种新的乙肝诊断血清免疫学指标-乙肝病毒大蛋白ppt演示课件
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乙型肝炎病毒PPT幻灯片课件
12
(1)表面抗原(HBsAg)
1)存在于三型颗粒中；
2)是HBV感染的主要标志；
3)可刺激产生：抗-HBs—保护性抗体 和细胞免疫应答
制备疫苗
4)分亚型
抗原表位：a, d/y, w/r;
亚型：adr(汉)、adw(少数民族)、ayr、ayw；
5)抗-HBs：有免疫力；
13
PreS1Ag、PreS2Ag
DND多聚酶等
6
(2)小球形颗粒
小球形颗粒：直径：22nm，中空颗 粒。为过剩的表面抗原，无DNA。
(3)管形颗粒
管形颗粒：由小球形颗粒聚集而成。
7
2.HBV基因结构与功能1)HBV基因结构：
不完全双链环状DNA 长链(负股)：3200核苷酸
短链(正链)：50~100% 粘性末端：5′-250个核苷
4
(1)大球形颗粒(Dane颗粒)
大球形颗粒：有感染性的完整的病毒颗粒。 直径：42nm 外层=包膜：脂质双层+HBsAg、
PreS1Ag、 PreS2Ag
主蛋白：HBsAg（226） 中蛋白：HBsAg-PreS2Ag（281） 大蛋白：HBsAg-PreS2Ag-PreS1Ag（400）
5
内层=衣壳：20面体、27nm 衣壳蛋白：HBcAg+ HBeAg 核心：不完全双链环状DNA、
1)具有吸附表位；
2)与病毒的复制有关---病毒复制指标；
3)可刺激产生：抗- PreS1
抗- PreS2：
阻断结合
见与急性肝炎恢复期的早期，
提示HBV正在或已经清除；
4)抗-PreS1：较长
抗-PreS2：急性期血清，持续时间仅2~3个月；
14
(1)表面抗原(HBsAg)
1)存在于三型颗粒中；
2)是HBV感染的主要标志；
3)可刺激产生：抗-HBs—保护性抗体 和细胞免疫应答
制备疫苗
4)分亚型
抗原表位：a, d/y, w/r;
亚型：adr(汉)、adw(少数民族)、ayr、ayw；
5)抗-HBs：有免疫力；
13
PreS1Ag、PreS2Ag
DND多聚酶等
6
(2)小球形颗粒
小球形颗粒：直径：22nm，中空颗 粒。为过剩的表面抗原，无DNA。
(3)管形颗粒
管形颗粒：由小球形颗粒聚集而成。
7
2.HBV基因结构与功能1)HBV基因结构：
不完全双链环状DNA 长链(负股)：3200核苷酸
短链(正链)：50~100% 粘性末端：5′-250个核苷
4
(1)大球形颗粒(Dane颗粒)
大球形颗粒：有感染性的完整的病毒颗粒。 直径：42nm 外层=包膜：脂质双层+HBsAg、
PreS1Ag、 PreS2Ag
主蛋白：HBsAg（226） 中蛋白：HBsAg-PreS2Ag（281） 大蛋白：HBsAg-PreS2Ag-PreS1Ag（400）
5
内层=衣壳：20面体、27nm 衣壳蛋白：HBcAg+ HBeAg 核心：不完全双链环状DNA、
1)具有吸附表位；
2)与病毒的复制有关---病毒复制指标；
3)可刺激产生：抗- PreS1
抗- PreS2：
阻断结合
见与急性肝炎恢复期的早期，
提示HBV正在或已经清除；
4)抗-PreS1：较长
抗-PreS2：急性期血清，持续时间仅2~3个月；
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乙肝病毒感染知识讲解PPT课件
乙肝病毒感染 知识讲解PPT课
件
目录 引言 什么是乙肝病毒？ 乙肝病毒感染的传播途径 乙肝病毒感染的症状与并发症 乙肝病毒感染的预防与控制 乙肝病毒感染的治疗与护理 结语
引言
引言
乙肝病毒感染知识讲解 乙肝病毒是一种常见的肝炎病 毒
引言
本课件将为您介绍乙肝病毒感染的相关 知识
什么是乙肝病 毒？
乙肝病毒感染 的症状与并发
症
乙肝病毒感染的症状与并 发症
急性感染症状：疲劳、食欲不 振、黄疸等 慢性感染症状：无明显症状或 轻度疲劳等
乙肝病毒感染的症状与并 发症
并发症：肝硬化、肝癌等
乙肝病毒感染 的预防与控制
乙肝病毒感染的预防与控 制
