土壤β- 葡萄糖苷酶活性检测试剂盒(可见分光广度法)使用说明
土壤脂肪酶(S-LPS)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4046
土壤脂肪酶（S-LPS）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:UPLC-MS-4046规格:50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体6mL×1瓶常温保存试剂三粉剂×1瓶2-8℃保存试剂四液体20mL×1瓶2-8℃保存标准品液体59.3μL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、标准品：临用前加入1.97mL甲苯，即100μmol/mL油酸。
用前注意解冻溶解。
用不完的试剂可以2-8℃保存一个月。
2、工作液的配制：将试剂三临用前加入20mL蒸馏水于沸水浴中溶解，2-8℃保存两周。
冷却至常温后加入5mL试剂二混合，高速震荡2次，每次3min，间隔5min。
可根据该比例现用现配。
产品说明：脂肪酶（LPS）又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。
该酶在土壤生物动力学中具有重要的作用。
LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS活性。
Triglyceride+LPS Fatty Acid+GlycerolFatty Acid+Cu2+Copperoleate(Soap)（蓝色络合物）710nm 注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、震荡混匀器、恒温水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、研钵、甲苯（不可快递）、冰和蒸馏水、30-50目筛。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干，过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长至710nm，甲苯调零。
2、标准溶液的稀释：取50µL100µmol/mL油酸标准溶液，加入950µL甲苯，充分混匀，配制成5µmol/mL标准溶液待测，现用现配。
土壤纤维素酶(S-CL)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
土壤纤维素酶（S-CL）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC0150规格：50T/24S产品说明：S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。
本产品采用3.5－二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
产品内容：试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备）试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存；标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1mL蒸馏水溶解，配制成10mg/mL葡萄糖溶液备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL。
自备的仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、加样表和测定步骤：对照管测定管标准管空白管风干土样（g）0.250.25-试剂一(μL)125125-煮沸15min（盖紧）振荡混匀，室温放置15min-第1页，共2页试剂二（μL）250250-试剂三（μL）10001000-蒸馏水（μL）250250-振荡混匀，40℃水浴糖化1h后，煮沸15min（盖紧，防止水分散失）,得糖化液糖化液(μL)5050-标准液(μL)--50蒸馏水(μL)50试剂四(μL)150150150150混匀，沸水浴中煮沸显色15min（盖紧，防止水分散失），冷却蒸馏水（μL）1050105010501050混匀，540nm处蒸馏水调零，测定吸光值A，样品管计算ΔA=A测定管-A对照管标准曲线的建立：540nm处蒸馏水调零，读标准管吸光值ΔA=A标准管-A空白管。
土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0270规格：50T/24S产品内容：试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL试剂一，沸水浴搅拌溶解后待用；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL蒸馏水充分溶解待用；试剂四：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存；标准品：液体2mL×1支，0.2μmol/mL酪氨酸溶液，4℃保存。
产品说明：土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。
土壤中性蛋白酶在中性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
中性条件下，土壤中性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝，在680nm有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL比色皿、蒸馏水、50目筛（或更小）。
样品处理：新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
操作步驟：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。
2、样本测定：第1页，共2页试剂名称测定管对照管标准管空白管风干土样（g）0.10.1--试剂一（μL）100100--试剂二（μL）200----混匀后，37℃反应24h，期间振荡5-6次，使土样与反应液充分接触。
试剂三（μL）200200--试剂二（μL）-200--混匀，10000rpm室温离心10min，取上清液--上清液（μL）220220--标准液（μL）--220-蒸馏水（μL）---220试剂四（μL）650650650650试剂五（μL）130130130130混匀，40℃水浴10min，10000rpm室温离心10min，取上清液于680nm下读取各管吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管，计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。
