组织病理学技术
病理学实验技术
病理学实验技术病理学实验技术是一门关注疾病诊断的学科，是疾病诊断的基础。
它涉及到多种实验技术，如组织学、免疫组织化学、分子生物学等。
这些技术都是通过研究组织和细胞的形态学、生物化学及分子遗传学特征，来揭示疾病的发生和发展。
一、组织学技术1. 组织标本的制备组织标本制备是病理学诊断的基础。
在组织标本制备的过程中，病理学家需要对组织进行取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等多个步骤。
其中，固定至关重要，因为只有对组织进行固定，才能保持组织在形态、结构和染色上的稳定性。
2. 组织切片的制备组织切片制备是组织学技术中的另一个关键步骤。
在这个过程中，病理学家会将固定的组织样本切成薄片，使其可以在显微镜下进行观察。
需要注意的是，切片必须足够薄，通常在3-4 μm之间，以确保显微镜下的观察到位。
3. 组织染色技术组织染色技术是通过对组织进行染色来增加组织样本的对比度，以便观察细胞和组织之间的区别。
在组织染色技术中，常用的染色剂包括血液学染色剂，如H&E染色剂及Immunohistochemistry染色技术等。
其中，Immunohistochemistry染色技术可根据抗原-抗体之间的特异性来判断组织和细胞是否存在特定的蛋白质。
二、免疫组织化学技术免疫组织化学技术是利用单克隆或多克隆抗体专门识别和检测组织中存在的化学物质的技术。
这些物质包括细胞表面受体、cytokines、细胞分子、肿瘤抗原等。
该技术可对某种特定的抗原进行定量和定位，从而为诊断和治疗疾病提供帮助。
三、分子生物学技术分子生物学技术是一种应用分子生物学方法和技术来研究疾病发生和发展的学科。
该技术通过研究DNA、RNA和蛋白质的结构、功能和相互作用，来了解疾病的致病机制，并为疾病的诊断和治疗提供更好的方法。
在分子生物学技术中，PCR技术是一种常用的方法。
PCR技术能够通过对DNA进行放大，从而扩增少量DNA，使得对DNA的分析得以进行。
结论综上所述，病理学实验技术涉及到多种技术，包括组织学技术、免疫组织化学技术和分子生物学技术。
细胞和组织学技术在病理学中的应用
细胞和组织学技术在病理学中的应用细胞和组织学技术是病理学中不可或缺的重要手段。
通过这些技术，人们能够对体内的异常变化进行观察和分析，进而对疾病的诊断、治疗和预防提供有力支持。
本文将介绍细胞和组织学技术在病理学中的应用，并探讨其对于现代医学的意义。
一、细胞和组织学技术概述1. 细胞学技术：细胞学是一门通过检查个体细胞结构和功能来了解生物状态和健康状况的科学。
常见的细胞学技术包括涂片染色、吸引剂涂片法等。
2. 组织学技术：组织学是一门研究动植物组成、结构与功能关系以及异常变化的科学。
主要通过取材切片、特殊染色等手段进行观察分析。
二、病理诊断中的应用1. 疾病诊断：利用细胞和组织学技术，医生可以观察到异常变化，如细胞形态的改变、器官组织的病理学变化等。
通过对这些异常变化的分析和判断，可以确定病因、作出准确诊断，并制定相应治疗方案。
2. 癌症筛查：细胞学技术在癌症早期筛查中具有重要作用。
例如，通过取得的细胞或组织样本进行涂片染色，医生可以观察到细胞异常和恶性肿瘤征象，从而实现早期癌症筛查。
三、疾病预防中的应用1. 原位杂交技术：原位杂交技术是一种通过特殊标记方法检测DNA或RNA存在的技术。
该技术在人类遗传学和肿瘤学中有广泛应用，例如发现特定基因是否存在于某个位置以及蛋白质表达水平等。
