(完整版)技能操作考试细菌平板划线分离技术技能操作评分标准
消毒供应中心技能考核操作评分标准
CSSD技能考核操作标准目录1.全自动喷淋清洗机操作技术---------------------------------22.环氧乙烷灭菌器操作技术-----------------------------------43.压力蒸汽灭菌器使用技术-----------------------------------64.3M Steri-Sealing II封口机使用技术-----------------------85.快速生物监测阅读器使用技术------------------------------106.六步洗手法----------------------------------------------127.器械物品包装操作法--------------------------------------148.手工清洗器械操作法--------------------------------------169.管腔类器械清洗操作法------------------------------------1810.防护服穿脱法--------------------------------------------201.全自动喷淋清洗机操作技术科室姓名考试日期监考人得分一、技术操作方法及评分标准 100%P3程序上清洗剂不上润滑油适用于轻微污染且需预洗的碗和弯盘P4程序上清洗剂不上润滑油适用于麻醉管道P5程序上清洗剂不上润滑油适用于重度污染的碗和弯盘P6程序上清洗剂上润滑油适用于重度污染的的器械9、按“”开始键（2%），黄灯将闪烁10秒，如果此时须停止程序，再按一下“”，屏幕将显示初始状态（1%），否则10秒钟后机器将自动运行所选程序步骤（6%）（预冲洗主洗漂洗（中和冲洗）终末漂洗（冲洗）消毒（最后冲洗）干燥）。
在程序循环过程中观察有无泄漏（1%）。
做好清洗机日常维护及清洗消毒运行情况记录，便于追溯（3％）10、程序完成后，绿灯亮，此时可从清洁侧打开门（绿灯灭）（1%），用洁净的手取出消毒物品（2%），然后关上舱门并锁好（1%），清洁侧门关闭后将无法再打开（1%）。
食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准
食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准一、食品微生物检验技能操作试题本次考试有五组技能测试题供学生随机抽取，每一组题满分均为100分，占该门课程总成绩的70,。
第一组:使用高压灭菌锅进行培养基的灭菌，并回答相关问题。
第二组:微生物划线分离技术操作，并回答相关问题。
第三组:食品中细菌总数的测定操作，并回答相关问题。
第四组:食品中大肠菌群测定，并回答相关问题。
第五组:常用仪器的使用二、考试程序1、组织学生抽取考试序号，按照此序号依次进行技能考试。
2、按照考试序号组织学生在考前5分钟抽取试题，拿到试题后可以准备5分钟，然后开始操作和回答。
其他学生集中在另一教室等待。
3、考试完的学生不允许与等待考试的学生接触，要迅速离开考场，防止学生利用通讯工具交流试题内容。
三、评分标准第一组湿热灭菌操作一、一、操作用具及物品:高压灭菌锅、试管培养基、三角瓶、线绳、报纸或牛皮纸等。
二、操作过程及评分标准1(首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
(10分)2(放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。
注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
(10分)3(加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。
再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。
(10分) 4(用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。
(或等压力上升到0.5时，打开放气阀排出冷空气)待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。
当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。
本实验用 1(05kg/cm2，121(3?，20分钟灭菌。
(10分) 提问:1.为什么要放出冷空气,答:因空气是热的不良导体，当高压锅内的压力升高后，它聚集在锅的中下部，使饱和热蒸汽难与被灭菌物品接触。
分区划线法评分标准
1、过程评价标准
操作
操作标准
评分标准（分）
准备
着实验服；检查实验器材是否齐全，并有序合理摆放；平板标注清晰合理
5
无菌操作
手、台面、菌种试管口的擦拭、接种环灼烧是否彻底
5
取种和划线时是否离开无菌区
5
接种完毕是否灼烧试管塞、接种环
