菌落计数器操作规程

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菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程

A.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST )肉汤A.1.1成分胰蛋白胨或胰酪胨20.0 g氯化钠5.0 g乳糖5.0 g磷酸氢二钾(K2HPO4)2.75 g磷酸二氢钾(KH2PO4)2.75 g月桂基硫酸钠0.1 g蒸馏水1 000 mL pH 6.8±0.2 制法将上述成分溶解于蒸馏水中,调节pH。

分装到有玻璃小倒管的试管中,每管10 mL 。

121 ℃高压灭菌15 min 。

菌落总数检验操作规程一、目的建立菌落总数检验的标准操作程序,使操作过程规范化。

二、适用范围适用于菌落总数的检验操作。

三、职责1.检验人员严格按检验操作规程进行检验。

2.QC主管监督检查执行情况。

四、程序1.范围本方法适用于食品中菌落总数(Aerobic plate count)的测定2.术语和定义菌落总数:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。

3. 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:3.1 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃。

3.2冰箱:2 ℃~5 ℃。

3.3 恒温水浴箱:46 ℃±1 ℃。

3.4天平:感量为0.1 g。

3.5均质器。

3.6振荡器。

3.7无菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸头。

3.8 无菌锥形瓶:容量250 mL、500 mL。

3.9无菌培养皿:直径90 mm。

3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。

3.11放大镜或和菌落计数器。

4.培养基和试剂4.1 平板计数琼脂培养基:见附录A 中A.1。

4.2 磷酸盐缓冲液:见附录A中A.24.3 无菌生理盐水:见附录A中A.3。

5.检验程序菌落总数的检验程序见图1。

图1 菌落总数的检验程序6.操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品:称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/min 均质 1 min~2 min,或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 1 min~2 min,制成1:10 的样品匀液。

全自动菌落计数器安全操作及保养规程

全自动菌落计数器安全操作及保养规程

全自动菌落计数器安全操作及保养规程概述全自动菌落计数器是一种广泛应用于生物科研、医疗、环保等领域的实验仪器。

使用全自动菌落计数器,能够方便、快速地对菌落进行计数和鉴定,提高实验效率和准确度。

为了更好地使用全自动菌落计数器,保障实验安全和设备使用寿命,本文提供了全自动菌落计数器安全操作和保养规程。

全自动菌落计数器安全操作规程1. 选择合适的环境充分了解实验特点,并保证在适宜的环境中操作仪器。

在使用前应保证仪器环境符合要求:干燥、清洁、无噪音和极少的振动。

2. 准备仪器在使用前,需要进行事先准备。

将仪器表面的灰尘和污垢除去,并连接电源。

操作人员应全程佩戴手套、防护眼镜等个人防护装备。

3. 操作前检查按照仪器说明书检查仪器的机械、电器和软件系统的运转是否正常。

特别需要检查的是,玻璃门、窗户和面板是否有破损或损坏。

如果发现异常情况,应及时整修或修理。

4. 样品的操作将需要检测的样品外转0.8mL的LB平板,自然晾干后,直接放在仪器样本架。

取样器轨道上放置含菌样品的架子,然后启动程序,开始自动检测和计数。

5. 操作完成后将样品架从样品架装置中取出,并断开电源。

检查操作位置是否清洁,如有样品残渣,则应及时清除干净。

全自动菌落计数器保养规程1. 日常保养除按照操作规程使用仪器外,要注意仪器表面的干净,并保持干燥。

使用后,要及时清除仪器表面的细颗粒。

2. 周期性维护在正常运行中,定期进行全自动菌落计数器的日清洁和消毒,避免积累过多的细菌或菌落。

3. 不适用时的处理当全自动菌落计数器长时间不使用,应放置在干燥、清洁、无噪音和极少的振动的环境中,不要暴露在阳光下,以免受到紫外线的侵蚀。

4. 维修保养如果全自动菌落计数器出现故障或其他异常情况,应及时找专业的技术人员进行维修保养,以免影响实验或造成二次污染。

总结全自动菌落计数器是一种实验室中常用的仪器,它能够方便、快速地对菌落进行计数和鉴定,提高实验效率和准确度。

在使用全自动菌落计数器时,需要遵守安全操作规程,并进行日常和周期性的保养维修,以保障实验安全和设备使用寿命。

菌落总数检测操作规程

菌落总数检测操作规程

微生物检测操作规范1范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法本标准适用于遂平克明面业有限公司方便面生产线微生物控制及验证计划。