2. 免疫组化技术：免疫组化技术利用抗体与抗原的特异性结合来检测体内特定蛋白质分子的表达情况。
这种技术在识别异常或肿瘤标志物方面具有重要意义，可为早期干预和疾病预防提供依据。
四、研究与治疗中的应用1. 细胞分离和培养：细胞学技术不仅可以观察到细胞形态的改变，还能够实现对细胞的离体分离和培养。
这为临床疾病的发生机制和药物治疗提供了基础。
2. 分子生物学技术：基因工程、蛋白质组学等分子生物学技术在组织学中的应用逐渐增多。
通过利用这些技术，人们可以深入了解疾病发生的分子机制，寻找新的靶向治疗手段。
五、挑战与展望虽然细胞和组织学技术在病理学中具有广泛应用前景，但也面临一些挑战。
病理组织制片技术基本流程
病理组织制片技术基本流程病理组织制片技术是病理学中的一项重要技术，它通过将病理标本切片、染色和覆盖玻片，使得细胞和组织的形态结构能够被显微镜观察和分析。
这项技术在医学诊断、研究和教学中起到了关键作用。
下面将介绍病理组织制片技术的基本流程。
1. 标本采集与固定病理组织制片的第一步是标本采集与固定。
医生根据患者的病情，选择合适的组织或细胞标本进行采集。
常见的标本包括切除标本、活检标本等。
采集后，标本需要立即进行固定，以保持组织的形态结构和化学成分的稳定。
最常用的固定剂是10%的中性缓冲福尔马林溶液。
2. 组织处理与包埋固定后的标本需要进行组织处理与包埋。
首先，将固定的标本进行去除固定剂的处理，然后用乙醇逐渐脱水，最后用苯麻油进行透明处理。
透明处理后，标本需要被包埋在石蜡中，以便后续的切片操作。
3. 切片与染色石蜡包埋的标本需要进行切片与染色。
首先，使用组织切片机将石蜡块切割成薄片，通常厚度为4-6微米。
切片后，将切片浸泡在水中，使其展开。
然后，将切片依次浸泡在染色剂中，进行组织染色。
不同的染色剂可以突显不同的细胞和组织结构，例如血液常规染色、免疫组化染色等。
4. 脱脂与覆盖玻片染色后的切片需要进行脱脂与覆盖玻片。
首先，将染色后的切片依次浸泡在醇中，去除多余的染色剂。
然后，使用透明剂将切片与玻片粘结在一起，使其固定。
最后，将覆盖玻片放在切片上，使用压力将其压平，使切片与玻片紧密结合。
5. 干燥与封装覆盖玻片后的切片需要进行干燥与封装。
将覆盖玻片的切片放置在干燥箱中，通过温度和时间控制，将其彻底干燥。
干燥后，将切片放置在干燥剂中，以防止切片吸湿。
最后，将切片放入切片盒中，进行封装，以便长期保存和使用。
病理组织制片技术的基本流程包括标本采集与固定、组织处理与包埋、切片与染色、脱脂与覆盖玻片以及干燥与封装。
这一流程确保了病理标本的形态结构得以保留，并使其能够被显微镜观察和分析。
病理组织制片技术的应用广泛，对于疾病的诊断和治疗具有重要意义，同时也为病理学研究和教学提供了有力支撑。
病理学研究中的组织学技术
病理学研究中的组织学技术病理学是医学中非常重要的一个学科，它是通过对组织、细胞等进行观察和分析来了解人体疾病的发生、发展和变化规律的学科。
而组织学技术则是在病理学研究中必不可少的一个工具，因为只有通过一系列的组织学技术，才能获得准确的组织样本并进行鉴定。
一、组织切片技术组织切片技术是指将组织标本制成一定厚度的切片，使其在显微镜下呈现出清晰、明确的形态，以便进行组织学检验和形态学分析。
组织切片技术分为冷冻切片和石蜡切片两种方法。
其主要区别是前者不需要预先处理组织标本，容易造成组织变性，而后者则需要将组织标本处理成特殊的固态物质以使其能够被切片。
制作组织切片需要借助于显微镜切片机。
首先将组织标本放置在内含有碳酸钙的冷冻剂中。
冷冻剂能够使组织标本迅速冷冻，使其保持形态不变。
