BD淋巴细胞亚群分型
淋巴细胞亚群的临床及科研应用
NK细胞(CD3-CD16+和/或CD56+)能够介导 对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性 作用。
下表为常见疾病的T 淋巴细胞的变化：
疾病
T 细胞亚群 CD4+/CD8+
类风关
CD4+ （活动期）
CD8+
SLE
- 或 （活动期）
Sjogren综合症
多发性硬化症
重症肌无力
膜型肾小球肾炎
胰岛素依赖性糖尿病
乙型肝炎
自身溶血性贫血
上呼吸道感染
传染性单核细胞增多症
（急性期）
巨细胞病毒感染
乙肝
（急性期/慢性肝炎）
结核
（胸水/重症外周血）
麻风
疟疾
血吸虫病
43;
Reversed CD4/CD8 Ratios of Tumor-Infiltrating Lymphocytes Are Correlated with the Progression of Human Cervical Carcinoma Received February 11, 1999; revision received May 21, 1999; accepted May 21, 1999. © 1999 American Cancer Society
CD4/CD8比值与肿瘤
恶性肿瘤患者术前CD4/CD8比值低与术后比 值恢复正常。
当发生癌转移时,CD3 、CD4 细胞数明显减 少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/ CD8 比 值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免疫 功能更低,预后更差。
流式细胞术临床检测项目操作流程
流式细胞术临床检测项目操作流程临床检测项目操作流程1：淋巴细胞亚群测定 2：HLA-B27测定 3：CD55／CD59测定 4：血小板抗体测定 5：红细胞抗体测定 6：粒细胞抗体测定 7：白血病免疫分型测定8：淋巴细胞T细胞亚群细胞内因子IFN-γ/IL-4测定 9：XL操作步骤淋巴细胞亚群测定(CD系列)方法流式细胞仪(BD)原理：双/三色直接免疫荧光法。
荧光素标记的各种单克隆抗体加入到全血中，与白细胞膜上相应的抗原结合，经过溶血、洗涤（和固定）等步骤后，在流式细胞仪上进行分析，从而得到淋巴细胞亚群的百分数。
淋巴细胞表面抗原分布如下：T淋巴细胞：CD3+；B淋巴细胞：CD5+，CDl9+；辅助性T淋巴细胞：CD3+CD4+；抑制性T淋巴细胞：CD3+CD8+；NK细胞：CD3-CDl6+56+等。
根据淋巴细胞膜上CD分子表达的不同，流式细胞仪可以分辨出淋巴细胞及其各种不同的亚群，利用计算机软件计算出淋巴细胞亚群的百分数。
标本采集与处理受检者的准备：检查对象生活饮食处于日常状态，空腹静脉采血。
抗凝剂：EDTA或肝素抗凝血要求： 1．样本量至少1ml。
2．样本应在采集后6小时内处理，冷冻的标本不能用。
3．样本白细胞计数应在 4.0-10.0×109/L之间。
若>10.0×109/L，样本需要稀释，用PBS稀释；若<4.0×109/L，应分离单个核细胞。
4．溶血样本不能用。
试剂品牌规格贮存贝克曼库尔特成分 1：单克隆抗体1ML 2―8℃ 2：全血溶血试剂A：甲酸 70ML 室温 B：碳酸钠等32ML 室温 C：多聚甲醛 14ML 室温3：鞘液 20L 室温 4：清洗液5L 室温 5：荧光微球 10ML 2-8℃质控品BD产品，未开瓶的试剂于2-8℃保存，可在有效期内保持稳定，稀释的试剂于2-8℃可稳定2周；每天校准一次：遇特殊情况随时进行校准。
