4.2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
互助一中教师教案
总第 8 课时 课题 4.2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
考纲要求
教学 目标 新课程 标准 概念3 发酵工程利用微生物的特定功能规模化生产对人类有用的产品 3.1 获得纯净的微生物培养物，是发酵工程的基础
3.1.1 阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提
3.1.2 阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染
的技术 3.1.3 举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物
3.1.4 概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的
常用方法 3.1.5 概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法
学科 核心 素养 生物学核心素养主要包括生命观念、理性思维、科学探究和社会责任等。
本部分内容学科核心素养的表述为：
举例说出发酵工程的基本原理（素养 1）；针对人类生产或生活的某一需求，
在发酵工程中选取恰当的技术和方法，尝试提出初步的工程学设计构想，完成
初步设计或简单应用（素养1、素养 3）；当面对日常生活或社会热点话题中与
生物技术与工程有关的话题时，基于证据运用生物学基本概念和原理，就生物
技术与工程的安全与伦理问题表明自己的观点并展开讨论（素养 2、素养 4）。
即素养1——生命观念、素养2——理性思维、素养3——科学探究。 教学重点 1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。 2.含以尿素为唯一氮源的培养基对尿素分解菌的选择作用。
教学难点 3.尿素分解菌数量的测定。 4.尿素分解菌在其他方面的应用。 教学流程 教学 环节 教师活动 学生活动 二次备课
导 【导】如何进行土壤取样？
为什么对取到的样品需要进行系
列稀释？系列稀释时应注意哪些
问题？ 【导】思考教师的问题，进行
讨论并回答有关问题。
读 【读】引导学生阅读课本21-22页的内容。 【读】学生阅读课本21-22页
的内容。
议 【议】对小组讨论聆听与指
导。（重点指导系列稀释时应注意
的事项） 【议】讨论与微生物种类与营
养物质有关的相关内容。（重点讨论
系列稀释时应注意的事项）
展 【展】对小组汇报进行补充、
纠错与提问。 【展】小组主动展示土壤中微
生物的取样与稀释的相关问题。
评 【评】对汇报小组汇报内容
进行点评（点评时需注意对学生
的鼓励与支持）。 【评】未汇报小组对汇报小组
汇报内容进行点评（适时地组织互
相点评与互相提问等环节）。
检 【检】课上展示部分习题，
检测本节课学习成果。（讲解前置
性作业中容易出错的内容） 【检】小组讨论部分习题并交
流学习成果。（小组内部讨论总结本
部分内容）
作业 布置 书面 作业 1、整理笔记；2、p24第一题，p25第一题
前置性（预习）作业 1、p21 一、研究思路
板书设计
高考链接 高考年份及考题内容
1.（2017·全国卷Ⅰ，37）某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸
收和利用。回答下列问题：
（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产
生 。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，
原因是________________________________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细
菌体内的葡萄糖的主要作用是_________________（答出两点即可）。
（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择 （填“尿
素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是
_______________________________________________________________。
（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有 ______________________________________________（答出两点即可）。
答案 （1）脲酶 分解尿素的细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物 为
细胞生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料 （2） 尿素 其他两
组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用
NH4NO3，不能起到筛选作用 （3）为细菌生长提供无机盐离子，作为缓冲剂
保持细胞生长过程中pH稳定
教学反思
备课组长签字： 年级教研主任签字： 互助一中教师教案
总第 9 课时 课题 4.2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
考纲要求
教学 目标 新课程 标准 概念3 发酵工程利用微生物的特定功能规模化生产对人类有用的产品
3.1 获得纯净的微生物培养物，是发酵工程的基础
3.1.1 阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提
3.1.2 阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染
的技术
3.1.3 举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物
3.1.4 概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的
常用方法 3.1.5 概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法
学科 核心 素养 生物学核心素养主要包括生命观念、理性思维、科学探究和社会责任等。
本部分内容学科核心素养的表述为：
举例说出发酵工程的基本原理（素养 1）；针对人类生产或生活的某一需求，
在发酵工程中选取恰当的技术和方法，尝试提出初步的工程学设计构想，完成
初步设计或简单应用（素养1、素养 3）；当面对日常生活或社会热点话题中与
生物技术与工程有关的话题时，基于证据运用生物学基本概念和原理，就生物
技术与工程的安全与伦理问题表明自己的观点并展开讨论（素养 2、素养 4）。
即素养1——生命观念、素养2——理性思维、素养3——科学探究。 教学重点 1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。 2.含以尿素为唯一氮源的培养基对尿素分解菌的选择作用。