然后将冷冻后的组织标本固定在显微镜切片机上，通过旋转一定的角度切割出一定厚度的组织切片。
二、组织固定技术组织固定技术是指将组织标本处置于特定的化学溶液中，以使其形态和细胞结构不发生改变，从而保护组织标本的完整性，为后续的组织学分析提供准确的数据。
目前常用的组织固定技术主要有福尔马林固定和Bouin's固定。
福尔马林固定是最常用的一种固定方法，它的作用是使组织标本中的细胞结构中的亲水性分子固定在其中，从而保持其原样。
福尔马林固定需要将组织标本置于10%~15%的福尔马林溶液中，通常需要处理数小时或过夜才能完成。
而Bouin's固定则是对特定组织标本适用的一种固定方法，用途较少。
三、组织染色技术组织染色技术是指通过将组织标本置于某些化学药物中，使其组织结构染上特定的颜色，以便于显微镜下的观察和分析。
目前常用的染色方法有血液学染色方法和组织化学染色方法。
血液学染色方法通常用于骨髓细胞和其他血液成分的检测。
组织化学染色方法则比较分散，根据不同的配合物和铁盐，组织化学染色的种类和质量也有所不同。
四、组织包埋技术组织包埋技术是将处理后的组织标本置于特定的材料中进行包裹，以便于组织切片和显微镜下的观察和分析。
病理学病理分析与组织病理学技术
病理学病理分析与组织病理学技术病理学是医学领域的一门重要学科，主要研究疾病的本质、发展和转归。
其中，病理分析与组织病理学技术是病理学研究中不可或缺的两个方面。
本文将重点探讨病理分析与组织病理学技术的意义以及其在诊断和治疗中的应用。
意义与重要性病理分析是通过对患者组织、细胞等进行仔细观察和分析，了解病理变化的过程、原因和机制。
通过病理分析，我们可以明确疾病的类型、分期、淋巴结转移情况等，进而为医生提供准确的诊断依据，并针对性地制定治疗方案。
组织病理学技术则是实现病理分析的重要手段之一。
通过显微镜观察和病理染色等技术，可以在细胞和组织级别上获得详细的信息，包括细胞的形态、结构、功能和异常变化等。
这些信息能够为疾病的诊断和治疗提供重要的依据。
应用场景病理分析与组织病理学技术在临床诊断和治疗中有着广泛的应用。
以肿瘤疾病为例，病理分析能够帮助医生确定病变的性质（是良性还是恶性）、分期（疾病的严重程度和传播情况）以及预后等重要信息。
组织病理学技术能够通过细胞形态学和分子标记等手段进一步确认肿瘤的类型和分子特征，为个体化治疗提供依据。
此外，在传染病、自身免疫性疾病、器官移植等领域，病理分析与组织病理学技术也发挥着关键作用。
通过对组织和细胞的观察与分析，可以帮助医生确定感染的致病微生物、研究疾病的发生机制、评估治疗效果及预后等。
技术手段病理分析与组织病理学技术依靠现代医学仪器和技术设备的支持，加以显微镜、组织染色、免疫组化、分子生物学等手段，可实现对组织和细胞进行高分辨观察和定性/定量分析。
其中，多种染色技术，如苏木精-伊红染色、Giems染色、磷酸钼酸染色等，被广泛应用于组织和细胞的显微观察，并可根据需求显示细胞核、线粒体、溶酶体等细胞结构和细胞器。
免疫组化技术是一种基于抗体特异性识别的技术，通过标记抗体来检测组织或细胞中蛋白质的表达和定位。
通过免疫组化技术，可以对肿瘤标记物、免疫细胞等进行精确检测和鉴定，为肿瘤的诊断和治疗提供重要信息。
《组织病理技术》课件
采用适当的固定液和保存方法，优化 染色流程，使用防脱片胶，提高制片 质量。
新技术的应用与展望
新技术
数字化病理技术、人工智能辅助诊断、 组织芯片技术。
VS
展望
数字化病理技术将使病理诊断更加便捷和 准确；人工智能辅助诊断能够提高诊断效 率和准确性；组织芯片技术可用于药物筛 选和疾病模型研究。