本标准适用于遂平克明面业有限公司方便面产品菌落总数、大肠菌群检测。

2 规范性引用标准GB 4789.1-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验总则》。

GB/T 4789.3-2003《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》。

GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》。

4 设备和材料恒温培养箱:36℃±1℃。

恒温水浴箱:46℃±1℃。

天平:感量为0.1g。

无菌吸管:1ml(具有0.01ml刻度)、10ml(具有0.1ml刻度)。

无菌培养皿:直径90mm。

无菌锥形瓶:容量500ml;或225ml塑料稀释瓶(带内垫,可高温灭菌)。

灭菌试管:16mm×160mm;或10ml-20ml无菌管。

显微镜:10×-100×4 培养基和试剂平板计数琼脂培养基:GB 4789.2-2016 附录A.1。

无菌生理盐水:GB 4789.2-2016 附录A.3。

乳糖胆盐发酵管:按GB/T 4789.3-2003中4.9规定。

伊红美蓝琼脂平板:按GB/T 4789.3-2003中4.25规定。

乳糖发酵管:按GB/T 4789.3-2003中2.2规定。

EC肉汤:按GB/T 4789.28-2003中4.11规定。

格兰仕染色液:按GB/T 4789.3-2003中4.9规定。

5菌落总数检验程序实验前准备移液管、三角瓶、试管包扎、灭菌移液管:洗净烘干后在吸管粗头顶端约0.5cm处,塞上一小段棉花,后用4-5cm宽的报纸或牛皮纸将其以下图所示包扎好。

三角瓶包扎图例将包扎后的器具放入灭菌锅,121℃ 15min灭菌。

a.样品处理面饼样品经粉碎机粉碎后,称取25g粉碎样加入装有225ml无菌生理盐水的稀释瓶内,充分振摇,做成1:10的均匀稀释液。

菌种检定操作规程

菌种检定操作规程

菌种检定操作规程
《菌种检定操作规程》
一、目的
菌种检定操作规程旨在规范菌种检定过程,确保检定结果准确可靠,保障实验室菌种质量。

二、适用范围
本规程适用于各类实验室对菌种进行检定的操作。

三、设备和试剂
1. 必备设备:无菌工作台、培养箱、平板计数器等。

2. 必备试剂:琼脂培养基、生理盐水、甘油等。

四、菌种检定操作流程
1. 取样准备:将待检菌种进行悬浮液制备或直接取样,保证单一菌种在接种时的质量。

2. 培养基接种:将取样溶液均匀涂敷于琼脂培养基表面,将琼脂培养基放入培养箱进行培养。

3. 孵化:将接种后的琼脂培养基置于培养箱中,进行相应的温度和时间的培养。

4. 菌落计数:使用平板计数器对菌落进行计数,记录结果。

5. 结果分析:根据计数结果,对菌种进行鉴别和鉴定。

五、结果确认与报告
1. 只有经过两名以上实验人员的确认,结果方可出具。

2. 将检定结果填写在检定记录表上,并进行备份存储。

六、质量控制
1. 定期对实验室设备和试剂进行检验、校正。

2. 定期进行内部质量控制,对检定结果进行复核和比对。

七、附则
1. 对于异常情况的处理:出现异常结果时,要及时进行排查并记录处理过程。

2. 本规程未尽事宜,由实验室主管负责进行详细规定。

以上即为《菌种检定操作规程》的内容,希望各实验室严格按照此规程进行菌种检定工作,确保实验室菌种质量及检定结果的准确性。

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程一、实验室准备工作1.准备培养基:根据实验需求选择适当的培养基,如营养琼脂培养基、大肠埃希氏菌选择性培养基等。

