淋巴细胞亚群(详细资料)
淋巴细胞亚群(详细资料)

淋巴细胞亚群(详细资料)机体免疫状态是衡量机体是否患病的重要指标,目前多采用流式细胞术来监测机体的免疫状态,其中最重要的指标是检测T、B和NK 淋巴细胞的水平。
T细胞主要包括T辅助细胞(Th)和T抑制细胞(Ts)细胞亚群。
CD3+细胞代表外周血中总的成熟T细胞,理论上应约等于CD4+细胞和CD8+细胞的总和,但往往出现CD4+加CD8+细胞之和大于CD3+,这是因为CD4+细胞包括CD3+/CD4+细胞(真正Th细胞)和CD3-CD4+细胞(非Ts细胞),而后者包括CD3-CD8+CD16+56+细胞(一部分NK细胞)和CD3-CD8+CD16+56-(未知细胞)。
由此可见,真正的TH细胞是CD3+CD4+细胞,真正Ts细胞是CD3+CD8+细胞。
尤其当患者NK细胞明显增加时,会使CD4细胞和CD8细胞的总和远大于CD3+细胞,因此,用三色荧光标记才能分析真正的辅助性T细胞和抑制性T细胞。
首先在淋巴细胞中识别出CD3细胞,然后在CD3细胞中再区分CD4+和CD8+细胞。
NK细胞的表面无T细胞和B细胞表面标志,但有CD16和CD56等标志,用CD16+56抗体能鉴定出NK细胞(一定是CD3阴性),CD3-CD16+56+细胞才是真正的NK细胞。
根据是否表达CD8,又可将NK细胞分为CD3-CD8+CD16+56+细胞(所占比例小,不影响CD8比例)和CD3-CD8-CD16+56+细胞(主要成分)。
B细胞的表面标志是CD19,理论上CD3-CD19+细胞才是真正的B淋巴细胞。
但CD3+CD19+细胞很少,可忽略不计,所以CD19+细胞就是B淋巴细胞。
在抗肿瘤效应中,CD4和CD8分别是T淋巴细胞的辅助/诱导细胞亚群与抑制/细胞毒细胞亚群,CD4细胞的主要功能是通过其分泌的淋巴因子,增强和扩大免疫应答过程,辅助诱导其它免疫细胞如杀伤性T细胞,B细胞等共同发挥抗肿瘤作用,CD4细胞的减少,导致免疫功能低下。
淋巴细胞亚群分类报告解读

淋巴细胞亚群分类报告是用于评估免疫系统功能的一种检测方法。
淋巴细胞亚群是指淋巴细胞的不同亚型,包括CD3+总淋巴细胞、CD4+ T细胞、CD8+ T细胞、CD19+ B细胞和CD16+56+ 自然杀伤细胞等。
这些亚群在免疫系统中扮演着不同的角色。
解读淋巴细胞亚群分类报告时,以下几个指标需要注意:
CD3+总淋巴细胞:CD3+总淋巴细胞是所有淋巴细胞的总数。
它是免疫系统的重要指标之一,用于评估免疫功能的整体状态。
CD4+ T细胞:CD4+ T细胞是一种辅助性T细胞,对于免疫系统的调节和协调起着重要作用。
CD4+ T细胞的数量和功能可以反映免疫系统的活跃程度。
CD8+ T细胞:CD8+ T细胞是一种细胞毒性T细胞,负责杀伤感染的细胞和肿瘤细胞。
CD8+ T 细胞的数量和功能可以反映细胞免疫的水平。
CD19+ B细胞:CD19+ B细胞是一种B淋巴细胞,负责产生抗体和调节免疫反应。
CD19+ B 细胞的数量和功能可以反映体液免疫的水平。
CD16+56+ 自然杀伤细胞:CD16+56+ 自然杀伤细胞是一种自然杀伤细胞,具有非特异性杀伤肿瘤细胞和感染细胞的能力。
它们在免疫防御中起着重要的作用。
在解读报告时,需要将各个亚群的数量和比例与正常参考范围进行比较。
如果某个亚群的数量或比例超出正常范围,可能意味着免疫功能异常或存在其他潜在的问题。
然而,报告结果需要结合临床病史和其他检查结果进行综合评估和解读。
医学检验·检查项目:T4淋巴细胞亚群_课件模板

强直性脊柱炎、风湿性多肌痛、皮肌炎与 多发性肌炎、新生儿获得性免疫缺陷综合 征、小儿原发性免疫缺陷病、小儿自身免 疫性淋巴细胞增生综合征、小儿继发性免 疫缺陷病、小儿获得性免疫缺陷综合征、 成人斯蒂尔病、复发性风湿病、获得性免 疫缺陷综合征、风湿热、重症联合免疫缺 陷。
谢谢!