组织病理技术的伦理与法规问题
组织病理技术的发展历程
19世纪初
随着显微镜的发明和应用 ，人们开始对组织结构和 细胞形态进行研究。
20世纪初
石蜡切片技术的出现，使 得组织病理技术更加标准 化和规范化。
20世纪末至今
随着科技的不断进步和应 用，组织病理技术不断发 展和完善，应用领域也更 加广泛。
02
组织病理技术的基本原理
组织样本的获取与处理
。
恶性程度评估
组织病理技术可以评估肿瘤的恶性 程度，判断肿瘤的侵袭性和转移风 险，为制定治疗方案提供依据。
预后判断
通过组织病理技术对肿瘤的病理特 征进行分析，可以预测患者的预后 情况，帮助医生制定后续治疗方案 。
移植组织鉴定
组织匹配
在器官移植中，组织病理技术用 于检测供体和受体之间的组织匹 配程度，确保移植组织的兼容性
根据处理方法的不同，组织病理 技术可以分为石蜡切片技术和冷 冻切片技术等。
组织病理技术的应用领域
01
02
03
临床病理诊断
通过组织病理技术对病变 组织进行观察和分析，为 临床医生提供准确的病理 诊断。
药物筛选
利用组织病理技术观察药 物对病变组织的影响，为 新药研发提供实验依据。
毒理学研究
通过组织病理技术观察化 学物质对组织结构和细胞 形态的影响，评估其毒性 和安全性。
2024病理学技术中级考试大纲
2024病理学技术中级考试大纲一、基础知识。
1. 病理学的基本概念。
这部分就像是病理学的地基啦。
咱们得知道什么是疾病，疾病在身体里是怎么个发展过程，正常的组织结构和功能是什么样的，这样才能看出哪里出了问题嘛。
比如说细胞的正常形态和功能，这可是基础中的基础哦。
就像盖房子，你得先知道砖头长啥样，才能知道歪了的砖头是怎么个情况呀。
2. 组织学基础。
组织学可有意思啦。
各种组织就像不同的小团队，有上皮组织、结缔组织、肌肉组织和神经组织这些。
每个组织都有自己的特点和任务呢。
上皮组织就像身体的保护膜，结缔组织像填充和连接的胶水，肌肉组织负责运动，神经组织就像指挥官，传递信息。
了解这些组织的结构、分布和功能，对后面理解病理变化超级重要哦。
3. 病理学技术的基本原理。
这是咱们这个考试的重点中的重点呢。
像标本的采集、固定、切片制作这些过程，每一步都有它的道理。
标本采集就像抓犯人，要抓对地方才能找到证据呀。
固定就是把这个证据保存好，不让它变质。
切片制作就像是把这个证据切成薄片，方便我们在显微镜下观察。
还有染色的原理，不同的染色方法能让我们看到不同的东西，就像给细胞穿上不同颜色的衣服，这样就能区分它们啦。
二、相关专业知识。
1. 细胞病理学技术。
细胞病理学可是个很神奇的领域呢。
通过观察细胞的形态来诊断疾病，就像看一个人的表情就能猜出他的心情一样。
这里面有涂片的制作，要把细胞均匀地涂在玻片上，可不容易呢，就像画画一样，得掌握好技巧。
还有细胞的固定和染色，让细胞的特征更加明显。
像巴氏染色，染出来的细胞可漂亮啦，不同的细胞结构颜色不一样，一看就很清晰。
2. 组织病理学技术。
这部分内容可就更丰富啦。
从组织的取材开始，要取到病变最典型的地方，这就需要一双慧眼啦。
然后是脱水、透明、浸蜡这些步骤，每一步都要小心翼翼的，就像照顾小婴儿一样。
包埋的时候也要注意，要把组织放得整整齐齐的，这样切出来的片子才好看。
切片的时候更是个技术活，切得薄厚均匀才行，太厚了看不清楚，太薄了又容易破。
组织学和病理学的新技术的应用
组织学和病理学的新技术的应用在医学领域中，组织学和病理学一直扮演着至关重要的角色。
