碱来滴定-COOH基，以间接方法测定氨基酸的量，反应式可能以下面三种形式存在。
（二）试剂(1) 40%中性甲醛溶液(2) 0.1%麝香草酚酞乙醇溶液。
(3) 0.100N氢氧化钠标准溶液。
(三)操作步骤：称取一定量样品(约含20毫克左右的氨基酸)于烧杯中(如为固体加水50毫升)，加2-3滴指示剂，用0.100N NaOH溶液滴定至淡蓝色。
加入中性甲醛20毫升，摇匀，静置1分钟，此时蓝色应消失。
再用0.100N NaOH溶液滴定至淡蓝色。
记录两次滴定所消耗的碱液毫升数，用下述公式计算计算：氨基酸态氮(％)=( N V×0.014×100)/W式中：N：NaOH标准溶液当量浓渡。
V：NaOH标准溶液消耗的总量(m1)W：样品溶液相当样品重量(克)。
0.014：氮的毫克当量。
三、双指示剂甲醛滴定法：(一)原理：与单色法相同，只是在此法中使用了两种指示剂。
从分析结果看，双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法(此法操作复杂，不作介绍)相近单色滴定法稍偏低，主要因为单指示剂甲醛滴定法是以氨基酸溶液PH值作为麝香草酚酞的终点。
PH值在9.2，而双指示剂是以氨基酸溶液的PH值作为中性红的终点，PH值为7.0，从理论计算看，双色滴定法较为准确。
(二)试剂：(1) 40%中性甲醛溶液(2) 0.1%麝香草酚酞乙醇溶液。
(3) 0.100N氢氧化钠标准溶液。
(4) 0.1%中性红(50%乙醇溶液)(三)操作步骤：取相同的两份样品，分别注入100毫升三角烧瓶中，一份加入中性红指示剂2-3滴，用0.100N NaOH溶液滴定终点(由红变琥珀色)，记录用量，另一份加入麝香草酚酞3滴和中性甲醛20毫升，摇匀，以0.100N NaOH准溶液滴定至淡蓝色。
甲醛滴定法
甲醛滴定法
甲醛是一种常用的化工原料，在医药、印染、化妆品等领域都有广泛的应用。
但在生活中，它也是一种有害物质，如长时间暴露在高含量的甲醛环境下，会损害人体健康。
因此，如何准确检测室内空气中甲醛的含量，成为了一项重要的任务。
甲醛滴定法是一种常用的检测方法，它通过一次滴定，可以准确计算出样品中甲醛的含量。
具体操作步骤如下：
1. 取得一支清洁干净的容量瓶，用洗涤液和蒸馏水清洗干净，在取样前将瓶子彻底清洗干净并吹干。
2. 用取样器取出1ml的检测样品，并放入容量瓶中。
3. 加入适量的氢氧化钠溶液（NaOH），使样品碱化后，将甲醛转化成形式醛。
4. 加入适量的碘化钾溶液（KI），使样品中的甲醛与碘形成反应产生碘酸。
5. 加入适量的硫酸（H2SO4），使样品酸化后，保证反应可以继续进行。
6. 用稀碘酸溶液作为指示剂，在样品中滴定，一直滴到溶液变淡为止。
7. 记录滴定过程中消耗的稀碘酸体积，用计算公式进行计算，即可得出样品中甲醛的含量。
在进行甲醛滴定法检测过程中，需要注意以下几点：
1. 容量瓶要清洗干净，并确保没有残留物。
2. 检测样品需要抽取代表性样品，避免样品不均匀影响结果。
3. 滴定过程中需要按照规定程序进行，不可随意调整。
4. 检测前后要注意手卫生和样品防止污染。
综上所述，甲醛滴定法是一种简单易懂、实用性强的检测方法，在甲醛的检测和监测中有着广泛的应用。
在操作中需注意正确的步骤和仪器装备的准备，以免影响检测过程和结果的准确性。
甲醛的测定—中和滴定法
甲醛的测定—中和滴定法应用范围：本方法适用于甲醛溶液。
方法原理：供试品置锥形瓶中，加水、过氧化氢试液及溴代麝香草酚蓝指示液，滴加氢氧化钠滴定液至溶液显蓝色，再精密加氢氧化钠滴定液，瓶口置一玻璃小漏斗，置水浴上加热，不时振摇，放冷，用水洗涤漏斗，加溴代麝香草酚蓝指示液2滴，用盐酸滴定液滴定至溶液显黄色，并将滴定的结果用空白试验校正根据滴定液使用量，计算甲醛的含量。
试剂：1. 溴代麝香草酚蓝指示液（BTB溶液）2. 过氧化氢试液3. 盐酸滴定液（1mol/L）4. 氢氧化钠滴定液（1mol/L）5.酚酞指示液6. 甲基红-溴甲酚绿混合指示液7. 基准邻苯二甲酸氢钾8. 基准无水碳酸钠试剂制备：1. 溴代麝香草酚蓝指示液（BTB溶液）取溴代麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2mL使溶解，再加水稀释至200mL。
