基本原理与主要分离类型
基本类型色谱方法及其分离机制 - 基本类型色谱方法及其分离机制
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第二节 基本类型色谱方法 及其分离机制
一、色谱法的分类
按流动相的分子聚集状态分类: GC、LC、SFC 等
按固定相的分子聚集状态分类: GSC、GLC、LSC、LLC等
一、色谱法的分类
按操作形式分类: 柱色谱法、平面色谱法、毛细管电泳法等
按色谱过程的分离机制分类: 分配色谱法、吸附色谱法、离子交换色谱
留强，后被洗脱，Ka小的组分在吸附剂上保 留弱，先被洗脱。 • Ka与组分的性质（极性、取代基的类型和数 目、构型有关）。
三、吸附色谱法
以硅胶为吸附剂：极性强的组分吸附力强 ①非极性化合物，不被吸附; ②基本母核相同，引入的取代基极性越强，则
分子的极性越强，吸附能力越强；极性基 团越多，分子极性越强; ③不饱和化合物的吸附力强，双键数越多，吸 附力越强。 ④分子中取代基的空间排列
二、分配色谱法
洗脱顺序 由组分在固定相或流动相中溶解度 的相对大小而决定 正相液液分配色谱：极性强的组分后被洗脱。
（库仑力和氢键力）
反相液液分配色谱：极性强的组分先出柱。
三、吸附色谱法
分离原理 利用被分离组分对固定相表面吸 附中心吸附能力的差别（吸附系数）而实现 分离。
吸附过程是试样中组分的分子(X)与流动相 分子(Y)争夺吸附剂表面活性中心的过程， 即为竞争吸附过程 。
法、分子排阻色谱法等
二、分配色谱法
• 分离原理 利用被分离组分在固定相或流动 相中的溶解度差别（分配系数）而实现分离
K＝ Cs X s Vs Cm X m Vm
组分在s中溶解度↑或在m中溶解度↓，K ↑ 在LLC中K主要与流动相的种类与极性有关； 在GLC中K与固定相极性和柱温有关。
细胞分离方法与原理
细胞分离方法与原理细胞是构成生命的基本单位，其分离对于生物学研究、医学诊断和治疗等领域具有重要意义。
细胞分离技术是指将混合的细胞种群分离出特定类型的细胞或富含某种细胞的组织。
本文将围绕细胞分离的方法和原理展开讨论。
一、细胞分离的方法1. 机械法机械法是最早被使用的细胞分离方法之一，其原理是利用细胞的大小、形状、密度、粘附性等特性，通过物理力学的方法将不同种类的细胞分离出来。
机械法包括过滤、沉淀、离心、切碎、切割等方法。
其中，过滤法是最常用的方法，通过不同孔径的滤网筛选出目标细胞，常用的滤网孔径为0.22μm、0.45μm和0.8μm等。
2. 化学法化学法是利用化学试剂对细胞进行分离的方法。
化学试剂可以改变细胞的表面电荷、粘附性、抗体性等特性，使其与其他细胞或细胞外物质分离。
化学法包括胶体金法、磁珠法、离子交换法、免疫磁珠法等。
其中，免疫磁珠法是一种广泛应用的方法，可以利用特异性抗体对细胞进行分离，具有高效、高选择性和易操作等优点。
3. 生物学方法生物学方法是利用生物学特性对细胞进行分离的方法。
生物学方法包括细胞培养、细胞染色、细胞分选等。
其中，细胞培养是最常用的生物学方法之一，可以将细胞在培养基中生长和繁殖，使其数量达到分离的要求。
细胞染色是利用染色剂对细胞进行染色，从而得到不同形态和结构的细胞，有助于细胞的鉴定和分离。
细胞分选是利用细胞的生物学特性，如大小、形状、表面特性等，对细胞进行分离，常用的方法包括流式细胞术、激光捕获微操作等。
二、细胞分离的原理1. 物理原理细胞分离的物理原理主要包括大小、形状、密度、粘附性等特性。
不同种类的细胞具有不同的大小和形状，通过物理力学的方法可以将其分离出来。
例如，利用过滤法可以分离出大小不同的细胞；利用沉淀法可以分离出具有不同密度的细胞；利用粘附性可以分离出具有不同粘附能力的细胞。
2. 化学原理细胞分离的化学原理主要包括化学试剂对细胞表面电荷、粘附性、抗体性等特性的改变。
简述常见色谱分离法的类型及基本原理
简述常见色谱分离法的类型及基本原理色谱分离法是一种常用的分离分析方法，其基本原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡，实现物质的分离。
根据分离原理的不同，色谱分离法可以分为以下几种类型：
1. 液相色谱法（LC）：该方法是最常用的色谱分离法之一，其基本原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡，实现物质的分离。