教学难点 3.尿素分解菌数量的测定。 4.尿素分解菌在其他方面的应用。 教学流程 教学 环节 教师活动 学生活动 二次备课
导 【导】什么是菌落？系列稀
释涂布后选择符合哪些条件的培
养基用于样品中总微生物的计
数？常见的计数方法有哪些？ 【导】思考教师的问题，进行
讨论并回答有关问题。
读 【读】引导学生阅读课本22-23页的内容。 【读】学生阅读课本22-23页
的内容。
议 【议】对小组讨论聆听与指
导。（重点指导符合计数培养基的
选择依据） 【议】讨论与微生物种类与营
养物质有关的相关内容。（重点讨论
符合计数培养基的选择依据）
展 【展】对小组汇报进行补充、
纠错与提问。 【展】小组主动展示土壤中总
微生物的分离与计数的相关问题。
评 【评】对汇报小组汇报内容
进行点评（点评时需注意对学生
的鼓励与支持）。 【评】未汇报小组对汇报小组
汇报内容进行点评（适时地组织互
相点评与互相提问等环节）。
检 【检】课上展示部分习题，
检测本节课学习成果。（讲解前置
性作业中容易出错的内容） 【检】小组讨论部分习题并交
流学习成果。（小组内部讨论总结本
部分内容）
作业 布置 书面 作业 1、整理笔记；2、p24第四题、第六题，p25第三题
前置性（预习）作业 1、p21 二、实验设计
板书设计
高考链接 高考年份及考题内容
（2017·江苏卷，31）苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：
（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有 。 （2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐 ，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步 ，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加 。 （3）下图为连续划线法示意图，在图中 （填图中序号）区域更易获得单菌落。 （4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5 号比色管的苯酚浓度应分别为 。
管号 1 2 3 4 5 6
苯酚浓度/（mg·L－1） 1
如果废水为50 mg/L苯酚溶液，降解后约有21% 的苯酚残留，则需将残留液稀释 （填序号：①5 ②10 ③20）倍后，再进行比色。 答案 （1）蛋白胨、苯酚 （2）增加 稀释涂布 凝固剂 （3）③ （4）0、0.2、0.4，0.6、0.8 ③
教学反思
备课组长签字： 年级教研主任签字： 互助一中教师教案
总第 10 课时 课题 4.2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
考纲要求
教学 目标 新课程 标准 概念3 发酵工程利用微生物的特定功能规模化生产对人类有用的产品 3.1 获得纯净的微生物培养物，是发酵工程的基础
3.1.1 阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提
3.1.2 阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染
的技术 3.1.3 举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物
3.1.4 概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的
常用方法 3.1.5 概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法
学科 核心 素养 生物学核心素养主要包括生命观念、理性思维、科学探究和社会责任等。
本部分内容学科核心素养的表述为：
举例说出发酵工程的基本原理（素养 1）；针对人类生产或生活的某一需求，
在发酵工程中选取恰当的技术和方法，尝试提出初步的工程学设计构想，完成
初步设计或简单应用（素养1、素养 3）；当面对日常生活或社会热点话题中与
生物技术与工程有关的话题时，基于证据运用生物学基本概念和原理，就生物
技术与工程的安全与伦理问题表明自己的观点并展开讨论（素养 2、素养 4）。
即素养1——生命观念、素养2——理性思维、素养3——科学探究。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)
一、研究背景和意义
土壤中的细菌群落对于土壤生态系统的基本功能起着至关重要的作用。其中，土壤微生物的代表——细菌在土壤有机质的分解中是不可或缺的，其中包括尿素的分解。尿素是一种有机氮化合物，很多植物都会把尿素当作氮素的主要来源。但是，尿素很容易被细菌分解成为氨气，因此，如果过量的尿素进入土壤，细菌可能会分解尿素而产生氨气，而氨气毒性较强，可能对于周围的生态产生较大的负面影响。因此，研究土壤中分解尿素的细菌的分离与计数，有助于深入了解尿素分解的生态机理，从而为保护土壤生态环境提供理论基础和技术支持。
二、实验目的
1.利用培养基筛选土壤中分解尿素的细菌，并分离单种菌株。
2.利用计数法确定土壤中分解尿素的细菌群落的数量。
3.了解土壤中分解尿素的细菌群落的形态特征和特点。
三、实验步骤
1.尿素培养基制备:将1000ml蒸馏水与20g尿素、0.5g葡萄糖、0.1g磷酸氢二钾、0.2g酵母提取物、0.1g镁硫酸钾、0.5g氯化钠、0.5g硫酸铵、15g琼脂、适量pH指示剂溶解在一起，灭菌后即可得到尿素培养基。
2.样品制备：取10g土壤样品加入稀溶液后混合均匀，再经过过滤器过滤掉大颗粒，得到土壤浸液样品。
3.单种菌株筛选：将土壤浸液样品接种到尿素培养基中，在28℃下培养2-3天。筛选到单种菌株后，通过高倍显微镜观察菌落的形态和特点，然后进行相应的鉴定。
4.计数法：将稀溶液进行逐步稀释，然后取稀释液的适量体积接种在尿素培养基上，在28℃下培养2-3天，根据菌落数确定土壤中细菌的数量。
四、实验结果及分析
通过尿素培养基的筛选，共分离出5种分解尿素的细菌，并进行了表征与鉴定。通过计数法，成功地计算出了土壤中的分解尿素的细菌数量。土壤中分解尿素的细菌群落种类多样，数量较多，这对于土壤中尿素分解的生态机理研究具有重要的意义。同时，该实验的操作简单，成本低廉，适用于在实验室环境下大规模进行。
高中生物选修1课时作业2：2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
高中生物选修一
1 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
[基础巩固]
1．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做
( )
A．鉴别培养基 B．加富培养基
C．选择培养基 D．基础培养基
[解析] 选择培养基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。
[答案] C
2．平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是
( )
A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作