相关检查: 抗艾滋病(AIDS)抗体、B淋巴细胞表面标 志、鼠红细胞花环形成试验、双链酶试验、 自身免疫性疾病14项、T4/T8比值。
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相关症状: 淋巴增生、淋巴结退化、淋巴发育不全、 发热伴淋巴结肿大、并伴触痛、发热伴关 节肿痛。
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简介:
T淋巴细胞表面有多种抗原,其中簇 分化(CD)抗原分类甚多,这些抗原除了标 记细胞的种类和分化阶段外,同时也有一 定的功能,或作为受体、黏附分子、信号 传递成分等,可通过这些表面特征性抗原 鉴别亚群。目前开展较多的是用抗分化抗 原的单克隆抗体,如抗CD4单克隆抗体, 对外周血单个核细胞进行
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临床意义:
(1)降低:低丙种球蛋白血症、细菌 感染、某些病毒感染。 (2)升高:急性移 植物抗宿主病(GVH)、肉瘤、硬皮病、皮 肤黏膜淋巴结综合征。
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正常值: 55%~65%。
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简介:
检测,根据出现阳性率,判定亚群分布。 T淋巴细胞亚群是观察机体细胞免疫水平 的重要方法,对恶性肿瘤、自身免疫性疾 病、免疫缺乏症、血液系统疾病的诊断、 治疗及预后判断有重要价值。T细胞亚群 之间有相互制约和相互辅助的作用,任何 一方的增多或减少皆影响另一亚群的形成 失调。
淋巴细胞亚群的临床应用

疾病预后评估
淋巴细胞亚群检测还可以用于评估疾 病的预后和治疗效果。通过监测淋巴 细胞亚群的变化,可以评估病情的进 展和治疗效果,为制定治疗方案提供 依据。
肿瘤免疫逃逸
肿瘤细胞通过影响淋巴细胞亚群的活化、增殖和分化,来 逃避免疫监视和攻击,从而影响肿瘤的发展和转移。
肿瘤疫苗
利用淋巴细胞亚群设计肿瘤疫苗是当前研究的热点,通过 激活机体免疫系统来预防和治疗肿瘤。
03
淋巴细胞亚群的检测方法
流式细胞术检测
总结词
流式细胞术是一种快速、准确、灵敏的检测技术,用于分析 淋巴细胞亚群的表面标志物,从而了解淋巴细胞的功能和活 性状态。
系统性红斑狼疮
淋巴细胞亚群失调与系统性红斑狼疮的发病机制 密切相关,如B细胞和T细胞的异常活化导致自身 抗体产生。
1型糖尿病
CD4+T细胞和CD8+T细胞在1型糖尿病的发病机 制中发挥关键作用,通过攻击胰岛细胞导致胰岛 素分泌不足。
淋巴细胞亚群在肿瘤性疾病中的作用
肿瘤免疫
淋巴细胞亚群在肿瘤免疫应答中发挥重要作用,如CD8+T 细胞对肿瘤细胞的杀伤作用和CD4+T细胞对肿瘤细胞的调 节作用。
深入研究淋巴细胞亚群的表型特征和功能特点,建立更准确的淋巴细胞亚群分类标准,为临床应用提 供更准确的检测结果。
深入探究淋巴细胞亚群的功能和作用机制
深入研究淋巴细胞亚群在免疫应答、 疾病发生和发展中的作用机制,了解 其在不同疾病中的功能和作用机制。
