淋巴细胞亚群检测方案
淋巴细胞亚群测定
1检验目的检测机体细胞免疫功能的重要指标，且对某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等）的辅助诊断，分析发病机制，观察疗效及监测预后有重要意义。
2 检验方法和原理2.1 方法：流式细胞术2.2 原理：在含有准确数量荧光计数微球的试管(如BD TruCount)中，加入一定体积的抗凝血液和六色荧光素标记的单克隆抗体进行免疫荧光染色，按溶血／免洗方法进行流式细胞仪检测，以CD45／SSC设定淋巴细胞门，应用FACS Canto软件自动进行多重逻辑设门和统计分析数据，可以准确计数血液中淋巴细胞亚群的绝对数量。
3 原始样本种类3.1 样本类型：KEDTA抗凝静脉血样本。
2EDTA或肝素抗3.2 样本容器：盛放样本的容器为洁净的一次性真空采血管（K2凝）。
3.3 样本保存：抽取样本后置于加有抗凝剂（一般选择EDTA或肝素）的试管中，室温（20-25℃）保存，尽量于采血后48小时内处理样本；标记后的样本最好在24小时内完成上机检测。
4设备和试剂4.1 设备名称：BD FACS Canto II流式细胞仪型号：Canto II厂家：美国BD公司4.2 试剂4.2.1 主要试剂本实验采用BD公司的试剂。
4.2.1.1 BD MultiTEST 6-color TBNK Reagent货号：337166规格：1ml厂家：美国BD公司储存条件：2-8℃避光保存，在试剂盒标识的有效期前使用。
只有相同批号的各种成分才能相互混用。
4.2.1.2 绝对计数管（TruCOUNT Tubes）货号：340334规格：25tubes/盒厂家：美国BD公司储存条件：2-25℃避光保存，在试剂盒标识的有效期前使用。
TruCOUNT Tubes 从冰箱拿出后需平衡至室温，方可打开包装袋。
每次用前，需要检查包装袋内的干燥剂，如果由蓝色变成粉色，则TruCOUNT Tubes不能继续使用。
4.2.1.3 溶血素Lysing Solution（10X Concentrate）货号：349202规格：100mL厂家：美国BD公司储存条件：2-8℃避光保存，在试剂盒标识的有效期前使用。
细胞亚群检测实验报告
1. 了解淋巴细胞亚群检测的基本原理和方法。
2. 掌握流式细胞术在淋巴细胞亚群检测中的应用。
3. 分析实验结果，了解淋巴细胞亚群在免疫调节中的作用。
二、实验原理淋巴细胞亚群检测是利用流式细胞术对淋巴细胞进行分类、计数和功能分析的一种技术。
通过特异性抗体标记，检测淋巴细胞表面标志物，实现对不同亚群的识别。
本实验主要检测T细胞、B细胞和NK细胞亚群。
三、实验材料1. 实验试剂：抗CD3、抗CD4、抗CD8、抗CD19、抗CD16、抗CD56单克隆抗体。
2. 实验仪器：流式细胞仪、细胞培养箱、离心机、移液器等。
3. 实验样本：新鲜血液。
四、实验步骤1. 样本采集：采集受试者新鲜血液，分离外周血单个核细胞（PBMCs）。
2. 抗体标记：将分离的PBMCs与抗CD3、抗CD4、抗CD8、抗CD19、抗CD16、抗CD56单克隆抗体混合，室温孵育30分钟。
3. 洗涤：将标记好的细胞用磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）洗涤两次。
4. 流式细胞术检测：将洗涤后的细胞上流式细胞仪，进行检测和分析。
5. 数据分析：使用流式细胞术分析软件对实验数据进行处理，计算各亚群细胞比例。
五、实验结果1. T细胞亚群：CD3+T细胞占外周血淋巴细胞的50-70%，其中CD4+T细胞占CD3+T 细胞的30-45%，CD8+T细胞占CD3+T细胞的30-45%。
2. B细胞亚群：CD19+B细胞占外周血淋巴细胞的10-20%。
3. NK细胞亚群：CD16+/CD56+细胞占外周血淋巴细胞的5-15%。