注意培养基的成分和质量。

2.准备培养基平板:测量合适的培养基量并加入培养皿中,使用无菌技术将培养基均匀倒入培养皿,标明编号和日期。

二、样品处理1.准备样品:如食品样品,需要将样品称重并加入适当的生理盐水中,用搅拌器或均质仪进行均匀悬浮。

2.稀释样品:根据实验需要,对样品进行系列稀释。

取适量的悬浮样品,依次加入尺量瓶中的生理盐水,振摇均匀。

三、接种培养1.无菌操作:在无菌工作台内进行操作,穿戴好无菌手套,将培养皿放入工作台上,注意防止污染。

2.接种样品:使用无菌移液器,取适量的稀释样品均匀滴入培养皿上。

3.均匀涂布:使用无菌匀涂棒,将样品在培养皿上均匀涂抹,注意避免混入外来微生物。

四、培养条件1.始菌箱:将接种后的培养皿置于始菌箱中,设定适当的温度和湿度(如37℃,24小时)。

2.孵化箱:将始菌箱中的培养皿转移到恒温培养箱中适当孵育时间,保持适宜温度及湿度。

五、菌落计数1.观察菌落:取出培养好的菌落总数平板,放在均匀光源下观察菌落的形态、颜色、大小等特征,标记异常菌落。

2.计数菌落:使用计数器或显微镜对菌落进行计数,记录结果,并用公式计算菌落总数。

每个菌落总数平板至少计数两遍,计算平均值。

六、数据分析与结果判定1.数据分析:对不同样品的检测结果进行归类整理,统计菌落总数的分布情况。

2.结果判定:根据相应的标准或规定,比较样品的检测结果与标准要求,判定样品是否合格。

七、清洗和消毒1.清洗:将培养皿彻底清洗干净,清除残留的培养基和菌落。

2.消毒:将使用过的器材进行高温高压消毒或化学消毒,确保无菌环境。

以上就是菌落总数检验操作规程的简要示例,实验过程中需严格遵守无菌操作规范,并根据具体实验要求进行相应的调整。

在实验过程中,及时记录实验数据,注意安全操作。

实验完成后,对结果进行统计分析和归档保存。

菌落计数器标准操作规程

菌落计数器标准操作规程

目的:本程序《菌落计数器使用说明书》规定了菌落计数器操作程序。

范围:本程序适用于JLQ—S型菌落计数器。

职责:质量管理部、QC内容:1接通200V电源,打开照明开关,将待检菌落平板翻转,底部朝上,放在灯光透射处,调节放大镜位置至菌落看的最清楚后固定镜头,探笔插入面板右上角孔中。

2按以下步骤操作计数计算器,先按一下ON/C键,显示器上显示“0”,再按一下“1”的数字键,显示器显示“1”,再按一下“+”号键,此时显示器显示“1”,再按一下“=”号键,显示器仍显示“1”,再按一下“0”字键,此时显示器显示“0”。

这时即可用探笔在菌落平板上进行累加计数。

3探笔使用方法:探笔是由三种不同颜色的针管尼龙笔和一支金属探笔头组成,在使用探笔时,需拔下尼龙笔的笔套、笔杆、将相同于笔杆颜色的彩色小墨水瓶剪开,对准储水芯徐徐挤入,墨水不宜加得太多,将加好墨水的储水芯连同笔尖套插入有带引线及插头的金属探笔头的套管内,使尖套塑料部分暴露在金属管外28mm左右,并有插入到底的感觉。

然后插入计数器插孔中进行计数器是否正常计数的试验。

探笔一般按平常书写钢笔时的握法(但不能握在笔尖塑料部分),宜倾斜一些,不能垂直于工作面,探笔在平板上进行碰触计数器时,能感觉到探笔有轻微的摆动。

计数完毕后,应将笔尖塑料杆连同储水芯从金属探笔头上取下,装入原来的塑料笔套中,以免墨水干掉,为了区别菌落在不同培养阶段的检测记录,仪器所备的三种颜色笔,后按上述方法换装不同的颜色。

4在计数时,将探笔在平板上碰触一下,计数器即计一个数,与此同时,探笔在平板上点上一个色点,表示此菌落已被数过。

以后每碰触一次,探笔点一个色点,计数器即累加一个数,直到所有的菌落都被点上色点,显示器中显示的读数即为该平板的菌落数。

5在计完某菌落平板后,如需再计其它平板的菌落数,可继续直接累加,待总的平板都数完后除以平板数即是平均数,也可使用存储键求平均数,在数完一个平板后,按一下M±键显示器上角显示“MEM”,表示此数已被存入,再按一下“0”字键,显示器上角显示“MEM”,右边显示“0”,即可继续计数。

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程菌落总数检验操作规程一、目的建立菌落总数检验的标准操作程序,使操作过程规范化。