液相色谱法具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点，被广泛应用于生物、医药、环保、化工等领域。
2. 气相色谱法（GC）：该方法利用不同物质在气相状态下的吸附和解吸特性，实现物质的分离。
气相色谱法具有高分离效能、高灵敏度、分析速度快等优点，被广泛应用于环保、化工、食品、医药等领域。
3. 高效液相色谱法（HPLC）：该方法是一种改进的液相色谱法，通过提高固定相的粒径和流动相的速度，提高分离效率和速度。
高效液相色谱法具有高分离效能、高灵敏度、分析速度快等优点，被广泛应用于生物、医药、环保、化工等领域。
4. 薄层色谱法（TLC）：该方法是一种简便的色谱分离法，通过在薄层板上分离样品，实现物质的分离。
薄层色谱法具有操作简单、分析速度快、灵敏度高等优点，被广泛应用于食品、环保、化工等领域。
5. 离子交换色谱法（IEC）：该方法利用不同物质在离子交换剂
上的吸附和解吸特性，实现物质的分离。
离子交换色谱法具有高分离效能、高灵敏度、分析速度快等优点，被广泛应用于生物、环境等领域。
不同的色谱分离法具有不同的原理和特点，应根据具体的分析需求选择合适的色谱方法。
ms质谱法
质谱法（MS）：原理、应用与实践一、简介质谱法（Mass Spectrometry，简称MS）是一种用于测定物质分子质量和结构分析的实验方法。
它通过将物质转化为离子，并根据其质量/电荷比（m/z）进行分离和检测，实现对物质组成的定量和定性分析。
在这份文档中，我们将详细介绍质谱法的基本原理、仪器组成、不同类型的质谱法以及其在各个领域的应用。
二、质谱法的基本原理质谱法的工作原理可以概括为以下几个步骤：1. 电离：首先，待分析的物质被转化为离子。
这个过程可以通过各种方式实现，包括电子撞击、化学电离、光致电离等。
2. 分离：然后，离子根据其m/z进行分离。
这通常是通过磁场或电场实现的。
3. 检测：最后，分离后的离子被检测和量化。
这通常通过检测离子产生的电子或光子来实现。
三、质谱法的仪器组成质谱仪主要由以下几部分组成：1. 电离源：用于将待分析的物质转化为离子。
2. 质量分析器：用于根据离子的m/z进行分离。
3. 检测器：用于检测和量化离子。
4. 数据处理系统：用于处理检测器产生的信号，生成质谱图。
四、不同类型的质谱法根据不同的电离方法和质量分析器，质谱法可以分为多种类型，包括：1. 电子撞击质谱法（EI-MS）：在这种方法中，待分析的物质被电子撞击后转化为离子。
2. 磁扇质谱法（MASS）：在这种方法中，离子在磁场中运动，根据其m/z进行分离。
3. 飞行时间质谱法（TOF-MS）：在这种方法中，离子在电场中飞行，根据其m/z 和飞行时间进行分离。
4. 电喷雾质谱法（ESI-MS）：在这种方法中，待分析的物质在电喷雾作用下转化为离子。
五、质谱法的应用质谱法在许多领域都有广泛的应用，包括：1. 生物医学：在生物医学研究中，质谱法被用于蛋白质组学、代谢组学等领域的研究。
2. 环境科学：在环境科学中，质谱法被用于监测环境中的污染物。
3. 化学分析：在化学分析中，质谱法被用于确定化合物的结构和纯度。
4. 食品安全：在食品安全领域，质谱法被用于检测食品中的有害物质。
高效液相色谱法的主要类型及其分离原理
高效液相色谱法的主要类型及其分离原理高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9´107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
特点1．高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。
一般可达150～350×105Pa。
2. 高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。
高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h 。
3. 高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。
4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。
如荧光检测器灵敏度可达10-11g。
另外，用样量小，一般几个微升。
5.适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。