2. 过氧化氢试液取浓过氧化氢溶液(30%)，加水稀释成3%的溶液，即得。
3. 盐酸滴定液（1mol/L）配制：取盐酸90mL，加水适量使成1000mL，摇匀。
标定：取在270~300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约1.5g，精密称定，加水50mL使溶解，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。
每1mL盐酸滴定液（1mol/L）相当于53.00mg的无水碳酸钠。
根据本液的消耗量与无水碳酸钠的取用量，算出本液的浓度。
4. 氢氧化钠滴定液（1mol/L）配制：取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。
取澄清的氢氧化钠饱和溶液56mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。
标定：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约6g，精密称定，加新沸过的冷水50mL，振摇，使其尽量溶解，加酚酞指示液2滴，用本液滴定，在接近终点时，应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。
甲醛滴定法测定溶液中的氨基酸含量.docx
甲醛滴定法测定氨基酸含量一、目的掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点二、原理水溶液中的氨基酸为兼性离子，因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。
甲醛可与氨基酸上的一N%3结合，形成一NH —CH Q OH、一N （CH2—0H）2等羟甲基衍生物，使N+H3上的H+游离出来，这样就可以用碱滴定N+H3放出H+,测出氨基氮，从而计算氨基酸的含量。
若样品中只含有单一的已知氨基酸，则可由此法滴定的结果算出氨基酸的含量。
若样品中含有多种氨基酸（如蛋白质水解液），测不能由此法算出氨基酸的含量。
脯氨酸与甲醛作用后，生成的化合物不稳定，导致滴定后结果偏低；酪氨酸含酚基结构，导致滴定结果偏高。
三、材料、试剂与器具（一）试剂1、1%酚酞酒精溶液称Ig酚酞溶于IOOmI 95%酒精中。
2、0.5%溴麝香草酚蓝溶液取0.5溴麝香草酚蓝溶于100ml 20%乙醇溶液中。
3、氨基酸溶液4、标准0.100mol∕L氢氧化钠溶液5、中性甲醛溶液取甲醛溶液50ml ,加1%酚酞指示剂2滴，滴加0.1mol∕L NaoH 溶液，使溶液呈微粉红色，临用前中和 （二）实验器具 1、锥形瓶 3、移液管洗耳球 5、容量瓶 7、量筒 四、操作步骤1、取3只50ml 锥形瓶，按下表加入试剂(pH8.7~9.0)2、碱式滴定管 4、天平 6、试剂瓶 8玻棒与烧杯3、结果计算氨基酸溶液中含氨基酸的百分比浓度为式中：C=（V1-V2）× C0×氨基酸分子量/（10× V样）C:总酸含量（g∕100ml）V i为滴定样品消耗标准氢氧化钠的体积（ml）; V2为滴空白消耗氢氧化钠的体积（ml）；C o :标准氢氧化钠准确浓度（mol∕L）V样：样品体积（ml）4、氢氧化钠标准溶液的标定4 1 κm标准is定落液4.1.1配制⅛⅛ no g⅛S'⅛钠需于IOQmL无二敦化晞⅛水中滞匀琏人聚乙烯容界中•密闭放置至溶液清氐按表1倾定佣酬管量取上翩孰用无二輸斛水解至IQ伽L,齣.表1标定按表2的规定称取于105Γ-110t电烘箱中十煥至国重的工作基准试剂命苯二屮酸爼銅厠无二水溶絹加2⅛≡ao示椒10 XLh用吃制⅛τ⅛s¾⅛⅛溶發滴定至酒液呈粉虹色供保痔30S4同时做零白试蜃。
甲醛测定的几种测定方法
甲醛测定的几种测定方法甲醛测定的测定方法主要有分光光度法、色谱法、电化学法、化学滴定法等，此处仅就其中的一些主要方法介绍如下：1.分光光度法分光光度法测定的主要方法有乙酰丙酮法、铬变酸法、MBTH法、付品红法、ＡＨＭＴ法等几种。
1.1乙酰丙酮法乙酰丙酮法原理是利用甲醛与乙酰丙酮及氨生成黄色化合物二乙酰基二氢卢剔啶后，412nm下进行分光光度测定。