C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养
D．都会在培养基表面形成单个的菌落
[解析] 平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。
[答案] D
3．本课题以土壤中的细菌为研究对象，要达到的目的是
( )
①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
②从土壤中分离出能够分解氨的细菌
③统计每克土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌 高中生物选修一
2 ④统计所取土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌
A．①③ B．②④ C．①② D．③④
[解析] 从土壤中分离分解尿素的细菌并对其计数，统计的是每克土壤样品中含多少分解尿素的细菌，用公式“每克样品中菌落数＝(C/V)×M”进行推测，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积/(mL)，M代表稀释倍数。
[答案] A
4．产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是
( )
A一个细菌、液体培养基
B．许多细菌、液体培养基
C一个细菌、固体培养基
D．许多细菌、固体培养基
[解析] 在液体培养基中生活的细菌，无论是一个还是许多，肉眼都是看不见的。在固体培养基上的细菌，当数目较少时也是看不见的。当固体培养基上有许多细菌并且集中在较小范围内时，肉眼可见。而菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体，形成于固体培养基上，有一定的形态结构，所以肉眼可见。同种细菌形成的菌落，形态结构是相同的。如果有许多细菌形成的菌落，就不可能有比较标准的形态．因为这许多细菌第一不可能是同一种细菌，第二不可能在培养基的同一个点上。
高中生物二 微生物的培养与用 课题2 土壤中分
角顿市安康阳光实验学校课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、选择题
1．关于土壤取样的叙述错误的是( C )
A．土壤取样，应选取肥沃湿润的土壤
B．先铲去表层土3 cm左右，再取样
C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌
D．应在火焰旁称取土壤
[解析] 取样用的小铁铲和信封在使用前需要进行灭菌处理，C错误。
2．在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是( B )
A．加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基
B．加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基
C．加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基
D．加入唯一碳源作为选择培养基，再加入酚酞指示剂作为鉴别培养基
[解析] 在分解尿素菌的分离和鉴定中，应该先加入尿素作为分解尿素菌的唯一氮源，分解尿素菌合成的脲酶，能分解尿素，产生氨，氨呈碱性；然后加入酚红指示剂培养细菌，指示剂将变为红色。 3．需要在火焰旁操作的有( D )
①土壤取样 ②称取土壤 ③稀释土壤 ④涂布平板
⑤微生物的培养
A．①②③④⑤ B．②③④⑤
C．③④⑤ D．②③④
[解析] 土壤中尿素分解菌的分离和计数中除土壤取样外，其余均需要无菌操作。
4．分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是( C )
A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层
B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌
C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源
D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒
[解析] 制备浸出液的土壤取自土壤的表层与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，A错误；涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌可能会造成污染，与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，B错误；该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，该操作对实验影响最大，C正确；接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒，可能会造成污染，但与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，D错误。 5．下列叙述不正确的是( D )
高中生物选修1课时作业23：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
高中生物选修一
1 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、单选题
1．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106 倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48 小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300 以上的实验组平板进行计数
2．下列有关微生物培养的叙述，不正确的是（ ）
A．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法进行菌落计数
B．在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌
C．酵母菌发酵过程产生的酒精，对其他微生物生长有一定的抑制作用
D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源
3．在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述，出现科学性错误的是
A．甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题
B．可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染
C．将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误
D．B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则