组织学是研究生物组织形态、组织学结构及其功能的学科。
而病理学是研究疾病发生、发展及其病因的学科。
在医学诊治过程中，这两个学科的应用非常广泛，它们可以为医生提供诊断、治疗及预后判断等方面的重要依据。
随着科学技术的迅猛发展，组织学和病理学也引入了许多新的技术，这些新技术在诊治过程中展现出了越来越重要的作用。
全数字化组织学技术随着数字化技术的日益成熟，全数字化组织学技术逐渐被广泛应用。
该技术可以将传统的光学显微镜下所需的玻片制作和观察过程完全数字化，通过利用高分辨率数字化扫描器或数字成像设备获得组织切片图像，这些图像可以在计算机上进行存储、处理和传输。
这种全数字化的组织学技术相对于传统的样本制备和阅片方式，在诊断结果的准确性和效率上有大的提升。
全数字化组织学技术可以大大提高医疗过程的效率，减少病人不便和病理医生工作中的错误率。
在一项2014年的研究中，全数字化组织学技术的诊断准确性与比例正确率分别达到了95.4%和93.7%。
此外，因为全数字化组织学技术可以通过互联网直接传输扫描图像，因此它还可以跨越医院界限，促进全球医学领域的合作和知识共享。
电子显微镜技术电子显微镜技术是一种基于电子束的成像技术，相比于传统光学显微镜可提供更高的分辨率。
在医学方面，电子显微镜技术有助于病理学家深入了解细胞和组织的内部结构和功能，尤其对于生殖组织和神经系统疾病的诊断更有支持。
通过电子显微镜，可以更好地观察细胞和组织结构，例如细胞核、细胞器和结构蛋白质等。
传统的组织学技术通过光学显微镜可以观察组织的形态和结构，但对于更细微的细节部分则很难揭示。
而电子显微镜则可以提供更高的放大倍数和更详细的细节信息。
分子病理学技术分子病理学技术针对的是疾病过程中的生物分子水平，以便更好地了解和治疗疾病。
分子病理学技术可以分析生物分子的一系列表现，这些表现涵盖了基因、蛋白质和代谢产物等方面。
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组织病理学技术
组织病理学技术
一. 实验综述
组织病理学切片技术是融解剖学、组织胚胎学及技术、病理学及技术和临床于一体的综合性课程。
是一门新兴的学科。
在当今不断发展、变革的社会中，在学科相互融合，知识相互渗透，技术不断发展、概念不断更新的时代，在时代要求综合素质人才辈出的今天，组织病理学切片技术的兴起尤为必要和重要。
主要任务是：使学生获得和掌握学会观察人体重要器官的解剖学特征、组织学结构、病理学变化并联系相关功能，从而在形态上观察、机能上分析、综合上判断和科学上研究疾病。
同时联系病变器官的代谢和机能的改变，探讨疾病的病因、发病机制以及病理变化与临床表现的内在联系和相互的关系。
为由基础走向临床打下坚实的基础。
二. 实验目的
1. 掌握病理组织切片的基本制作过程步骤
2. 掌握病变器官的代谢和机能的改变
3. 明白病理组织切片制作过程中的注意事项
4. 了解病理切片的制作程序及仪器的操作和注意事项
二.实验材料
1. 实验材料：手术盘、镊子、手术刀、石蜡、小鼠病理组织、纱布、烧杯、脱水机、塑料包埋盒、水浴锅、切片机、染色机、载玻片、盖玻片、铅笔、标签
2. 实验试剂：福尔马林、酒精（50% 55% 70% 75% 80% 85% 95% 无水浓度）、二甲苯、苏木素、盐酸酒精、伊红染液、树胶
四.实验步骤
（一）取材
从尸体解剖材料或临床手术切除的待检材料上选取供作切片标本的病理组织切块，称为取材。
1. 取材要全面具有代表性，能显示病变的发展过程。
为此要选取病变显著的区域和可疑