疫苗接种：乙肝疫苗是预防乙 肝的有效手段 避免血液传播：拒绝共用针具 、安全注射等
乙肝病毒感染的预防与控 制
安全性行为：正确使用避孕措施、减少 性伴数等 垂直传播防控：孕前筛查、新生儿疫苗 接种等
乙肝病毒感染 的治疗与护理
乙肝病毒感染的治疗与保持良好生活习惯 、定期复查等
乙肝病毒感染的治疗与护 理
支持性治疗：饮食调理、避免酒精等
什么是乙肝病毒？
乙肝病毒是一种DNA病毒 乙肝病毒主要通过血液和性接 触传播
什么是乙肝病毒？
乙肝病毒感染可导致急性或慢性肝炎
乙肝病毒感染 的传播途径
乙肝病毒感染的传播途径
血液传播：输血、注射毒品、 医疗器械污染等 性传播：不安全性行为、性伴 感染等
乙肝病毒感染的传播途径
垂直传播：感染妇女分娩时传给新生儿 其他途径：共用针具、美容美发器具等
结语
结语
乙肝病毒感染是一种严重的疾 病 通过预防、控制和治疗，我们 可以减少乙肝病毒感染的风险
件
目录 引言 什么是乙肝病毒？ 乙肝病毒感染的传播途径 乙肝病毒感染的症状与并发症 乙肝病毒感染的预防与控制 乙肝病毒感染的治疗与护理 结语
引言
引言
乙肝病毒感染知识讲解 乙肝病毒是一种常见的肝炎病 毒
引言
本课件将为您介绍乙肝病毒感染的相关 知识
什么是乙肝病 毒？
乙肝病毒感染 的症状与并发
症
乙肝病毒感染的症状与并 发症
急性感染症状：疲劳、食欲不 振、黄疸等 慢性感染症状：无明显症状或 轻度疲劳等
乙肝病毒感染的症状与并 发症
并发症：肝硬化、肝癌等
乙肝病毒感染 的预防与控制
乙肝病毒感染的预防与控 制
疫苗接种：乙肝疫苗是预防乙 肝的有效手段 避免血液传播：拒绝共用针具 、安全注射等
乙肝病毒感染的预防与控 制
安全性行为：正确使用避孕措施、减少 性伴数等 垂直传播防控：孕前筛查、新生儿疫苗 接种等
乙肝病毒感染 的治疗与护理
乙肝病毒感染的治疗与保持良好生活习惯 、定期复查等
乙肝病毒感染的治疗与护 理
支持性治疗：饮食调理、避免酒精等
什么是乙肝病毒？
乙肝病毒是一种DNA病毒 乙肝病毒主要通过血液和性接 触传播
什么是乙肝病毒？
乙肝病毒感染可导致急性或慢性肝炎
乙肝病毒感染 的传播途径
乙肝病毒感染的传播途径
血液传播：输血、注射毒品、 医疗器械污染等 性传播：不安全性行为、性伴 感染等
乙肝病毒感染的传播途径
垂直传播：感染妇女分娩时传给新生儿 其他途径：共用针具、美容美发器具等
结语
结语
乙肝病毒感染是一种严重的疾 病 通过预防、控制和治疗，我们 可以减少乙肝病毒感染的风险
最新乙型肝炎血清学和分子生物学检测技术PPT课件
•表面抗原抗体系统 (HBsAg，抗-HBs) •e 抗原抗体系统 (HBeAg，抗-HBe) •核心抗原抗体系统 (HBcAg，抗-HBc)
HBsAg 最早出现的血清学标志之一
是HBV感染的基本标志 HBsAg阳性见于
乙肝的潜伏期、急性期 慢性乙肝 病毒携带 与HBV感染有关的肝硬化和原发性肝细胞癌
抗-HBc IgM 通常在出现症状时即可检出，一般持续约6个月，提 示HBV 复制，是急性感染的重要指标，也是慢性活动性肝炎的重 要标志
抗-HBc IgG 在抗-HBc IgM下降及消失后出现，可伴随感染者终生 存在
临床机构一般常规检测抗-HBc ，抗但-HB检c测Ig抗M-H≠B抗c-HIBgcM，相对较少（
▪ 新增检测指标
➢ Pre–S1抗原等
19
3. HBV分子生物学检测
➢HBV基因型和基因变异研究：
必要性 主要方法
➢HBV-DNA病毒载量测定：
PCR结合荧光探针技术 病毒复制水平最可靠，最直接的证据，与传
染性和疾病进展密切相关； 主要用于HBV感染的判断，治疗适应症的选
择及抗病毒疗效的判断。
F
G (甘) R (精)
99
137--S-S- 149
164
107 S-S 138 139 S-S 147 D
E
145 144 G R
D E
Loop 2 of “a”determinant
Vaccine escape mutant
PCR扩增相应区段 PCR 产物直接测序 生物信息学分析与数据信息挖掘
22
121 S-S 124 Loop 1 of “a”determinant