淋巴细胞亚群

淋巴细胞亚群在免疫治疗中的挑战
• 淋巴细胞亚群检测技术的优化和标准化
• 淋巴细胞亚群在免疫治疗中的机制研究
• 淋巴细胞亚群在免疫治疗中的临床应用的推广和验证
CREATE TOGETHER
谢谢观看
THANK YOU FOR WATCHING
DOCS
• 分析淋巴细胞亚群的变化,辅助诊断自身免疫性疾病
• 评估免疫调节功能,指导免疫抑制治疗
淋巴细胞亚群检测在肿瘤诊断中的应用
• 分析淋巴细胞亚群的变化,辅助诊断肿瘤的发生和发展
• 评估免疫应答状态,指导免疫治疗
淋巴细胞亚群检测在免疫治疗评估中的意义
淋巴细胞亚群检测在免疫检查点抑制剂治疗评估中的应用
• 分析淋巴细胞亚群的变化,评估免疫检查点抑制剂的疗效
• CD4+ T细胞和CD8+ T细胞数量减少,免疫监视减弱
• B细胞产生抗体,识别和清除肿瘤细胞
淋巴细胞亚群在肿瘤发展中的作用及机制
• CD4+ T细胞和CD8+ T细胞数量增加,参与免疫应答
• B细胞产生抗体,中和肿瘤细胞
⌛️
淋巴细胞亚群在肿瘤治疗中的作用及机制
• 免疫检查点抑制剂:调节淋巴细胞亚群的活性,提高免疫治疗疗效
• CD4+ T细胞和CD8+ T细胞数量增加,参与免疫应答
• B细胞产生抗体,加重炎症反应
淋巴细胞亚群在系统性红斑狼疮中的变化及机制
• CD4+ T细胞和CD8+ T细胞数量增加,参与免疫应答
• B细胞产生抗体,形成免疫复合物
⌛️
淋巴细胞亚群在肿瘤发生与发展中的作用及机制
淋巴细胞亚群

B细胞
产生抗体,为体液免疫提 供重要保护。
自然杀伤细胞
针对病毒感染和肿瘤细胞 的杀伤作用。
淋巴细胞亚群的功能和作用
1 免疫调节
调节免疫系统的应答, 维持 疫应答。
3 免疫效应
产生免疫效应,杀伤被 感染的细胞。
淋巴细胞亚群在免疫应答中的作用
抗原递呈
T细胞接受抗原递呈细胞的信 号,触发免疫应答。
抗体产生
B细胞分化为浆细胞,产生抗 体。
肿瘤杀伤
自然杀伤细胞识别肿瘤细胞并 杀伤。
淋巴细胞亚群与疾病的关联
1
免疫缺陷病
淋巴细胞功能异常导致免疫系统缺陷性疾病。
2
自身免疫病
免疫系统对自身组织产生异常反应。
3
淋巴瘤
淋巴细胞的恶性肿瘤。
淋巴细胞亚群的检测方法
通过流式细胞术、细胞培养和免疫组化等方法检测和鉴定淋巴细胞亚群。
淋巴细胞亚群
淋巴细胞亚群是免疫系统中不同类型的淋巴细胞。它们在免疫应答中扮演着 重要角色,具有不同的功能和特点。
淋巴细胞亚群简介
淋巴细胞亚群是淋巴细胞的亚群,包括T细胞、B细胞和自然杀伤细胞等。它 们在免疫系统中起着至关重要的作用。
淋巴细胞亚群的分类与特点
T细胞
包括辅助T细胞和细胞毒性 T细胞,对调节和进攻性免 疫起关键作用。
淋巴细胞亚群应用的前景和挑战
1 免疫疗法
淋巴细胞亚群的研究为新的免疫疗法提供了机会。
2 个体化治疗
深入了解淋巴细胞亚群有助于个体化治疗的发展。
3 技术挑战
淋巴细胞亚群的准确检测和鉴定仍然面临技术挑战。
淋巴细胞亚群
淋巴细胞亚群是指在免疫系统中不同类型和功能的淋巴细胞种类。了解淋巴 细胞亚群的分类和功能,对于理解免疫系统以及免疫疾病的发生至关重要。
什么是淋巴细胞亚群?
