微生物染色
常用微生物染色方法
WOIRD格式革兰染色抗酸染色：分支杆菌属，诺卡放线菌属。
石炭酸复红染色，金永染色。
芽孢染色：用于区分细菌的芽孢和营养细胞。
结果芽孢染成绿色，营养细胞为红色。
晶体染色：观察苏云金杆菌不同变种的晶体形状大小。
结果晶体染成紫色，芽孢为透明椭圆形，仅见具有轮廓的折光体。
鞭毛染色：有赖夫生染色法、银盐染色法，西萨-基尔染色法等。
一般以西萨-基尔（Cesares-Gill）染法效果最佳。
异染颗粒染色：用于白喉棒状杆菌染色，直接涂片或改良阿伯特法染色。
墨汁荚膜染色：观察菌体有无荚膜，如新型隐球菌。
碳素墨汁。
镀银染色：螺旋体吉姆萨染色：螺旋体荧光染色魏申染色（wayson）染色：鼠疫耶尔森杆菌。
铬酸P、A、S真菌类染色。
结果：曲霉菌、念球菌属、细胞浆菌属、隐球菌属为红紫色。
曲霉菌丝周边紫红色，弹力纤维紫色，背景绿色。
Mann氏甲基蓝伊红染色法：病毒包涵体染色。
Negri氏小体红色。
Nacchiavello氏染色：病毒包涵体染色。
结果：包涵体、立克次氏体均染红色，其余组织呈蓝色。
Crocott-Gomori氏六胺银法：新型隐球菌碘染色法吉姆萨染色：衣原体乳酸酚棉蓝染色，糖原染色：真菌，前者适用于所有真菌，呈蓝色。
吉姆萨染色，瑞氏染色：鞭毛虫，滴虫，锥虫，疟原虫，弓形虫，隐孢子虫等原虫。
三色染色，碘染色：阿米巴等原虫。
荧光素吖啶橙染色：疟原虫。
金胺-酚染色：隐孢子虫。
甲苯胺蓝，四胺银染色：耶氏肺孢子虫。
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微生物染色技术
简单染色法革兰氏染色法抗酸染色法死菌鉴别染色法芽孢染色法姬姆萨染色法细菌染色法活菌：美蓝或氧化三苯基四氮唑（TTC）染料：染料是一类苯环上带有发色基团和助色基团的有机化合物。
前者赋予染料颜色特征，后者使染料能形成盐。
染料通过离子键、共价键或疏水作用实现染色常用的微生物细胞染料都是盐，分酸性染料和碱性染料两大类：美蓝（即亚甲蓝）、结晶紫、碱性复红、番红（即沙黄）、孔雀绿等都属于碱性染料；酸性复红、伊红及刚果红属于酸性染料。
碱性染料带正电荷酸性染料带负电荷。
微生物染色原理：在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷；碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，易与细胞结合使其着色。
细胞处于酸性条件下（如细菌分解糖类产酸），所带正电荷增加，可采用酸性染料染色。
染色种类:简单染色：利用单一染料对菌体进行染色。
常用碱性染料进行简单染色，这是因为：细菌的等电点较低，pH值大约在2—5之间，故在中性、碱性或弱酸性溶液中，菌体蛋白质电离后带阴电荷；而碱性染料电离时染料离子带阳电。
因此，带阴电的细菌常和带阳电的碱性染料进行结合。
所以，在细菌学上常用碱性染料进行染色。
常用作简单染色的染料有：美蓝、结晶紫、碱性复红等。
操作步骤1．涂片：用灼烧灭菌冷却后的接种环挑取少量菌体与水滴充分混匀，涂成极薄的菌膜。
2．干燥：可自然晾干，或将涂片置于火焰高处微热烘干，但不能直接在火焰上烘烤。
3．固定：手执玻片一端，有菌膜的一面朝上，通过迅速通过火焰2-3次（用手指触涂片反面，以不烫手为宜）。
4．染色：加适量(以盖满菌膜为度)结晶紫染色液(或石炭酸复红液)，染l～2min。
5．水洗：用自来冲洗至流下的水中无染色液的颜色时为止。
6．干燥7．镜检鉴别染色：使用两种以上的染料进行染色，以区分不同类群的细菌，如革兰氏染色。
革兰氏染色:原理：G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经番红复染后就成红色。
几种常用的微生物染色方法汇总
·健康科学·几种常用的微生物染色方法汇总黄波因微生物细胞比较小且透明，在普通的光学显微镜下不容易进行观察。
染色以后微生物细胞会与背景形成比较鲜明的色差，从而可以清楚地观察到微生物的形态，有利于鉴别、强化细化或细胞组分与周围环境之间产生的反差，方便利用普通光学显微镜对微生物细胞进行观察的简便方法。
