国内外多肽合成仪主要品牌及选购指南
微波固相多肽合成仪

微波固相多肽合成仪介绍微波固相多肽合成仪(Microwave-Assisted Solid-Phase Peptide Synthesizer)是一种用于合成多肽的高效工具。
它结合了微波辐射和固相合成技术,能够在短时间内合成出高纯度的多肽。
本文将详细介绍微波固相多肽合成仪的原理、优势以及应用。
原理微波固相多肽合成仪利用微波辐射加速多肽的合成过程。
传统的固相合成方法中,反应物在室温下通过长时间的反应来合成多肽。
而微波固相多肽合成仪利用微波辐射的特性,可以在较短的时间内完成合成反应,大大提高了合成效率。
微波辐射能够加速反应物分子之间的碰撞,增加反应速率。
在微波固相多肽合成仪中,多肽合成的过程主要分为三步:活化、耦合和脱保护。
在每一步反应中,微波辐射能够加速反应物的转化,从而缩短了反应时间。
优势微波固相多肽合成仪相比传统的多肽合成方法具有许多优势:1.高效:微波辐射能够加速反应速率,使得多肽的合成时间大大缩短,提高了合成效率。
2.高纯度:微波固相多肽合成仪能够合成高纯度的多肽,减少了杂质的产生。
3.可控性:微波固相多肽合成仪可以通过调节微波辐射的功率和时间来控制反应的进程,使得合成过程更加可控。
4.自动化:微波固相多肽合成仪可以实现自动化合成,减少了操作人员的工作量。
应用微波固相多肽合成仪在生物医药领域具有广泛的应用前景:1.药物研发:多肽药物在治疗癌症、糖尿病等疾病方面具有潜在的应用价值。
微波固相多肽合成仪能够高效地合成出多肽药物,加速药物研发过程。
2.蛋白质工程:微波固相多肽合成仪可以用于合成蛋白质的片段,进一步进行蛋白质工程研究。
3.生物标记物:微波固相多肽合成仪可以合成出具有特定功能的多肽,用于生物标记物的研究。
4.抗体研究:微波固相多肽合成仪可以合成出抗体的结构域,用于抗体的研究和应用。
操作步骤使用微波固相多肽合成仪进行多肽合成的操作步骤如下:1.准备反应器:将反应器放入微波固相多肽合成仪中,加入合适的溶剂和固相载体。
多肽合成仪工作原理

多肽合成仪工作原理
多肽合成仪工作原理主要分为以下几个步骤:
1. 固相合成:多肽合成仪的工作原理基于固相合成技术,其中固相可以是树脂或固体载体。
多肽合成仪中,固相通过连接剂固定在反应器中。
2. 保护基去除:多肽合成的第一步是去除固相保护基。
保护基是为了防止非特定的反应发生。
通过加入适当的溶剂和试剂,可以在保护基去除的过程中去除保护基,暴露出多肽链的氨基。
3. 活化:在保护基去除后,多肽链的氨基需要进行活化。
活化通常是通过加入适当的试剂,如活化剂(如N,N'-二甲基甲
酰胺二乙基)和耦合剂(如二硫代代乙酸)等来实现。
4. 耦合:活化后的氨基能够与下一个氨基进行反应,形成肽键。
耦合的过程需要提供适当的试剂和配体,以促进反应的进行。
5. 反复循环:上述步骤可以循环进行,直到多肽链的完整序列形成。
每次循环都会添加一个新的氨基酸,并保护已添加的氨基酸。
6. 脱保护:整个多肽链形成后,需要脱除保护基,以暴露出多肽的自由末端。
脱保护可以通过加入适当的试剂,如强碱或酸来实现。
7. 纯化和分析:合成的多肽需要进行纯化和分析。
纯化可以使
用色谱技术,如高效液相色谱或逆相高效液相色谱。
分析则通常使用质谱、核磁共振等技术。
总的来说,多肽合成仪通过固相合成技术,依次活化和耦合氨基酸,反复循环,在保护基去除后脱保护,最终合成出完整的多肽链。
这种合成方法具有高效、连续、自动化等特点,可以用于合成各种需要的多肽。
高通量多肽合成仪安全操作及保养规程

高通量多肽合成仪安全操作及保养规程高通量多肽合成仪是一种用于自动化合成多肽的仪器,能够提高合成效率和准确性。
然而,由于其涉及化学品、高温高压等危险因素,操作时需要特别注意安全问题。
本文将介绍高通量多肽合成仪的安全操作及保养规程。
安全操作规程1.仪器放置高通量多肽合成仪需要放在通风良好、离火源远、开关方便、干燥、平整稳固的地方。