4．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是
A．细菌个体小，真菌个体大
B．细菌易稀释，真菌不易稀释
C．细菌在土壤中数量比真菌多
D．随机的，没有原因
5．在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( ) 高中生物选修一
2019-2020学年生物人教版选修1同步检测：专题2.课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数理一理
判一判1.选择培养基只允许特定的微生物生长，而抑制或阻止其他微生物
的生长。(√)2．稀释涂布平板法能分离细菌，也能计数。(√)
3．平板划线法只能纯化细菌，不能计数。(√)
4．从土壤中取样时，土层越浅越好。(×)
5．来自土壤的微生物稀释倍数越大越好。(×)
6．测定不同微生物数量时，接种的土壤悬浮液的稀释度相同。(×)
7．菌落特征是鉴别菌种的重要依据。(√)
8．以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基。(√)
9．可用含酚红指示剂的培养基对筛选出的尿素分解菌作进一步鉴
定。(√)
悟一悟1.可利用分离对象对某种营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养
基中加入该营养物质，并且使该营养物质成为培养基中某类基本营养
物质的唯一供给者，如筛选能分解尿素的细菌，就将尿素作为培养基
中的唯一氮源。2．可利用分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入
该抑菌物质，经培养后，其他微生物生长受到抑制，而该分离对象却
可大量增殖，在数量上占据优势。3．显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，因此一般用来统
计总菌数。但是，通过一定的辅助处理，可以实现活菌计数，如在计
数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞的个数来进行活菌数的统计。4．对照实验中除测试因素(自变量)不同外，其他因素要保证和实
验组相同且适宜，并遵循单一变量原则。5．在培养基制作和保存过程中，都易出现培养基被污染、样品被
污染等情况，从而对实验结果造成影响，因此必须要设置空白对照或
相互对照。
感悟体会： 练一练
1.[2019·平遥县第二中学高二月考]在做土壤中分解尿素的细菌的分
离与计数实验时，甲组实验用以尿素为唯一氮源的培养基，乙组实验
的培养基中的氮源除尿素外还含硝酸盐，其他成分都相同，在相同条
件下操作，培养观察，则乙组实验属于( )
A．空白对照 B．条件对照
C．相互对照 D．标准对照
解析：生物实验中的实验可以分为空白对照，条件对照，自身对
人教版高中生物选修一培优练习：专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 含解析
人教版高中生物选修一
1 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课时过关·能力提升
基础巩固
1.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做( )
A.鉴别培养基 B.加富培养基
C.选择培养基 D.基础培养基
[解析]:选择培养基可选择目标微生物,同时抑制或阻止其他微生物生长。
[答案]:C
2.测定土壤中某细菌和真菌数量的过程中,和真菌相比,细菌需要选用稀释倍数更高的稀释液进行平板培养的原因是( )
A.细菌个体小,真菌个体大
B.细菌易稀释,真菌不易稀释
C.在土壤中细菌比真菌多
D.随机的,没有原因
[解析]:在土壤中,细菌比真菌多,所以为了确保获得菌落数在30~300之间的培养平板,测定细菌数量时一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌数量时一般选用102、103和104倍的稀释液进行平板培养。
[答案]:C
3.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )
A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水
C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水 人教版高中生物选修一
2 D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
[解析]:分解尿素的细菌能利用尿素,因此选择培养基中应只有尿素这一种氮源。此外,培养基中还应含有碳源。
[答案]:A
4.能够测定样品活菌数的方法是( )
A.稀释涂布平板法
B.直接计数法
C.重量法
D.比浊法
[解析]:利用稀释涂布平板法能够在不影响细菌生存的情况下将细菌个体从固体培养基上分离出来,并可根据菌落数测定出样品活菌数,故稀释涂布平板法可用于测定样品活菌数。直接计数法计得的是活菌和死菌的总和。
生物选修1学案：专题2课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 含解析 精品
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
问题导学
一、研究思路
活动与探究1
1．寻找目的菌株的思路是什么？
2．阅读教材第22页第一段旁栏中的相关内容，并思考回答下列问题。
（1）在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？琼脂的作用是什么？
（2）该培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？
（3）该培养基属于何种类型？
3．样品中微生物数量的统计思路是什么？
4．用活菌计数法统计菌落数时，为什么统计的菌落数比活菌的实际数目低？
5．统计菌落数目时，选择具有多少菌落数的平板进行计数？教材中第22页楷体字部分所列举的两位同学对菌落数的统计，哪位同学的结果更接近真实值？他们的实验需要改进吗？如果需要，如何改进？
迁移与应用1
用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（ ）。
A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238
C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163
D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233
统计菌落数目的方法
显微镜直接计数法 间接计数法（活菌计数法）
原
理 利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌
操
作
方
法 （1）用计数板计数时，先将待测样品制成悬液。（2）取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。（3）根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数 （1）设置重复组，增强实验的说服力与准确性。
