肉中蛋白质含量的测定(甲醛滴定法)数据表格结论
食品中甲醛的测定(食品安全国家标准)
食品安全国家标准食品中甲醛的测定1.范围本标准规定了食品中甲醛的测定的第一法分光光度法；第二法液相色谱法。
本标准适用于啤酒、腐竹、鱿鱼丝、竹笋、白菜、牛奶和熟肉样品中甲醛的测定。
第一法分光光度法2.原理样品经水蒸气蒸馏，冷凝收集馏出液。
馏出液中甲醛在乙酸铵存在的前提下，与乙酰丙酮反应生成黄色的吡啶化合物，在波长413 nm下测定吸光值，与标准系列比较得出食品中甲醛的含量。
3.试剂和材料注1：除非另有说明，本方法所用试剂均为优级纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1试剂3.1.1冰乙酸（CH3COOH）：优级纯。
3.1.2乙酰丙酮（2,4-戊二酮，C5H8O2）。
3.1.3无水乙酸铵(CH3COONH4)。
3.1.4磷酸(H3PO4)。
3.2试剂配制3.2.1乙酰丙酮溶液：称取25.0 g乙酸铵溶于适量水中，移入100 mL容量瓶中，加0.4 mL乙酰丙酮和3.0 mL冰乙酸，加水定容至刻度，混匀，移至棕色试剂瓶中，0℃～4℃保存，有效期1个月。
3.2.210%的磷酸溶液（10+90）：取10 mL磷酸，用水稀释至100 mL，混匀，室温保存。
3.2.3淀粉溶液（0.02 g/mL）：称取1 g淀粉，加少许水，调成糊状，倒入50 mL沸水中调匀，煮沸，临用现配。
3.2.4碘溶液（0.05 mol/L）：见GB/T 5009.1-2003的第B.13。
3.2.5硫代硫酸钠标准溶液（0.1 mol/L）：见GB/T 5009.1-2003的第B.15。
3.3标准品甲醛溶液标准物质（CH2O）：1000 mg/L，安瓿瓶封装，冷藏保存，使用前恢复至室温，摇匀，备用。
3.4标准溶液配制3.4.1甲醛标准储备液（0.01 mg/L）：取甲醛溶液标准物质（3.3）1.0 mL于100 mL容量瓶中，加水定容至刻度（首次配置可直接使用）。
3.4.2甲醛溶液的标定：取甲醛储备液吸取10.0 mL放入碘量瓶中，加入0.1 mol/L碘溶液50 mL和1 mol/L 氢氧化钠溶液20 mL，摇匀，放置15 min。
肉与肉制品中蛋白质含量的测定Word版
第一部分 肉与肉制品化学指标测定实验实验三 肉与肉制品中蛋白质含量的测定（凯氏定氮法）一、原理在凯氏定氮过程中，样品中的蛋白质和其他有机成分在催化剂存在下，被硫酸消化，总有机氮转化成硫酸铵，然后碱化蒸馏，中和消化液使氨游离，并将氨蒸馏至硼酸溶液中形成硼酸铵，用标准酸溶液滴定，测出样品转化后的氮含量。
由于非蛋白组分中也含有氮，所以此方法的分析结果为样品中的粗蛋白含量。
二、试剂所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制1．硫酸铜，消化过程中加入硫酸铜是为了增加反应速度，硫酸铜可以起催化剂的作用。
2．硫酸钾，在消化过程中添加硫酸钾，它可与硫酸反应生成硫酸氢钾，可提高反应温度（纯硫酸沸点330℃，添加硫酸钾后，可达400℃），加速反应过程。
3．硫酸。
4．2%硼酸溶液。
5．混合指示剂，1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。
也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基兰乙醇溶液临用时混合。
6．0.05N 硫酸标准溶液或盐酸标准溶液。
三、仪器凯氏定氮蒸馏装置，分析天平，凯氏烧瓶，酸式滴定管，容量瓶（100mL ），量桶（100mL ），20mL 吸管，托盘天平，10mL 吸管，三角烧瓶。
四、操作方法1．样品处理精密称取0.2-2.0g 固体样品或2-5g 半固体样品或吸取10-20mL 液体样品（含氮量5～80mg ），准确至0.0002g ，肉及肉制品取样量为0.8-1.2克。
移入干燥的100mL 或500mL 定氮瓶中，加入0.2g 硫酸铜，3g 硫酸钾及20mL 硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45℃角斜支于有小孔的石棉网上。
小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力（360～410℃），并保持瓶内液体微沸至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5图1 凯氏蒸馏装置 蒸汽发生器安全管 导管汽水分离器 样品入口冷凝管 冷水接收三角瓶反应管hr 。
取下放冷，小心加20mL 水，放冷后，移入100mL 容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中。
甲醛值滴定法快速测定牛奶中蛋白质含量_田志梅
甲醛值滴定法快速测定牛奶中蛋白质含量 ) )) 田志梅
) 245 )
饱和草酸钾溶液和 015 ml 酚酞指示液, 约 2 min 后
用 011 molPL 氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色。然
后加入 2 ml 中性甲醛溶液, 再用 0105 molPL 氢氧化
( 志谢 本文得到衡水市疾病预防控 制中心主 任技师张 永顺的 指导, 特此致谢! )
参考文献
[ 1] GBPT 50091 5 ) 2003, 食品卫生检验方法 理化部分( 一) ; 食品中 蛋白质的测定[ S] .