1. 实验结果表明，本实验成功检测了T细胞、B细胞和NK细胞亚群，验证了流式细胞术在淋巴细胞亚群检测中的应用价值。
2. 淋巴细胞亚群在免疫调节中发挥重要作用。
CD4+T细胞具有辅助功能，参与细胞免疫和体液免疫；CD8+T细胞具有杀伤功能，直接杀伤病毒感染细胞和肿瘤细胞；B细胞产生抗体，参与体液免疫；NK细胞具有天然杀伤功能，对病毒感染细胞和肿瘤细胞具有杀伤作用。
淋巴细胞亚群检测方案
目和相对比例都在一定的范围内。
那么临床常见的淋巴细胞亚群包括哪些项目？一、淋巴细胞亚群二、抗体组合方案联合CD45的三色方案主要是有四种不同的试剂。
1.CD45/CD3/CD4这个抗体组合主要用来检测T3细胞和T4细胞。
2.CD45/CD3/CD8用来检测T3细胞和T8细胞。
3.CD45/CD3/CD19用来检测T3细胞和B细胞。
4.CD45/CD3/CD16和/或CD56用来检测T3细胞和NK细胞。
（三）双色方案如果实验室在边远的地区，条件不足，只能做双色方案，但是在双色方案中建议要把CD3加进来，因为CD45能很好地将白细胞和其他的干扰细胞，尤其是红细胞进行区分。
如果不能用CD45，最好能用到CD3，CD3可以特异的标记T淋巴细胞，T淋巴细胞和CD4做双标可以克服单一的CD4抗体。
为此，双色方案中也分为四管，每管当中建议都包含有CD3。
1.CD3/CD4用来检测T3细胞和T4细胞。
2.CD3/CD8用来检测T3细胞和T8细胞。
3.CD3/CD19用来检测T3细胞和B细胞。
4.CD3/CD16和/或CD56用来检测T3细胞和NK细胞。
尽管检测条件不允许做四色或三色的分析，但也至少要用CD3和其他的直标抗体进行双免疫荧光染色方案，不建议采用单色方案进行淋巴细胞亚群分析。
（四）7-氨基放线菌素D(7-AAD)联合CD45方案1．目的对于超过24小时的标本或肉眼观察发现已经变质的标本，需使用7-氨基放线菌素D（7-AAD）结合CD45（评估淋巴细胞、单核细胞和粒细胞死亡）复染评估细胞活力。
2.判定7-AAD荧光染料主要染活细胞，主要用来鉴定细胞活性。
（1）7-AAD阴性者是活细胞群。
（2）7-AAD阳性者为细胞膜不完整的死细胞群。
（3）7-AAD阴性细胞群阴性细胞群计数为75%时为最低细胞活力。
（4）对于细胞活力低于75%的标本，建议采用7-AAD结合CD45的方案，包括①～③的组合方案。
三、数据采集和分析（一）联合CD45和SSC设门确定淋巴细胞群方案1和方案2都存在CD45，首先建议采用联合CD45和侧向散射光SSC设门来确定淋巴细胞群。
淋巴细胞亚群检测及临床应用
一、概述
二、淋巴细胞亚群检测
1、检测原理
• 把全血加入到试剂中时，荧光标记的抗体会和白细胞表面抗原特异性结合，在采集 时，细胞通过激光束使激光散射。被染色的细胞就会发出荧光。这些被仪器检测到 的散射光和荧光信号提供了关于细胞大小、内部复杂度和相关荧光强度等信息。 BD Multitest检测试剂采用了荧光触发技术，能够直接对淋巴细胞群进行荧光设门， 以减少门中的未裂解细胞或有核红细胞带来的污染。
射光照射。于室温下(20-25℃)进行此程序操作 • 盖上管盖并轻轻混匀振荡进行混匀。室温(20-25℃)环境下避光孵育15min上
机检测。
二、淋巴细胞亚群检测
3、操作步骤-品牌B（六色淋巴细胞亚群试剂）
• 取一支 Trucounttube。用反向加样法加入50μl充分混匀的抗凝全血。注意血 不要碰到试管底部的微球( Beads)。
液时，将按钮按至第二个刻度点。释放按钮时，过量样本将被吸入吸头中。 将按钮按至第一个刻度点排出精确体积的样本，将过量样本留在吸头中。
二、淋巴细胞亚群检测
3、操作步骤-品牌B（四色淋巴细胞亚群试剂）
• 盖上管盖并轻轻混匀振荡进行混匀。在室温(20~25℃)环境下避光孵育 • 向各管中添加450μl 1× Multitest溶血素，注意：小心保护样本管，免受直