一、微生物染色原理因微生物细胞含有大量的水分，所以对光线的吸收、反射及水溶液之间的差异不明显，机体属于无色、透明样，且与周围的环境背景之间也没有明显的反差，在普通的光学显微镜下不容易进行识别，所以必须对微生物进行染色，经过染色以后，菌体会与背景有明显色差的形成，才能更加清楚地观察到其形态与结构。
微生物细胞主要是有由蛋白质、核酸等两性电解质以及其他的化合物所组成，所以会表现出两性电解质的性质。
而两性电解质又兼具了碱性基、酸性基，在酸性溶液当中，会解离出含有碱性基呈碱性带正电；在碱性溶液当中，会解离出酸性基呈酸性带负电。
经过测定后，细菌等电pH值在2~5之间，所以在中性、碱性或是偏酸性的溶液中，细菌的等电点均小于上述中溶液的pH值，因此，细菌是带负电荷，容易和带正电荷的碱性染料相互结合，所以应用碱性染料色的比较多。
此外，微生物体内的各种结构的结合力与染料不同，所以可以使用各种染料对微生物的结构分别进行染色，便于观察。
二、染料的种类与选择染料可以分为2种类型：①天然染料，包含胭脂虫红、地衣素、石蕊、苏木素等，大部分都是从植物中所提取的，成分较为复杂。
②人工染料，又被称为煤焦油染料，大部分都是从焦煤油中所提取的，属于苯的衍生物。
大部分染料都属于带色有机酸或是碱类，有的也与有机溶剂相溶，为了使其能够在水中易溶，通常会把它们制作成盐类。
染料按照电离后的染料离子，所带的电荷性质，将其可分为以下几种类型。
（一）酸性染料该类染料进行电离以后，染料离子带负电，例如伊红、刚果红、苯胺黑等，可以和碱性的物质进行结合，成为盐；当培养基为糖类，而分解产酸的时候会使pH值下降，同时细菌所带的正电荷会增加，这时应该选择酸性染料，微生物容易被染色。
微生物基本染色方法
基本染色方法1.染色准备：染色的第一步是制作涂片。
菌液涂片时，用接种环沾取菌液点在载玻片上，标本可直接在玻片上涂布。
菌落涂片时，先取生理盐水 1滴，置玻片上，用接种针挑取菌落，在盐水中涂布。
涂片时必须注意应轻轻操作。
猛烈的动作会改变菌细胞原有的排列形式，或造成细菌鞭毛脱落，影响结果的准确性。
制备的涂片应自然干燥，并经火焰固定，固定温度不宜过高，以玻片背面接触手背不烫为准，否则可能使细胞形态改变。
将固定后的涂片进行染色。
2.几种基本染色方法2.1 革兰染色本染色是最基本的染色法，可用于标本涂片或菌落涂片。
染色结果将细菌分为革兰阳性(紫色)和革兰阴性(红色)两类。
2.1.1结晶紫溶液A液：结晶紫2g95％乙醇20mlB液：草酸铵0.8g蒸馏水80ml需在用前24h将A液、B液混合，过滤后装入试剂瓶内备用。
2.1.2碘液碘1g碘化钾2g蒸馏水300ml碘与碘化钾混合并研磨，加入几毫升水，使其逐渐溶解，然后研磨，继续加入少量蒸馏水至完全溶解。
最后补足水量。
也可用少量蒸馏水，先将碘化钾完全溶解，再加入碘片，待完全溶解后，加水至300ml。
2.1.3 脱色液：95％乙醇。
2.1.4复染液A. 贮存液：沙黄 2.5g95％乙醇100mlB. 应用液： A液 10ml蒸馏水 90ml2.1.5染色方法：A．涂片经火焰固定，加结晶紫液染30s，清水冲去染液。
B．加碘液染30s，水洗。
C．加脱色液，不时摇动约5～10s，至无紫色脱落为止，水洗。
D．加复染液，染30s，水洗。
E．干后镜检。
3、抗酸染色抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当增加标本涂片的厚度，以提高检出率。
染厚涂片时，须掌握复染色时间。
如果背景过深，影响镜检。
奴卡菌及放线菌可呈弱抗酸性，取培养菌落涂片染色时，呈现两种现象，视野中有些菌细胞阳性，另外一些则阴性；有时同一个菌体上，红色的深浅亦有不同，观察时应予注意。
抗酸染色有两种常用方法：①碱性复红法又称萋纳(Ziehl—Neelsen)法(我们使用的方法)。
微生物染色技术
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（六）革兰氏染色各步骤的要求
1、载玻片的要求