使用期间,要保持周围环境干净整洁,不得摆放其他物品。
2.化学品操作在进行实验操作之前,必须准确查看化学品的物性和安全性数据,掌握其毒性、稳定性、燃点和爆炸极限等信息,才能进行下一步的处理。
在进行实验操作时,必须佩戴防护服、手套、防护镜等防护用品,以避免化学品滴到眼睛、口腔等敏感部位。
3.操作规程操作时必须按照设备操作说明书中的步骤进行,不能随意更改、添加或删除操作流程。
在启动仪器前,需进行充分地预热,确保所有零部件的就绪状态,并检查所有阀门、管道、泵等元件是否处于正常工作状态。
在实验中,要密切关注仪器的性能参数,以保证实验的准确性。
在操作过程中,任何异常情况都要及时记录、处理或报告。
4.实验结束合成结束后,需要对仪器进行全面清洁,将不易脱落或清洗的残留物及时清除。
同时,要保证化学品的柜子上锁,所有的文献和记录都要归档。
保养规程1.保养前的准备在进行任何保养过程之前,必须切断供电,等待仪器的所有元件冷却后再进行操作。
2.清洗和维护高通量多肽合成仪需要进行定期的清洗和维护。
在清洗和维护过程中,应使用专用的清洗剂和工具,并根据操作说明进行操作。
首先是清理和检查反应器和管路,检查是否有损坏或漏液的情况,是否有积灰、污垢等杂物。
然后,对关键零部件进行维护,例如更换泵头、替换滤网、检查油压、清洁阀门、管路等。
3.保养之后在对高通量多肽合成仪进行保养后,应仔细检查仪器各部分是否已恢复正常工作状态,并再次进行启动和检查。
如果出现异常,应及时解决或报告。
总结高通量多肽合成仪是一种复杂的自动化化学实验设备。
pcr仪四大国产品牌

pcr仪四大国产品牌PCR(聚合酶链反应)是一种用于扩增DNA片段的技术,被广泛应用于基因组学、医学研究、遗传学等领域。
在PCR实验中,PCR仪是必不可少的实验设备。
PCR仪的质量和性能直接关系到PCR实验结果的准确性和可靠性。
本文将介绍PCR仪领域四大国产品牌的特点和优势。
一、美国品牌 - Thermo Fisher Scientific作为全球领先的生命科学和诊断企业,Thermo Fisher Scientific在PCR仪领域拥有丰富的经验和出色的产品线。
该品牌的PCR仪以高精度、高效性和可靠性著称。
Thermo Fisher Scientific的PCR仪具有以下特点和优势:1. 温度控制精确度高:采用先进的PID温度控制技术,温度控制范围广,可满足不同实验需求。
2. 快速升温和降温速度:独特的热电堆技术和高效散热系统,使PCR反应快速达到所需温度。
3. 多样化的模块化设计:可根据实验需求选择不同的模块,如标配模块、大容量模块等,方便灵活。
4. 应用广泛:适用于标准PCR、实时荧光PCR、定量PCR等多种PCR实验。
二、德国品牌 - EppendorfEppendorf是一家全球领先的实验室仪器和消耗品供应商,其PCR仪产品以出色的品质和性能而闻名。
Eppendorf的PCR仪具有以下特点和优势:1. 优化的温度控制系统:采用高精度PT1000传感器和独立热电堆技术,可实现卓越的温度控制稳定性。
2. 简洁易用的操作界面:智能化的操作界面,用户可以轻松设置PCR反应参数和监控实验进展。
3. 低能耗设计:独特的节能模式和温度控制技术,降低了耗电量,节约实验成本。
4. 高品质材料和加工工艺:严格选材和工艺要求,保证PCR仪的稳定性和耐用性。
三、日本品牌 - Takara BioTakara Bio是一家专注于生物医学研究和医药领域的公司,其PCR仪产品以高品质和创新性能而著称。
Takara Bio的PCR仪具有以下特点和优势:1. 优化的热传导技术:采用特殊的导热材料和散热结构,实现快速均匀的温度变化,提高PCR反应的准确性。
多肽合成仪安全操作及保养规程

多肽合成仪安全操作及保养规程前言多肽合成仪是一种广泛应用于生物化学领域的仪器,可用于合成多肽并将其应用于药物设计、蛋白质研究等方面。