而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。
对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400 以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75% ～80% ）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。
据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。
高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。
用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。
层析技术的种类及其基本原理
层析技术的种类及其基本原理层析技术是一种分离化合物的方法，它是基于物质在不同相中的分布系数不同而实现的。
层析技术主要包括三种类型：薄层层析、柱层析和气相色谱。
一、薄层层析1.1 基本原理薄层层析是一种简单易行的分离方法，它利用了化合物在固定相和移动相之间的分配系数差异进行分离。
通常情况下，我们将待测样品涂在硅胶或氧化铝等吸附剂上，然后将其放置在一个玻璃板上，形成一个薄而均匀的涂层。
接着，我们将这个玻璃板放入一个密闭的槽中，在槽底部加入适量移动相。
当移动相向上升时，它会与样品发生反应并带走它们。
由于不同化合物在固定相和移动相之间具有不同的分配系数，因此它们会以不同速度被带走，并最终被分离出来。
1.2 分类根据吸附剂的不同，薄层层析可以进一步分为硅胶层析、氧化铝层析和纸层析等。
1.3 应用薄层层析广泛应用于食品、化妆品、药品等行业中，用于分离和鉴定其中的成分。
二、柱层析2.1 基本原理柱层析是一种利用固定相和移动相之间的互作用进行分离的方法。
通常情况下，我们将待测样品注入到一个装有固定相的柱子中，然后通过加入适量移动相来进行分离。
在这个过程中，不同化合物会以不同速度被带走，并最终被分离出来。
2.2 分类根据固定相的不同，柱层析可以进一步分为凝胶柱层析、反相柱层析和离子交换柱层析等。
2.3 应用柱层析广泛应用于生物技术、制药工业以及环境监测等领域中，常用于纯化和提取目标物质。
三、气相色谱3.1 基本原理气相色谱是一种利用气体载流体将混合物分离成单独组分的方法。
通常情况下，我们将待测样品注入到一个装有固定相的柱子中，然后通过加热来蒸发样品中的化合物，并将它们带入气相。
接着，我们将气相送入到一台质谱仪中进行分析。
在这个过程中，不同化合物会以不同速度被带走，并最终被分离出来。
3.2 分类根据固定相的不同，气相色谱可以进一步分为毛细管气相色谱、开放管气相色谱和微柱气相色谱等。
3.3 应用气相色谱广泛应用于食品、环境、制药等领域中，常用于分析和鉴定其中的成分。
分离器的结构和工作原理
分离器的基本原理
立式分离器（径向）
油气混合物经油管进入分离器后，喷洒在
挡油帽上（散油帽），扩散后的油靠重力 沿管壁下滑到分离器的下部，经排油管排 出。同时，气体因密度小而上升，经分离 伞集中向上改变流动方向，将气体中的小 油滴粘附在伞翌上，聚集后附壁而下，脱
气
油气
油后的气体经公离器顶部出气管进入管线
离后比较纯净的天然气从气口排出。
总结
通过对分离器的结构和原理学习，从而了解 其内部结构、类型、特点以及工作原理，熟 悉现玚常用几种分离器的结构和工作原理。
气进一步分离，油沿挡油帽下滑，气上升。上升的气体经下
层分离伞收集集中，从顶部出口处上升进入上层分离伞，沿 上层分离伞上升，这样一收一扩并几次改变流动方向，尤其 在通过伞斜面过程中，使初分离出来的气体中携带的小油滴
吸附在分离伞的斜面上，聚集成较大的油滴而下滑落入分离
器下部，然后经油出口排出分离器。而经两次分离脱出的比 较纯天然气则从分离器顶部的气出口排出。 离心分离原理—（初分离） 重力沉降原理—（沉降段） 碰撞分离原理—（捕雾段）
分离器的结构和工作原理
2010年采油技师二班
张炳华
教
学
内
容
1、了解分离器的作用、类型 2、知道分离器的主要结构
3、熟知分离器的工作原理
分离器的作用及类型