载玻片应清洁干净。 常规工作中可将载玻片清洗干
净后浸泡在95％酒精中，随 用随取。
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2、涂片的要求
滴一滴无菌水在载玻片中央， 准备涂片；或用接种环沾3-4 环无菌水，用于涂片。
无菌水不宜过多，否则后续的 干燥时间增多。
红色
2#
球状
紫色
结果判断 G-杆菌 G+球菌
报告：经镜检，该细菌为G-（革兰氏阴性） 杆菌。
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（五）操作注意事项
1、载玻片要洁净无油迹。涂片时，滴生理盐 水不要过多，挑菌量宜少，涂片要均匀，菌
？ 膜宜薄。
2、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。 3、染色过程中勿使染色液干涸。 4、选用幼龄的细菌。
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（一）革兰氏染色流程
涂片 → 干燥 → 固定 → 染色 → 镜检
初染 → 媒染 → 脱色 → 复
结晶紫初染1min，水洗
染
碘液媒染1min，水洗
乙醇脱色20秒，立即水洗至无色
番红复染1min，水洗
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（二）革兰氏染色原理
革兰氏染色后镜检，显微镜下 观察发现，有些种类细菌呈红 色，有些种类呈紫色。
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5、涂片为什么要薄而均匀，不能过厚？
涂片过于浓厚，可能会脱色不 足，导致假阳性结果，菌量过 大也不利于菌体排列方式的观 察。
左下角，太厚而不能脱色
同理，不均匀也会在局部过厚， 颜色不一，难以判断。
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5、涂片为什么要薄而均匀，不能过厚？
微生物的染色原理
微生物的染色原理
微生物的染色原理在实验室中被广泛应用，以便观察和研究微生物的形态、结构和分布。
常用的染色方法包括革兰氏染色、抗酸染色和目标特异性染色等。
革兰氏染色是最常用的微生物染色方法之一。
它基于细菌细胞壁的特性，将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
染色过程中，先通过紫色染料普鲁士蓝霜处理细菌细胞，使其呈紫色。
随后用碘酒金溶液进行固定，不易被冲洗掉。
然后使用乙醇洗去多余染料，并通过红色染料孔雀石绿进行反染，使革兰氏阴性细菌呈绿色。
抗酸染色用于分辨酸杆菌，如结核分枝杆菌和变形杆菌等。
这种染色方法基于酸性染料的特点，如琼红和文氏染料，能够着色酸杆菌。
染色过程包括涂片染色、定着、洗涤和固定等步骤，最终观察酸杆菌的红色或粉红色。
目标特异性染色常用于检测特定微生物或其特定组分。
例如，荧光染色可以利用荧光染料与微生物靶标结合，使其发出荧光信号；免疫染色可以利用抗体识别特定微生物蛋白质，再用染色剂标记抗体，显示出目标微生物的位置。
总之，微生物染色的原理是通过特定的染料与微生物结构或组分的相互作用，使其呈现出可视化的颜色或荧光信号。
这些染色方法对于微生物的鉴定、分类和研究具有重要的意义。
常用微生物染色方法
原理
一 通透性学说 二 等电点学说
三 化学学说
革兰氏阳性菌含有大量核糖 核酸镁盐，其可与结晶紫-碘 结合成大分子复合物，因而 不易被95％酒精脱色；而阴 性菌中此物质含量较少，因 而吸附染料量很少，分子量 也较小，故易被酒精脱色。
细菌涂片的制备
涂片：取一张洁净载玻片，用已灭菌的接种环取一环 生理盐水于玻片中央，再将接种环灭菌，取菌与生理 盐水磨匀，涂布成1cm×1cm大小区域的均匀薄膜，使 盐水磨成灰白色为宜，接种环灭菌后放回试管架。 干燥：涂片最好在室温下自然干燥或将标本片涂抹面 向上，置酒精灯火焰上半尺高处慢慢烘干。 固定：常用火焰加热法，手执载玻片一端，标本面向 上，迅速来回通过火焰三次。