为确保多肽合成仪的安全操作和长期使用,本文将介绍多肽合成仪的安全操作和保养规程。
安全操作环境安排在进行多肽合成仪的操作前需要确保操作环境的安全性和卫生性。
首先,要找到安全的实验室来使用多肽合成仪,需要考虑实验室内的防火、防静电、通风情况等因素,并要保持实验室整洁、无杂物、无易燃品等物品。
其次,在使用实验仪器时,要将地面、桌面等清理干净,并准备好必要的工具和器材,例如手套、安全镊子、移液器、等离子器等。
仪器操作1.压力控制多肽合成仪在操作时,需要传递压力来支持化学反应发生。
紧盯仪器采用的加压方法和压力传递的过程,说明需要根据标准规范设置最小和最大压力值,避免因高压或低压引发仪器故障或人身安全事故。
2.安全打开和关闭在打开和关闭多肽合成仪时,需要按照操作说明书中的规定进行操作,确保实验人员的安全。
在操作时,应将多肽合成仪放在水平地面,并进行安全锁定。
注意:不要在打开或关闭仪器的过程中强制转动仪器开关。
3.化学品处理多肽合成仪在进行化学反应时,需要使用各种化学试剂。
在进行化学合成实验时,必须遵循安全检查清单的原则和规定。
事前要仔细阅读化学试剂使用方法,弄清楚它们的特性、毒性、易燃性等因素,并保持足够的注意力和防范意识。
4.废物处理在化学实验结束后,必须妥善处理实验产生的废物。
不得将废物随便倒入水道、污水箱等地方,必须将废物清理干净并送往指定的垃圾桶。
处理过程中,需严格按要求完成相应的清理记录并且将记录归档。
紧急情况应对当多肽合成仪出现紧急情况时,实验人员必须迅速处理问题,并按照操作说明书或安全手册给出的指导措施处理紧急故障。
在紧急处理完成后,要详细记录处理过程以及原因,以便日后的安全检查和排查。
仪器保养在日常使用中,必须定期对多肽合成仪进行维护和保养,以确保仪器处于最佳工作状态。
INTAVIS MultiPep CF 多肽合成仪-连续实时UV监测

MultiPep CF内置一套独特的合成柱模块,可以合成各种合成难度大,氨基酸序列长的多肽。
可选配的紫外检测模块能够监测合成反应的实时状态并自动优化合成参数。
连续监测功能可以用于自适应清洗等合成步骤,可以极大的降低溶剂的消耗。
MultiPep CF是唯一采用LED长效光源进行连续实时紫外监测功能的多肽合成仪。
MultiPep CF可以升级72合成柱模块,进行10-500µmol浓度的多肽合成。
仪器采用陶瓷切换阀,具有平行清洗功能,可快速的进行溶剂转移和清洗。
合成柱模块可在多肽合成柱中平行合成72个,36个或者18个多肽,单个多肽浓度可达 10-100, 50-300 或者 100-500µmol。
可选配的震荡和加热模块可以保证溶剂和树脂达到最佳的混合效果。
MultiPep CF适合重点实验室,科研机构以及多肽合成公司。
最多可以放置13种溶剂,为复杂合成方法提供了更多的灵活性。
可选配模块:→单柱模块:合成浓度 0.05-2mmol scales,可选配实时紫外监测功能。
MultiPep CF连续实时监测·通过连续流动和震荡混合。
·可选配实时紫外监测功能。
·可选配惰性气体保护功能。
·合成浓度高 (0.05 - 2mmol)·兼容一次性合成柱 (12, 25 和 40ml)→柱合成模块:最多可平行合成72个多肽,单个浓度10-500µmol 。
MultiPep CF柱合成模块此升级模块可最多同时合成72个多肽序列,使用Fmoc法,合成浓度为单个多肽10-500µmol。
合成柱可以独立处理,使得切割过滤过程简便化。
合成柱模块可以选配旋转震荡模块和加热选配模块。
模块更换只需要几分钟时间。
·72个2 或者5 ml 合成柱,单个合成浓度 10-100 µmol·36个 10 ml 合成柱,单个合成浓度 50-300 µmol·18个 25 ml 合成柱,单个合成浓度100-500 µmol。
多肽合成仪的工作原理