β - 木糖苷酶(β - xylosidase )测定试剂盒说明书
货号：QS2620 规格：50管/24样β-木糖苷酶（β-xylosidase）测定试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。
另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。
测定原理：β-木糖苷酶催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚，对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰，测定405nm光吸收增加速率，可计算β-木糖苷酶活性。
自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体2mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。
粗酶液提取：1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心20min，取上清待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.液体：直接检测。
β-木糖苷酶活性计算公式：标准曲线：y=13.226x+0.0011，R2=0.9998；x为标准品浓度（μmol/mL），y为吸光值ΔA。
1、按蛋白浓度计算酶活定义：45℃，pH7.4时每毫克蛋白1min内催化产生1 nmol对硝基苯酚为一个酶活单位。
第1页，共2页β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷（V样×Cpr）÷T×1000= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr2、按样本质量计算：酶活定义：45℃，pH7.4时每克样品1min内催化产生1 nmol对硝基苯酚为一个酶活单位。
β-葡糖苷酶(纤二糖酶)测定方法
β-葡糖苷酶(纤二糖酶)测定方法-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1试验二β-葡萄糖苷酶(BG; EC3.2.1.21)活性测定新鲜土样比色法的原理：以对硝基苯-β-D-吡喃葡糖苷为基质，水解产生对硝基酚，比色测定（硝基酚比色法）。
1.配置溶液：（1）改进的通用缓冲溶液（MUB）贮备液：12.1g三羟甲基氨基甲烷（C4H11NO3即Tris）、11.6g马来酸（C4H4O4）、14g柠檬酸（C6H8O7）和6.3g硼酸（H3BO3）溶于500ml 1mol.L-1 NaOH溶液中，用去离子水稀释至1L，于4℃下贮存。
（2）pH值6.0的MUB缓冲溶液：在继续搅拌下，在200ml MUB贮备液中分别滴加0.1 mol.L-1 HcL或0.1mol.L-1 NaOH至溶液pH值为6.0，去离子水稀释定容至1L（3）4-Nitrophenyl-beta-D-glucopyranoside对硝基酚-β-D-吡喃葡糖苷（PNPG）溶液[C12H15NO8=25mmol.mol-1]：0.377g PNPG溶于40ml MUB溶液（pH为6.0）中，用相同pH值的缓冲液稀释至50ml，于4℃下贮存。
301.25（4）Cacl2溶液（0.5mol.L-1）：取无水Cacl2 55.49g加入1L的容量瓶中配置（5）Tris缓冲液[c（C4H11NO3）=0.1mol.L-1，pH值12.0]：12.2 g三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶于800ml去离子水，用0.5mol.L-1NaOH调节pH至12.0，去离子水稀释至1L（6）标准对硝基苯酚溶液：溶解0.500g 对硝基酚于400ml 双去离子水中，定容到500mL，保存于4度，用时再稀释10倍。
稀释后为100ug.ml-1。
（一般需1000ppm）2.试验过程(1)取1g新鲜土样(<2mm)于100ml三角瓶中，加0.25ml甲苯, 通风橱10min后，4ml pH为6.0的MUB溶液和1mm PNPG溶液，盖上瓶盖，充分混匀，在37℃培养1h。
土壤几丁质酶活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4040
土壤几丁质酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：UPLC-MS-4040规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体3mL×1瓶（自备）常温保存试剂二液体10mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体18mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂五A粉剂×2瓶2-8℃保存试剂五B液体55mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：自备甲苯。
2、试剂三：悬浊液，使用前摇匀。
3、试剂四为饱和溶液，低温（2-8℃）取出可能会有晶体析出，加热使其溶解即可。
4、试剂五：临用前取1瓶加入25mL试剂五B，充分溶解，现配现用。
用不完的试剂2-8℃可以保存4周。
5、标准液：5mg N-乙酰氨基葡萄糖。
临用前加入1mL试剂二配制成5mg/mL的标准溶液，即5000μg/mL的标准溶液，2-8℃可以保存4周。
产品说明：几丁质来源非常丰富，是自然界中仅次于纤维素的第二大类生物高聚物，由于其分解非常缓慢而大量堆积容易造成环境严重污染。
几丁质酶是影响土壤中氮矿化的一种重要的酶，其分解几丁质控制着氮循环的关键步骤。
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖，N-乙酰氨基葡萄糖与碱共热产生的中间化合物可进一步与对二甲氨基苯甲醛反应产生显色物质，该显色物质在585nm处有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
Chitin Chitinase N-Acetyl Glucosamine OH-Glucose OxazolineGlucose Oxazoline+P-Dimethylaminobenzaldehyde H+585nm 注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