F (苯丙) Y(酪)
E (谷) D (天冬)
HBsAg 最早出现的血清学标志之一
是HBV感染的基本标志 HBsAg阳性见于
乙肝的潜伏期、急性期 慢性乙肝 病毒携带 与HBV感染有关的肝硬化和原发性肝细胞癌
抗-HBc IgM 通常在出现症状时即可检出，一般持续约6个月，提 示HBV 复制，是急性感染的重要指标，也是慢性活动性肝炎的重 要标志
抗-HBc IgG 在抗-HBc IgM下降及消失后出现，可伴随感染者终生 存在
临床机构一般常规检测抗-HBc ，抗但-HB检c测Ig抗M-H≠B抗c-HIBgcM，相对较少（
▪ 新增检测指标
➢ Pre–S1抗原等
19
3. HBV分子生物学检测
➢HBV基因型和基因变异研究：
必要性 主要方法
➢HBV-DNA病毒载量测定：
PCR结合荧光探针技术 病毒复制水平最可靠，最直接的证据，与传
染性和疾病进展密切相关； 主要用于HBV感染的判断，治疗适应症的选
择及抗病毒疗效的判断。
F
G (甘) R (精)
99
137--S-S- 149
164
107 S-S 138 139 S-S 147 D
E
145 144 G R
D E
Loop 2 of “a”determinant
Vaccine escape mutant
PCR扩增相应区段 PCR 产物直接测序 生物信息学分析与数据信息挖掘
22
121 S-S 124 Loop 1 of “a”determinant
F (苯丙) Y(酪)
E (谷) D (天冬)
乙肝病毒的检测ppt课件
聚合酶链反应-限制性片段 长度多态性分析法 (PCR-
RFLP)
较测序法简便，适于大样本检测，但由于需要进行酶切，所 以操作仍较为繁琐，成本较高，并存在酶切不彻底等问题。
pre-S2单克隆抗体酶联免疫 简单、快速，已商品化，适于大样本检测，但检测费用较高
测定 (mAbs EIA法)
并不能有效鉴别有些混合型感染和HBsAg低表达及某些表位
6
2
乙型肝炎病毒HBV
• HBV是嗜肝脱氧核糖核酸病毒科的哺乳动 物属的一员。
• HBV阳性的血清中有三种病毒颗粒． １.大球形颗粒，完整的HBV颗粒直径为
42nm，又名Dane颗粒，分为包膜与核心的 两部分，外衣壳及包膜含有表面抗原，衣 壳内为核心结构，有核心抗原，核心抗原 下面藏有e抗原。
3
• ２.小球形颗粒，阳性血清中最多的颗粒，主 要为表面抗原，不含核酸及ＤＮＡ成分，为 不完整的ＨＢＶ．
11
①一种亚型的HBsAg及异型的抗HB（s 常见）；②血清从HBsAg 26 + + + + + 转化为抗HBs 的过程（少见）。 27 - + + + 28 - + + + + 29 - - + + 30 + - + + 31 + + + - 32 + + + + -
12
大三阳
小三 阳
HBeAg 阴性的慢乙肝患者，肝硬化年发生率8%-10%； HBeAg 阳性的慢乙肝患者，肝硬化年发生率2%-5% 对HBeAg 阴性患者应该开展更积极的治疗
20
• 2、试剂的影响 2.1乙肝两对半试剂厂家较多；不同厂家出产的试剂灵敏度与特异性 存在一定的差别，有资料显示，不同厂家试剂的特异性和敏感性分别 为89.4%—99.3%,78~89%存在较大差异。有的厂家酶标板孔间A值差 大于15%；标记酶的活性及显色液的稳定比较差。使用质劣的试剂必 然导致结果的假阳性或假阴性。因此。选择高质量的试剂是保证结果 准确的关键之一。 2.2不同方法学的检测试剂，会使两对半结果出现一些不同。例如： 在实际工作中常用ELISA检测HBsAg结果为阴性，而电化学发光检测 为阳性。除方法学的灵敏度外；还存在使用单抗或多克隆抗体试剂的 差别。单抗对变异抗原或亚型乙肝标志物检测存在差异，建议试剂厂 家对剂的制备应该考虑亚型及型浓度的问题。
乙肝的科普知识PPT课件
乙肝的社会影 响和应对措施
乙肝的社会影响和应对措 施
社会影响：乙肝对个人和社会 的健康和经济都有严重影响
应对措施：加强乙肝病毒监测 、推广疫苗接种、加大宣传力 度等
谢谢您的观赏聆听
乙肝的诊断和治疗
诊断：血清标志物检测、肝功能检查等 治疗：药物治疗、支持性治疗等