淋巴细胞亚群是在免疫系统中不同类型和功能的淋巴细胞种类。它们扮演着 免疫系统中重要的角色,参与免疫应答和疾病清除。
淋巴细胞亚群的分类
免疫耐受
一些淋巴细胞亚群具 有免疫耐受的能力, 防止免疫系统对自身 组织产生过度反应。
免疫突变
淋巴细胞亚群可以通 过基因重组和突变来 产生多样的抗体和受 体。
免疫逃逸
一些病原体可以通过 改变自身的表面结构 或进入宿主细胞来逃 避淋巴细胞亚群的识 别和清除。
淋巴细胞亚群在免疫疾病中的 作用
淋巴细胞亚群的功能失调常常与免疫疾病的发生和发展密切相关,研究淋巴 细胞亚群对于免疫疾病的预防和治疗具有重要意义。
3 免疫清除
淋巴细胞亚群可以通过不 同的机制来清除感染和异 常细胞,维护身体健康。
4 免疫监视
淋巴细胞亚群可以监视身体中的各种细胞和 组织,及时发现和排除异常。
5 免疫刺激
淋巴细胞亚群可以增强免疫应答,激发免疫 系统产生更强的反应。
淋巴细胞亚群的生物学特性
组织特异性
不同的淋巴细胞亚群 可以富集在特定的组 织和器官中,发挥特 定的功能。
NK细胞是一种具有自然杀伤功能的淋巴细胞,可以直接杀伤病变细胞和受体 识别异常的细胞。
B细胞亚群
B细胞是一种产生抗体的淋巴细胞,具有抗原呈递和体液免疫功能。
淋巴细胞亚群的功能
1 免疫记忆
淋巴细胞亚群可以记住特 定病原体,使得免疫系统 在再次遭遇时更快、更有 效地应对。
2 免疫调节
淋巴细胞亚群可以调节免 疫应答的强度和方向,确 保免疫系统对各种病原体 做出合适的反应。
《淋巴细胞亚群》课件
免疫组织化学检测方法
总结词
直观、特异性好、可定位
详细描述
免疫组织化学检测方法是一种通过抗体与抗原的特异性结合,对淋巴细胞亚群进 行定位和定量的检测方法。该方法可以将淋巴细胞亚群定位在组织切片中,并对 其表达的特定抗原进行检测,具有直观、特异性好、可定位等优点。
基因表达谱检测方法
总结词
全面、深入、高通量
淋巴细胞亚群与肿瘤
肿瘤免疫逃逸机制
肿瘤通过多种机制逃避身体的免疫攻击,其中淋巴细胞亚 群的异常功能和分布发挥了重要作用。
肿瘤微环境中的淋巴细胞亚群
不同类型的淋巴细胞亚群在肿瘤微环境中具有不同的功能和作用 。例如,肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)可以促进或抑制肿瘤的生长,
具体取决于其亚型和功能状态。
免疫治疗策略
详细描述
基因表达谱检测方法是一种通过对淋巴细胞亚群基因表达谱进行分析的检测方法。该方 法可以对淋巴细胞亚群在不同生理和病理状态下基因表达情况进行全面、深入的研究, 具有高通量、高分辨率的特点。通过基因表达谱检测,可以深入了解淋巴细胞亚群的功
能和分化过程,为淋巴细胞相关疾病的诊断和治疗提供有力支持。
05
淋巴细胞亚群在自身免疫性疾病中的角色
不同类型的淋巴细胞亚群在自身免疫性疾病中发挥不同的作用。例如,辅助性T细胞17和 调节性T细胞在类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病中的功能和平衡被破 坏,导致疾病的发生和发展。
治疗策略的探索
针对淋巴细胞亚群的靶向治疗是当前研究的热点,旨在调节异常的免疫反应并控制自身免 疫性疾病的进展。
B淋巴细胞亚群
根据功能和表型的不同, 可分为浆细胞、记忆B细 胞和未成熟B细胞等。
NK细胞亚群
根据表型和功能的不同, 可分为CD56bright和 CD56dim等。
淋巴细胞亚群与临床
+ 活化标志一般选择CD69、CD25、HLA-DR等
+ 结合淋巴细胞亚群绝对值,可评估免疫功 能失调
+ 临床上将活化的CD3细胞数目过低,即视作 机体免疫功能极度缺失、提示有可能继发 全身感染,应当立即调整治疗方案
+ 见于慢性活动性肝炎、重症肌无力等自身 免疫病活动期
+ CD4淋巴细胞减少:见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺 陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂患者。
