实验性毕业论文范例修订稿
实验性论文格式模板

实验性论文格式模板【篇一:实验型论文的一般格式】实验型论文的一般格式前置部分主体部分前言正文结论一、题目1、题名全文内容的高度概括,是读者了解全文的窗口写作原则突出主题突出具有创新和特色之处,使读者一目了然准确具体确切恰如其分地反映研究的范围和深度,从题目可大体了解内容忌:抽象、笼统、小题大做等题目太大、范围过宽属于小题大做,要做到范围明确,内容具体间断精炼(一般20字左右,不超过30字)语言必须高度概括,反复推敲,简明扼要标题中少用“??的探讨”、“??的研究”、“??的观察”等非特定词尽量不用“漫谈”、“浅谈”、“试论”等没有特色的词检索性强2、拟题方法包括三要素三要素:研究方法、研究对象、研究目的如《遥测法研究户外冬眠刺猬体温变化》片名拟题注意事项避免使用非公认的缩略词数字一般用阿拉伯数字,但作为名词或形容词除外。
如“十二指场”“12指肠”??二、作者署名是学术论文的必要组成部分包括姓名、单位、所在地、邮编等避免同名同姓署名的意义1、署名事关学术和法律责任、著作权、版权等2、便于读者作者通信3、对作者劳动的肯定4、作为检索途径满足文献检索的需要署名的条件自始自终参与论文全部或部分研究工作和写作过程,能对论文内容复责并具有答辩能力合作完成成果,按照贡献的大小顺序署名。
署名人对本人所贡献部分负责,发表前应由本人审阅并署名区别具有实质性贡献的作者署名的形式和方法集体署名第一作者、并列第一作者个人署名署名的方法因不同杂志二有区别署名注意事项1、署名不应太多三、摘要对论文内容不加注释和评论的高度概括和简练的陈述作用快速查询和阅读便于文摘检索刊物的编制和应用便于计算机文献数据库的建立和检索对论文的初步评价要求完整性包含研究目的、内容、方法、结果等自明性独立性简洁性类型与写法1、报道性摘要(资料性、信息性摘要)按照研究目的、方法、结果和结论顺序写作2、指示性摘要3、报道_指示性摘要4、结构式摘要写摘要注意事项在全文完稿后,仔细思考后写如实、高度浓缩不要简单重复题目已有的信息,不要将本专业已成常识的内容写进摘呀一般用第三人称城市,“对??进行了研究”,不用“本人”“我们”等,表客观不分段不用公式四、关键词特点1、代表性一组关键词变成浓缩的摘要2、检索性3、专指性关键词意义单一,指向性和特异性强各个关键词都从一个侧面反映论文的中心内容,读者可从不同角度了解论文的内容通过关键词查阅到所需文献,而少检出不需要的文献4、关键性作用1、便于读者快速了解论文主题和中心内容2、便于编制索引3、便于二次文献检索刊物和计算机数据库收录和检出文献适应信息时代的需要标明关键词利于论文的收录率、检出率标引反方法1、根据论文主题数量适当,过多或过失影响文献的检出率和检准率注意事项1、表示化学物质的用名称不用结构式2、论文中提到的常规技术,未进一步探讨时不能【篇二:学术论文格式模板完全版】城市邮编(四要素缺一不可)等。
毕业论文实验方案模板

毕业论文实验方案模板一、实验目的。
本实验旨在验证某某理论的有效性,通过实验数据的收集和分析,来论证该理论在实际应用中的可行性和有效性。
二、实验原理。
实验将采用某某方法进行数据采集和处理,结合某某技术手段,通过对比实验组和对照组的数据,来验证理论的有效性。
三、实验材料。
1. 实验设备,某某设备一台、某某仪器一套。
2. 实验试剂,某某试剂若干。
3. 实验样本,某某样本一批。
四、实验步骤。
1. 实验前准备,根据实验要求,准备好实验设备、试剂和样本。
2. 实验操作,按照实验步骤进行操作,保证实验的准确性和可重复性。
3. 数据采集,记录实验过程中的数据,并进行分析和整理。
4. 结果对比,对比实验组和对照组的数据,进行统计分析。
5. 结论总结,根据实验结果,得出结论并进行总结。
五、实验注意事项。
1. 实验过程中要注意安全,严格遵守实验室操作规程。
2. 实验数据采集要准确无误,避免人为误差的影响。
3. 实验过程中要保持实验环境的稳定性,避免外界因素的干扰。
4. 实验结束后,要及时清理实验设备和实验环境,做好实验记录和数据保存工作。
六、实验结果分析。
通过实验数据的分析,可以得出某某理论在实际应用中的有效性,并对实验结果进行合理解释和论证。
七、实验结论。
本实验结果表明某某理论在实际应用中具有一定的可行性和有效性,为相关领域的理论研究提供了一定的参考价值。
八、参考文献。
1. 某某著,某某,某某出版社,2000年。
2. 某某著,某某,某某出版社,2005年。
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论文实验方案模板范文一、引言本部分简要介绍研究背景和选题意义,阐明研究目的和意图,说明实验方案的设计意义和价值。