5
划线
接种环与平板表面的角度应在30°至45°之间
5
要有明显的旋转平板进行分区划线的操作，每次旋转弧度在90°以内，单手旋转
10
培养基不可被划破
5
培养
倒置放入适宜温度的培养箱
5
结束操作
物品归位，带走废弃物
5
总分
50
2、结果评价标准
操作
操作标准
评分标准（分）
无菌检查
无杂菌污染
10
划线
线型清晰，线距合理，较为美观
5
有明显的分区
5
各区细菌分布有明显的梯度
5
菌落菌苔分布:1至2区为菌苔为主,3区为菌落为主,4区为菌落
10
单菌落
出现单菌落，且多于10个
10
原始记录
原始记录完整清晰，操作报告结果正确，简
医学检验专业技能考核
说明测试带各模块对应的检测内容
开机、预热
0.5
调试
检测仪器性能和测试带质量
根据结果,判断能否使用该仪器检测标本
测定
按start键后,按仪器提示,适时、正确把测试带浸入尿中,浸入时间(2秒）准确
放置测试带到仪器检测槽内,完成检测,打印结果
取出测定完的测试带,放入指定地点
正确说明打印结果代码的中文含义（每错1个扣0。5分）
消毒灭菌
1
结果及报告（1分）
报告书写规范、整洁,无笔误
1
总分(10分)
二、尿液常规检验技术评分标准
考核项目
评分标准
标准
分数
得分
备注
实验用品准备
（2分）
滴管、质控带、测试带、质控尿液、尿液分析仪、10ml刻度离心管、载玻片、盖玻片、离心机、显微镜
每缺一样扣0.2分
实验过程（7分）
尿液仪器分析（3分）
准备
2
收场
整理清场(试剂、器材归位、实验台面清理）
消毒灭菌
0。5
完成时间
30min内完成,每延时2min扣0.5分
1
结果及报告（1分）
报告书写规范、整洁,无笔误
1
总分（100分）
三、细菌接种培养技术评分标准
考核项目
评分标准
标准
分数
得分
备注
实验用品准备
(2分)
普通平板、菌种、接种环、酒精灯、打火机、记号笔
0.5
完成时间
全过程12min内完成,每延长2min扣0。5分
1
白细胞计数(3分）
计数结果准确
白细胞计数结果评分方法:
变异百分率V＝│X测－X靶│/ X靶×100
平板划线分离_实验六平板划线法分离菌种
实验六平板划线法分离菌种一、实验目的1、了解平板划线法分离菌种的基本原理2、练习平板划线法分离菌种的基本操作，掌握无菌操作技术二、实验原理平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。
一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板表面上作多次划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。
通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。
实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可形成一个单菌落，故在科学研究中，特别是在菌种鉴定等工作中，必须对实验菌种的单菌落进行多次划线分离，才可获得可靠的纯种。
平板划线分离对细菌、酵母菌较为适宜，而霉菌和放线菌的分离多采用稀释分离法进行菌种的分离纯化。
具体的划线形式有多种，这里仅介绍一种经过长期实践并证明可获得良好实验效果的方法将一个平板分成A、B、C、D4个面积不同的小区进行划线，A区面积最小，作为待分离菌的菌源区，B和C区为经初步划线稀释的过渡区，D区则是关键的单菌落收获区，它的面积最大，出现单菌落的概率也最高。
由此可知，这4个区的面积安排应做到D>C>B>A。
鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助于快速鉴别某种微生物。
这样的培养基称之为鉴别培养基。
例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。
（参考GB47838-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数）其配方中含有乳糖、伊红和美蓝，用以鉴别肠道病原菌及其他杂菌。
伊红、美蓝作为指示剂，伊红系酸性染料，当大肠埃希氏菌或产气肠杆菌分解乳糖产酸时，由于细菌带正电荷，所以被伊红着色。
在大肠埃希氏菌中因为伊红与美蓝结合，所以菌落不呈红色，而是蓝紫黑色，且具有绿色金属光泽；菌落呈棕色者为产气肠杆菌；不分解乳糖的肠道病原菌则不着色，有时因产生碱性物质较多，细菌带负电荷，被美蓝着色后，菌落并不呈蓝色，因美蓝与伊红结合，所以菌落为淡紫色。
微生物技能测试评分标准
1.倾斜玻片，连续滴加95%乙醇
2.脱色30s~1min至流出液无色，水洗。
1分
2分
1.玻片未倾斜，扣一分
2.脱色不彻底，扣一分；未冲洗扣一分
复染
滴加沙黄染液覆盖整个菌面复染1min，水洗
2分
未覆盖菌面或染液过多扣一分；时间不足扣0.5；未冲洗扣一分
晾干
将染好的涂片于空气中晾干或用吸水纸吸干
1分
未完全干燥，扣一分
镜检
1.检查显微镜
2.用低倍镜调出清晰图像
3.使用油镜观察
1分
2分