样本制备：1) 按照要求，分别向已编好号的试管中加入20 ul单克隆抗体和同型对照 2) 分别向试管中加入混匀的100u1抗凝血。
淋巴细胞亚群分析报告
淋巴细胞亚群分析报告一、背景介绍淋巴细胞是免疫系统中的重要成分，通过分析淋巴细胞亚群的分布情况，可以评估机体的免疫功能及潜在疾病风险。
本报告旨在对您进行淋巴细胞亚群分析，以提供对您免疫系统状况的了解。
二、实验方法我们采用了流式细胞术（flow cytometry）对您的淋巴细胞亚群进行检测。
通过自动计数细胞的特定抗体标记，我们能够高效准确地分析淋巴细胞的亚群分布情况。
三、结果解读1. CD3+ T淋巴细胞CD3+ T淋巴细胞是一类非常重要的免疫细胞，负责调节和执行免疫应答。
根据我们的检测结果显示，您的CD3+ T淋巴细胞数量处于正常范围内。
2. CD4+ T细胞CD4+ T细胞又称为辅助性T细胞，对机体的免疫反应起重要作用。
根据检测结果，您的CD4+ T细胞比例为XX%，处于正常范围。
3. CD8+ T细胞CD8+ T细胞是细胞介导的免疫反应的关键成分，负责杀伤感染的细胞和控制体内的肿瘤细胞。
我们的结果显示，您的CD8+ T细胞比例为XX%，处于正常范围。
4. CD4+/CD8+ 比值CD4+/CD8+ 比值是评估免疫功能的重要指标之一。
正常情况下，CD4+/CD8+ 比值在1.5到2.5之间。
根据我们的检测结果，您的CD4+/CD8+ 比值为XX，可判断您的免疫功能正常。
5. NK细胞NK细胞是重要的自然杀伤细胞，对抗病毒感染和肿瘤细胞起到重要作用。
根据我们的检测结果，您的NK细胞比例为XX%，处于正常范围。
四、结果分析根据对您淋巴细胞亚群的分析，您的免疫系统状况良好，各项指标均在正常范围内。
您的CD4+/CD8+ 比值正常，表明您的免疫应答和监测能力正常。
此外，您的NK细胞比例正常，对抵抗感染和抗肿瘤细胞有良好的保护作用。
然而，请注意，本报告只是对您淋巴细胞亚群的初步分析，仅能提供免疫系统的总体情况。
如有其他相关检测需求或担忧，建议您咨询专业医生或进行更全面的免疫功能评估。
五、结论通过对您淋巴细胞亚群的分析，我们认为您的免疫系统状况良好，各项指标处于正常范围内。
BD淋巴细胞亚群分型
50-84%
CD3+/CD4+
T辅助/诱导淋巴细胞
27-51%
CD3+/CD8+
T抑制/毒性淋巴细胞
15-44%
CD3-/CD19+
B淋巴细胞
5-18%
CD3-/CD16+56+
NK淋巴细胞
7-40%
15.0-25.0%
项目名称
项目说明
临床意义
正常值范围
CD3+
总T细胞
淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，它可以辅助诊断某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等)，分析发病机制，观察疗效及监测预后有重要意义；
1．CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。
CD3+/HLA-DR+
活化总T细胞
有助于了解移植、自身免疫、免疫缺陷、免疫失调及T-ALL时细胞激活状态。如外周血单核细胞表面HLA-DR的表达与手术和创伤后患者的预后成正相关，可作为手术患者一种可靠的免疫监测手段了解病人的天然免疫，有助于防止感染。
1.2-5.8%
CD14+/HLA-DR+
活化的单核细胞
CD8+/CD28-
抑制性T细胞
9.9-24.8%
CD4+/CD4ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱRO+
T辅助细胞诱导亚群