二、研究背景本部分概述相关研究现状和领域进展,说明该研究课题的重要性和紧迫性,挖掘已有研究存在的不足之处,提出研究动机。
三、研究目的与内容本部分明确研究的总目标并划定具体的研究内容和范围,阐明研究的重点和难点。
四、研究方法与流程4.1 研究方法本部分详细描述研究采用的方法论和理论基础,包括实证分析、实验研究、案例分析等具体方法。
4.2 实验流程本部分列出研究的实验步骤和流程,描述各项实验操作及其对应的理论依据。
五、实验设计5.1 实验对象本部分明确实验所涉及的对象范围和特征,对实验对象进行细致的描述。
5.2 实验变量本部分列出所有可能影响实验结果的变量,包括独立变量和因变量。
5.3 实验组设计本部分描述实验组的设置和分组方法,确保实验的可比性和结果的可信度。
六、数据采集与处理6.1 数据采集方法本部分说明数据采集的具体手段和工具,描述数据来源和获取途径。
6.2 数据处理方法本部分介绍对采集到的数据进行处理和分析的具体方法和步骤,确保数据的准确性和可靠性。
七、实验结果分析本部分将研究结果进行统计分析和解读,验证实验假设,给出结论和建议。
八、结论与展望本部分总结全文的研究内容和论证过程,提出研究的不足和展望未来研究方向。
参考文献[1] 作者1,作者2. (年份). 文章标题. 期刊名称, 卷号(期号), 页码.[2] 作者3,作者4. (年份). 文章标题. 会议名称, 页码.以上就是关于论文实验方案模板范文的详细介绍,希望对您的实验方案设计有所帮助。
实验论文范文

沈阳药科大学毕业设计(论文)苦参碱缓释微球的制备学生姓名指导教师专业学院2011年0 月日Graduation Project (Thesis)Shenyang Pharmaceutical UniversityPreparation of Matrine Sustained-ReleaseMicrospheresStudentSupervisorSpecialtySchool2009-06- 01毕业设计(论文)任务书毕业设计(论文)审阅评语毕业设计(论文)审阅评语毕业设计(论文)答辩评语摘要利用海藻酸钠溶液与氯化钙溶液发生沉淀反应,采用滴制法制备海藻酸钠微球,可以提高药物的生物利用度,增强药物的稳定性及临床疗效,达到缓释作用和靶向作用,从而控释药物,实现靶向和定位给药,减少给药次数,减轻或消除毒副作用。
以微球的基本药剂学性质(形态、粒径及其分布;药物的含量;药物的载药量与包封率;药物的释放速率)为指标,筛选出符合微球质量要求的最佳处方。
采用紫外分光光度法建立了缓释微球中苦参碱含量测定的方法,方法操作简便,重复性好。
同时建立了苦参碱缓释微球溶出度测定的方法。
关键词:苦参碱;海藻酸钠;微球;缓释制剂AbstractCa-alginate gel microspheres were prepared by dropping Na-alginate solution into CaCl2 solution.It can enhance the bioavailability. The medicine's stability and the clinical effect were enhanced.It achieved the slow release function and the function of controlling the release of the medicine,which can realize the target to give the medicine with the localization, reduce the medicine of number of times, reduce or eliminate the poisonous side effect. The basic prescription and preparation was designed by the study about formulation screening and optimization, based on the pharmacy rule ( appearance, size and disposition, content, envelop rate of drug and drug release-rate )as indicator and the stability maintaining of Matrine Ultraviolet spectrophotometry was used in quality criteria research of