（一）、分离器的作用：主要用来分离油、气、沉水、沉砂、单井计量 等。 （二）、分离器的结构：目前现场上使用的油、气分离器类型很多，但 基本结构大体相同，都是由壳体、油气混合进口、伞油帽、油出口、 排污口、水包、量油玻璃管、隔板分离伞、气出口等所组成。同时 为了使油、气分离器在生产过程中能够安全地运行，上部都装有安 全阀。 （三）、分离器的类型： 1、按内部结构的不同分为：伞状分离器、隔板分离器、蜂窝分离箱 式分离器、翻斗分离器、隔板、伞状分离器。 安全阀
简述常见色谱分离法的类型及基本原理
简述常见色谱分离法的类型及基本原理色谱分离法是一类对物质进行分析和分离的重要手段，广泛应用于化学、生物化学、药品、环境等领域。
常见的色谱分离法主要包括气相色谱（Gas Chromatography，GC）、液相色谱（Liquid Chromatography，LC）、超高效液相色谱法（Ultra-High Performance Liquid Chromatography，UHPLC）、毛细管电泳（Capillary Electrophoresis，CE）等。
本文将分别对这些色谱分离法的类型和基本原理进行介绍。
一、气相色谱（GC）气相色谱是利用气相作为移动相进行分离的色谱分离法，适用于描写分析样品中挥发性和半挥发性有机化合物的组成和含量，对非极性化合物富有选择性。
其基本原理是将待分离的混合物通过一定方法进样，然后通过携带气体流动的固定相柱进行分离，使用检测器进行检测，最后形成色谱图。
GC分析主要有两种模式，即气定常模式和温度编程模式。
气定常模式：在气定常模式下，固定相的温度是恒定不变的。
样品经进样器进入柱状固定相，随着固定相温度的递增，各组分在柱中停留时间渐次增长，从而实现了分离。
温度编程模式：在温度编程模式下，固定相的温度是随时间递增的。
通过渐增柱温，可以改变各组分在柱中的停留时间，以实现对样品中组分的分离。
该方法因为能够提高分离效率，主要应用于复杂混合物的分析。
二、液相色谱（LC）液相色谱是液体相与固定相之间相互作用的色谱分离法，其基本原理是待分析的混合物通过一种液相载体进行分离，静止相可以是固体（固定相液相色谱，SPLC）或是液体（液-液色谱，LLC）。
LLC又可分为正相液相色谱（Normal Phase Liquid Chromatography，NPLC）和反相液相色谱（Reverse Phase Liquid Chromatography，RPLC）。
正相液相色谱：正相液相色谱是以极性固定相为静止相的液相色谱，常用的固定相有硅胶和氨基硅胶。
色谱法的基本原理
色谱法的基本原理
色谱法是一种分离和分析化合物的方法，它基于不同化合物在固定相和流动相
之间的分配系数不同而实现分离。
色谱法广泛应用于化学、生物、环境等领域，是一种重要的分析技术。
本文将从色谱法的基本原理入手，介绍色谱法的工作原理、分类和应用。
色谱法的基本原理是利用不同化合物在固定相和流动相之间的分配系数不同而
实现分离。
固定相是一种固体或涂覆在固体支持物上的液体，而流动相则是气体或液体。
在色谱柱中，样品通过流动相的推动在固定相中进行分离。
当样品中的化合物与固定相和流动相相互作用时，它们将以不同的速率通过色谱柱，从而实现分离。
色谱法根据固定相的不同可以分为气相色谱和液相色谱。
气相色谱主要应用于
气体和挥发性化合物的分离，而液相色谱则主要应用于非挥发性化合物的分离。
在色谱法中，固定相的选择对分离效果起着至关重要的作用，不同的固定相适用于不同类型的化合物。
色谱法的应用非常广泛，它可以用于分离和分析各种化合物，包括有机物、无
机物、生物分子等。
在化学领域，色谱法常用于分析有机合成产物的纯度和结构鉴定；在生物领域，色谱法可以用于分离和分析蛋白质、核酸等生物大分子；在环境领域，色谱法可以用于检测水体和大气中的污染物。
总之，色谱法是一种重要的分离和分析技术，它基于化合物在固定相和流动相
之间的分配系数不同而实现分离。
通过选择合适的固定相和流动相，色谱法可以实现对各种化合物的高效分离和分析。
在实际应用中，色谱法已经成为化学、生物、环境等领域不可或缺的分析工具，为科学研究和工程实践提供了重要的支持。
常见色谱分离法的类型和基本原理
常见色谱分离法的类型和基本原理
常见的色谱分离法包括气相色谱（GC）、液相色谱（LC）、超高效液相色谱（UHPLC）和离子交换色谱（IC）等。
1. 气相色谱（GC）：该方法将待分离的混合物溶解在气相载气中，然后通过柱中的固态填充物，利用物质在固相填充物和气相载气之间的分配不平衡来进行分离。
分离是根据样品中化合物在固相填充物上的相对亲/疏水性的不同实现的。
2. 液相色谱（LC）：该方法将待分离的混合物通过溶解在液相中，然后通过液相柱中的固相填充物进行分离。
液相色谱可以根据不同的机理分为几种类型，包括反相色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色谱等。
3. 超高效液相色谱（UHPLC）：UHPLC是液相色谱的一种变种，使用更细小的颗粒填充物和较高的操作压力，以提供更高分辨率和更快的分离速度。
4. 离子交换色谱（IC）：IC主要用于分离和分析带有正负离子的化合物。
通过固相柱中的离子交换剂，将待分离的样品中的离子与固相交换剂之间的电荷相互作用进行分离。
这些色谱分离法的基本原理都是根据待分离样品中组分之间在不同相（固相和液相、气相和液相）中的分配行为或相互作用来进行分离。
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• 按结构分，键合相可分为四种键型：
（1）硅酸酯型（≡Si-O-C≡）键合相 （2）硅氮型（ ≡ Si-N ≡ ）键合相 （3）硅碳型（ ≡ Si-C ≡ ）键合相 （4）硅氧烷型（ ≡ Si-O-Si-C ≡ ）键合相
2018/11/24
• 按极性分，键合相可分为三种
• （1）非极性键合相
氰基键合相： 硅胶-氰乙硅烷基[－Si－(CH2)2CN] 一般用于正相色谱
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表示方法：
国产：YWG-C18H37 YQG-C18H37 YWG-CN YQG-NH2
YWG-C6H5
进口：Spherisorb ODS
Lichrosorb -CN
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特点：
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离子交换色谱法是利用不同待测离子对固定相亲和力的差别来 实现分离的。其固定相采用离子交换树脂，树脂上分布有固定的带电 荷基团和可游离的平衡离子。当待分析物质电离后产生的离子可与树 脂上可游离的平衡离子进行可逆交换，其交换反应通式如下： 阳离子交换：
+ + Y +R Xm s
阴离子交换：
_
_ + + Ym + X R s
_ _ X m + Y R+ s
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_ _ Y m + X R+ s
凡在溶液中能够电离的物质，通常都可用 离子交换色谱法进行分离。它不仅适用无机离 子混合物的分离，亦可用于有机物的分离，例 如氨基酸、核酸、蛋白质等生物大分子。因此 ，应用范围较广。
1）不易流失； 2）热稳定性好； 3）化学性能好：可键合不同官能团，
提高选择性； 4）载样量大； 5）适于梯度洗脱 存在着双重分离机制：(键合基团的覆盖率决定分离机理) 高覆盖率：分配为主； 低覆盖率：吸附为主；
使用时应注意：
1）流动相pH应在2～8，否则会引起硅胶溶解 2）不同厂家，不同批号的同一类型键合相也可能表现不同的
液-固吸附 液-液分配
正相色谱 反相色谱
一般反相色谱 离子对色谱
键 合 相 色 谱
离子抑制色谱 一般离子交换色谱 离子交换色谱 离子色谱 氨基酸分析 凝胶渗透色谱
HPLC
空间排斥色谱 假相色谱
凝胶过滤色谱 胶束色谱
环糊精色谱 亲合色谱，手性色谱，毛细管电泳
一、 液-固吸附色谱
liquid-solid adsorption chromatography
2018/11/24
吸附剂含水量是控制吸附剂活性，影
响溶质保留的重要因素。
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当流动相通过固定相（吸附剂）时，吸附剂表 面的活性中心就要吸附流动相分子。同时，当试 样分子（X）被流动相带入柱内，只要它们在固定 相有一定程度的保留就要取代数目相当的已被吸
附的流动相（溶剂分用）于是，在固定相表面发
2018/11/24
阴离子分离：常采用烷基铵类，如氢氧化四丁基铵或氢 氧化十六烷基三甲铵作为对离子； 阳离子分离：常采用烷基磺酸类，如己烷磺酸钠作为对 离子； 色谱条件：非极性的疏水固定相 (C-18柱 )，含有对离子 Y+ 的甲醇 - 水或乙腈 - 水作为流动相，试样离子 X- 进入流动相 后，生成疏水性离子对Y+ X -后；在两相间分配。
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四、 离子色谱
离子色谱法是由离子交换色谱法派生出来的一种分离方 法。其与离子交换色谱的区别是其采用了特制的、具有极低 交换容量的离子交换树脂作为柱填料，并采用淋洗液抑制技 术和电导检测器，是测定混合阴离子的hy
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五、
生竞争吸附:
Xm +nMs 吸附 解吸 Xs + nMm
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二、 液-液分配色谱
liquid- liquid partition chromatography
固定相与流动相均为液体（互不相溶）； 基本原理：组分在固定相和流动相上的分配； 流动相：对于亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流 动相的极性小于固定液的极性（正相 normal phase），反之 ，流动相的极性大于固定液的极性（反相 reverse phase）。 正相与反相的出峰顺序相反； 固定相：早期涂渍固定液，固定液流失，较少采用； 化学键合固定相：将各种不同基团通过化学反应键合到 硅胶（担体）表面的游离羟基上。C-18柱（反相柱）。
固定相：固体吸附剂如硅胶、氧化铝等，较常使用的是
5～10μm的硅胶吸附剂；
流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂，相似相溶， 即极性大的试样用较强的流动相，反之亦然。 基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸；
适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有
官能团的化合物和异构体有较高选择性； 缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾；
色谱特性。
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2018/11/24
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三、 离子交换色谱
ion-exchange chromatography
固定相：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂； 流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶 液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液； 基本原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应； 组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存 在形式等有关。亲和力大，保留时间长； 阳离子交换：R—SO3H +M+ = R—SO3 M + H + 阴离子交换：R—NR4OH +X- = R—NR4 X + OH应用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等。
• （2）弱极性键合固定相
• （3）极性键合相
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（1）非极性键合相
表面基团为非极性羟基，如十八烷基（C18）、辛烷基
（C8）、甲基（C1）、苯基等。 常用于反相色谱 非极性键合相的烷基链越长，稳定性越好，溶质的K越大， 载样量越高，分离选择性越好。
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固定相：C1 固定相：C8
固定相：C18
时间，min
硅胶-烷基键合相中烷基链长对反相色谱分离的影响
1-尿嘧啶；2-苯酚；3-乙酰苯；4-硝基苯；5-苯甲酸甲酯；6-甲苯
2018/11/24
（2）弱极性键合固定相
常见的有醚基和二羟基键合相
可用于正相或反相色谱 （3）极性键合相
氨基键合相： 硅胶-氨丙硅烷基[－Si－(CH2)3NH2]