多肽合成仪的工作原理一、引言多肽合成仪是一种用于合成多肽的设备。
随着生物技术的发展,多肽在药物研发、生物医学研究等领域得到了广泛应用。
多肽合成仪的出现,为制备高质量的多肽提供了有效的手段。
二、多肽合成仪的组成1. 反应器反应器是多肽合成仪中最核心的部分。
其主要由反应室和加热系统组成。
反应室通常采用高压玻璃管或不锈钢管制作,具有耐腐蚀、耐高温等特点。
加热系统则能够对反应室进行精确控温。
2. 气体输送系统气体输送系统主要由氮气罐、空气过滤器、压力表和阀门等部分组成。
其作用是将氮气输送到反应器中,以促进反应进行。
3. 液体输送系统液体输送系统主要由溶剂罐、溶剂泵和针头等部分组成。
其作用是将各种溶液精确地加入到反应器中,以实现多肽的逐步合成。
4. 控制系统控制系统主要由计算机、温度传感器、压力传感器和流量计等部分组成。
其作用是对反应器进行精确的控制,以保证反应的顺利进行。
三、多肽合成仪的工作原理1. 准备工作首先需要将所需的氮气罐和溶剂罐连接到多肽合成仪上,并将所需的溶剂和氮气加入到相应的容器中。
然后需要设置反应条件,包括温度、压力和时间等参数。
2. 加入第一个氨基酸在反应室中加入第一个氨基酸(通常为甘氨酸)。
此时需要将溶液泵中的甘氨酸溶液加入到反应室中,并加入一定量的亚硝基二甲胺(DMF)作为催化剂。
然后需要将反应室进行密封,并通过空气过滤器向其中注入一定量的氮气。
3. 活化在第一个氨基酸与DMF发生缩合反应之后,需要对其进行活化。
此时需要向反应室中加入一定量的二噁烷(DIEA),以使缩合产物失去保护基并形成新的羧基。
4. 再次加入氨基酸在活化之后,需要再次向反应室中加入下一个氨基酸。
此时需要将溶液泵中的氨基酸溶液加入到反应室中,并加入一定量的DMF和DIEA 作为催化剂和活化剂。
5. 重复以上步骤重复以上步骤,直至合成出所需的多肽。
在每一次加入新的氨基酸之前,都需要进行活化操作,以保证反应的顺利进行。
自动多肽合成仪Liberty操作规程

自动多肽合成仪Liberty操作规程Liberty简易操作规程一、开机:按照顺序依次打开路由器、电脑、Discover、Liberty。
二、打开软件Pepdrive,确认联机成功。
三、新建方法:根据所要合成的多肽选择或者创建相应的序列及合适的方法。
1、在软件主界面下点击methods2、点击Sequence Editor,进入序列编辑界面,点击序列目录左上角New Sequence由需变实,根据要合成的多肽创建所需序列(如需修改序列名称可根据个人习惯重新命名序列名称)。
3、点击保存(save)、关闭(close)后回到方法编辑界面。
4、点击Method目录下的CEM文件夹,左上角New Method由需变实,点击创建新方法(如需修改名字,可根据自己习惯重新命名,系统默认为New Method),选择合适序列,创建新方法时根据需要修改相关选项(不推荐在Liberty上进行Cleaving)。
5、点击保存(save)、关闭(close)后回到软件主界面。
选择所需方法右键添加或者拖到合适位置N号位(例如1号位) 四、五、利用软件的自动计算功能,称取适量树脂(无需提前溶胀,但可加少量DMF 润湿树脂)放于树脂瓶Liberty N号树脂瓶位置,并在各试剂瓶及所需氨基酸瓶内添加足够体积的试剂。
再次检查所有相关试剂无误后点击Start键开始运行。
软件界面黄色部分显示正在运六、行步骤,右上角时间条为预计反应结束所需时间。
七、反应顺利结束后1号变为蓝色,但是如果反应异常中断则显示红色。
异常中断有两种情况:1、断电或者电脑故障中断:电源恢复后开机打开软件中的运行历史(Run History)查看方法运行记录,确认方法运行至哪一步骤,点亮该步骤后右键点击出现Restart Method重新运行方法。
2、仪器提示错误信息中断:详细记录错误信息后联系CEM售后服务人员,解决故障后在终端步骤重新运行方法。