Matrine which has simple method of operation and good reproducibility as well as the method to determine the dissolution of Matrine.KEY WORDS :Matrine ;sodium polymannuronate;microspheres;sustained-release preparation目录摘要 (I)Abstract (II)1绪论 (1)1.1缓释制剂的研究与应用 (1)1.2缓释制剂研究进展 (2)1.2.1口服缓控释给药系统 (2)1.3微球制剂进展 (6)1.3.1制备方法多样 (6)1.3.2局麻药实现长效缓释 (7)1.3.3眼用微球制剂受肯定 (7)1.3.4微球制剂抗癌研究进展迅速 (8)1.4海藻酸钠概述 (8)1.4.1海藻酸盐来源 (8)1.4.2海藻酸钠的化学性质 (9)1.4.3性状 (9)1.4.4黏性 (9)1.4.5溶解性 (10)1.4.6稳定性 (10)1.4.7缓释作用 (10)1.5苦参碱概述 (10)1.5.1来源 (10)1.5.2理化性质 (11)1.5.3药理作用 (11)1.5.4临床应用 (11)1.5.5展望 (11)1.6本课题的来源及研究的目的意义 (12)1.6.1本课题来源 (12)1.6.2研究的目的意义 (12)2实验部分 (13)2.1药品与仪器 (13)2.1.1实验药品 (13)2.1.2实验仪器 (13)2.1.3其他 (13)2.2苦参碱缓释微球的制备 (13)2.2.1苦参碱缓释微球的制备工艺过程 (14)2.2.2讨论 (14)2.3苦参碱缓释微球质量评价 (15)2.3.1含量测定标准曲线的建立 (15)2.3.2回收率试验 (16)2.3.3微球中苦参碱的含量测定 (16)2.3.4溶出度的测定 (17)2.3.5讨论 (17)结论 (19)参考文献 (20)致谢 (22)附录 (23)1绪论1.1缓释制剂的研究与应用缓释制剂系指用药后能在较长时间内持续释放药物以达到长效作用的制剂。
实验性毕业论文范例终审稿)

实验性毕业论文范例文稿归稿存档编号:[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-学号:泰山医学院毕业设计(论文)题目:蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞凋亡机制的研究院(部)系药学院所学专业药学年级、班级完成人姓名指导教师姓名专业技术职称2013年 6 月 18 日论文原创性保证书我保证所提交的论文都是自己独立完成,如有抄袭、剽窃、雷同等现象,愿承担相应后果,接受学校的处理。
专业:班级:签名:20 年月日摘 要目的 观察蜂胶黄酮对过氧化氢(H 2O 2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC 12)凋亡的影响及机制。
方法 培养PC 12细胞,取对数生长期细胞分为五组,空白对照组、模型组、蜂胶黄酮高、中、低剂量组,剂量分别为200mg/L 、100 mg/L 、50 mg/L.药物预处理2h 后,孵育H 2O 2(140μmol/L)24h 诱导过氧化损伤。
TUNEL 试剂盒检测原位细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞内活性氧水平以及细胞周期,ELISA 检测细胞内Caspase-3蛋白含量。
结果 TUNEL 细胞凋亡染色显示, H 2O 2组与空白对照组比较染色明显加深,而蜂胶黄酮组染色明显变浅,说明蜂胶黄酮能对抗H 2O 2诱导细胞凋亡;周期结果显示H 2O 2组处于G0/G1细胞明显增多,而处于G2/M 、S 期细胞明显减少,细胞增殖降低,而蜂胶黄酮增加S 期细胞促进细胞增殖;与空白对照组相比H 2O 2组活性氧水平、细胞内Caspase-3含量明显增高,而蜂胶黄酮各剂量组活性氧水平降低,Caspase-3含量减少。
结论 蜂胶黄酮对H 2O 2诱发PC 12神经细胞凋亡有显着的抑制作用,其机制可能其影响细胞周期、清除氧自由基、降低凋亡因子Caspase-3有关。