+ CD4淋巴细胞增加:可能有过强的细胞免疫反应; 或某些免疫增强药物的有效结果。
+ CD8淋巴细胞增多:见于自身免疫性疾病,如SLE、 艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。
+ CD8淋巴细胞减少:见于机体对各种病毒感染的免 疫反应;肿瘤患者具有抗肿瘤免疫反应时 。
+ CD8细胞与CD4细胞同时减少:见于各种严重的免疫 缺陷以及肿瘤患者晚期或免疫系统严重损伤后。
+ CD4/CD8>2.5表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态,容 易出现自体免疫反应,见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。
百分率(%)
50-84 27-51 15-44
0.71-2.78
7-40 5-18 95-105
NK细胞
CIK细胞
B细胞
淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能 的重要指标,它总体反映机体当前的免疫功能、状 态和平衡水平,并可以辅助诊断某些疾病(如自身 免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反 应性疾病等),分析发病机制,观察疗效及检测预 后有重要意义 。
CD4/CD8较移植前明显增加,则可能发生排斥反应。比值持 续减低表明移植后感染,若比值<0.2时应停用免疫抑制剂, 以免继发严重感染而导致移植失败。
细说“淋巴细胞亚群”
细说“淋巴细胞亚群”通常患者朋友对血常规非常熟悉,其中有淋巴细胞占白细胞的百分比和计数。
其实呢,淋巴细胞还分为各种亚群,临床上,经常有医生会开“淋巴细胞亚群”项目,以帮助了解患者的免疫功能。
一、那么“淋巴细胞亚群”是群什么细胞?众所周知淋巴细胞是构成机体免疫器官的基本单位,是参与机体细胞免疫和体液免疫应答功能的重要细胞。
人的淋巴细胞根据其生物功能和细胞表面抗原的表达又可分为三大类:T淋巴细胞,B淋巴细胞和NK淋巴细胞,即是通常所谓的“淋巴细胞亚群”。
这些细胞是如何分化而来的呢?从头说起吧,骨髓造血干细胞分化为髓样干细胞和淋巴样干细胞。
前者分化为红细胞,血小板,和原粒细胞,其中原粒细胞继续分化为粒细胞,包括嗜酸性、嗜碱性粒细胞和中性粒细胞。
而淋巴样干细胞分化为原淋细胞,继续分化为T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK淋巴细胞。
这些T、B、Nk细胞也就是所称的“淋巴细胞亚群”。
当然,T细胞还进一步分为辅助性和杀伤抑制性T细胞,调节性T细胞等。
二、在化验单上,这些“淋巴细胞亚群”又是怎样标识的呢?CD3+ 代表总的T淋巴细胞,是机体免疫系统内功能最重要的一大细胞群;CD3+CD4+代表辅助/诱导性T淋巴细胞即Th细胞;CD3+CD8+代表抑制/细胞毒性T细胞即Ts细胞。
CD3-CD19+代表B淋巴细胞,CD3-CD56+CD16+代表自然杀伤性(NK)淋巴细胞。
具体报告的是各类淋巴细胞的百分比(%),以及Th/Ts的比值。
有的医院除了百分比,还报告各种淋巴亚群的细胞绝对计数(就是每微升全血中含有的这种淋巴细胞的个数)。
三、淋巴细胞亚群是怎样测定的呢?首先,检测的标本要求抽取2毫升肝素或EDTA-K抗凝全血。
利用各种单克隆抗体,与标本中淋巴细胞表面抗原结合,再配多色荧光染料,就可以通过流式细胞术的分析,区分各淋巴细胞不同的亚型,进而得到各亚群的比例及绝对计数。
四、为什么要测定淋巴细胞亚群呢?概括说,淋巴细胞亚群是了解机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标,分析这些免疫细胞的比例和数量及活性对于评估机体的免疫功能非常重要。