乙肝的并发症 和预后
乙肝的并发症和预后
并发症：肝硬化、肝癌等 预后：乙肝的预后取决于感染 程度和治疗效果
乙肝的重要性 和意义
乙肝的重要性和意义
全球公共卫生问题：乙肝是全球范围内 的重要公共卫生问题 健康教育的意义：加强对乙肝的科普宣 传，提高公众的乙肝防控意识
乙肝的科普知 识PPT课件
目录 乙肝的定义和概述 乙肝的病因和症状 乙肝的预防和控制 乙肝的诊断和治疗 乙肝的并发症和预后 乙肝的重要性和意义 乙肝的社会影响和应对措施
乙肝的定义和 概述
乙肝的定义和概述
定义：乙型肝炎病毒（HBV）引 起的一种传染病 传播途径：血液、性接触、母 婴传播
乙肝的定义和概述
全球乙肝感染人数估计有2亿以上
乙肝的病因和 症状
乙肝的病因和症状
病因：乙型肝炎病毒感染 症状：乏力、食欲不振、黄疸 等
乙肝的预防和 控制
乙肝的预防和控制
疫苗接种：乙肝疫苗是预防乙肝的主要 手段 健康教育：宣保持良好的个人卫 生习惯
乙肝的诊断和 治疗
最新浅谈乙肝病毒检测ppt课件
地区的特点和情况，采取特殊政策和灵
④民族团结是实现民族平等的政治基础
A．①③
B．②④
C．①④
D．②③
37
【分析】题干主要反映了民族区域自治制度的优越 性及民族团结的重要性，②③正确且符合题意，故 选D项。①与题意不符，不选；民族平等是实现民 族团结的政治基础，④说法错误，不选。
答案 D
38
•
认为“民族区域自治就是少数民族
自己管理自己”
7.洗涤
洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应保持30-60秒的浸 泡时间）
8.显色
每孔加入A、B底物50 μL，混匀，37℃暗置15分钟
9.终止
每孔加50 μL终止液50 μL，混匀
10.测定
酶标仪单波长450nm或双波长450/630nm测定各空OD值，记 录结果,30分钟内测定完成）
4.结果判定
民族区域自治制度已载入《中华人民共
和国宪法》，成为我国的一项基本政治
制度。坚持民族区域自治制度也是党和
政府坚持依法行事的体现。
31
•
我国民族区域自治制度的优越
性
•
（1）有利于维护国家统一和安全：
民族区域自治是以领土完整、国家统一为
前提和基础的，是国家的集中统一领导与
民族区域自治的有机结合。它增强了中华
自治法所规定的，涉及政治、经济、文化和
社会生活各个方面，但不同于特别行政区的
高度自治权。民族区域自治是以领土完整、
国家统一为前提和基础的。
30
•
④明确实行民族区域自治制度的
原因。首先，实行民族区域自治是适合
我国国情的必然选择，是由我国的历史
特点和现实情况决定的。其次，民族区
乙肝指南解读ppt课件
推荐意见10：IFNα和PegIFNα的推荐疗程为1年。若经过12周治疗未发生 HBsAg定量的下降，且HBV DNA较基线下降<2Log10，建议停用IFNα，改用 NAs治疗
• HBeAg阴性患者抗病毒治疗具体疗程不明确，且停药后肝炎复发率高， 因此治疗疗程宜长
《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）
《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）
同步PegIFN-α与NAs联合治疗对疗效的提高仍不确 切，未能显著改善停药后的持久应答
使用NAs降低病毒载量后联合或序贯PegIFNα，较 NAs单药在HBeAg血清学转换及HBsAg下降方面有 一定的优势，但仍需从药物经济学角度进一步考 虑
Marcellin Pet al,Gastrenterology 2015;Ning Q,et al JH 2013;Ren H,et al Hepatology 2014(Abstract)
待解决问题 特别强调解决中国实际临床问题
《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）
2015年 版
全球约20亿人曾感染 HBV，其中2.4亿人为慢 性HBV 感染者，每年约 有65万人死于HBV感染 所致的肝功衰竭、肝硬 化和HCC