如机器自动切割,产品会以TFA溶液的形式自动转移到对应产品瓶内,此后经过八、旋蒸浓缩后加入10倍量的冰乙醚(-20度冰箱储存1h以上)沉淀,离心即可得到肽的粗产品。
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国内外多肽合成仪主要品牌及选购指南一、基本概念1.多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质,它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间,是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成的化合物。
2.多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,固相合成顺序一般从C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。
过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。
从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来,经过不断的改进和完善,到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无法比拟的优点,从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。
多肽合成总的来说分成两种:固相合成和液相多肽合成。
3.多肽合成仪多肽合成是一个以树脂(人工合成的固相介质)为载体,在一定的反应条件下重复添加氨基酸,经过化学反应后合成多肽的过程,多肽合成仪即是用来合成多肽的仪器。
一般情况下,多肽合成仪整体由主体、传输设备、动力装置以及软件系统组成。
二、历史背景1.固相合成法的诞生多肽合成研究已经走过了一百多年的光辉历程。
1902年,Emil Fischer首先开始关注多肽合成,由于当时在多肽合成方面的知识太少,进展也相当缓慢,直到1932年,Max Bergmann等人开始使用苄氧羰基(Z来保护α-氨基,多肽合成才开始有了一定的发展。
到了20世纪50年代,有机化学家们合成了大量的生物活性多肽,包括催产素,胰岛素等,同时在多肽合成方法以及氨基酸保护基上面也取得了不少成绩,这为后来的固相合成方法的出现提供了实验和理论基础。
1963年,Merrifield首次提出了固相多肽合成方法(SPPS),这个在多肽化学上具有里程碑意义的合成方法,一出现就由于其合成方便,迅速,成为多肽合成的首选方法,而且带来了多肽有机合成上的一次革命,并成为了一支独立的学科——固相有机合成(SPOS)。
因此,Merrifield荣获了1984年的诺贝尔化学奖。
Merrifield经过了反复的筛选,最终屏弃了苄氧羰基(Z)在固相上的使用,首先将叔丁氧羰基(BOC)用于保护α-氨基并在固相多肽合成上使用,同时,Merrifield在60年代末发明了第一台多肽合成仪,并首次合成生物蛋白酶,核糖核酸酶(124个氨基酸)。
1972年,Lou Carpino首先将9-芴甲氧羰基(FMOC)用于保护α-氨基,其在碱性条件下可以迅速脱除,10min就可以反应完全,而且由于其反应条件温和,迅速得到广泛使用,以BOC和FMOC这两种方法为基础的各种肽自动合成仪也相继出现和发展,并仍在不断得到改造和完善。
同时,固相合成树脂,多肽缩合试剂以及氨基酸保护基,包括合成环肽的氨基酸正交保护上也取得了丰硕的成果。
2.多肽合成仪的诞生虽然Merrifield在发明固相多肽合成科学并取得巨大成功的同时,使用了自主研发的合成设备,但却没因此将多肽合成仪引入市场。