操作步骤 1、涂片经火焰固定，加石碳酸复红溶液用火 焰微热至出现蒸气约3分钟（防止染液蒸发干， 必要时可续加第一液数滴，水洗。 2、用3%盐酸酒精脱色约1分钟，直至涂片无色 或淡粉红色为止，水洗 3、再加复染液复染1分钟，水洗，干后镜检。 结果判断 抗酸杆菌呈红色，其他细菌及细胞 呈蓝色。
注意事项 1．抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当增加 标本涂片的厚度，发提高检出率。染厚涂片时， 须掌握复染时间，如果背景过深，会影响镜检。 痰标本找抗酸杆菌，应先高压杀菌，避免实验室 污染。 2．尿、粪中找到抗酸杆菌须作潘氏染色，排除 耻后杆菌，才能报告。 标本中找到抗酸杆菌，须作传染病报告。 3．离心应为3000转/分，30分钟。 4．涂片至少保留三个月。
注意点
⒈取菌量不可太多，涂片应均匀，否则影响染色结果 ⒉干燥时切忌高热，以免细菌变形 ⒊固定时温度不可过高时间不可长，以防涂抹面 烧焦及玻片烧裂
固定的目的
杀死细菌，使菌体蛋白凝固，染料易于着色 改变细菌通透性，以利于染料进入细胞内 使菌体与玻片粘附牢固，在染色时不致被染 料和水冲掉
常用的微生物染色方法
常用的微生物染色方法微生物染色是微生物学研究中非常重要的方法，通过染色可以使微生物的形态和结构更加清晰，便于观察和研究。
下面将介绍几种常用的微生物染色方法。
1. 革兰氏染色法（Gram染色）：革兰氏染色法是最常用的微生物染色方法之一、该方法可以根据细胞壁结构的差异将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏阳性菌具有较厚的细胞壁，可以保留紫色的革兰氏染料-碘-酒精复合物，呈紫色；而革兰氏阴性菌由于细胞壁较薄，无法保留染料-碘-酒精复合物，经酒精洗涤后以褪色方式显现嫩蓝色。
2. 去瓶球菌染色法（Ziehl-Neelsen染色）：该染色方法主要用于诊断结核菌感染。
结核菌具有酸酒杆菌的特征，该染色方法通过热定性进行，即将杆菌加热固定在玻璃片上。
染色液为仲子红与甲苯红的酒精醚溶液，结核菌上的脂质物质可以吸附染色液，呈现红色。
3.金黄色葡萄球菌染色法：金黄色葡萄球菌染色采用的是接种在含有豆粉和盐的琼脂糖平板上的细菌进行。
染色液为碘酸钾和碘甘液的混合物，在细菌细胞内部染出棕色团块。
4. 吉姆萨染色法（Giemsa染色）：吉姆萨染色法主要用于染色血液细胞、细菌和寄生虫等。
染色液为吉姆萨染料溶液，通过染色液和蒸馏水的混合来染色。
吉姆萨染色方法对捕获染色成分极为敏感，将蓝色碱性染料用于碱性碳水化合物和核酸材料，将红色和紫红色酸性染料用于酸性成分，如蛋白质和细胞质组分。
5. 格拉姆-韦瑞染色法（Gram-Weigert染色）：该染色法用于菌体内基质和胞外多糖的特异染色。
六元蔗糖银试剂与格拉姆染色特殊染料结合，生成黑色的沉淀物，用以观察菌体内多糖地点和部位。
6.碘染色法：碘染色用于染色藻类和真菌。
该染色法主要原理是将菌丝或细胞的内部特异性细胞器染为紫黑色，以便更容易观察和研究。
7.寇歇染色法：寇歇染色法主要应用于真菌的染色，染色方法与碘染色类似，可以观察到真菌菌丝和孢子的形态和结构。
总结起来，微生物染色方法有很多种，每种方法适用于特定的微生物和研究目的。
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• 碱性染料的离子带正电荷性染料常用。
• 常用碱性染料有：美蓝、结晶紫、碱性复 红和孔雀绿。
染色染料简介
• 酸性染料的离子带负电荷，能与带正电荷 的物质结合。
• 中性染料是碱性染料和酸性染料的结合物， 故又称复合染料。
七、实验结果
简单染色 ： 金黄色葡萄球菌和枯草杆菌染成（ ）色。 革兰氏染色（大肠杆菌与枯草杆菌） ： 将结果填于下表中
菌名 大肠杆菌 枯草杆菌
菌体形态
液体颜色
G+或 G﹣
小结
1.食品微生物检验方法是食品监测必不可少的重要组 成部分，可衡量食品卫生质量，为卫生管理工作提供 依据，保障人民的身体健康。
六、注意事项