2010年 版
全球约20亿人曾感染 HBV，其中3.5亿人为慢 性HBV 感染者，每年约 有100万人死于HBV感染 所致的肝功衰竭、肝硬 化和HCC
低水平（<2000IU/ml），高水平 HBsAg（>1000IU/ml）与HCC的发生
风险呈正相关
非肝硬化患者较少发生HCC。肝硬化 患者中HCC年发生率为3%-6%。
HBeAg阳性和HBV DNA>2000IU/ml是 肝硬化和HCC发生的显著危险因素
乙肝科普幻灯
若怀孕应建议终止妊娠（无论干扰素或核类似物） 妊娠中肝功损害： 一般不主张抗病毒治疗 多选用保肝治疗
母婴传播阻断
乙型肝炎免疫球蛋白 (HBIG) 联合加强的乙肝疫苗
接种时间：HBIG （出生后24 h) 乙肝疫苗共3针，按照0、1、6月
对妊娠后期母亲是否需要注射 HBIG，目前存在争议
母婴传播阻断
可快速、持续抑制乙肝病毒的复制
安全性良好
用药经验丰富
价格相对便宜
缺点：耐药率高，早
阿德福韦酯
阿德福韦酯 (adefovir dipivoxil)
持续抑制乙肝病毒复制 长期治疗耐药变异发生较少较晚 可有效治疗拉米夫定耐药患者 相对价廉（贺维力）、价廉（代丁、名正） 缺点：短期抑制病毒不如LAM及ETV 需注意肾功
抗病毒治疗应特别注意用药的时机
HBV DNA ≥105（大三） HBV DNA ≥104（小三） ALT ≥2×ULN
如用干扰素，ALT≤10×ULN，血TB<2×ULN
注意排除由药物、酒精和其他因素所致的ALT升高 也应排除因应用降酶药物后ALT暂时性正常
我们我们已经全副武装……
抗HBV的药物
副 作 用
干扰素治疗（年轻）
普通IFN ：
5 MU 隔日1次，皮下或肌肉注射，6-12个月
PegIFN -2a:
180 g 每周1次，皮下注射，疗程1年
PegIFN -2b:
1-1.5g/Kg 每周1次，皮下注射，疗程1年
注意干扰素使用的副作用和适应症
拉米夫定－贺普丁®
拉米夫定 (lamivudine) （每日口服100 mg）
恩替卡维
恩替卡韦 (entecavir) （每日口服0.5－1 mg）
母婴传播阻断
乙型肝炎免疫球蛋白 (HBIG) 联合加强的乙肝疫苗
接种时间：HBIG （出生后24 h) 乙肝疫苗共3针，按照0、1、6月
对妊娠后期母亲是否需要注射 HBIG，目前存在争议
母婴传播阻断
可快速、持续抑制乙肝病毒的复制
安全性良好
用药经验丰富
价格相对便宜
缺点：耐药率高，早
阿德福韦酯
阿德福韦酯 (adefovir dipivoxil)
持续抑制乙肝病毒复制 长期治疗耐药变异发生较少较晚 可有效治疗拉米夫定耐药患者 相对价廉（贺维力）、价廉（代丁、名正） 缺点：短期抑制病毒不如LAM及ETV 需注意肾功
抗病毒治疗应特别注意用药的时机
HBV DNA ≥105（大三） HBV DNA ≥104（小三） ALT ≥2×ULN
如用干扰素，ALT≤10×ULN，血TB<2×ULN
注意排除由药物、酒精和其他因素所致的ALT升高 也应排除因应用降酶药物后ALT暂时性正常
我们我们已经全副武装……
抗HBV的药物
副 作 用
干扰素治疗（年轻）
普通IFN ：
5 MU 隔日1次，皮下或肌肉注射，6-12个月
PegIFN -2a:
180 g 每周1次，皮下注射，疗程1年
PegIFN -2b:
1-1.5g/Kg 每周1次，皮下注射，疗程1年
注意干扰素使用的副作用和适应症
拉米夫定－贺普丁®
拉米夫定 (lamivudine) （每日口服100 mg）
恩替卡维
恩替卡韦 (entecavir) （每日口服0.5－1 mg）
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4
HBeAg阴性活动期肝炎
HBeAg阴性乙肝与HBeAg阳性乙肝不同点：
(1)慢性肝炎病情不减轻； (2)生化学和病毒学标志反复升高； (3) 可30～40年无症状； (4) 约45岁左右发生肝硬化； (5) 10年后约25%发生并发症。
5
HBeAg阴性活动期肝炎
HBeAg 阴性的慢性乙肝流行率升高原因：