[ 2] GBPT 12143. 2- 1989, 果蔬汁饮料中氨基态氮 测定方法 甲醛值 法[ S] . [ 收稿日期: 2007- 12- 24]
试验结果表明, 甲醛值法测定 4 种样品的相对 标准偏差均小于 5% , 方法的精密度良好; 甲醛值法 测定生鲜牛乳与市售纯牛乳中蛋白质的含量经与现 行国家标准方法[ 1] 对照, 结果与国标法一致。国标 GBPT 500915 ) 2003 规定, 食品中蛋白质的测定方法 的精密度, 在重复性条件下获得的两次独立测定结 果的绝对值不得超过算术平均值的 5% , 本方法的 精密度 RSD % 2163~ 3140, 国标法的精密度 RSD% 4106~ 5141; 本法与国标法两种方法测定结果的绝 对差值与其算术平均值之比小于 5% 。 212 掺伪样品对照试验 分别在 10 ml 纯牛奶( 经 确证没有添加非蛋白质类的含氮物质) 中掺入 0105 g 尿素、011 g 氯化铵、011 g 碳酸铵, 用甲醛值法和国 标法分别测定蛋白质含量, 结果见表 2。
钠标准 滴定溶 液滴定 至粉红 色, 记录 滴定 消耗的 0105 molPL氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数。
蛋白质含量测定总结报告
（四）、蛋白质的四级结构
亚基(subunit)：寡聚蛋白中的单条独立的多肽链，具有 独立的一、二、三级结构，单独存在时一般无生物学活性。 亚基之间以非共价键联系，亚基可以相同或不同。 亚基之间以非共价键联系，包括疏水键（主要）、盐键、 氢键、范德华力 亚基可以相同或不同
蛋白质分子中的结构层次
件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。
* 蛋白质的等电点( isoelectric point, pI) 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成 正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电 荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。
2、蛋白质的紫外吸收
由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸
和色氨酸，因此在280nm波长处有特征性吸收
1.动物蛋白
2.植物蛋白
黑 大 豆
植 物 蛋 白 粉
紫外吸收：
Trp、Tyr和 Phe在280nm波
长附近具有最大
吸收峰，其中 Trp的最大吸收 最接近280nm
3、显色反应：（1）茚三酮反应
❀氨基酸与茚三酮水合物共热，生成蓝紫色化合物，其最 大吸收峰为470nm，可用于氨基酸定量分析。
(2) 与甲醛的反应
用过量的中性甲醛与氨基酸反应，可游离出氢离子， 然后用NaOH滴定，从消耗的碱量可以计算出氨基酸的 含量。此法称为间接滴定法。
肽与肽键
基本概念
* 肽键(peptide bond)是由一个氨基
酸的-羧基与另一个氨基酸的-氨
基脱水缩合而形成的化学键。
O NH2-CH-C H
甘氨酸
+
OH
O NH-CH-C H
甘氨酸
H
OH
-HOH
O O NH2-CH-C-N-CH-C H HH OH
蛋白检测报告文本格式
蛋白检测报告文本格式
尊敬的先生/女士，
根据您提供的样品，我们进行了蛋白质检测，并进行了详细的分析。
以下是我们得出的结论和相关数据：
1. 样品信息：
- 样品编号/名称：
- 采样时间/日期：
- 采样来源/地点：
2. 检测方法：
我们使用了（方法名称）来检测样品中的蛋白质含量。
该方法基于（原理）。
3. 检测结果：
根据我们的分析，蛋白质含量为（数值）。
如果有必要，我们还可以提供进一步的细分结果和数据。
4. 结果解读：
蛋白质含量在样品中的测定结果表明（进一步解读结果，可能包括样品的蛋白质含量高低、相对变化等）。
5. 结论：
根据检测结果，我们得出以下结论（可能包括结果与预期的符合程度、可能的异常情况分析等）。
请注意，以上结果仅基于我们使用的方法和分析技术得出。
如果您对结果有任何疑问或需要进一步解释，请随时与我们联系。
甲醛值滴定法快速测定牛奶中蛋白质含量
甲醛值滴定法快速测定牛奶中蛋白质含量
田志梅
【期刊名称】《中国食品卫生杂志》
【年(卷),期】2008(20)3
【摘要】目的建立牛奶中蛋白质的快速检验方法-甲醛值滴定法。
方法利用氨基酸的两性特性,加入甲醛溶液并用标准碱溶液滴定,通过测定牛奶中蛋白质的游离氨基酸含量,计算求得牛奶中蛋白质含量。