灶，在统一组织块中最好包括病灶及其周围的健康组织，并应包含该器官的主要结构部分。
较大而重要的病变可从病灶中心到外周的不同部位取材，以反映病变各阶段的形态学变化。
2. 取材时要尽量保持组织的自然状态与完整性，避免认为变化。
为此，切取组织块的剪
刀要锋利，切取时勿使组织受挤压、拉扯胡揉搓。
3. 组织块的大小要适当，通常其长、宽、厚以 1.5 X1X 0.4cm为宜，必要时可
增大到2X 1.5 x 0.5cm,以便于固定液迅速浸透。
尸体剖检时采取病理组织块可切得稍大些，待固定几小时后在家以修整，切到适当的大小。
4. 对于特殊病灶要做适当标记。
5. 注意避免类似的组织块混淆。
6. 制片的组织块，越新鲜越好。
7. 接受送检标本时，须依据送检单详细检查送检物。
（二）固定和固定液
将组织浸在固定液内，使细胞组织内的物质成为不溶性，让固有形态和结构得以保存叫作固定。
固定是为了保持组织、细胞与生活时的形态相似。
1. 本次试验的固定液为：10%畐尔马林液（实验室常用固定液）
福尔马林100ml
自来水900ml
2. 固定时的注意事项
（1）.固定组织时固定液用量要充分，液量勿少于组织块总体积的4倍。
（2）.勿使组织块之间粘连。
（3）.将被检病例的畜别、编号、剖检号等信息写于标签上贴好。
（4）.组织固定要尽可能恰当地掌握时间。
时间过短过长都不好，根据组织大小而定，一般数小时到数天。
（三）冲洗
组织固定后，通常用流水冲洗12~24小时，以洗净固定液，停止固定作用, 避免组织固定，而影响制片效果，是时组织经过冲洗也可改变硬度。
（四）脱水
将组织内的水分彻底去除，称为脱水。
常用脱水剂为酒精。
70%酒精2小时
85%酒精 1.5~2小时
95%酒精(1) 1.5~2小时
95%酒精(2) 1.5~2小时
无水酒精（1）1.5~2小时
无水酒精
（2）
1.5~2小时
透明是指组织脱水后，通过透明剂的作用而脱去酒精使组织透明，并使石蜡抑郁渗入组织的过程。
二甲苯能溶于酒精，又可溶解石蜡，是最常用的透明剂。
但不宜时间过长，会使组织收缩、硬化变脆。
1:1酒精二甲苯此液为过渡液，时间要求不严格
二甲苯⑴0.25-0.5 小时
二甲苯（2）0.25-0.5 小时
（六）浸蜡
组织经过透明作用后移入熔化的石蜡中浸渍，使石蜡充分渗透到组织内, 起填充作用，称为浸蜡。
浸蜡后的组织硬度均匀适中，可是切片完整。
浸蜡过程与时间：
1:1 二甲苯石蜡 1 小时
1:2 二甲苯石蜡 1 小时
石蜡（1） 1.5 小时
石蜡⑵ 1.5 小时
（七）包埋
石蜡包埋，是将饱浸石蜡的组织块的过程。
方法：将包埋用蜡倾注于包埋容器内，用镊子夹取浸透石蜡的组织块，将其平整切面向下平置于包埋容器底部，并用镊子轻轻压平，待石蜡凝固后检查蜡块内是否有气泡，如有气泡需重新包埋。
注意事项：
1. 包埋时注意组织块切面，必须将平整切面向下平置于包埋容器底部
2. 包埋用蜡的熔点须与浸蜡时石蜡（2）的熔点一致
3. 包埋盒大小须与组织块大小适宜
4. 包埋完毕，及时写清标本编号
（八）切片及附贴
1. 切片
制作石蜡切片多用轮转式切片机。
蜡块、切片刀准备好后，即可开始切片。
(1) .将蜡块放于持物台上，调节切片机，式切片刀接近蜡块。
(2) .炫动调节器，使厚度为10-20微米。
(3) 启动切片机并观察蜡块被切削情况，至组织全面完整切平后，再将调节器调 至所需厚度指标。
一般石蜡切片的厚度为 5-7微米为宜。
转动切片机时用力要 均匀，使切片完整、厚薄均匀，能连续成带。
(4)切片切出后，随即用洁净毛笔轻轻挑起，使之牵引成带，放入水浴锅内展片。