不能使用。室温保存的抗凝全血，可稳定48h;染色固定后的样本在2~8℃条 件下可稳定24h。 • 患者准备：无须特殊准备，检查对象生活饮食处于日常状态，空腹为宜， 静脉采血。
二、淋巴细胞亚群检测
3、操作步骤-品牌A
流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南
488nm的 激 发 光 源 激 发 ,最 大 发 射 波 长 分 别 为
525nm、 575nm、 670nm、
675nm和
613nm。
别 藻 青 蛋 白 (APC)的 激 发 光 源 为 630nm,最 大 发 射 波 长 为 660nm。
3.2
溶血素 使 用 与 仪 器 相 匹 配 的溶 血 素 (内 含 固定 液 ),并 严 格 按 照 使 用 说 明 和 注 意 事 项 进 行 操 作 。 如 果 使 用
FCSC Count StandardtM(Flow C~vt° metry Standards Corporaton)和
TruCountTM(Becton Ekkns° ω 等 。
4
标 本 采集 和 处理 生物 安 全 血 液 和体 液 标 本 中可 能存 在致 病 性 甚 至致 死 性 的活 体 病 原 微 生 物 ,所 有 标 本 都 应 当作 潜 在 传 染 源
3.1.2
单抗对 细胞 的反应 性
CD45表 达 于 所 有 白细 胞 ;CD3表 达 于 T淋 巴细 胞 ;CD4表 达 于 T辅 助 /诱 导 淋 巴细 胞 (CD4+T细 胞 )和 单 核 细 胞 ;CD8表 达 于 细 胞 毒 T细 胞 (CD8・ T)和 NK细 胞 ;CD19表 达 于 B淋 巴 细 胞 ;CD16表 达 于 NK细 胞 、 核 巨 噬 细 胞 、 细 胞 和 树 突 状 细 胞 等 ;CD56表 达 于 NK细 胞 和 细 胞 毒 T细 胞 。 单 粒
2
术语和定 义 下 列 术 语 和定 义适 用 于 本 文 件 。
2.1
分 化 抗 原 cIuster of differentiation,CD 活 成 不 同谱 系 细 胞 在 分 化 、 熟 、 化 过 程 中 ,出 现 或 消 失 的 细 胞 表 面 标 志 。 细 胞 表 面 标 志 通 常 用 单 克 隆抗 体 来 识 别 。每 个 抗 体 都 有 指 定 的 CD编 号 ,能 被 特 定 抗 体 识 别 的特 定 抗 原 通 常 具 有 相 同 的 编 号 ,例 ” “ ” “ 如 ,被 CD1抗 体 识 别 的抗 原 称 为 tlDl抗 原 。
淋巴细胞亚群
NK自然杀伤细胞：是一类独立的淋巴细胞群， 不表达特异性抗原识别受体。无需抗原预先致 敏即可直接杀伤某些靶细胞，包括病毒感染细 胞和突变的肿瘤细胞。 NK细胞表面标志物：CD3-/CD16+CD56+
淋 巴 细 胞 亚 群 意 义
CD3+T细胞：反映机体细胞免疫应答的能力。 CD3+CD4+T细胞：1.针对胞内寄生的病原体；2.辅 助体液免疫应答。 CD3+CD8+T细胞：主要杀伤病毒、某些胞内寄生菌 的宿主细胞、肿瘤细胞等。 CD19+B细胞：反应机体体液免疫应答的能力。 NK细胞：非特异性杀伤肿瘤细胞、病毒或细菌感染的 细胞。
T淋巴细胞亚群临床意义
CD3+降低：见于自身免疫性疾病，如SLE、类风湿关节炎 等。 CD3+增高：T系淋巴细胞白血病，重症肌无力，慢性活动性 肝炎等 。 CD4+降低：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、 应用免疫抑制剂者。 CD8+降低：见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病。 CD8+增高：多见于病毒感染，如HBV、HCMV、EB等。 CD4+/CD8+比值增高：自身免疫性疾病、病毒性感染、变 态反应等。 CD4+/CD8+比值减低：见于艾滋病(常<0.5)，恶性肿瘤进行 期和复发时。