关键词 蜂胶黄酮;PC 12细胞;H 2O 2;Caspase-3;细胞凋亡AbstractObjective :To observe the protection ofpropolis flavonoidson rat with injuried pheochromocytomacells(PC 12) induced by?hydrogen peroxide(H 2O 2) and to explore its possible mechanism.Methods:Culture?PC 12 cells,the cells inthe logarithmic growth phase weredivided into five groups,blank control group,model group,propolis flavoneof high,medium and low dose group,the dose of 200mg/L,100 mg/L,50 mg/L.After 2h 0fPharmacological preconditioning,the cellswere incubated with H 2O 2(140 μ mol/L)for24hto induceoxidative damage.TUNEL Kitis used fordetermining Cell apoptosis,Flow cytometry was used to detect the intracellular ROS level and cell cycle,ELISA is used for determining the concentration of protein Caspase-3 in cells.Results:Apoptosis of TUNEL cells staining, H 2O 2 group compared with the control group, staining was deepened, and the propolis flavone group was significantly lighter, that propolis flavonoids can antagonize the apoptosis induced by H 2O 2 Cycle showed that H 2O 2 group in G0/G1 cells were increased, and in the G2/M,S phase cells decreased significantly, reduced cell proliferation, and propolis flavonoids increased S phase cells promoting cell proliferation; compared with the blank control group, caspase-3 in H 2O 2group, the levels of reactive oxygen species in cells increased significantly, while the propolis flavone in all dose groups decrease the levels of reactive oxygen species, reduced caspase-3 content.Conclusion : Propolis flavonoids on H 2O 2-induced PC 12 cells damage a significant protective effect,The mechanism may be its effect on cell cycle, scavenging oxygen free radicals, decrease the apoptosis related factor caspase-3.Key words : Propolis; flavonoids; PC 12 cells; H 2O 2; apoptosis目录正文 (01)1前言 (01)2仪器与试剂 (01)3实验方法 (02)3.1 蜂胶总黄酮的提取与含量测定 (02)3.2 PC细胞的培养及分组给12药 (02)3.3 TUNEL细胞凋亡原位检测 (02)3.4流式细胞仪检测细胞周期 (02)3.5流式细胞仪检测细胞内活性氧水平 (03)3.6 ELISA试剂盒检测细胞内Caspase-3蛋白含量 (03)4实验结果 (03)4.1 TUNEL细胞凋亡原位检测 (03)4.2流式细胞仪检测细胞周期 (04)4.3流式细胞仪检测细胞活性氧水平 (05)4.4 ELISA检测细胞内Caspase-3蛋白含量 (06)5讨论 (07)6结论 (08)参考文献 (09)文献综述 (10)致谢 (15)蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞凋亡机制的研究学生:*** 指导教师:***(泰山医学院药学院,泰安 271016)1 前言老年性痴呆 (Alzheimer′s disease, AD) 是一种以进行性认知功能障碍和记忆能力受损为主的中枢神经系统退行性疾病。