结果牛奶中蛋白质含量与游离氨基酸含量呈良好的正相关,RSD%2.63～3.40,本法与国标法两种方法测定结果的绝对差值与其算术平均值之比小于5%,测定时间由约3h缩短为3～5min。
结论本方法有效地解决了非蛋白质类的含氮物质对牛奶中蛋白质测定结果的干扰问题,适用于牛奶与奶粉中蛋白质的快速定量检验。
【总页数】2页(P244-245)
【关键词】乳;蛋白质类;甲醛;滴定分析法
【作者】田志梅
【作者单位】河北省衡水市疾病预防控制中心
【正文语种】中文
【中图分类】R15;O655.2
【相关文献】
1.牛乳中蛋白质含量的快速测定方法：福尔马林滴定法 [J], 金晔;徐明芳
2.牛奶中蛋白质含量的示波滴定法 [J], 李刚;孙为德
3.电位滴定法测定工业甲醛溶液中甲醛含量 [J], 曾燕
4.牛乳中蛋白质含量的快速测定方法—福尔马林滴定法 [J], 金晔; 徐明芳
5.酶催化水解法快速测定牛奶中蛋白质含量 [J], 陈亚锋;徐斐;曹慧;许辉
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肉中蛋白质含量的测定（甲醛滴定法）数据表格结论
肉中蛋白质含量的测定（甲醛滴定法）数据表格结论1肉中蛋白质含量的测定（甲醛滴定法）1.1 原理氨基酸本身有碱性的氨基（—NH2），又有酸性的羧基（—COOH），他们相互作用成中性内盐，加入甲醛溶液时，—NH2与甲醛结合，碱性消失，再用强碱标准溶液来滴定—COOH，并用间接地方法测定氨基酸的总量。
1.2试剂①40%中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示剂，用氢氧化钠将40%甲醛中和至绿色。
②0.1%百里酚酞乙醇溶液，③0.1%中性红50%乙醇溶液，④0.1mol/L 氢氧化钠标准溶液。
1.3实验步骤1.3.1样品消化准确称取肉0.8-1.2克，精确至0.0002g。
切成小块状移入干燥的250mL锥形瓶，加入0.2g硫酸铜，3g硫酸钾及25mL浓硫酸，稍摇匀后小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力（360～410℃），并保持瓶内液体微沸至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热30min。
取下冷却，移入100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。
1.3.2标准溶液的配制与标定0.1mol/L HCL 配制与标定：称取Na2CO30.3g左右，加10mL 水，用HCL滴定至颜色由黄色变为橙黄色，平行做3次0.2mol/LNaOH配制与标定：称取邻苯二甲酸氢钾0.25g左右，加10mL水，用NaOH滴定至微，红色平行做3次1.3.3滴定移取20mL样品消化液于250mL锥形瓶中，加入3滴中性红指示剂，用0.2mol/L NaOH标准溶液滴定由无色变为浅红色为终点，加入5mL甲醛，放置2min，加入3滴百里酚酞指示剂，再用NaOH滴定由无色变为浅红色。
分别记录两次消耗的NaOH标准溶液的体积。
1.4结果计算214100%(%)V c m氨基酸态氮含量==%?蛋白质含量总氮量（）F C ——NaOH 标准溶液的浓度，mol/L ：V 1——用中性红作指示剂滴定所耗NaOH 标准溶液体积，mL ：V 2 ——用酚酞作指示剂滴定所耗NaOH 标准溶液体积，mL ： m ——测定用样品永夜相当于样品的质量，g ； 0.014——1/2 N 2的毫摩尔质量，g/mmol F ——氮换算为蛋白质的系数1.5数据记录及计算称取肉的质量m=2.0001321003.46100.2046141420100%(%)100% 2.478%2.0001V c m-==氨基酸态氮含量==%??蛋白质含量总氮量（）F=2.478% 6.25=15.49%。
食物中蛋白质含量的测定
一、实验摘要：蛋白质是含一定量氮的有机化合物。
其测定方法也有很多种。
不同的方法都有其优点和缺点，以及它们的适用范围不同。
紫外吸收法（方便快捷，0.2-2mg/ml）凯氏定氮法（粗蛋白测定，0.2 – 2.0mg /ml)双缩脲法（1-10mg /ml)福林酚法（0.005-0.10mg /ml)G250 （0.025-0.20mg /ml) （考马氏亮蓝法）BCA法（0.010-1.2mg/ml；0.0005-0.001mg/ml）此次实验采用牛奶样品在凯氏烧瓶中经浓硫酸和催化剂消化后，使蛋白质分解，产成的氨与硫酸结合生成硫酸铵，再在强碱条件下蒸馏出氨，并用硼酸吸收，以标准盐酸滴定，根据标准酸消耗的量，乘以一定系数，即可计算样品中蛋白质的含量。