1．革兰氏染色成败的关键是脱色时间，如脱 色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认 为革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏 阴性菌也会被误认为是革兰氏阳性菌。因此 必须 严格把握脱色时间。
2 ．选用培养18-24小时菌龄的细菌为宜，若细 菌太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性 菌转呈阴性反应。
实验二 微生物染色
实验目的 染色原理 染色方法 实验材料 实验内容与步骤 注意事项 实验结果
三 、细菌染色法:
细菌染色
活 菌染色
死菌染色
正染色
负染色
普通染色
特殊染色
简单染色法
复杂染色法
芽孢染色法
荚膜染色法 细胞壁染色法
抗酸染色 革兰氏染色
负染色
背景着色，菌体不着色，多用于荚膜的观察。
三、染色方法
1．取大肠杆菌和枯草杆菌(均以无菌操作)分别做涂 片、干燥、固定，方法均与简单染色的相同。 2．用草酸铵结晶紫染色1min后水洗。 3．加碘液媒染1min后水洗。 4．斜置载玻片，滴加95％乙醇脱色，至流出的乙醇 不现紫色 为止，大约需时20~30s，随即水洗。
5．用蕃红染液复染1min，水洗。 6．用吸水纸吸掉水滴，
实验二 微生物染色
实验目的 染色原理 染色方法 实验材料 实验内容与步骤 注意事项 实验结果
五、实验内容与步骤
制备涂片标本→简单染色
涂片
干燥
固定
镜检
水洗、吸干
染色1min
细菌的简单染色步骤
涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→镜检
1．涂片
取干净的载玻片于实验台上，在载玻片的中央滴一滴无菌 蒸馏水，将接种环在火焰上烧红，待冷却后从斜面挑取少量菌 种(金黄色葡萄球菌或枯草杆菌)与玻片上的水滴混匀后，在载 玻片上涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。
简单染色法
简单染色法又叫作普通染色法，只用 一种染料使细菌染上颜色，如果仅为了在 显微镜下看清细菌的形态，用简单染色即 可。
(二)复染色法
用两种或多种染料染细菌，目的是为了鉴 别不同性质的细菌，所以又叫鉴别染色法。主 要的复染色法有革兰氏染色法和抗酸性染色法。
革兰氏染色法：不仅能观察到细菌的形态， 而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应 呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示； 染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴 性细菌，用G-表示。细菌对革兰氏染色的不同 反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而 造成的。
实验二 微生物染色
实验目的 染色原理 染色方法 实验材料 实验内容与步骤 注意事项 实验结果
二、染色原理
由于微生物细胞含有大量水分，对光线的吸收和反射与水 溶液的差别不大,机体是无色透明的，与周围背景没有明显的 反差,在普通光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色， 使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而能更清楚地观 察到其形态和结构。
酒精灯火焰外层尽快的来回通过2~3次，共约2~3秒钟，并不 时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉过烫为宜（不超过 60℃）,放置待冷后，进行染色。
4．染色 在涂片薄膜上滴加染色液(石炭酸复红、草酸铵结晶紫或
用油镜观察 美蓝任选一种)一滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
5．水洗