土壤中性磷酸酶(S-NP)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4050
可见分光光度法土壤中性磷酸酶（S-NP）活性检测试剂盒说明书注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：UPLC-MS-4050规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体21mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1瓶2-8℃保存试剂三液体11mL×1瓶2-8℃保存试剂四粉剂×2支2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入50mL蒸馏水充分溶解，2-8℃保存8周；2、试剂四：临用前取1支加入576μL无水乙醇（自备），24μL蒸馏水充分溶解。
试剂变褐色后不能再使用，2-8℃可保存2周；3、标准品：0.5μmol/mL苯酚标准液。
产品说明：土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。
土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响，根据最适pH范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。
中性环境中，S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-NP活性。
Phenyl Disodium Phosphate S-NP Phenol+Na2HPO4Phenol+2,6-Dibromobenzoquinone Chlorimide Alkaline Conditions Indoxyl(660nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水、乙醇、30~50目筛和甲苯（不允许快递）。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比可以例参考文献）1.新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase, α-GC)试剂盒说明书
货号：QS2612 规格：50管/24样α-葡萄糖苷酶（α-Glucosidase,α-GC）试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：α-GC(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖，不仅与细胞壁的松弛或加固有关，而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。
测定原理：α-GC分解对-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算α-GC活性。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入10mL蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存。
粗酶液提取：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
，第1页，共2页测定管需设一个对照管。
α-GC活力计算：标准条件下测定的回归方程为y =0.00543x -0.0027；x为标准品浓度（nmol/mL），y为吸光值。
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土壤β-葡萄糖苷酶活性检测试剂盒（可见分光广度法）使用说明
货号:BC0160
规格:50T/24S
产品内容：
试剂一：甲苯5mL×1瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入10mL蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；
试剂三：液体40mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：液体80mL×1瓶，4℃保存；
标准品：液体1mL×1支， 1.5ml EP管含1ml，5mmol/L的对硝基苯酚溶液。
标准样品的准备：取100μL标准液，加入到400μL试剂三中，得到1mmol/L标准液，十倍稀释到100mol/l，倍比稀释：50、25、12.5、6.25mol/L，稀释液用试剂三。
100、50、25、12.5、6.25mol/L做标准液。
产品说明：
S-β-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
S-β-GC能够催化对-硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，产物略显黄色，在400nm有特征光吸收。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：
试剂名称测定管对照管标准管空白管
风干土样（g）0.050.05--
试剂一（μL）2525--
振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置15min
试剂二（μL）400---
试剂三（μL）500500--
混匀，37℃水浴1h后，立即沸水浴煮沸5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却
试剂二（μL）-400--
振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置15min
上清液（μL）500500-
标准液（μL）--500
蒸馏水（μL）---500
试剂四（μL）1000100010001000
充分混匀，室温静置2min后，400nm处蒸馏水调零，测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。
每个测定管设一个对照管。
标准曲线建立：根据标准管的浓度（y）和吸光度ΔA（A标准管-A空白管，x），建立标准曲线。
S-β-GC活力的计算：
根据标准曲线，将ΔA（x）带入公式计算样品浓度（μmol/L）。
单位的定义：每天每g土样中产生1μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-β-GC活力（U/g土样）＝y×V反总÷W÷T=0.444×y
T：反应时间，1h=1/24d；V反总：反应体系总体积：9.25×10-4L；W：样本质量，0.05g。