此法最大的优点是操作简便，性能稳定，误差小，不受乙醛的干扰，有色溶液可稳定存在12hr，；缺点是灵敏度较低，最低检出浓度为0.25mg/L，仅适用于较高浓度甲醛的测定；方法缺点是反应较慢，需要约60min；SO2对测定存在干扰（使用NaHSO3作为保护剂则可以消除）。
该方法非常传统，应用极为广泛。
1.2变色酸法（CTA法）变色酸法也称铬变酸法,甲醛在浓硫酸溶液中可与变色酸（1, 8-二羟基萘-3,6-二磺酸）作用形成紫色化合物，该化合物最大吸收波长在580nm处，可用分光光度法进行分析测定。
改变变色酸浓度和采用不同的采样手段，可满足不同浓度甲醛检测需要。
用0.1%变色酸-86%硫酸溶液作吸收液,检测限可达20μg/L；用1％亚硫酸钠溶液吸收甲醛，变色酸浓度改为5％，方法更稳定、更灵敏。
该法的优点是操作简便、快速灵敏；缺点是在浓硫酸介质中进行，不易控制，且醛类、烯类化合物及NO2等对测定有干扰。
1.3酚试剂法酚试剂法原理是甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物，颜色深浅与甲醛含量成正比，该化合物在660nm处摩尔吸光系数ε可达7.0×104,该法对甲醛的测定非常灵敏最低检测限为0.015mg/L。
方法的缺点是乙醛、丙醛的存在会对测定结果产生干扰；反应受温度限制，室温低于15，显色不完全，20～35时15min显色最完全，放置4小时，吸收情况稳定不变。
1.4副品红法（PRA）副品红法原理是在甲醛存在下，亚硫酸根离子与副品红生成紫色络合物，其最大吸收峰在570nm处，检测限为50μg/L。
甲醛如何检测
说到甲醛检测，很多人都表示束手无策，正所谓：明枪易躲，暗箭难防，对于看不见摸不着有刺激性的气体的它，人们如何进行检测呢？
一般的方法有两种：其一是找专业的第三方检测机构进行检测，这类公司能提供专业的仪器，给出比较可靠的报告。
其二就是自己检测，具体的方法是：1、滴定法
(1)碘量法测定甲醛含量碘量法是己知过量的碘液在碱性溶液中氧化甲醛为甲酸盐，剩余的碘经酸化使之氧化成蚁酸后用硫代硫酸钠标准溶液滴定，淀粉为指示剂，滴至蓝色消失。
根据碘的消耗量计算甲醛含量。
(2)酸碱滴定法甲醛在过量的氢氧化钠溶液中与过氧化氢反应生成甲酸钠，然后再用硫酸标准溶液反滴过量的氢氧化钠溶液。
2、亚硫酸钠法测定甲醛
一定条件下，已知过量的亚硫酸钠与甲醛发生加成反应，生成OH羟甲基磺酸盐，剩余的亚硫酸钠用碘标准溶液回滴，淀粉为指示剂，滴至蓝色，30s内不褪色，根据碘的消耗量计算甲醛含量。
3、气相色谱法
气相色谱方法检测化合物具有抗干扰能力强，操作简便，检出限低等优点，常被用来作为化台物的标准检测方法。
在检测甲醛过程中通常以2，4一二硝基苯肼为衍生剂，在酸性介质中与甲醛反应生成相应的腙，用环己烷或正己烷进行萃取，EcD检测器测定生成的腙，从而间接测定游离的甲醛。
检测机构，这里给大家推荐--河南德和检测技术有限公司，这是一家从事第三方检测的专业机构，公司取得了河南省质量技术监督局颁发的CMA《检验检测机构资质认定证书》，证书编号为：181603100359。
同时公司还具备室内空气（甲醛、苯、TVOC等）、洁净厂房、医院手术室、ICU病房等共计63项指标的检验检测资质和能力。
实验四 甲醛滴定
将3只100ml锥形瓶标以０、1、2号。 1、2号瓶内加甘氨酸（约1%）2.0ml及水5.0ml； ０号瓶内加水7.0ml。 再向3只锥形瓶中各加中性甲醛溶液 5.0ml、0.5% 酚酞乙醇溶液4滴． 然后用标准0.100mol/lNaOH滴定至微红色。 （pH=8.7~9.0）。
三、数据记录及处理：
+
CH 2 Gly
+
CH 2 Gly
+ -
-
用甲醛处理氨基酸，甲醛与氨基结Байду номын сангаас，形成羟 甲基衍生物，不仅相对增强了NH3＋的酸性解离， 而且降低了氨基的碱性。 NH3＋上的H＋游离出来，就可用碱来滴定，测 出氨基氮，从而计算氨基酸的含量。
当溶液中存在1mol/l甲醛时，滴定终点由pH12左右，降至pH9附近，即酚酞指示
五、注意事项
利用甲醛滴淀法可以用来测定蛋白质的水解程度。 随着蛋白质水解度的增加，滴定值也增加，当蛋白质 水解完成后，滴定值不再增加。 六、实验报告