香柏油在边台上 斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗
实验二 微生物染色
实验目的 染色原理 染色方法 实验材料 实验内容与步骤 注意事项 实验结果
微生物染色
染色的意义
1. 微生物细胞小而透明，在普通光学 显微镜下不易观察。染色后微生物 细胞与背景形成明显的色差，从而 能清楚的观察到其形态；
2. 用于鉴别。
微生物染色
染色的意义
实验目的
学习微生物的染色原理、染色的基本 操作技术，从而掌握微生物的一般染色 法和革兰氏染色法。
实验二 微生物染色
实验目的 染色原理 染色方法 实验材料 实验内容与步骤 注意事项 实验结果
四、实验材料
1.显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、接种环、载 玻片、酒精灯等。
2.石炭酸复红染液、草酸铵结晶紫染液、碘液、95％乙醇、 蕃红染液
3.菌种：金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌
染色染料简介
2．干燥 涂片最好在室温下使其自然干燥，有时为了使之干得更快
些，可将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精 灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间 过长，以防标本烤枯而变形。
五、实验内容与步骤
制备涂片标本→简单染色
涂片
干燥
固定
镜检
水洗、吸干
染色1min
3．固定 固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在
2.食品微生物检验包括生产环境的检验，原辅料检验， 食品加工、储藏、销售诸环节的检验，食品的检验等 内容。
3.食品微生物检验指标主要有菌落总数、大肠菌群、 致病菌、霉菌及其毒素等。
小结
4、食品微生物检验的一般程序包括：检验前准备、 样品的采集与处理、样品的送检与检验、检验、结果 报告等。
5、染色是强化细胞或细胞组份与周围环境之间的反 差，便于利用普通光学显微镜来观察微生物细胞的简 捷方法。染色的制片过程一般包括涂片、干燥、固定、 染色、水洗、干燥等基本步骤。
下的水呈无色为止。
6．干燥 用吸水纸吸去涂片边缘的水珠，置于室温下自然干燥。
用吸水纸时切勿将菌体擦掉。 7．镜检
用显微镜观察，并用铅笔绘出细菌形态图。
五、实验内容与步骤
制备涂片标本→简单染色
涂片
干燥
固定
镜检
水洗、吸干
染色1min
2 细菌的革兰氏染色步骤 复染
涂片→干燥→固定→初染→水洗→媒 染→水洗→脱色→水洗→复染→水洗→ 干燥→观察
2 细菌的革兰氏染色步骤 复染
5．用蕃红染液复染1min，水洗。 6．用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微 镜下，用低倍镜观察，发现目的物后用油镜观 察，注意细菌细胞的颜色。绘出细菌的形态图 并说明革兰氏染色的结果。
实验二 微生物染色
实验目的 染色原理 染色方法 实验材料 实验内容与步骤 注意事项 实验结果
微生物细胞是由蛋白质、核酸等两性电解质及其他化合物 组成。所以，微生物细胞表现出两性电解质的性质。两性电解 质兼有碱性基和酸性基，在酸性溶液中离解出碱性基呈碱性带 正电。在碱性溶液中离解出酸性基呈酸性带负电。
经测定，细菌等电点pH在2-5之间，故在中性、碱性或偏 酸性溶液中，细菌的等电点均低于上述溶液的pH值，所以细 菌带负电荷，容易与带正电荷的碱性染料结合，故用碱性染料 染色的较多。微生物体内各结构与染料结合力不同，故可用各 种染料分别染微生物的各结构以便观察。
实验作业题
1、简述革兰氏染色与细菌细胞壁结构的关系。 2、说明革兰氏染色的操作步骤。当对一株未知菌进 行革兰氏染色时，怎样确证你的染色操作正确，结 果可靠。 3、通过革兰氏染色，你认为它在微生物学中有何实 践意义？
实验二 微生物染色
实验目的 染色原理 染色方法 实验材料 实验内容与步骤 注意事项