5分
1.缺此步骤，扣一分
2.未使用低倍镜，扣二分
3.换高倍镜后，用粗准焦螺旋扣三分；图像不清晰扣二分。
若用显微镜在5min之内调不出图像，此项分值全扣。
清场
1.试剂及玻片清洗
2.显微镜恢复原状
1分
1分
1.此项未做扣一分
2.此项未做扣一分
革兰氏染色法操作考核评分标准
项目
技术操作要求
标准分
扣分标准
备注
准备
1.检查试剂药品是否齐全，
2.检查仪器是否完好。
1分
1分
缺一项扣一分
涂片
1.接种环及玻片灭菌
2.滴加半滴生理盐水用接种环取单菌落涂菌，直径不超过1cm
3.接种环灭菌
2分
3分
2分
1.一项不符合要求扣一分
2.生理盐水过多扣一分；菌落不纯扣一分；直径过大扣一分
3.未灭菌扣一分
干燥、固定
1.于空气中自然干燥
2.手拿一端过火2~3次，不烫手为宜。
2分
过火离火焰太近，扣2分；
结晶紫染色
1.滴加结晶紫染液盖满菌面
临床微生物学检验技术考试题库及答案(二)
临床微生物学检验技术考试题库及答案2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。
3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素）4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白）5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。
结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥（G-菌无。
是溶菌酶、青霉素作用部位）6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环状DNA分子）、转位因子7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动器官）、菌毛（普通菌毛—粘附，致病性；性菌毛—接合方式转移遗传物质）*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细菌）。
②颗粒型菌落（简称G型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。
高渗环境生长。
（环丙沙星）9、自营菌：以无机物为原料；异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质；寄生菌：以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。
10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。
11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单位）。
13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法；14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。
15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。
16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。
17、细菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染，使脱色菌体着色）。
18、胃部细菌喜酸，肠道细菌喜碱19、SS琼脂有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。
微生物学实验操作考核试题及评分标准
实验四：
活菌计数法和显微镜直接计数
步骤
考核目标及评分细则
满分值
一
浏览整个实验目的、原理和操作步骤。
二
实验需要的仪器和药品
显微镜、血细胞计数板、凹载玻片、盖玻片、擦镜纸、软布、接种环、毛细滴管、度管、脱脂棉和三角烧瓶等。
香柏油、二甲苯、生理盐水和凡士林等。
酿酒酵母、米曲霉、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌等。
10分
六
实验后整理：
无菌操作台、无菌操作室进行清理。洗涤仪器并使其归位。保持台面和地面整洁，实验后洗手。
10分
实验二：
培养基制备
步骤
考核目标及评分细则
满分值
一
浏览整个实验目的、原理和操作步骤。
二
实验需要的仪器和药品
试管、三角烧瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、自动式高压灭菌锅、封口膜、记号笔、皮筋、pH试纸等。
7、混合涂片染色
在载玻片同一区域用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片，其他步骤同上。（10分）
70分
四
得出结论：