二、适用范围适用于菌落总数的检验操作。

三、职责1. 检验人员严格按检验操作规程进行检验。

2. QC主管监督检查执行情况。

四、程序1.范围本方法适用于食品中菌落总数(Aerobic plate count)的测定2.术语和定义菌落总数:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。

3. 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:3.1 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃。

3.2冰箱:2 ℃~5 ℃。

3.3 恒温水浴箱:46 ℃ ±1 ℃。

3.4天平:感量为0.1 g。

3.5均质器。

3.6振荡器。

3.7无菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸头。

3.8 无菌锥形瓶:容量250 mL、500 mL。

3.9无菌培养皿:直径90 mm。

3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。

3.11放大镜或和菌落计数器。

4.培养基和试剂4.1 平板计数琼脂培养基:见附录A 中A.1。

4.2 磷酸盐缓冲液:见附录A中A.24.3 无菌生理盐水:见附录A中A.3。

5.检验程序菌落总数的检验程序见图1。

图1 菌落总数的检验程序6.操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品:称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~***** r/min 均质1 min~2 min,或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min,制成1:10 的样品匀液。

6.1.2 液体样品:以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10 的样品匀液6.1.3用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL,沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用 1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100 的样品匀液。

霉菌及酵母菌计数测定方法操作规程

霉菌及酵母菌计数测定方法操作规程

食品中霉菌及酵母菌计数测定方法操作规程一、范围本规程规定了食品中霉菌和酵母菌(moulds and yeasts)的计数方法。

本规程适用于各类食品中霉菌和酵母菌的计数。

二、编写依据GB 4789. 15-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母菌计数》三、设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:3.1冰箱:21〜5(。

3.2恒温培养箱:28o C±ΓCo3.3均质器。

3.4恒温振荡器。

3.5 显微镜:10×-100×o3.6电子天平:感量0. 1g。

3.7无菌锥形瓶:容量500mL. 250mLo3.8无菌广口瓶:500mLo3.9无菌吸管:1mL(具0.01 mL刻度)、10mL(具0. 1mL刻度)。

3.10无菌平皿:直径90mmo4.11 无菌试管:10mm×75mmo5.12无菌牛皮纸袋、塑料袋。

四、培养基和试剂6.1马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基:同GB 4789. 15项下制法。

6.2孟加拉红培养基:同GB 4789. 15项下制法。

6.3氢氧化钠Imol/L: 8g配200ml蒸储水。

6.41ICL lmol/L:7. 3g 配200ml 蒸储水。

五、检验程序5.1样品的稀释5.1.1固体和半固体样品:称取25g样品至盛有225mL灭菌蒸储水的锥形瓶中,充分振摇,即为1:10稀释液。

或放入盛有225 mL无菌蒸储水的均质袋中,用拍击式均质器拍打2min,制成1:10的样品匀液。

5.1.2液体样品:以无菌吸管吸取25 mL样品至盛有225 mL无菌蒸储水的锥形(可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。

7.1.3取1 mL 1:10稀释液注入含有9 mL无菌水的试管中,另换一支1 mL无菌吸管反复吹吸,此液为1: 100稀释液。

5.1.4按5. 1.3操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液。

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2、适用范围:本方法适用于菌落计数器的使用。

3、责任人:检测员。

4、正文:
操作步骤
将电源插头插入220V电源插座内。

将探笔插入仪器上的探笔插孔内。

将电源开关拨向“开”,计数池内灯亮。

同时显示明亮的“000”表示允许进行计数。

将待检的培养皿,皿底朝上放入计数池内。

用探笔在培养皿底面面对所有的菌落逐个点数。

此时,菌落处被标上颜色,显示窗内数字自动累加。

用放大镜仔细检查,确认点数无遗漏,计数即已完毕。

显示窗内的数字即为该培养皿内的菌落数。

记录数字后取出培养皿,按复0键,显示恢复“000”。

为另一培养皿的计数做好准备。

注意事项
仪器应放置在平整牢固的试验台上使用。

点数菌落时,探笔不要过于倾斜。

轻轻点下有弹跳感时,数字即被输入。

仪器应防潮、防强烈震动、防直接日光曝晒、防酸碱侵蚀。

用后应加防尘罩。

注意防止细菌污染计数池。

仪器及探笔均不能随意拆卸,发现故障,应请有经验的专业人员检修。

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