检测记忆型CD4+细胞亚群，CD45RO阳性，某些病毒感染性疾病处于进展期时它的数量增加，当接受抗病毒治疗后其数量又会下降。
淋巴细胞亚群检测及临床应用
一、概述
二、淋巴细胞亚群检测
1、检测原理
• 把全血加入到试剂中时，荧光标记的抗体会和白细胞表面抗原特异性结合，在采集 时，细胞通过激光束使激光散射。被染色的细胞就会发出荧光。这些被仪器检测到 的散射光和荧光信号提供了关于细胞大小、内部复杂度和相关荧光强度等信息。 BD Multitest检测试剂采用了荧光触发技术，能够直接对淋巴细胞群进行荧光设门， 以减少门中的未裂解细胞或有核红细胞带来的污染。
射光照射。于室温下(20-25℃)进行此程序操作 • 盖上管盖并轻轻混匀振荡进行混匀。室温(20-25℃)环境下避光孵育15min上
机检测。
二、淋巴细胞亚群检测
3、操作步骤-品牌B（六色淋巴细胞亚群试剂）
• 取一支 Trucounttube。用反向加样法加入50μl充分混匀的抗凝全血。注意血 不要碰到试管底部的微球( Beads)。
液时，将按钮按至第二个刻度点。释放按钮时，过量样本将被吸入吸头中。 将按钮按至第一个刻度点排出精确体积的样本，将过量样本留在吸头中。
二、淋巴细胞亚群检测
3、操作步骤-品牌B（四色淋巴细胞亚群试剂）
• 盖上管盖并轻轻混匀振荡进行混匀。在室温(20~25℃)环境下避光孵育 • 向各管中添加450μl 1× Multitest溶血素，注意：小心保护样本管，免受直
不能使用。室温保存的抗凝全血，可稳定48h;染色固定后的样本在2~8℃条 件下可稳定24h。 • 患者准备：无须特殊准备，检查对象生活饮食处于日常状态，空腹为宜， 静脉采血。
二、淋巴细胞亚群检测
3、操作步骤-品牌A
淋巴细胞表面标志的检测及亚群分类
体，在T细胞分化过程中出现较早，主要存在于粘
膜上皮和皮肤（CD8+），在防止病原体入侵粘膜
上皮中起重要作用。
TCR 能特异性地与抗原结合，但
由于 TCR 与抗原的结合力较弱，一般
只结合与 MHC 分子连接的抗原，构成
了 MHC限制性的基础。 TCR 与抗原结
合后不能直接活化T细胞，而是依赖与
其邻接的CD3分子传递活化信息。
有丝分裂原刺激后的增殖反应、细胞毒性 试验及淋巴细胞分泌产物的测定。
T细胞功能的检测
1. 淋巴细胞转化实验 （lymphocyte transformation test，LTT）
基本原理：
T细胞在体外受到刺激物的刺激后将 发生增殖、转化，根据其增殖转化的能力 评定相应的细胞功能。
淋巴细胞刺激物的种类和作用细胞
淋巴细胞表面标志可用于：
1. 淋巴细胞及其亚群的鉴别
2. 研究淋巴细胞分化过程和功能 3. 临床上研究某些疾病的发病机
制和诊断方法。
T 淋巴细胞表面标志
1. 簇分化抗原(cluster of differentiation, CD)
糖蛋白，有的由数条多肽链组成，如 CD3由5条链组成。目前已鉴定的CD分子达 100多种，已弄清50%以上CD分子编码基因 的核苷酸序列及其染色体定位。大多数CD分 子分布于各种类型的白细胞表面，但近年发 现还广泛分布在造血和非造血细胞上。
T细胞主要的CD抗原
（1）CD2： 表达于全部T细胞和NK细胞表面；由3 种抗原性不同的分子组成（CD2-1，2，3） CD2-1，2表达于静止细胞表面，CD2-3表 达于活化的T细胞表面。CD2可与绵羊红细 胞（SRBC）结合，故又称绵羊红细胞受体 （E受体），它是粘附分子之一，在抗原提 呈过程中起辅助作用。
淋巴细胞亚群分析报告
淋巴细胞亚群分析报告背景介绍淋巴细胞亚群分析是一种用于评估免疫系统功能的方法。
淋巴细胞是免疫系统中的重要成分，可以分为不同的亚群，每个亚群在免疫应答中扮演不同的角色。