掌握革兰氏染色法，以及两种菌的颜色、形态。
10分
五
实验后整理：
显微镜放置好，洗涤仪器并使其归位。保持台面和地面整洁，清理垃圾，实验后洗手。
10分
实验七：
环境因素对微生物生长的影响
步骤
考核目标及评分细则
70分
四
得出结论：
掌握环境因素如温度、渗透压、pH值等对微生物生长的影响。
10分
五
实验后整理：
无菌操作台、无菌操作室进行清理。洗涤仪器并使其归位。清除垃圾，保持台面和地面整洁，实验后洗手。
10分
实验八：
平板分离技术
微生物技能考核标准
5
都编号且正确，得5分
每漏编（贴）一个，扣1分
每错编一个，扣1分；标签信息不全，一个扣1分
样品稀释
(30分)
样品混匀(原始样品、稀释样品)
10
进行且操作正确（平摇样品瓶、手心震摇试管），得10分
原始样品没有混匀，扣2分
稀释样品没有混匀，一个扣2分
手心震摇试管时没塞塞子，扣2分
清理用物，环境卫生
5
清扫实验台及收拾产生垃圾，少1环节扣1分
10
时间（10分）
操作时间
15
要求10分钟内完成，每超过1分钟，扣5分。
总分
制备无菌平板评分标准（时间5分钟）
班级： 姓名： 学号：
项目
考核内容
分值
评分细则
扣分
备注
得分
准备 (10分)
物品准备、摆放及酒精擦拭
8
物品摆放合理、酒精擦手正确，材料准备齐全，得8分
3
整理，得3分
未整理，扣3分
器皿破损
2
未破损，得2分
破损，扣2分
完成 时间 (5)
共用（ ）分钟
开始：
结束：
0
提前，不加分不扣分
按时，不加分不扣分
超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）
合计
高压蒸汽灭菌锅的使用与维护
班级： 姓名： 学号：
序号
内容
实验后台面整理
1
整理，得1分
未整理，扣1分
器皿破损
1
未破损，得1分
破损，扣1分
完成 时间 (0)
共用（ ）分钟
开始：
结束：
0
提前，不加分不扣分
按时，不加分不扣分
护理专业技能评分标准
排气一次不成功-2
浪费药液-1
5、连接留置针与输液器:打开套管针外包装，将留置针连接于输液器，排尽针头内空气
未排留置针空气-2
6、将小垫枕置于穿刺部位下，铺治疗巾，在穿刺点上方8-10cm处扎止血带
选择血管不当-1
扎止血带松紧、高度不合适
-1
7、常规消毒注射部位皮肤，消毒直径大于8cm，待干。准备无菌透明敷贴，打开放置适当处
进针速度宜慢，见回血后降低角度再顺静脉走行继续进针0.2cm
右手持住针翼，左手将套管一起送入静脉，拔出针芯，且穿刺一次成功
未旋转松动外套管-1
未再次排气-2
未嘱患者握拳-1
未绷紧皮肤-1
穿刺点选择不当-1
进针速度过快-1
见回血后未降低角度再进针少许-1
右手未固定针翼-1
左手未持针座Y接口-1
穿刺时回针-5
皮肤消毒范围不合格-2
未打开无菌透明敷帖-1
穿
刺
时
操
作
步
骤
45
1、二次核对患者的床号、姓名、药液瓶签（药名、浓度、剂量）及给药时间和给药方法
未二次核对-2
少查对一项-1
2、静脉穿刺
取下针套，旋转松动外套管
右手拇指与示指夹住两翼，再次排气于弯盘中
嘱患者握拳，绷紧皮肤，固定静脉，在消毒范围内部1/2—2/3处直刺静脉
穿刺一次不成功-20
3、松开止血带，打开调节器，嘱患者松拳
未松开止血带-1
未打开调节器-1
未嘱患者松拳-1
4、用无菌透明敷贴固定
固定方法不当-1
5、在透明胶布上记录日期和时间
未记录日期时间-1
6、根据患者的年龄，病情及药物性质调节滴速
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2
实验操作
无菌操作
（15分）
在火焰外焰2-3cm灼烧菌种试管口四周1分
拿接种环的方式与拿毛笔的方式相同1分
利用火焰外焰，先垂直再倾斜30-45度角灼烧圆环2分
细线（灼烧完全）及金属柄1分
打开试管口时用小拇指勾开棉塞1分
试管口与棉塞四周进行灼烧1分
棉塞不得离手1分
接种环接触菌种前要在试管内壁上冷却1分
细菌平板划线分离技术技能操作评分标准
评审专家：评审时间：座位号：
评审地点：实验内容：
得分
备注
序
评分细则
1
实验习惯与精神面貌（10分）
按时到达考场，遵守考场纪律1分
无仪器设备、玻璃器材损坏3分
无试剂污染，滴管不可放错1分
所用试剂瓶使用后及时归位1分
酒精灯不使用时及时关灭2分
实验过程中保持安静，无手机铃声响动1分
B区接种环冷却B区转到灯前（60度）从a带到b划线3分
立即烧接种环残菌1分
同时盖上培养皿盖1分
C区d区与b相同各5分
熟练程度及整理归位
（4分）
器具整归位，卫生2分熟练程度2分
取菌适量，不得将培养基刮下2分
取菌后要及时灼烧棉塞与试管口，盖好棉塞1分
试管口灼烧→接种环灼烧→打开试管口→取菌→关闭试管口→划线3分
划线
（21分）
A区酒精灯旁边，点酒精灯方法正确1分
打开酒精灯一侧皿盖角度适宜1分
与涂抹处成30*--40*角1分ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
腕力3--4条线，1分
立即烧接种环残菌1分
同时盖上培养皿盖1分