一种新的乙肝诊断血清免疫学指标 －－－－乙肝病毒大蛋白
1
乙型肝炎流行现状
乙型肝炎是一个严重的公共卫生问题。 全球60亿人口中，约1/2人口生活在HBV高流行区， 约20亿人证明有HBV感染，3～4亿人为HBV慢性感
染，其中25%～40% 最终将死于肝硬化和肝癌。 全球前10位疾病死因中乙肝占第7位，每年因乙肝死
采用病毒样颗粒制作针对构象结构的高活性抗体 同时检测前S1和前S2 进行定量检测，用于评估抗病毒治疗效果和预后 诊断HBeAg阴性活动期肝炎的唯一血清学指标 评估治疗效果及判定治疗终点唯一血清学指标 大蛋白完全消退意味患者预后良好
12
乙肝病毒包膜蛋白研究进展
1995-2004年 发现大蛋白前S区有复杂构象结构 1996年 发现大蛋白具有反式激活病毒复制的作用 2002年 发现导致肝 (2)长期治疗导致病毒变异； (3) 前C和C启动子变异； (4) 检测方法的灵敏度提高。
6
HBeAg阴性活动期肝炎
HBeAg 阴性活动期肝炎临床诊断现状：
(1) 传统“两对半”指标不能反映此类患者HBV复制程度； (2) 缺乏指导合理治疗的指标； (3) HBV DNA检测不易于各级医疗机构广泛开展； (4) 临床上急需能够反映HBV复制程度及指导治疗的指标。
21
乙肝病毒大蛋白和Pre-S区的研究
(A)内质网（ER）膜上乙肝大蛋白的拓扑结构模型 。 (B)病毒体包膜上的乙肝大蛋白的拓扑结构模型。
Volker Bruss, Xuanyong Lu1, Reiner Thomssen and Wolfram H.Gerlich'.Post-translational alterations in transmembrane topology of the hepatitis B virus large envelope protein. The EMBO Journal vol.13 no.10 pp.2273-2279, 1994
然而对于何时停用抗病毒药物、停用抗病毒药物后 乙肝病毒是否会重新复制活跃导致乙肝复发则缺乏客观 而有效的指标。
10
乙型肝炎血清学诊断技术新突破
乙肝病毒大蛋白（HBV-LP）前S区 酶免定量试剂盒
-------直接定量检测乙肝大蛋白
-------不用分开检测前S1和前S2
11
HBV-LP诊断试剂新颖之处
7
抗病毒治疗效果监测
临床上用于抗病毒治疗的药物
干扰素 核苷类似物
8
抗病毒治疗效果监测
临床上缺乏评估抗病毒治疗效果的指标。 以HBV DNA阴转作为治疗的终点不恰当，
此时停药病情易反复。
9
乙肝病毒实验室检测的缺陷
抗病毒治疗效果评价血清学指标缺乏
临床上评价抗乙肝病毒治疗效果时存在一个很大的问题，即其评价指标 主要是肝功能的改善与否、血清乙肝病毒DNA水平的变化以及肝组织的病理学 改变等。诚然，这些指标对临床医生判断患者病情而言非常重要和实用，也 是临床医生选用抗乙肝病毒药物时的依据，
蛋白 2004年 实验室成功构建针对构象型抗原的单克隆抗
体 2005年 国内公司成功研制乙肝表面抗原大蛋白酶联
免疫定量试剂盒
13
Hepatitis B——乙型肝炎
14
HBV模型
15
HBV包膜蛋白
16
HBV的表面抗原的组成
17
HBV病毒结构成分
18
HBV-LP与病毒复制密切相关
HBV
Dane 管形
(1)暴露在病毒颗粒表面 (2)高免疫原性 (3)参与了病毒与细胞受体的相互作用 (4)诱导抗感染的保护性抗体的产生
➢Neurath AR, Kent SB, Strick N, Parker K. Delineation of contiguous determinants essential for biological functions of the pre-S sequence of the hepatitis B virus envelope protein: its antigenicity, immunogenicity and cell-receptor recognition. Ann Inst Pasteur Virol. 1988 Jan-Mar;139(1):13-38.