通过对淋巴细胞亚群的分析，可以了解免疫系统的状态，对疾病的诊断和治疗具有重要的意义。
实验方法在本次分析中，我们采用了流式细胞术（flow cytometry）来对淋巴细胞亚群进行分析。
流式细胞术是一种用于测量细胞表面标记物的方法。
通过该方法，我们可以将淋巴细胞分为不同的亚群，并进一步计算它们的百分比。
结果在本次实验中，我们对100名健康人群的淋巴细胞亚群进行了分析。
以下是分析结果的总结：CD4+ T细胞•平均百分比：50%•正常范围：40-60%•描述：CD4+ T细胞是一种重要的免疫细胞，对于维持免疫系统的正常功能至关重要。
在正常情况下，CD4+ T细胞的百分比应该在40-60%之间。
在本次实验中，健康人群的CD4+ T细胞百分比平均为50%，处于正常范围内。
CD8+ T细胞•平均百分比：30%•正常范围：20-40%•描述：CD8+ T细胞是一种具有杀伤作用的免疫细胞，对于清除感染的病原体和肿瘤细胞起到重要作用。
正常情况下，CD8+ T细胞的百分比应该在20-40%之间。
在本次实验中，健康人群的CD8+ T细胞百分比平均为30%，处于正常范围内。
B细胞•平均百分比：15%•正常范围：10-20%•描述：B细胞是一种产生抗体的免疫细胞，对于清除体内的病原体具有重要作用。
正常情况下，B细胞的百分比应该在10-20%之间。
在本次实验中，健康人群的B细胞百分比平均为15%，处于正常范围内。
自然杀伤细胞•平均百分比：5%•正常范围：2-10%•描述：自然杀伤细胞是一种具有直接杀伤作用的免疫细胞，对于清除感染的病原体和肿瘤细胞起到重要作用。
正常情况下，自然杀伤细胞的百分比应该在2-10%之间。
在本次实验中，健康人群的自然杀伤细胞百分比平均为5%，处于正常范围内。
淋巴细胞亚群流式细胞学检查
淋巴细胞亚群流式细胞学检查
淋巴细胞亚群流式细胞学检查是一种检测淋巴细胞亚群的方法。
淋巴细胞是免疫系统的重要组成部分，包括T细胞、B细胞和自然杀伤细胞等亚群。
这些亚群在免疫应答中发挥着不同的作用。
流式细胞学是一种可靠的检测淋巴细胞亚群的方法。
在流式细胞学中，通过利用细胞表面分子的不同表达，将淋巴细胞分成不同的亚群。
利用荧光标记的抗体，可以快速、准确地检测出特定亚群的淋巴细胞。
淋巴细胞亚群流式细胞学检查可以用于评估免疫功能、诊断免疫相关疾病、监测疾病治疗效果等方面。
常见的淋巴细胞亚群包括CD4+ T细胞、CD8+ T细胞、B细胞、NK细胞等。
其中，CD4+ T细胞是免疫系统的主要调节细胞，其数量和功能状态对于正常免疫系统的维持至关重要。
总之，淋巴细胞亚群流式细胞学检查是一种重要的免疫学检查方法，可以为临床诊断和治疗提供可靠的参考依据。
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活化总T细胞
有助于了解移植、自身免疫、免疫缺陷、免疫失调及T-ALL时细胞激活状态。如外周血单核细胞表面HLA-DR的表达与手术和创伤后患者的预后成正相关，可作为手术患者一种可靠的免疫监测手段了解病人的天然免疫，有助于防止感染。
1.2-5.8%
CD14+/HLA-DR+
活化的单核细胞
CD4+/CD25+/Foxp3+
调节性T细胞
CD4+CD25+/Foxp3+调节性T(Treg)细胞是维持机体免疫耐受的重要因素之一，它由胸腺产生后输出至外周，并通过主动调节（dominant regulation）的方式抑制存在于正常机体内潜在的自身反应性T细胞的活化与增殖，从而调节机体的免疫力，如防止自身免疫性疾病的发生。CD4+CD25+/Foxp3+细胞的数量减少或功能异常均有可能导致自身免疫病的发生，可用于骨髓移植术前术后的跟踪。
414～1123 cells/μl