根据滴定结果，总结分析此法在实际应用中的优缺 点。 七、思考题 为什么氢氧化钠溶液滴定氨基酸的—NH3+基上的H+， 不能用一般的酸碱指示剂？
实验九 甲醛滴定法
COO
H
一、原理：
H 3N
+
C R
α
水溶液中的氨基酸为两性离子，不能直接用酸、碱滴定。因 为氨基酸的酸、碱滴定的终点pH值或过高（12-13）或过低 （1-2），没有合适的指示剂可被选用。
COOH H 3N
+ H K1
COO H 3N
K2
H
+
COO H 2N Gly CH 2
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甲醛滴定法测定氨基氮
一.目的
初步掌握甲醛滴定法测定氨基氮含量的原理和操作要点。
二.原理
氨基酸是两性电解质，在水溶液中有如下平衡：
－NH3是弱酸，完全解离时PH为11－12或更高，若用碱滴定－NH3所释放的H＋来测定氨基酸，一般指示剂变色域小于10，很难准确指示滴定终点。
常温下，甲醛能迅速与氨基酸的氨基结合，生成羟甲基化合物，使上述平衡右移，促使－NH3释放H＋，使溶液的酸度增加，滴定中和终点移至酚酞的变色域内（PH9.0左右）。
因此可用酚酞作指示剂，用标准氢氧化钠溶液滴定。
如样品为一种已知的氨基酸，从甲醛滴定的结果可算出氨基氮的含量。
如样品为多种氨基酸的混合物如蛋白质水解液，则滴定结果不能作为氨基酸的定量依据。
但此法简便快速，常用来测定蛋白质的水解程度，随水解程度的增加滴定值也增加，滴定值不再增加时，表明水解作用已完全。
三.仪器、试剂、材料
1.仪器
25ml锥形瓶；3ml微量滴定管；吸管；研钵。
2.试剂
(1)300ml 0.05mol/L标准甘氨酸溶液
准确称取375mg 甘氨酸，溶解后定容至100ml。
(2)500ml 0.02mol/L标准氢氧化钠溶液
(3)20ml酚酞指示剂
0.5 ％酚酞的50 ％乙醇溶液
(4)400 ml中性甲醛溶液
在50ml 36－37 ％分析纯甲醛溶液中加入1ml 0.5％酚酞乙醇水溶液，用
0.02mol/L的氢氧化钠溶液滴定到微红，贮于密闭的玻璃瓶中。
四.操作方法
1.取3个25 ml的锥形瓶，编号。
向1、2号瓶内各加入0.05mol/L标准甘氨酸溶液
2ml和水5ml，混匀。
向3号瓶内加入7 ml水。
然后向三个瓶中各加入5滴酚酞指
示剂，混匀后各加2 ml甲醛溶液再混匀，分别用0.02mol/L标准氢氧化钠溶液滴定
至溶液显微红色。
重复以上实验两次，记录每次每瓶消耗的标准氢氧化钠溶液的毫升数。
取平均值，计算甘氨酸氨基氮的回收率。
2.取未知浓度的甘氨酸溶液2ml，依上述方法进行测定，平行做几份，取平均值。
计
算每毫升甘氨酸溶液中含有氨基氮的毫克数。
五.结果处理
1.回收率计算：
甘氨酸氨基氮回收率％＝实际测得量
×100 加入理论量
公式中实际测得量为滴定1和2号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液毫升数的平均值与第3号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液毫升数之差乘以标准氢氧化钠的摩尔浓度，再乘以14.008。
2.氨基氮计算：
氨基氮（毫克/毫升）= （V未－V对）×N NaOH×14.008
2
公式中V未为滴定待测液耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。
V对为滴定对照液（3号瓶）耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。
N NaOH为标准氢氧化钠溶液的摩尔浓度。
六.注意事项
1.标准氢氧化钠溶液应在使用前标定，并在密闭瓶中保存。
不可使用隔日贮在微量滴
定管中的剩余氢氧化钠。
2.中性甲醛溶液在临用前配制，若已放置一段时间，则使用前需要重新中和。
3.本实验为定量实验，甘氨酸和氢氧化钠的浓度要严格标定，加量要准确，全部操作
要按分析化学要求进行。
4.脯氨酸与甲醛作用生成不稳定的化合物，使滴定毫升数偏低。
而酪氨酸的滴定毫升
数结果偏高。