2.贴片 贴片是指将菲薄的切片贴敷于载玻片的过程。
用洁净的载玻片将漂浮于水 浴锅表面的切片轻轻挑起，使切片附于载玻片上。
(九)染色 染色是用一种以上的染料浸染组织切片，使组织细胞中的不同物质，因着 色性能不同而染成不同色彩，从而便于在显微镜下观察。
染色的步骤： 1. 脱蜡：将干燥的切片一次通过下列溶液。
(1) .二甲苯(1)
(2) .二甲苯(2) ⑶.1:1 二甲苯酒精 (4).无水酒精 ⑸.95%酒精 ：
⑹.85%酒精 ： (7) .75% 酒精 ：
(8) .55% 酒精 ： 2. 染色：将经过脱蜡的切片，移入染色液中进行染色。
(1) .苏木素液 (2) .蒸馏水洗 (3) .盐酸酒精分化 (4) .自来水洗 作用，使细胞核更清晰 ⑸.50%酒精 ⑹.70%酒精 ⑺.85%酒精
(8) .95% 酒精 (9) .0.5%伊红酒精浸液 1-2min 3. 脱水、透明：伊红染色之后，切片一次通过下列溶液，洗去伊红浮色，并进
行脱水透明 (1).95% 酒精(1) ⑵
.95%酒精⑵ 色脱下为止 5-20min 5-20mi n ，进行彻底脱蜡 1-2mi n ，为国度溶液 2min 2min 2min 2min 2min 5min 片刻 1-5S 10-20min O 2min 2min 2min 2min (切片进入些液作2-3次提取即可) ，此时切片逐渐呈现鲜蓝色，这一步起反蓝 洗去多余伊红染液 脱去伊红浮色，切片进行此液后反复提取，直到无浮 (3). 无水酒精(1) 4-5min (4). 无水酒精(2)
4-5mi n. 彻底脱水 (5). 二甲苯⑴ 10-20min (6). 二甲苯(2) 10-20min 充分透明
(十)封固
封固是指切片上滴加封固和盖玻片，以利于观察和保存。
将完全透明的切片从二甲苯液中取出，擦去切片以外载玻片上的二甲苯，用粗细适度的玻璃棒滴加树胶一滴于切片一端，随即将盖玻片一端与树胶接触稍稍前推，并与载玻片成30度角，徐徐下落，将切片封盖，盖玻片加盖之前，需在酒精灯火焰上稍加烘烤，以去潮气，然后将烘烤面向上加盖。
操作要迅速准确，勿使切片在空气中暴露太久，以防二甲苯挥发切片干燥。
（十一）镜检
先用低倍镜（x10）观察，找到合适的病变观察部位；再用高倍镜（x40）观察, 观察具体的病变特征和病理变化。
五.实验结果
经过显微镜的观察得到小鼠肝组织病变与肾组织病变图如下：
1.肝组织病变图
2. 肾组织病变图
六•实验讨论及分析
通过实习不仅加深对理论知识的理解和认证，而且掌握基本病理过程的形态表现及主要疾病时的形态改变；在正确理解和掌握病理学基本理论的基础上学习病理学的观察方法，理论联系实际，使病理与临床有机结合，形态和功能密切联系，提高分析问题和解决问题的能力，并培养学生的创新能力和实践能力，为其以后的临床学习打下坚实的基础。
下面是切片时碰到的问题的原因及可能处理的方法：(1)组织发脆：一般是脱水、透明、浸蜡时间过长、温度过高，并与组织本身质地也有关，在切片时，边切边用嘴向蜡片吹气，可能会好些。
(2)切片卷起，可能是刀不锋利，或刀锋在另一面，或刀角度过大，切片太厚等等。
(3)蜡片弯曲：可能是刀锋不均，切片刀未磨直，切片刀与蜡块不平行。
(4)透明、浸蜡时间过长、温度过
高，并与组织本身质地也有关(5)厚薄不均：可能是刀、刀座及蜡块未夹紧，组织太硬，或切片机主轴太向前，或切片机已磨损。
(6)切片出现裂痕：可能是
刀有缺口，石蜡内有杂质，组织内有钙化、骨片或有线结，也可能会有棉纸纤维等。