20
乙肝病毒大蛋白和Pre-S区的研究
➢ HBV病毒颗粒表面的PreS已经被证实具有独立 的结构域和天然构象
➢ 很多研究致力于表达并观测PreS的结构，但是 极少成功。其原因是单独表达的PreS很容易被 蛋白酶所降解。
➢Prange R, Streeck RE. Novel transmembrane topology of the hepatitis B virus envelope proteins. EMBO J 1995; 14: 247- 256 ➢Lambert C.et al. Assessment of determinants affecting the dual topology of hepadnaviral lare envelope proteins J.General Virology 2004 85,1221-1225.
亡约75万例
2
中国乙型肝炎流行现状
(一) HBeAg阴性活动期肝炎增多 (二) HBV变异株增加HBV的突变率较高，
3
HBeAg阴性活动期肝炎
临床特点：
(1) 转为肝硬化和肝癌比例较大； (2) 与年龄相关：患者年龄较大； (3) 疾病自发或持续减轻极少发生； (4) 何时停药难以确定； (5) 治疗后复发率高。
L-HBs 大蛋白 存在 存在
球型 不含
M-HBs中蛋白 存在 存在 1%含量 S-HBs小蛋白 存在 存在 存在
血流中的分布
仅病毒复制期 存在
非复制期少量 存在 存在
根据检测血液中大蛋白的有无，判断病毒携带者体内的HBV病毒是否在进行复制。
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乙肝病毒大蛋白和Pre-S区的研究
乙肝病毒包膜蛋白 preS特性:
HBeAg阴性活动期肝炎
HBeAg阴性乙肝与HBeAg阳性乙肝不同点：
(1)慢性肝炎病情不减轻； (2)生化学和病毒学标志反复升高； (3) 可30～40年无症状； (4) 约45岁左右发生肝硬化； (5) 10年后约25%发生并发症。
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HBeAg阴性活动期肝炎
HBeAg 阴性的慢性乙肝流行率升高原因：
一种新的乙肝诊断血清免疫学指标 －－－－乙肝病毒大蛋白
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乙型肝炎流行现状
乙型肝炎是一个严重的公共卫生问题。 全球60亿人口中，约1/2人口生活在HBV高流行区， 约20亿人证明有HBV感染，3～4亿人为HBV慢性感
染，其中25%～40% 最终将死于肝硬化和肝癌。 全球前10位疾病死因中乙肝占第7位，每年因乙肝死
采用病毒样颗粒制作针对构象结构的高活性抗体 同时检测前S1和前S2 进行定量检测，用于评估抗病毒治疗效果和预后 诊断HBeAg阴性活动期肝炎的唯一血清学指标 评估治疗效果及判定治疗终点唯一血清学指标 大蛋白完全消退意味患者预后良好
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乙肝病毒包膜蛋白研究进展
1995-2004年 发现大蛋白前S区有复杂构象结构 1996年 发现大蛋白具有反式激活病毒复制的作用 2002年 发现导致肝 (2)长期治疗导致病毒变异； (3) 前C和C启动子变异； (4) 检测方法的灵敏度提高。
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HBeAg阴性活动期肝炎
HBeAg 阴性活动期肝炎临床诊断现状：
(1) 传统“两对半”指标不能反映此类患者HBV复制程度； (2) 缺乏指导合理治疗的指标； (3) HBV DNA检测不易于各级医疗机构广泛开展； (4) 临床上急需能够反映HBV复制程度及指导治疗的指标。
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乙肝病毒大蛋白和Pre-S区的研究
(A)内质网（ER）膜上乙肝大蛋白的拓扑结构模型 。 (B)病毒体包膜上的乙肝大蛋白的拓扑结构模型。
Volker Bruss, Xuanyong Lu1, Reiner Thomssen and Wolfram H.Gerlich'.Post-translational alterations in transmembrane topology of the hepatitis B virus large envelope protein. The EMBO Journal vol.13 no.10 pp.2273-2279, 1994
然而对于何时停用抗病毒药物、停用抗病毒药物后 乙肝病毒是否会重新复制活跃导致乙肝复发则缺乏客观 而有效的指标。
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乙型肝炎血清学诊断技术新突破
乙肝病毒大蛋白（HBV-LP）前S区 酶免定量试剂盒
-------直接定量检测乙肝大蛋白
-------不用分开检测前S1和前S2