创新实验论文正文

郑重声明本人的毕业论文是在指导教师董春华老师的指导下独立撰写完成的。
如有剽窃、抄袭、造假等违反学术道德、学术规范和侵权的行为,本人愿意承担由此产生的各种后果,直至法律责任,并愿意通过网络接受公众的监督。
特此郑重声明。
毕业论文作者(签名):年月日摘要本文主要叙述了5-甲基苯并三氮唑-1-乙酸配体的合成和表征。
实验过程采用5-甲基苯并三氮唑在碱性条件下,使其与氯乙酸反应合成5甲基苯并三氮唑-1-乙酸配体。
通过熔点测定、红外光谱、紫外光谱等手段对配体进行表征。
此实验结果可为稀土发光材料的配体合成提供理论依据。
关键词5-甲基苯并三氮唑氯乙酸5-甲基苯并三氮唑-1-乙酸发光材料Synthesis and characterization of 5-methyl benzotriazole-1-acetic acid ligandCao Minglu Directed by Lecture Dong Chun-hua Abstract This paper mainly describes the synthesis and characterization about 5-methyl benzotriazole-1-acetic acid ligand. The experiment process using 5-methyl benzotriazole in alkaline conditions, make its with chloroactic acid reaction synthesis 5-methyl benzotriazole-1-acetic ligand. The ligand was characterized by melting test, infrared spectra and ultraviolet spectra. The experiment provides some theoretical basis for ligand of rare earth luminescent materials.Key words5-methyl benzotriazole acetic acid5-methyl benzotriazole-1-acetic acid luminescent materials目录摘要 (I)关键词 (I)ABSTRACT (II)1引言 (4)1.15-甲基苯并三氮唑的概述和发展前景 (4)1.2芳香羧酸类配体的研究与进展 (4)1.3本文的研究目的及内容 (4)2实验部分 (5)2.1主要试剂及仪器 (5)2.2实验步骤 (5)2.2.1 配体的合成 (5)2.2.2 配体及配合物的表征 (7)3结果与讨论 (8)3.1配体及配合物的合成 (8)3.2配体及配合物的表征 (9)3.2.1 5-甲基苯并三氮唑和5-甲基苯并三氮唑-1-乙酸熔程的测定 (9)3.2.1.1 5-甲基苯并三氮唑熔程的测定 (9)3.2.1.2 5-甲基苯并三氮唑-1-乙酸配体熔程的测定 (9)3.2.6红外光谱测试 (14)4结语 (17)参考文献 (17)致谢 (20)5-甲基苯并三唑-1-乙酸配体的合成及表征1引言我国稀土资源丰富,开发稀土功能材料一直是一个重要的研究领域。
玉米脱粒机毕业设计毕业论文修订版

玉米脱粒机毕业设计毕业论文修订版一、设计目标和背景玉米脱粒机是农业机械装备中的重要一环,它的设计目标是提高玉米脱粒的效率,减少能源的消耗,降低对环境的污染,同时保证玉米颗粒的完整性和质量。
本文所修订的玉米脱粒机设计将结合当前农业生产的实际需求和技术要求来进行设计。
二、设计原理和结构玉米脱粒机的设计原理是通过推动玉米穗的旋转运动,使玉米粒子与秸秆分离。
脱粒机的结构主要由机架、输送机、排渣装置和脱粒装置组成。
脱粒装置采用圆筒形结构,内部装有刀片和凸轮,通过刀片和凸轮的协同运动,将玉米粒子与秸秆进行有效分离。
排渣装置用于将脱粒后的秸秆排除,以便下一步的加工。
三、参数计算和优化设计根据实际农业生产的需求,需要对玉米脱粒机的一些参数进行计算和优化设计。
例如,对于脱粒装置的刀片和凸轮的形状和尺寸,需要考虑玉米粒子和秸秆的大小和硬度,以及机器的功率和转速。
通过计算和模拟,可以得到最佳的设计参数,以提高脱粒效率和降低能源消耗。
四、实验验证和性能评估为了验证所设计的玉米脱粒机的性能,需要进行实验验证和性能评估。