TH1和TH2细胞之间相互牵制，各自分泌的细 胞因子可对对方起负反馈调节作用。
Th1细胞介导的细胞免疫效应
Th2辅助体液免疫应答的机制
CD3+CD8+杀伤T细胞
CD8+T细胞又称细胞毒性T细胞，Tc或CTL，它在T 细胞免疫应答中发挥重要功能。 CTL主要杀伤胞内寄生病原体（病毒、某些胞内寄生 菌等）的宿主细胞、肿瘤细胞。
淋巴细胞亚群检测五项解读
淋巴细胞亚群检测五项解读
淋巴细胞亚群检测，是一种检测人体免疫系统活动的实验方法，主要用于诊断感染性疾病，判断炎症反应和抗原抗体的变化情况。
检测时，将血液样本中的淋巴细胞按照不同形态特征进行分类，如：B细胞、T细胞、自然杀伤细胞、单核细胞等，从而了解患者的免疫状态，进而更好地诊断和治疗疾病。
淋巴细胞亚群检测五项解读：
1）B细胞比例：B细胞是淋巴细胞的主要组成部分，可以产生抗原抗体，从而帮助抗击外界病原体的侵袭。
正常情况下，B细胞比例多在20%~30%之间。
2）T细胞比例：T细胞主要负责维持人体的免疫平衡，其中CD4+T细胞和CD8+T细胞是T细胞的重要组成部分，正常情况下，CD4+T细胞比例在40%~50%之间，CD8+T 细胞比例在20%~30%之间。
3）自然杀伤细胞比例：自然杀伤细胞（NK细胞）是免疫系统的重要组成部分，可以有效抑制病毒感染和恶性肿瘤的生长。
正常情况下，NK细胞比例多在15%~20%之间。
4）单核细胞比例：单核细胞也是淋巴细胞的一种，可以促进炎症反应，也可以抑制炎症反应。
正常情况下，单核细胞比例多在3%~7%之间。
5）淋巴细胞比例：淋巴细胞比例反映着人体免疫系统的活动情况，正常情况下，淋巴细胞比例多在25%~45%之间。
淋巴细胞亚群流式
淋巴细胞亚群流式
淋巴细胞亚群流式是一种通过流式细胞术检测淋巴细胞亚群的方法。
流式细胞术是一种用于分析细胞特性和功能的生物技术，通过将单个细胞与特异性抗体结合，对细胞表面和内部标记物进行定量和定性分析。
在淋巴细胞亚群流式中，通过使用特异性抗体标记不同的淋巴细胞亚群，如T细胞、B细胞、NK细胞等，然后利用流式细胞仪对标记后的细胞进行快速分析和计数。
这种方法可以获得淋巴细胞亚群的相对百分比和绝对值，从而评估机体的免疫状态。
淋巴细胞亚群流式在临床诊治中发挥了重要作用。
例如，在白血病诊断和治疗中，通过监测异常淋巴细胞亚群及绝对计数结果，可以为临床初步判断信息提供依据。
同时，在诊疗阶段，更为明确的白血病分型及MRD监测有助于为治疗方案选择、临床疗效分析、预后判断、复发监测等方面提供更加精准的医学决策支持。
此外，在免疫重建过程中，多参数流式细胞术结果对于及时评价患者的细胞免疫功能，指导免疫抑制剂等药品的使用种类和剂量等方面均具有重要价值。
需要注意的是，临床检测都有标准化的检测方案，可以直接上机调用建立好的内置模板，使用比较方便。
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目和相对比例都在一定的范围内。
那么临床常见的淋巴细胞亚群包括哪些项
目？
一、淋巴细胞亚群
二、抗体组合方案
联合CD45的三色方案主要是有四种不同的试剂。
1.CD45/CD3/CD4
这个抗体组合主要用来检测T3细胞和T4细胞。
2.CD45/CD3/CD8
用来检测T3细胞和T8细胞。
3.CD45/CD3/CD19
用来检测T3细胞和B细胞。
4.CD45/CD3/CD16和/或CD56
用来检测T3细胞和NK细胞。
（三）双色方案
如果实验室在边远的地区，条件不足，只能做双色方案，但是在双色方案中建议要把CD3加进来，因为CD45能很好地将白细胞和其他的干扰细胞，尤其是红细胞进行区分。
如果不能用CD45，最好能用到
CD3，CD3可以特异的标记T淋巴细胞，T淋巴细胞和CD4做双标可以克服单一的CD4抗体。
为此，双色方案中也分为四管，每管当中建议都包含有CD3。
1.CD3/CD4
用来检测T3细胞和T4细胞。
2.CD3/CD8
用来检测T3细胞和T8细胞。
3.CD3/CD19
用来检测T3细胞和B细胞。
4.CD3/CD16和/或CD56
用来检测T3细胞和NK细胞。
尽管检测条件不允许做四色或三色的分析，但也至少要用CD3和其他的直标抗体进行双免疫荧光染色方案，不建议采用单色方案进行淋巴细胞亚群分析。
（四）7-氨基放线菌素D(7-AAD)联合CD45方案
1．目的
对于超过24小时的标本或肉眼观察发现已经变质的标本，需使用7-氨基放线菌素D（7-AAD）结合
CD45（评估淋巴细胞、单核细胞和粒细胞死亡）复染评估细胞活力。
2.判定
7-AAD荧光染料主要染活细胞，主要用来鉴定细胞活性。
（1）7-AAD阴性者是活细胞群。
（2）7-AAD阳性者为细胞膜不完整的死细胞群。
（3）7-AAD阴性细胞群阴性细胞群计数为75%时为最低细胞活力。
（4）对于细胞活力低于75%的标本，建议采用7-AAD结合CD45的方案，包括①～③的组合方案。
三、数据采集和分析
（一）联合CD45和SSC设门确定淋巴细胞群
方案1和方案2都存在CD45，首先建议采用联合CD45和侧向散射光SSC设门来确定淋巴细胞群。
它是准确分析淋巴细胞亚群的第一步，可以用于来定位淋巴细胞群，把淋巴细胞群找到，排除标本中非淋巴细胞或细胞碎片的干扰。
首先在CD45/SSC散点图中，调整SSC，使所有白细胞群均可见。
第二步是根据CD45强阳性细胞群设门或者划定区域。
因为在CD45染色细胞中，淋巴细胞群呈现CD45强阳性和SSC弱表达。
设门时尽可能包括所有淋巴细胞，仪器会给一个提示，一共是包括了多少淋巴细胞数。
一般门内淋巴细胞数不低于95%，而且要排除单核细胞和嗜碱细胞的感染，因为单核和嗜碱在周围，很容易对淋巴细胞进行干扰。
单核细胞的CD45呈弱表达，而SSC呈中等强度表达。
嗜碱性粒细胞的CD45和SSC均为低表达。
如果不能确定标记的淋巴细胞群是否被设门设的比较准确，里面是否含有其他细胞的干扰，还有一个办法就是将CD3/SSC、CD19/SSC以及 CD56或CD（16+56）/SSC中T细胞、B细胞和NK细胞的分布特征筛选出来，并在CD45/SSC双参数散点图中显示，以监测设门的准确性。
当设门准确了，准确的找到淋巴细胞后，才能采集细胞数。
第三步，采集细胞数。
非设门荧光散点图中，每一荧光通道至少收集5000个淋巴细胞，以确保对数量较少的淋巴细胞亚群（如占总淋巴细胞数的10%）提供足够量的细胞。
从上面的图片上可以看到，图形中画黑框、标记是紫色的细胞是淋巴细胞群，在它的上方是单核细胞，用红颜色标记，嗜碱性细胞CD45和SSC的表达较低，用粉颜色标记的。
（二）淋巴细胞亚群分析和相对计数
首先在亚群分析时设置几个散点图：CD3/CD4散点图、CD3/CD8散点图、CD3/CD19散点图、CD3/CD56或CD（16+56）散点图。
散点图设置完后，在每一个荧光散点图中再设一个四象限门，将CD45/SSC散点图中
选定的淋巴细胞群中的表达该抗原的阴性细胞群和阳性细胞群区分开来。
第三步，进行淋巴细胞亚群计数。
T4细胞的计数，一般先得到一
个相对计数，也称为百分比，比如CD3/CD4散点图中CD3+CD4+细胞群占
CD45/SSC散点图中选定淋巴细胞群的百分比，这叫做T4细胞的相对计
数百分率。
它占的是前一个散点图，在第一次设门的散定图中淋巴细
胞的百分率。
T8细胞相对计数是CD3/CD8散点图中CD3+CD8+细胞群占
CD45/SSC散点图中选定淋巴细胞群的百分比。
B淋巴细胞计数是
CD3/CD19散点图中CD3-CD19+细胞群占CD45/SSC散点图中选定淋巴细胞
群的百分比。
NK细胞相对计数是为CD3/CD56或CD（16+56）散点图中