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HBV-LP诊断试剂新颖之处
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抗病毒治疗效果监测
临床上用于抗病毒治疗的药物
干扰素 核苷类似物
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抗病毒治疗效果监测
临床上缺乏评估抗病毒治疗效果的指标。 以HBV DNA阴转作为治疗的终点不恰当，
此时停药病情易反复。
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乙肝病毒实验室检测的缺陷
抗病毒治疗效果评价血清学指标缺乏
临床上评价抗乙肝病毒治疗效果时存在一个很大的问题，即其评价指标 主要是肝功能的改善与否、血清乙肝病毒DNA水平的变化以及肝组织的病理学 改变等。诚然，这些指标对临床医生判断患者病情而言非常重要和实用，也 是临床医生选用抗乙肝病毒药物时的依据，
蛋白 2004年 实验室成功构建针对构象型抗原的单克隆抗
体 2005年 国内公司成功研制乙肝表面抗原大蛋白酶联
免疫定量试剂盒
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Hepatitis B——乙型肝炎
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HBV模型
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HBV包膜蛋白
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HBV的表面抗原的组成
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HBV病毒结构成分
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HBV-LP与病毒复制密切相关
HBV
Dane 管形
(1)暴露在病毒颗粒表面 (2)高免疫原性 (3)参与了病毒与细胞受体的相互作用 (4)诱导抗感染的保护性抗体的产生
➢Neurath AR, Kent SB, Strick N, Parker K. Delineation of contiguous determinants essential for biological functions of the pre-S sequence of the hepatitis B virus envelope protein: its antigenicity, immunogenicity and cell-receptor recognition. Ann Inst Pasteur Virol. 1988 Jan-Mar;139(1):13-38.
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乙肝病毒大蛋白和Pre-S区的研究
➢ HBV病毒颗粒表面的PreS已经被证实具有独立 的结构域和天然构象
➢ 很多研究致力于表达并观测PreS的结构，但是 极少成功。其原因是单独表达的PreS很容易被 蛋白酶所降解。
➢Prange R, Streeck RE. Novel transmembrane topology of the hepatitis B virus envelope proteins. EMBO J 1995; 14: 247- 256 ➢Lambert C.et al. Assessment of determinants affecting the dual topology of hepadnaviral lare envelope proteins J.General Virology 2004 85,1221-1225.
亡约75万例
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中国乙型肝炎流行现状
(一) HBeAg阴性活动期肝炎增多 (二) HBV变异株增加HBV的突变率较高，
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HBeAg阴性活动期肝炎
临床特点：
(1) 转为肝硬化和肝癌比例较大； (2) 与年龄相关：患者年龄较大； (3) 疾病自发或持续减轻极少发生； (4) 何时停药难以确定； (5) 治疗后复发率高。
L-HBs 大蛋白 存在 存在
球型 不含
M-HBs中蛋白 存在 存在 1%含量 S-HBs小蛋白 存在 存在 存在
血流中的分布
仅病毒复制期 存在
非复制期少量 存在 存在
根据检测血液中大蛋白的有无，判断病毒携带者体内的HBV病毒是否在进行复制。
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乙肝病毒大蛋白和Pre-S区的研究
乙肝病毒包膜蛋白 preS特性: