BHK细胞培养小结
细胞培养毕业实习报告总结
毕业实习报告总结：细胞培养首先，我要感谢我的导师和实验室的同事们，他们在我的实习期间给予了我无私的帮助和指导。
通过这次实习，我对细胞培养这一领域有了更深入的了解，也积累了宝贵的实践经验。
细胞培养是生物医学和生物技术领域中重要的实验技术，它通过模拟细胞在体内的生长环境，使细胞在体外继续生长和繁殖。
在实习期间，我学习了细胞培养的基本原理和操作技术，包括细胞的复苏、传代、胰蛋白酶消化、细胞计数、铺板等步骤。
我也了解了细胞培养中常用的仪器设备，如二氧化碳培养箱、显微镜、细胞计数仪等。
在实习过程中，我不仅掌握了细胞培养的基本技能，还参与了一些具体的实验项目。
我参与了一项关于细胞凋亡的研究，通过细胞培养技术，我成功地培养了所需细胞，并进行了凋亡实验。
通过观察细胞形态的变化和流式细胞术的分析，我得出了实验结果，并协助导师进行了数据分析和论文撰写。
这个过程中，我不仅学习了实验设计和数据分析的方法，还提高了自己的实验操作能力。
在实习期间，我也遇到了一些挑战和困难。
例如，细胞培养过程中细胞的生长速度较慢，有时需要耐心等待。
另外，细胞的复苏和传代过程中，也有一些技巧需要掌握。
通过请教导师和同事，我逐渐克服了这些困难，并取得了较好的实验结果。
通过这次实习，我不仅学到了专业知识和技能，还锻炼了自己的团队合作和沟通能力。
在实验室中，我与同事们共同合作，互相学习和帮助。
我们也定期进行实验室会议，分享实验进展和心得体会，这让我感受到了团队合作的重要性。
总之，这次细胞培养实习是一次非常宝贵的学习经历。
我不仅掌握了细胞培养的基本技能，还参与了一些具体的实验项目，并取得了较好的研究成果。
同时，我也学会了团队合作和沟通的能力。
我相信这次实习对我未来的学术研究和职业发展将产生积极的影响。
细胞分子生物学实验训练小结
细胞分子生物学实验训练小结本次细胞分子生物学实验训练的目标是加深对细胞和分子生物学的理解，并提高实验技能。
以下是我对此次实验训练的总结：实验1：细胞培养和细胞计数在本实验中，我们研究了细胞培养的基本技术和细胞计数的方法。
通过观察细胞的生长情况和计数细胞的数量，我们能够评估细胞的健康状态和增殖能力。
同时，我们也了解了如何使用显微镜观察细胞的形态特征，并掌握了准确计数细胞的技巧。
实验2：DNA提取和PCR扩增本实验旨在了解DNA提取的步骤和PCR扩增的原理。
通过提取细胞中的DNA，并使用PCR技术扩增目标基因片段，我们能够获取足够数量的DNA样本进行后续分析。
在这个过程中，我们学会了如何使用蛋白酶K和酒精沉淀法提取DNA，以及设置PCR反应体系和调节PCR条件进行DNA扩增。
实验3：凝胶电泳与基因分析在这个实验中，我们研究了凝胶电泳的原理和应用，以及DNA分析的方法。
通过将PCR扩增后的DNA样本加载到琼脂糖凝胶上，我们可以根据DNA片段的大小进行分离和分析。
我们学会了准备琼脂糖凝胶和加载DNA样本，并通过电泳分离和可视化DNA条带来判断PCR扩增是否成功。
实验4：细胞转染和荧光显微镜观察本实验的目标是研究细胞转染的原理和应用，以及荧光显微镜的使用。
通过将外源基因导入细胞中，并观察转染细胞的荧光信号，我们可以研究基因在细胞中的表达及功能。
在这个实验中，我们掌握了细胞转染技术，学会了荧光染料的使用和荧光显微镜的操作。
结论通过本次细胞分子生物学实验训练，我们不仅加深了对细胞和分子生物学的理解，还提高了实验技能。
我们学会了细胞培养和计数、DNA提取和PCR扩增、凝胶电泳与基因分析、以及细胞转染和荧光显微镜观察等技术。
这些技能将为我们今后的研究工作和研究提供坚实的基础。
希望通过不断积累实验经验，我们能够不断提升自己在细胞分子生物学领域的能力，为科学研究做出更大的贡献。
*以上为细胞分子生物学实验训练小结。
*。
细胞培养实验总结总结
细胞培养实验总结引言细胞培养是现代生物学研究中常用的实验技术之一，它可以模拟体内环境，为研究细胞的生理生化过程提供便利。
本文对进行的细胞培养实验进行总结，包括实验目的、实验步骤、实验结果及讨论等内容。
实验目的本次实验的主要目的是通过细胞培养技术培养和观察细胞生长情况，了解细胞培养过程中的操作步骤和注意事项。
同时，通过添加不同培养基成分，探究对细胞生长和分化的影响。
实验步骤1.准备实验器材和培养基：将所需的培养基放置在无菌工作台上，同时清洗好所有需要使用的培养器皿和器械，保持无菌状态。
2.细胞传代：将上一代培养的细胞用无菌吸管吸取，移至新的培养器皿中，加入新鲜准备好的培养基。
细胞传代的目的是保持细胞的生长状态和纯度。
3.细胞观察：将培养器皿放置在显微镜下，使用适当倍率进行观察。
检查细胞的生长状况和细胞数量是否符合预期。
4.添加培养基成分：根据实验设计，可以在相应的培养器皿中加入不同的培养基成分，例如细胞分化因子、抗生素等。
目的是观察添加不同成分后细胞的生长和分化变化。
5.细胞采集：当细胞达到一定的生长密度时，可以进行细胞采集。
用无菌吸管吸出细胞悬液，将其置于离心管中，并进行离心处理，获取细胞沉淀。
6.分析实验结果：对培养的细胞进行计数、生长速率分析等统计，观察实验结果是否符合预期。
实验结果根据实验步骤和操作要求，我们成功地进行了细胞培养实验，并获得了一系列实验结果。
首先，观察到细胞在培养基中显示出良好的生长状态。
细胞数量逐渐增多，呈现典型的细胞周期。
观察到细胞的形态变化，细胞逐渐变大，细胞贴壁生长良好。
这说明培养基的成分和培养条件对细胞的生长具有重要影响。
其次，实验中添加了不同的培养基成分，包括细胞分化因子和抗生素。
观察到加入细胞分化因子后，部分细胞呈现出明显的分化现象，形成不同的细胞类型。
而加入抗生素后，观察到细胞数量减少，并且呈现出不同程度的细胞死亡。
这说明细胞分化和细胞存活受到培养基成分的影响。
新型微载体培养系统中BHK-21细胞的生长特性研究
［ １ ３ ］ Ｈａ ｒ ｅ ｎ ｄ ｒ ａ Ｇ Ｇ，Ｊ ａ ｙ ａ ｓ ｅ ｋ ａ ｒ ａ Ｒ Ｗ ，Ｄｉ ｓ ｓ ａ ｎ ａ ｙ ａ ｋ ｅ Ｖ Ｈ．Ｈａ ｐ ｌ ｏ —
ｔ ｙ ｐ ｅ ｓ ｏ ｆ ｈｅ ｐ ａ ｒ ｉ ｎ — － ｂ ｉ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ｅ ｐ ｉ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｌ — － ｇ ｒ ｏ ｗｔ ｈ — － ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ － ｌ ｉ ｋ ｅ ｇ ｒ ｏ ｗｔ ｈ
ｔ ｅ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｓ ｐ ｌ ｉ ｃ ｅ ｄ ｆ ｏ ｒ ｍｓ ［ Ｊ ］ ．Ｅ ＭＢ Ｏ Ｊ ， １ ９ ９ ５ ，１ ４ （ ２ ） ： ３ ４ １ — ３ ５ ０ ． ［ １ ５ ］ 许发美 ， 邢 海 燕 ，田 征 ，等 ．ＡＭＬ ｌ ａ在 小 鼠 造 血 细 胞 增 殖
养， 为以 Ｂ ＨＫ一 ２ １细胞 为生产 基质 的病毒 疫苗 生产提供 了一 条 简便 快捷 的途径 。
关键 词 ： 生物反 应 器； 微 载体 ； Ｂ ＨＫ 一 ２ １细胞
中 图分 类 号 ： Ｑ８ １ ３ ． １ １ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ７ — ５ ０ ３ ８ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ — ０ ０ ３ ２ — ０ ５
型， 分发酵 式 培养 和 微 载体 式 培 养 。动 物 细胞 以贴 壁 细胞 为主 ， 因此 微 载体 培 养 式生 物 反 应 器 在病 毒 疫 苗制备 应用更 为广 泛 。微 载体 培养 式生 物反 应器 又分搅拌 式和 固定床 式生物 反应器 ， Ｂ ｅ ｌ ｌ Ｃ ｅ ｌ ｌ 是 美 国
目前 我 国兽 医 生物 制 品 生产 过程 中 ， 细 胞 培 养 设 备相对 比较 落后 ， 大多是 在转 瓶 内旋转 贴 壁培 养 ，
BHK-21传代细胞培养
BHK-21传代细胞培养BHK是仓鼠肾细胞[原理]细胞在培养瓶壁上长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。
传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。
同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。
[材料和试剂]1、细胞：贴壁BHK-21细胞株2、试剂：0.25％胰蛋白酶、配制好的DMEM培养液、小牛血清、双抗溶液、7.5%碳酸氢钠3、仪器和器材：倒置显微镜，培养箱、培养瓶、胶塞、量筒、注射器、针头、酒精灯、污物缸等[操作步骤]1、应需要计算好培养液的总用量，按10%的比例加入血清，按1%的比例加入双抗。
用7.5%的碳酸氢钠调PH至7.0~7.2左右。
2、将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。
3、加入0.25％胰酶溶液，使瓶底细胞都浸入溶液中为宜。
4、瓶口塞好胶塞，平放在实验台上。
约2~3分钟会看到贴壁细胞层出现细针孔空隙，赶紧将胰酶弃去，加入少量培养液终止消化。
5、用注射器将贴壁的细胞反复吹打，使其均匀分散成悬液，再加入足量的培养液，分成两到三瓶。
塞好胶塞，置37℃温箱中继续培养。
细胞培养常用溶液的配制一、青、链霉素溶液青霉素钠盐(80万IU／瓶) 5瓶链霉素(100万IU／瓶) 4瓶将两者溶于400ml0.9％的无菌生理盐水，分装小瓶，-20℃保存。
双抗在培养基中的终浓度为100IU/ml为宜。
二、7.5%碳酸氢钠溶液的配制称取碳酸氢钠7.5g，加入超纯水使总体积为100ml。
高压灭菌，分装于小瓶中，4℃贮存。
三、1%酚红溶液的配制首先配制1mol/L的NaOH溶液。
称取NaOH4.0g，加入100ml超纯水，使NaOH 完全溶解，在室温或4℃贮存（最好现用现配）。
配制好NaOH溶液后，再称取1.0 g 酚红置研钵中，加1mol/L的NaOH（不多于7.0ml），研磨使酚红完全溶解，加超纯水至100ml，高压消毒，在室温或4℃贮存。
四、0.25%胰蛋白酶溶液的配制氯化钠8.0g氯化钾0.2g柠檬酸钠(Na3C6H5O7•5H2O) 1.12g磷酸二氢钠(NaH2PO4•2H2O) 0.056g碳酸氢钠 1.0g葡萄糖 1.0g胰蛋白酶（1：250） 2.5g超纯水加至1000ml放4℃冰箱过夜，待胰蛋白酶充分溶解后，用0.2um微孔滤膜过滤除菌，分装于小瓶中，-20℃保存。
bhk细胞培养小结
BHK 细胞培养小结报告人：1、细胞培养（1）培养基： DMEM 培养基+10%无支原体新生牛血清 +100U/ml 青/链霉素（2）细胞传代：细胞长满瓶壁 90%-95% 时，将上清倒掉，用 D-Hanks 液洗 2-3 遍细胞，加 1ml0.25% 胰酶 37℃温箱消化 3-5 分钟后，加入 3ml 培养基将细胞吹下来，转移至 15ml 离心管， 1000 转离心 5 分钟，倒掉上清，加入 3ml 新鲜培养基重悬细胞，将细胞吹打均匀后按 1：2 或 1：3 的比例接种于新的培养瓶中，加入 5ml 新鲜培养基，放入培养箱培养。
2、细胞冻存及复苏（1）细胞冻存液： 90%无支原体新生牛血清 +10%DMSO（2）细胞冻存方法：细胞长满瓶壁90% 后，细胞消化离心，弃上清，加入配制好的冻存培养液（含10%DMSO），重悬细胞，或者用细胞计数板计数细胞浓度，将细胞浓度调至 106 个/m l，将细胞转移至冻存管，每管1ml，用棉花包住冻存管放入-80℃冰箱，2 天后将冻存管放入液氮冻存。
（3）细胞复苏：先准备一支15ml 离心管，加入 5-8ml 新鲜培养基，再从液氮取出细胞后立刻放入37-40 ℃水浴，在 1min 内融化，然后将细胞转移至装有培养基的离心管，1000 转离心 5 分钟，倒掉上清，加入 2m l 新鲜培养基重悬，再转移到 1 个新的培养瓶中，加入 4ml 新鲜培养基放入培养箱培养， 1 天后细胞贴壁，换液。
3、注意事项（1）如果细胞生长太慢可选用含20% 无支原体血清的DMEM 培养基培养，可加快细胞生长；（2）细胞传代时必须先离心后再重悬，如果不离心直接吹打后传代细胞不能吹打成单个细胞悬液，传代细胞成堆生长，影响细胞状态；（3）细胞传代时不能传得太稀，如果传代时细胞浓度太低的细胞生长速度会很慢，而且细胞容易成堆生长；（4）胰酶在使用前最好预热到 37 度。
由于胰酶平时保存在 4 度，反复预热对胰酶的活性不好，可以将胰酶进行分装，尽可能避免胰酶反复冷却加热；（5）BHK 还是比较好消化的， 2-3min 应该足够了，消化时间太长对细胞不利。
细胞培养实验员工作总结
细胞培养实验员工作总结作为一名细胞培养实验员，我深知这项工作的重要性和复杂性。
在过去的一段时间里，我积累了丰富的经验，也遇到了不少挑战。
在这篇文章中，我将分享我的工作总结，希望能够对同行们有所帮助。
首先，作为细胞培养实验员，我们的工作主要是负责细胞培养和细胞实验。
这包括细胞的分离、培养、传代、冻存等工作。
在这个过程中，我们需要严格控制实验条件，确保细胞的生长环境和培养条件符合要求。
同时，我们还需要进行细胞实验，包括细胞凋亡、增殖、迁移等实验，以评估细胞的生理功能和药物反应等。
在工作中，我发现最重要的是细心和耐心。
细胞培养是一个细致而繁琐的过程，需要耐心和细心的操作。
任何一个细节的疏忽都可能导致实验失败。
因此，我在工作中始终保持高度的注意力和细致的操作，以确保实验的准确性和可靠性。
另外，团队合作也是非常重要的。
在实验室工作中，我们需要和同事们密切合作，共同完成实验任务。
在这个过程中，我学会了与他人良好沟通，团结协作，共同解决实验中的问题。
团队合作不仅提高了工作效率，也促进了团队的凝聚力和成员之间的友好关系。
此外，不断学习和提高自身的专业能力也是非常重要的。
细胞培养是一个不断发展和变化的领域，新的技术和方法层出不穷。
作为一名细胞培养实验员，我始终保持学习的态度，不断学习新的知识和技术，提高自己的专业能力。
总的来说，作为一名细胞培养实验员，我深知这项工作的重要性和挑战性。
在工作中，我始终保持细心和耐心，与同事们团结合作，不断学习和提高自身的专业能力。
我相信，在未来的工作中，我将继续努力，不断提高自己的细胞培养技术，为科学研究和医学发展贡献自己的力量。
微载体培养BHK-21细胞生产狂犬病毒Flury株的研究
现代畜牧兽医2018年第9期刘艳霞：微载体培养BHK-21细胞生产狂犬病毒Flury株的研究狂犬病（Rabies）是由狂犬病毒感染引起的一种致死性、人兽共患的传染病，表现为急性、进行性、几乎不可逆转的脑脊髓炎，临床表现恐水、怕风、兴奋、咽肌痉挛、流涎、进行性瘫痪等症状，最后因呼吸、循环衰竭而死亡[1]。
犬狂犬病在80多个国家和地区广泛分布，主要是发展中国家。
99%以上的人狂犬病病例的病毒都来自于犬[2]。
通过大幅度提高犬的免疫覆盖率，在控制了犬狂犬病流行的同时也使人狂犬病的发病率显著降低[3-4]。
狂犬病弱毒活疫苗的安全性一直令人担忧[5]，2017年7月1日，农业部发布第2514号公告，停止生产使用狂犬病活疫苗（包括多联活疫苗）。
目前国内市场上兽用狂犬病灭活疫苗毒株主要为FluryLEP株、Flury株、PV206株、CVS-11株、CNT-1株、SAD株、dG株、PV/BHK-21株，其中绝大多数采用传统的转瓶培养工艺进行生产。
高滴度的抗原液是疫苗生产中非常重要的一微载体培养BHK-21细胞生产狂犬病毒Flury株的研究刘艳霞（辽宁益康生物股份有限公司，辽宁辽阳111000）摘要：本文主要研究了利用生物反应器Tide-Cell微载体培养的BHK-21细胞生产狂犬病毒Flury株工艺。
总数为1×1010个BHK-21细胞接入装有500g BioNOCTMⅡ型载体的Tide-Cell培养系统，最适条件下培养120h。
当细胞培养系统中葡萄糖消耗量达到8g/（L·h）左右，细胞数达到4×1011时，按照MOI为1接入Flury株病毒。
一批至少可以收获10次（50L/次）毒价高于107.5TCID50/mL的抗原液，其中包含5次毒价为108.0TCID50/mL 的抗原液。
提高抗原液病毒含量有助于提升狂犬病灭活疫苗效价，从而降低生产成本。
关键词：微载体；BHK-21细胞；狂犬病毒；Flury株中图分类号：S852.65文献标识码：B文章编号：1672-9692(2018)09-0006-04 Production of Flury Strain of Rabies Virus by MicrocarrierCulture of BHK-21CellsLiu Yanxia(Liaoning Yikang Blological Corporation Limited,Liaoning Liaoyang111000)Abstract:In this paper,we studied the process of BHK-21cells cultured in Tide-Cell bioreac‐tor filled microcarrier manufacture rabies virus Flury strain.1×1010BHK-21cells were seeded to bioreactor cell culture system(CCS)bioreactor equipped with500g BioNOCTMⅡvector and cultured optimum parameters.Flury virus(MOI=1)were seeded with8g/L·h glucose consumption and4×1011 total cells in cell culture system after120h.Every time would have harvest50L antivirus so‐lution(TCID50>107.5/mL)and10times for each batch,including antivirus solution TCID50about108.0/mL for5times.Increase the virus content of the antivirus solution help to improve the efficacy of rabies inactivated vaccine,it contribute toreduce production cost.key words:Microcarrier;BHK-21cells;Rabies virus;Flury strain收稿日期：2018-07-27作者简介：刘艳霞（1981-09），女，黑龙江省齐齐哈尔人，本科，兽医师，主要从事兽用生物制品研发工作。
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BHK细胞培养小结
报告人：
1、细胞培养
（1）培养基：DMEM培养基+10%无支原体新生牛血清+100U/ml青/链霉素
（2）细胞传代：细胞长满瓶壁90%-95%时，将上清倒掉，用D-Hanks液洗2-3遍细胞，加1ml0.25%胰酶37℃温箱消化3-5分钟后，加入3ml培养基将细胞吹下来，转移至15ml离心管，1000转离心5分钟，倒掉上清，加入3ml新鲜培养基重悬细胞，将细胞吹打均匀后按1：2或1：3的比例接种于新的培养瓶中，加入5ml新鲜培养基，放入培养箱培养。
2、细胞冻存及复苏
（1）细胞冻存液：90%无支原体新生牛血清+10%DMSO
（2）细胞冻存方法：细胞长满瓶壁90%后，细胞消化离心，弃上清，加入配制好的冻存培养液（含10%DMSO），重悬细胞，或者用细胞计数板计数细胞浓度，将细胞浓度调至106个/ml，将细胞转移至冻存管，每管1ml，用棉花包住冻存管放入-80℃冰箱，2天后将冻存管放入液氮冻存。
（3）细胞复苏：先准备一支15ml离心管，加入5-8ml新鲜培养基，再从液氮取出细胞后立刻放入37-40℃水浴，在1min内融化，然后将细胞转移至装有培养基的离心管，1000转离心5分钟，倒掉上清，加入2ml新鲜培养基重悬，再转移到1个新的培养瓶中，加入4ml新鲜培养基放入培养箱培养，1天后细胞贴壁，换液。
3、注意事项
（1）如果细胞生长太慢可选用含20%无支原体血清的DMEM培养基培养，可加快细胞生长；
（2）细胞传代时必须先离心后再重悬，如果不离心直接吹打后传代细胞不能吹打成单个细胞悬液，传代细胞成堆生长，影响细胞状态；
（3）细胞传代时不能传得太稀，如果传代时细胞浓度太低的细胞生长速度会很慢，而且细胞容易成堆生长；
（4）胰酶在使用前最好预热到37度。
由于胰酶平时保存在4度，反复预热对胰酶的活性不好，可以将胰酶进行分装，尽可能避免胰酶反复冷却加热；
（5）BHK还是比较好消化的，2-3min应该足够了，消化时间太长对细胞不利。
可以在显微镜下观察消化情况，必要时可以拍打培养瓶帮助细胞分散，消化结束后直接加入培养基即可，胰酶会被血清灭活；
（6）细胞冻存时要选细胞状态好的细胞冻存，否则细胞不容易复苏。