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机体免疫状态是衡量机体是否患病的重要指标,目前多采用流式细胞术来监测机体的免疫状态,其中最重要的指标是检测T、B和NK淋巴细胞的水平。
T细胞主要包括T辅助细胞(Th)和T抑制细胞(Ts)细胞亚群。
CD3+细胞代表外周血中总的成熟T细胞,理论上应约等于CD4+细胞和CD8+细胞的总和,但往往出现CD4+加CD8+细胞之和大于CD3+,这是因为CD4+细胞包括CD3+/CD4+细胞(真正Th细胞)和CD3-CD4+细胞(非Ts细胞),而后者包括CD3-CD8+CD16+56+细胞(一部分NK细胞)和CD3-CD8+CD16+56-(未知细胞)。
由此可见,真正的TH细胞是CD3+CD4+细胞,真正Ts细胞是CD3+CD8+细胞。
尤其当患者NK细胞明显增加时,会使CD4细胞和CD8细胞的总和远大于CD3+细胞,因此,用三色荧光标记才能分析真正的辅助性T细胞和抑制性T细胞。
首先在淋巴细胞中识别出CD3细胞,然后在CD3细胞中再区分CD4+和CD8+细胞。
NK细胞的表面无T细胞和B细胞表面标志,但有CD16和CD56等标志,用CD16+56抗体能鉴定出NK细胞(一定是CD3阴性),CD3-CD16+56+细胞才是真正的NK细胞。
根据是否表达CD8,又可将NK细胞分为CD3-CD8+CD16+56+细胞(所占比例小,不影响CD8比例)和CD3-CD8-CD16+56+细胞(主要成分)。
B细胞的表面标志是CD19,理论上CD3-CD19+细胞才是真正的B淋巴细胞。
但
CD3+CD19+细胞很少,可忽略不计,所以CD19+细胞就是B淋巴细胞。
在抗肿瘤效应中,CD4和CD8分别是T淋巴细胞的辅助/诱导细胞亚群与抑制/细胞毒细胞亚群,CD4细胞的主要功能是通过其分泌的淋巴因子,增强和扩大免疫应答过程,辅助诱导其它免疫细胞如杀伤性T细胞,B细胞等共同发挥抗肿瘤作用,CD4细胞的减少,导致免疫功能低下。
CD4/CD8比值是重要的免疫状态监测指标,其比例的降低与免疫系统损害的程度相关。
CD4降低见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者;CD8降低见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病;CD4/CD8比值升高见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应、病毒感染等;CD4/CD8比值降低见于艾滋病(常小于0.5)。
监测器官移植排斥反应时,CD4/CD8比值升高预示可能发生排斥反应。
淋巴细胞担负着免疫的主要功能。
淋巴细胞亚群的测定有助于了解机体免疫状况及一些疾病的监测。
利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合,再配合多色荧光染料,通过流式细胞仪检测分析即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来,进而得到各亚群的相对比例。
最常检测的亚群包括T细胞(CD3)、B细胞(CD19)、NK细胞(CD16+56)、辅助性T细胞(CD3+CD4+)和抑制性T细胞(CD3+CD8+)等等。
(1) 应用CD3/CD19区分T淋巴细胞和B淋巴细胞
CD3是T细胞的特异性抗原,CD19则用来识别B细胞.因此应用CD3/CD19双标试剂即可以区分和鉴定T淋巴细胞和B淋巴细胞亚群;CD3、CD19阳性表达为独立的阳性细胞群体。
如出现双阳性细胞均为假象。
这样就可不用同型对照来设定阴性或阳性界线。
此外,此检测还会出现双阴性群体,这些都是NK细胞,这些细胞也提供了双阴性群体的对照。
(2) 应用CD3/CD4来鉴定CD4+T细胞
首先用CD3来区分全部T细胞.而CD3/CD4双阳性细胞为真正的辅助/诱导性T细胞,这是HIV病毒感染的主要对象;CD3-/CD4+细胞群是由单核细胞组成,这些细胞相对于CD4+和T细胞来说弱表达CD4,在光散射参数的位置分布也较广。