CD4+T淋巴细胞＞100/μl的病人。
③帮助确定抗HIV药物治疗及机会性感染预防性治疗的适应症，例如，当CD4+T淋巴细胞＜200/μl时，应给予抗卡氏肺囊虫肺炎的预防性治疗。
④抗HIV药物疗效的重要判断指标。
CD8+/CD38+
活化CD8细胞
CD38亚群细胞是一群激活亚群，当HIV感染时高度扩增，对疾病的进程有重要的预后意义。是HIV感染患者发展为AIDS或死亡的更灵敏的预后指标。临床还用于监控骨髓和器官移植。
项目名称
项目说明
临床意义
正常值范围
CD3+
总T细胞
淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，它可以辅助诊断某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等)，分析发病机制，观察疗效及监测预后有重要意义；
1．CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。
15.0-25.0%
如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！
CD4绝对数
T辅助细胞绝对计数
CD4+T淋巴细胞计数测定的主要意义：
①用于HIV感染者的疾病分期：凡CD4+T淋巴细胞＜200/μl或CD4+T淋巴细胞的百分比＜14%的HIV感染者可归入艾滋病。
②判断HIV感染者的临床合并症(各种机会性感染与CD4+T淋巴细胞的相关性)，如CD4+T淋巴细胞＜200/μl时，很容易发生卡氏肺囊虫肺炎；而巨细胞病毒感染和鸟分支杆菌感染常发生于CD4+T淋巴细胞＜50/μl的病人，极少见于
2．CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。
3．CD4／CD8比值异常：艾滋病患者比值显著降低，多在0．5以下。比值降低：SLE肾病、传染性单核细胞增多症、急性巨细胞病毒感染、骨髓移植恢复期等。比值增高:见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排异反应。
CD8+/CD28-
抑制性T细胞
9.9-24.8%
CD4+/CD45RO+
T辅助细胞诱导亚群
检测记忆型CD4+细胞亚群，CD45RO阳性，某些病毒感染性疾病处于进展期时它的数量增加，当接受抗病毒治疗后其数量又会下降。
9.8-26%
CD4+/CD45RA+
抑制细胞诱导亚群
用于检测幼稚型CD4+细胞亚群, CD62L阳性，当某些病毒感染性疾病处于进展期时它的数量下降，而当接受抗病毒治疗后其数量又会增加。在后一种情况下，它有助于区分病人在经抗病毒治疗后，免疫细胞（如CD4）数量增加是由于外周血中现有淋巴细胞亚群扩增而产生的纯真细胞，还是胸腺增生和真正的免疫重建。
4．NK细胞(CD3-CD16+和/或CD56+)能够介导对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性作用。
50-84%
CD3+/CD4+
T辅助/诱导淋巴细胞
27-51%
CD3+/CD8+
T抑ห้องสมุดไป่ตู้/毒性淋巴细胞
15-44%
CD3-/CD19+
B淋巴细胞
5-18%
CD3-/CD16+56+
NK淋巴细胞
7-40%
CD8+/CD28+
细胞毒T细胞
检测细胞毒/抑制性T细胞，CD8+/CD28+为细胞毒T细胞，CD8+/CD28-为抑制性T细胞；可作为一些自身免疫性疾病、艾滋病及免疫缺陷的免疫检测指标。CD28+亚群随HIV病程发展时数量降低。急性乙肝患者外周血CD8+CD28+细胞呈现明显的升高。
8.6-15.5%