实验的内容包括脱粒效率、能源消耗和玉米颗粒的完整性等方面的评估。
通过实验和性能评估的结果,可以对所设计的玉米脱粒机进行优化和改进,以满足实际生产的需求。
五、结论和展望通过对玉米脱粒机的修订版设计,可以提高玉米脱粒的效率,减少能源的消耗,并保证玉米颗粒的完整性和质量。
然而,目前的设计还存在一些问题,如机器的稳定性和可靠性需要进一步改进。
未来的研究可以以此为基础,进一步完善玉米脱粒机的设计,并探索更加先进的玉米脱粒技术。
综上所述,本文对玉米脱粒机进行了修订版设计,完善了其结构和性能,并提出了进一步改进的展望。
通过实际应用和进一步的研究,相信该设计可以在农业生产中发挥重要的作用。
实验性研究的论文范文

实验性研究的论文范文实验性研究论文范文,影响音乐对学习记忆的实验研究。
摘要,本研究旨在探讨音乐对学习记忆的影响。
通过实验方法,我们对参与者进行了学习记忆任务,并在学习过程中加入了音乐干扰。
结果表明,音乐对学习记忆有一定的影响,但具体影响因素还需进一步研究。
关键词,音乐;学习记忆;实验研究。
引言。
音乐作为一种艺术形式,对人们的情绪、认知和行为等方面都有一定的影响。
在学习记忆领域,有研究表明音乐可以帮助人们提高学习效率和记忆能力,但也有研究认为音乐会干扰学习过程。
因此,本研究旨在通过实验方法,探讨音乐对学习记忆的影响,以期为相关领域提供一定的参考和借鉴。
方法。
参与者,本实验共招募了60名大学生作为参与者,均为右利手,无听觉或认知障碍。
材料,实验材料包括学习材料和音乐材料。
学习材料为一份包含20个单词的列表,参与者需在规定时间内记忆这些单词。
音乐材料为一段轻音乐,时长为5分钟。
程序,实验分为两组,分别为音乐组和非音乐组。
音乐组在学习过程中播放轻音乐,非音乐组在学习过程中无音乐干扰。
每组均进行了两次学习记忆任务,间隔时间为一周。
在每次任务开始前,参与者需填写一份情绪问卷,以控制情绪对学习记忆的影响。
结果。
本研究结果显示,音乐组的学习记忆成绩略低于非音乐组,但差异不显著。
在情绪问卷方面,音乐组的情绪评分略高于非音乐组,但差异也不显著。
另外,两组在两次任务中的成绩均有一定的提升,但提升幅度较小。
讨论。
本研究结果表明,音乐对学习记忆有一定的影响,但具体影响因素还需进一步研究。
可能是因为音乐干扰了参与者的注意力,导致学习效率降低。
另外,情绪对学习记忆也有一定的影响,音乐可能通过调节情绪来影响学习记忆。
但本研究样本量较小,实验设计也有一定的局限性,因此结果还需谨慎解释。
结论。
本研究通过实验方法探讨了音乐对学习记忆的影响,结果显示音乐对学习记忆有一定的影响,但具体影响因素还需进一步研究。
未来可以通过扩大样本量、改进实验设计等方式来深入探讨音乐对学习记忆的影响机制。
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实验性毕业论文范例 WEIHUA system office room 【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-学号:泰山医学院毕业设计(论文)题目:蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞凋亡机制的研究院(部)系药学院所学专业药学年级、班级完成人姓名指导教师姓名专业技术职称2013年 6 月 18 日论文原创性保证书我保证所提交的论文都是自己独立完成,如有抄袭、剽窃、雷同等现象,愿承担相应后果,接受学校的处理。
专业:班级:签名:20 年月日摘要目的观察蜂胶黄酮对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡的影响及机制。
方法培养PC12细胞,取对数生长期细胞分为五组,空白对照组、模型组、蜂胶黄酮高、中、低剂量组,剂量分别为200mg/L、100 mg/L、50 mg/L.药物预处理2h后,孵育H2O2(140μmol/L)24h诱导过氧化损伤。
TUNEL试剂盒检测原位细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞内活性氧水平以及细胞周期,ELISA检测细胞内Caspase-3蛋白含量。
结果TUNEL细胞凋亡染色显示, H2O2组与空白对照组比较染色明显加深,而蜂胶黄酮组染色明显变浅,说明蜂胶黄酮能对抗H2O2诱导细胞凋亡;周期结果显示H2O2组处于G0/G1细胞明显增多,而处于G2/M、S期细胞明显减少,细胞增殖降低,而蜂胶黄酮增加S期细胞促进细胞增殖;与空白对照组相比H2O2组活性氧水平、细胞内Caspase-3含量明显增高,而蜂胶黄酮各剂量组活性氧水平降低,Caspase-3含量减少。