此次实验中使用的是乳制品，系数F=6.38.这种测定方法即为凯氏定氮法。
因为食品中除蛋白质外，还含有其他含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白质。
此次实验后，我们组的最终得率为2.77%。
二、实验目的：1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理2、掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理，蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等3、侧面了解测定食品中蛋白质含量的多种方法和优劣三、基本原理：利用浓硫酸及催化剂与食品试样一同加热消化，使蛋白质分解，其中C、H形成CO2、H2O逸出，而氮以氨的形式与硫酸作用，形成硫酸铵留在酸液中。
然后将消化液用NaOH碱化，蒸馏，使氨游离，用水蒸气蒸出，被硼酸吸收。
用标准盐酸溶液滴定所生成的硼酸铵，从消耗的盐酸标准液计算出总氮量，再折算为粗蛋白含量。
1.有机物中的氮在强热和CuSO4，浓H2SO4作用下，消化生成（NH4）2SO4反应式为：H2SO4==SO2↑+ H2O +[O]R-CH2-COOH+[O]==R-CO-COOH+ NH3↑R-CO-COOH+[O]==nCO2↑+m H2O2 NH3+ H2SO4==（NH4）2SO42.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3，收集于H3BO3溶液中。
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1 肉中蛋白质含量的测定（甲醛滴定法）
1.1 原理
氨基酸本身有碱性的氨基（—NH2），又有酸性的羧基（—COOH），他们相互作用成中性内盐，加入甲醛溶液时，—NH2与甲醛结合，碱性消失，再用强碱标准溶液来滴定—COOH，并用间接地方法测定氨基酸的总量。
1.2 试剂
①40 %中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示剂，用氢氧化钠将40%甲醛中和至绿色。
②0.1%百里酚酞乙醇溶液，
③0.1%中性红50%乙醇溶液，
④0.1mol/L 氢氧化钠标准溶液。
1.3 实验步骤
1.3.1样品消化
准确称取肉0.8-1.2克，精确至0.0002g。
切成小块状移入干燥的250mL锥形瓶，加入0.2g硫酸铜，3g硫酸钾及25mL浓硫酸，稍摇匀后小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力（360～410℃），并保持瓶内液体微沸至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热30min。
取下冷却，移入100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。
1.3.2标准溶液的配制与标定
0.1mol/L HCL 配制与标定：称取Na2CO3 0.3g左右，加10mL水，用HCL滴定至颜色由黄色变为橙黄色，平行做3次
0.2mol/LNaOH配制与标定：称取邻苯二甲酸氢钾0.25g左右，加10mL水，用NaOH滴定至微，红色平行做3次
1.3.3滴定
移取20mL样品消化液于250mL锥形瓶中，加入3滴中性红指示剂，用
0.2mol/L NaOH标准溶液滴定由无色变为浅红色为终点，加入5mL甲醛，放置2min，加入3滴百里酚酞指示剂，再用NaOH滴定由无色变为浅红色。
分别记录两次消耗的NaOH标准溶液的体积。
1.4 结果计算
214
100%(%)V c m
⨯⨯⨯氨基酸态氮含量=
=%⨯蛋白质含量总氮量（）F
C——NaOH 标准溶液的浓度， mol/L ：
V 1——用中性红作指示剂滴定所耗NaOH 标准溶液体积，mL ： V 2 ——用酚酞作指示剂滴定所耗NaOH 标准溶液体积，mL ： m ——测定用样品永夜相当于样品的质量，g ； 0.014——1/2 N 2的毫摩尔质量，g/mmol F——氮换算为蛋白质的系数
1.5 数据记录及计算
称取肉的质量m=2.0001
32100
3.46100.20461414
20100%(%)100% 2.478%2.0001
V c m
-⨯⨯⨯⨯
⨯⨯⨯=⨯=氨基酸态氮含量=
=%⨯⨯蛋白质含量总氮量（）F=2.478% 6.25=15.49%。