1970年,Beckman公司开发的全自动多肽合成仪Beckman 990 Peptide Synthesizer 作为第一台投入市场的科研用多肽合成仪,被美国多所大学的实验室采用。
几乎同一时间,Vega Biotechnologies, Inc.公司开发出两款经济型多肽合成仪:Vega’s Coupler 1000与Vega’s Coupler 250 (不久又推出Vega’s Coupler 296),其将多肽合成后续的在线切割理念结合到设备中,所有反应器采用防爆玻璃材质,防止TFA的腐蚀。
被当时的肽化学界称为最经济适用的多肽合成仪。
而今,Beckman与Vega’s两家公司均停止的多肽合成仪的研发与制造,而转向到更多面的化学合成、分离、检测技术设备的研制产业中。
3.多肽合成仪的发展a) 第一代多肽合成仪第一代多肽合成仪是以Beckman公司推出的Beckman 990 Peptide Synthesizer以及Vega’s Biotechnologies公司推出的Vega’s 296 Peptide Synthesizer为代表的,诞生在上世纪七十年代。
虽然随着生产工艺的改进和发展,如今第一代多肽合成仪已全部退出了市场。
但1990年以前的众多肽化学文献都是在此实验设备上运行研发而来,第一代的多肽合成仪为之后的合成仪研发与制造产生了重大意义。
b) 第二代多肽合成仪第二代多肽合成仪是以Protein Technologies公司推出的PS3 Peptide Synthesizer以及Advanced ChemTech公司推出的ACT peptide synthesizer Model 90为代表的,诞生在上世纪八十年代。
此两款设备也是目前市场上仍在销售的最早的多肽合成仪。
PS3 的设计原理是采用氮气鼓泡的反应方式来对反应物进行搅拌,即合成仪上反应器是固定的,氮气从反应器的下方通过反应器到上部排出,在这一过程中产生的汽泡把固相和液相混合起来。
这样设计的好处是结构简单,成本低,但反应相对温和:1)有时候多肽-固相载体在静电作用下会“抱团”,使其不能与液相充分混合,在这种情况下需要调高氮气的压力以消除静电作用;而在静电作用消除后要把压力立刻调低,不然的话较高的压力会把多肽-固相载体“吹”到反应器液面上方。
由于多肽-固相载体具有较强的粘壁性,一旦被粘到反应器液面上方就再也无法下来,也就是无法再参加反应。
显然第一代机器是无法自动作这样的压力调整的,这就是造成反应“死角”的重要原因。
反应死角会降低多肽合成的效率和多肽的纯度,有的甚至造成合成的失败。
2)长时间氮气鼓泡会使溶液挥发,液面降低后一部分多肽-固相载体就粘在液面上方,也无法再参加反应。
3)氮气消耗量大,运行成本增大。
ACT90的设计原理是反应器在直立下围绕原点作左右摆动,或者圆周运动。
ACT的多肽合成仪同样具有反应温和的特点,即转动角度与速度都不能够完全达到氨基酸耦合的极限,反应往往需要更长的时间。
c) 第三代多肽合成仪第三代多肽合成仪是以Applied Biosystems公司的ABI 433 peptide synthesizer 与C S Bio公司的CS336为代表的无死角多肽合成仪为代表的,诞生在上世纪九十年代。
ABI433的设计原理是反应器上方相对固定,而下方作圆周360度快速旋转,带动反应器里的固液两相从底部向上作螺旋运动,一直达到反应器的最上方。
换句话说,溶液可以达到反应器内部的任意点,真正做到了无死角。
由于搅拌速率可达每分钟1800转的高速,反应得以充分完全。
由于无死角的搅拌方式保证的肽的合成纯度,ABI433型多肽合成仪(其退出多肽合成仪市场后最后一款仪器)至今在世界上还占有着很大的比例。
当然,ABI产品的售价也是最高的。
由于部件使用频率高,电磁阀会经常损坏,而ABI将7个电磁阀做成模块化的设计,坏掉一个电磁阀必须要更换整个模块,无形中增加了维修成本。