CD3-CD56+细胞群或CD3-CD（16+56） +占CD45/SSC散点图中选定淋巴细
胞群的百分比。
T3细胞的百分率在四个散点图中都可以计数，因为每一个散点图中都含有CD3的标记。
在CD3/CD4散点图中，计数为CD3+CD4-单阳性细胞群百分比和CD3+CD4+双阳性细胞群百分比的总和。
在CD3/CD8散点图中也一样，计数为CD3+CD8-单阳性细胞群百分比和CD3+CD8+双阳性细胞群百分比的总和。
在CD3/CD19散点图中，计数为CD3+CD19-细胞群百分比。
在CD3/CD56或CD3/CD（16+56）散点图中，计数为CD3+CD56-或
CD3-CD（16+56）-百分比和CD3+CD56+或CD3+CD（16+56）+百分比的总和。
（三）淋巴细胞亚群的绝对计数
根据淋巴细胞亚群相对计数结果，对于绝对计数来讲，通常有两种绝对计数的方法，一个是单平台法，一个是双平台法。
单平台方法是采用了一个内部的计数，计数的微球。
所有的数据都可以从流式细胞仪这一台仪器检测到，由专用软件直接计算生成，具体操作可以试剂操作说明书。
双平台方法，白细胞计数需要与亚群分析使用同一标本进行测试，并在6个小时内完成。
当白细胞计数不能准确获得时，不能用DP方法进行淋巴细胞绝对计数，只能采用SP方法。
不能采用淋巴细胞计数来计算淋巴细胞亚群绝对计数。
因为淋巴细胞计数在血细胞分析仪上表现出更大变异度，白细胞计数作为分母比淋巴细胞计数更为稳定。
（四）数据分析可靠性的验证
1. CD45
在有些验证中要采用CD45，CD45在三色和四色抗体组合方案的每一标本管中均存在，这样它既可以对淋巴细胞群进行设门，因为它在每一管中都存在，也可以根据CD45表达情况和图形分布情况检测和评估样本管间的变异，所以这是一个很好的一个验证方法。
重复结果间的差异如果大于（ ）说明样本管间的变异较大四、对照
那么为什么需要进行调整荧光补偿？
五、调整荧光补偿
调整的方式有手工的方式，还有软件自动补偿方式。
（三）补偿试剂的选择
1.一般选择与最强荧光信号相匹配的补偿试剂。
2. 三色抗体组合分析
三色抗体组合分析时要通过含有荧光微球或细胞补偿颗粒的4个单标记样本管来调整补偿。
第一管是无直标抗体标本管，只有标本没有抗体。
第二管是仅含有FITC直标抗体的阳性标本管。
第三管是仅含PE直标抗体的阳性标本管。
第四管是仅含第三种直标抗体的阳性标本管。
3.四色抗体组合分析
可以在三色抗体组合的基础上再加上一管，也就是第五个管子，第五管是仅含有第四种直标抗体阳性标本管。
（四）荧光补偿顺序
1.三色组合方案
依次是FITC、PE和第三种荧光。
先做FITC，然后PE，再做第三种荧光。
补偿达到一个理想状态是将不应该是两种荧光抗体双阳性的细胞群调整到相应的直角荧光象限中，使双阳象限中无荧光重叠。
要避免过度补偿，以防将双阳性细胞错误地识别为单阳性细胞。
2.四色组合方案
一般试剂说明书有一个很好的说明，可以按照说明书进行执行，要注意避免过度补偿。
六、结果报告和审核
（一）临床报告的内容
对于淋巴细胞亚群所出的临床报告，一般有以下几个内容：T3细胞相对计数(百分比)/绝对计数(绝对值)、T4细胞相对计数(百分比)/绝对计数(绝对值)、T8细胞相对计数(百分比)/绝对计数(绝对值)、B细胞相对计数(百分比)/绝对计数(绝对值)、NK细胞相对计数(百分比)/绝对计数(绝对值) 、T4/T8比值、参考范围、必要的解释和分析。
（二）审核内容
审核的内容包括有数据采集阈值的设定、采集细胞数和微粒数、散射光模式、抗体组合方案，与试剂结果相关的所有设门。
在发出报告之前，要把这些方面的内容都进行一个审核，审核确认无误后才能将结果发放给临床。
七、储存
（一）采用列表模式储存标本数据
数据在储存方面也有一定的要求，要把所有的原始数据进行储存，所以一般采用的是列表模式，储存标本数据，以确保对原始数据进行全面分析。
八、质量控制
胞和CD8。