结论蜂胶黄酮对H2O2诱发PC12神经细胞凋亡有显着的抑制作用,其机制可能其影响细胞周期、清除氧自由基、降低凋亡因子Caspase-3有关。
关键词蜂胶黄酮;PC12细胞;H2O2;Caspase-3;细胞凋亡AbstractObjective:To observe the protection ofpropolis flavonoidson rat with injuried pheochromocytomacells(PC12) induced by?hydrogen peroxide(H2O2)and to explore its possible mechanism.Methods:Culture?PC12 cells,the cells inthe logarithmic growth phase weredivided into five groups,blank control group,model group,propolis flavoneof high,medium and low dose group,the dose of 200mg/L,100 mg/L,50 mg/L.After 2h 0fPharmacological preconditioning,the cellswere incubated with H2O2(140 μ mol/L)for24hto induceoxidative damage.TUNEL Kitis used fordetermining Cell apoptosis,Flow cytometry was used to detect the intracellular ROS level and cell cycle,ELISA is used for determining the concentration of protein Caspase-3 in cells. Results:Apoptosis of TUNEL cells staining, H2O2 group compared with the control group, staining was deepened, and the propolis flavone group was significantly lighter, that propolis flavonoids can antagonize the apoptosis induced by H2O2 Cycle showed that H2O2 group inG0/G1 cells were increased, and in the G2/M,S phase cells decreased significantly, reduced cell proliferation, and propolis flavonoids increased S phase cells promoting cell proliferation; compared with the blank control group, caspase-3 in H2O2group, the levels of reactive oxygen species in cells increased significantly, while the propolis flavone in all dose groups decrease the levels of reactive oxygen species, reduced caspase-3 content.Conclusion: Propolis flavonoids on H2O2-induced PC12 cells damage a significant protective effect,The mechanism may be its effect on cell cycle, scavenging oxygen free radicals, decrease the apoptosis related factor caspase-3.Key words: Propolis; flavonoids; PC12 cells; H2O2; apoptosis目录正文 (01)1前言 (01)2仪器与试剂 (01)3实验方法 (02)蜂胶总黄酮的提取与含量测定 (02)PC12细胞的培养及分组给药 (02)TUNEL细胞凋亡原位检测 (02)流式细胞仪检测细胞周期 (02)流式细胞仪检测细胞内活性氧水平 (03)ELISA试剂盒检测细胞内Caspase-3蛋白含量 (03)4实验结果 (03)TUNEL细胞凋亡原位检测 (03)流式细胞仪检测细胞周期 (04)流式细胞仪检测细胞活性氧水平 (05)ELISA检测细胞内Caspase-3蛋白含量 (06)5讨论 (07)6结论 (08)参考文献 (09)文献综述 (10)致谢 (15)蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞凋亡机制的研究学生:*** 指导教师:***(泰山医学院药学院,泰安 271016)1 前言老年性痴呆 (Alzheimer′s disease, AD) 是一种以进行性认知功能障碍和记忆能力受损为主的中枢神经系统退行性疾病。
该病严重威胁中老年人的健康,对社会和经济造成巨大压力。
因此,研究AD发病机制及寻求有效药物防治已成为目前世界医药界的热点和难点。
氧化应激损伤神经元在神经退行性病变中具有重要的病因学意义。
研究表明老年性痴呆与氧化应激损伤密切相关。
H2O2是和氧化应激反应密切相关的活性氧之一,它参与了许多神经系统疾病的发病,与多种疾病如自身免疫病,肿瘤,炎症以及细胞凋亡的发生有关,长期用作神经细胞氧化损伤的诱导剂。
蜂胶(Propolis) 被誉为“紫色黄金”,是蜜蜂从植物新生枝嫩芽或花蕾处采集的树脂类物质,掺入其舌腺及蜡腺分泌物,经蜜蜂反复混合而成的胶状物质。
蜂胶富含多种具有药用价值的活性成分,其中主要是黄酮类化合物。
本课题组前期研究发现蜂胶醇提物对东莨菪碱、亚硝酸钠、三氯化铝诱导的小鼠学习记忆障碍模型具有明显保护作用,对D-半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆功能也有保护作用,其作用机制可能与其对抗小鼠体内过氧化反应有关[1-2]。
通过MTT、流式细胞术等前期研究也发现蜂胶黄酮能有效的保护H2O2诱导的PC12细胞损伤,提高细胞存活率,抑制细胞凋亡,为进一步研究其抗痴呆作用奠定了基础。
PC12细胞为大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞,在细胞形态,结构,功能上与多巴胺神经元有许多相似特征,能够表达多巴胺转运体,是体外神经细胞损伤及保护作用研究使用最为广泛的细胞系。
本实验拟培养大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞株,以H2O2诱导神经细胞损伤,蜂胶黄酮干预, TUNEL 染色观察蜂胶黄酮的抗凋亡作用,并通过检测细胞周期、活性氧及Caspase-3对蜂胶黄酮的抗凋亡机制进行研究。
2 仪器与试剂材料和试剂蜂胶原胶,购自山东省实验种蜂场;PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株),购自南京凯基生物技术有限公司;二甲基亚砜(DMSO)、胰蛋白酶、PBS,购自于索莱宝;完全DMEM 培养基、新生牛血清(NBS),购自于南京凯基生物技术有限公司;TUNEL细胞原位凋亡测定试剂盒、活性氧试剂盒及细胞周期检测试剂盒(购自于南京凯基生物技术有限公司)、ELISA试剂盒(蓝基生物技术有限公司)。
其它试剂均为分析纯。
仪器二氧化碳孵箱(Thermo);单人双面超净工作台(SW-CJ);倒置式生物显微镜(XDS-1B);酶标仪(Infinite f200);流式细胞仪(FACSCalibur);高速离心机(TGL-16G);数控超声波清洗器(KQ-600DB);旋转蒸发仪(RE-52A 上海亚荣生化仪器厂)、恒温干燥箱(施都宝Bao-80A)、恒温水浴锅、超低温冰箱(Thermo)。
3.实验方法蜂胶黄酮的提取与含量测定取蜂胶50g粉碎,用85%乙醇浸泡4天,配料比蜂胶(g):85%乙醇(ml)为1:30,在30℃条件下超声50min后,旋转蒸发仪蒸发成浸膏状,冰箱4℃内保存备用。
以芦丁为标准品,得标准曲线y=+, R2=,计算蜂胶中黄酮含量为:g。
PC12细胞的培养及分组给药在37℃,恒湿的5%CO2细胞培养箱内培养PC12细胞,完全培养基为高糖DMEM培养基中含10%新生小牛血清,加入100 μg/ml链霉素和100 μg/ml氨苄青霉素。
细胞为上皮样贴壁生长,每2~3 d传代1次,取对数生长期细胞用于实验。
将细胞分为五组:空白对照组、模型组、蜂胶黄酮高、中、低剂量组。
加药前先将蜂胶黄酮溶于DMSO中,再用完全培养基稀释,使药物终浓度为200 mg/L、100 mg/L、50mg/L,DMSO终体积为1‰,空白对照组及模型组加入含1‰DMSO完全培养基。
药物预处理2h后,再加入H2O2培养24h,24h后检测各项指标。