CS336的设计原理是反应器中点为圆心,上下做180度旋转搅拌,搅拌速度可达180rpm,同时其采用了氮气鼓泡反应方式的优越性,将氮气吹动作为可选反应方式融入反应方法中,多肽合成仪在科研领域的高耦合率效果得到充分体现。
4.多肽合成仪的现状进入二十世纪以来,各大合成仪制造公司相继推出了升级产品和新产品,如Protein Technologies公司推出Tribute双通道多肽合成仪,将“短信通知”功能融入产品,增添了用户与设备之间的紧密感,更加人性化;C S Bio公司对其从研发型到生产型设备的UV Online Monitor系统配置统一升级,用户可直观看到每一部氨基酸偶联反应的状态并可根据数据调整出最佳合成效果与工艺;Advanced ChemTech公司自2005年破产重组后分裂为两家新公司,其中Aapptec延续了其前身的生产步骤,推出Focus XC三通道合成仪。
美国另一家公司CEM以蛋白质有机反应设备的制造著称,推出了微波多肽合成仪同样可以合成简单的小分子多肽。
其采用微波加热方式,大大提高了反应速度,将反应的速率增加到之前多肽合成仪的几倍甚至十几倍。
可惜的是在加热的情况下副反应也相应增多,多肽纯度不能与之前的第三代甚至第二代产品媲美。
另外,微波加热方法无法放大,故不适合用作多肽药物的研发。
三、功能研究1.运行原理多肽合成仪以固相合成为反应原理,在密闭的防爆玻璃反应器中使氨基酸按照已知顺序(序列,一般从C端-羧基端向 N端-氨基端)不断添加、反应、合成,操作最终得到多肽载体。
固相合成法,大大的减轻了每步产品提纯的难度。
为了防止副反应的发生,参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。
羧基端是游离的,并且在反应之前必须活化。
固相合成方法有两种,即Fmoc和tBoc。
由于Fmoc比tBoc存在很多优势,现在大多采用Fmoc法合成,但对于某些短肽,tBoc因其产率高的优势仍然被很多企业所采用。
具体合成由下列几个循环组成: 1)去保护:Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂(piperidine)去除氨基的保护基团。
2)激活和交联:下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化。
活化的单体与游离的氨基反应交联,形成肽键。
在此步骤使用大量的超浓度试剂驱使反应完成。
循环:这两步反应反复循环直到合成完成。
3)洗脱和脱保护:多肽从柱上洗脱下来,其保护基团被一种脱保护剂(TFA)洗脱和脱保护。
2.基本元件a) 反应器 Reaction Vessel数百年来,制药业的反应器/反应釜设备以玻璃材质最为常见,因其完全透明且耐腐蚀,而被众多化学、生物学专家沿用。
多肽合成的过程需要操作人员直观监测,同时合成后可进行在线切割(切割试剂TFA的强腐蚀性对反应器材质有了极大限制),这些要求限制反应器以玻璃材质最为适用。
而玻璃材质的反应器在制造工艺上有极大的难度限制:①烧制工艺:磨口精度要求极高,正如很多国产设备都无法达到要求出现漏液漏气现象,玻璃壁均匀程度等。
②配合搅拌柄以及密封装置的成套加工工艺③防爆处理b) 氨基酸储罐 Amino Acid Reservoirsc) 溶剂储罐 Solvent Reservoirsd) 量筒 Metering Vessele) 转液瓶 Transfer Vesself) 感应器 Sensor多端触发器自感应定量量取法,直观、科学、相对误差最低。
g) 废液桶 Waste Carboy废液桶通常选择容积较大的HDPE桶,保证通风良好,同时需安装感应器装置时刻检测废液情况,避免溢出。
3.控制配件a) 电磁阀 Valves多肽合成仪中的电磁阀属于敏感配件,其控制液路的串联与闭路,在氨基酸转移与量取,溶剂转移与量取两步骤中起到至关重要的作用。
不同品牌的合成仪对电磁阀的设计与排布也略有不同。