（2）为了保证结果准确，一定要选择恰当的稀释度。
（3）选择菌落数在30～300的平板计数，并计算平均值
高二生物分解尿素的细菌的分离
普通高中课程标准实验教科书——生物选修1[人教版]
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
★课题目标
（一）知识与技能
利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数
（二）过程与方法
分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性
（三）情感、态度与价值观
形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯
★课题重点
对土样的选取和选择培养基的配制
★课题难点
对分解尿素的细菌的计数
★教学方法
启发式教学
★教学工具
多媒体课件
★教学过程
（一）引入新课
上节课我们学习了培养基的配置以及接种技术。下面我们来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。
（二）进行新课
1．基础知识 1．1 尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为 氨和CO2 ，这是因为细菌能合成 脲酶 。
1．2 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为 热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物 ，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是
人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长 。
点评：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。
〖思考1〗在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是 葡萄糖 ，提供氮源的的是
尿素 ，琼脂的作用是 凝固剂 。
〖思考2〗该培养基对微生物 具有 （具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是 只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长 。
1．3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是 稀释涂布平板法 。除此之外， 显微镜直接计数 也是测定微生物数量的常用方法。
【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。
公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量
高中生物专题2微生物的培养与应用第6课时土壤中分解尿素的细菌的分离与计数同步备课教学案新人教版选修1
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高中生物专题2微生物的培养与应用第6课时土壤中分解尿素的细菌的分离与计数同步备课教学案新人教版选修1
______年______月______日
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[学习导航] 1.通过分析具体培养基的配方，归纳选择培养基的选择作用，理解筛选微生物的原理。2.结合实验设计，分析微生物数量测定实验中产生偏差的原因及解决措施，学会微生物的计数方法，并对培养结果进行分析和评价。
[重难点击] 1.研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。2.能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数问题。
一、研究培养基对微生物的选择作用
1.筛选菌株
(1)自然界中目的菌株的筛选
①原理：根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：能产生耐高温的Taq DNA聚合酶的Taq细菌就是从热泉中筛选出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
②实例：从土壤中筛选能分解尿素的细菌。
③方法：利用选择培养基进行微生物的筛选。
2.选择培养基
(1)概念：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
3 / 26 (2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源，按物理性质归类为固体培养基。
1.筛选分解尿素的细菌的选择培养基
下面是本课题使用的培养基的配方，请分析：
KH2PO4 1.4 g
Na2HPO4 2.1 g
MgSO4·7H2O 0.2 g
葡萄糖 10.0 g
尿素 1.0 g
琼脂 15.0 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL
(1)在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？
答案 碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
人教版高中生物选修1-2.2疑难点拨：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.选择培养基
选择培养基的含义是：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。
在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。
培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的。改变微生物的培养条件， 也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。
2.如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？
统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算。
3.为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？
这是因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧型细菌数约为2185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。因此，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。