所以CD3/CD4抗体组合能够完全把CD4阳性辅助/诱导性T细胞区分开。
另外,应用适当的双色组合如CD4与CD29,CD4与CD45RA,也可以测定T辅助细胞的的亚群。
如CD4+2H4(CD 45RA)+细胞是Ts的诱导细胞;CD4+ 4B4 (CD29)+细胞Th的诱导细胞。
同理,•利用CD8+CD45RA和CD8+CD29+ S6F1可测定T抑制细胞的亚群。
T辅助细胞还可分成Th1、Th2两个亚群,同时标记细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4,可区分Th1细胞(CD4+/IFN-γ+)和Th2细胞(CD4+/IL-4+)。
(3)应用CD3/CD8鉴定CD8+T淋巴细胞
CD8的表达不只限于细胞毒性T细胞,此抗原在部分的NK细胞上也能检测到。
所以利用CD3抗体才能把该细胞亚群分开。
若采用三色测定可给出更为准确的各亚群的情况:如真正的T辅助细胞应是CD3+ CD4+CD8-,真正的T抑制细胞应是CD3+CD4- CD8+,单标CD8+细胞中不仅有T抑制细胞,还含有30%左右的NK细胞;而CD3+CD4-CD8-细胞群是γδT细胞,此类细胞与感染有关.CD3+CD4+ CD8-细胞+CD3+CD4-CD8+细胞+CD3+CD4-CD8-细胞
+CD3+CD4+CD8+细胞=CD3+细胞。
(4) 自然杀伤细胞(NK)的检测
①CD16(FcRⅢ)表达于大多数NK细胞上,但也表达于中性粒细胞,此抗原NK细胞的表达比较弱,并在NK 细胞活化时丢失;②CD56表达于大多数NK细胞上,也表达于一些T淋巴细胞,与CD3联合使用可以区分CD3+/CD56+T淋巴细胞和CD3-/CD56+NK细胞。
③联合使用3种抗体最完全地鉴定所有的NK细胞。
NK细胞或表达CD16,或表达CD56,但它们不表达CD3。
CD16和CD56联合使用,根据荧光强度可将NK细胞从双阴性细胞中区分出来。
这样运用该试剂组合,NK细胞可形成独立的群体与其它细胞相区分。
图1 流式分析细胞亚群
外周血是临床检验中的重要标本。
FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。
以下给出常用细胞亚群的正常范围供参考,请注意同一CD中有多种克隆的McAb,同一CD中不同McAb•所测出的数值不同,每个实验室应测定自己实验室的正常数值:
表1 人外周血各细胞亚群表面抗原和流式检测的正常参考值
细胞表面抗原细胞名称正常参考值(%)
T细胞抗原
CD2 总T细胞62.5-89.0
CD3 成熟T细胞61.1-77.0
CD4 T辅助/诱导性细胞亚群15.8-41.6
CD5 T细胞(B细胞亚群)69.5-88.0
CD8 T细胞/细胞毒性细胞亚群18.1-29.6
CD28 T细胞受体共刺激分子39.5-6408 CD8+/CD28+ 细胞毒性T细胞8.6-15.5
CD8+/CD28- T抑制性细胞9.9-24.8
CD3+/HLA-DR- 静止T细胞55.3-77.1
B细胞抗原
CD19 全部B细胞7.3-18.2
CD20 全部B细胞7.3-18.2 NK细胞抗原
CD3-/CD(16+56)+ NK细胞8.1-25.6
造血干细胞、祖细胞
CD33 粒细胞前体21.3-30.4 CD34 多能干细胞0.1-0.5
活化细胞表面抗原
CD3+/HLA-DR+ 活化T细胞 1.2-5.8 CD3-/HLA-DR+ 活化B细胞 3.0-11.7 CD3+/CD25+ 活化T细胞 1.01-2.20 CD5+/CD19+ 活化B细胞 3.1-6.6 CD69 活化诱导分子(AIM)0.8-3.5 CD38 活化T细胞42.4-60.0
免疫调节细胞
CD4+/CD29+ T辅助性细胞诱导亚群9.8-26.0 CD4+/CD45-RA+ T抑制性细胞诱导亚群15.5-25。