总糖的测定复习过程
总糖的测定方法
总糖的测定方法（斐林氏溶液快速测定法）一、原理：酶制剂生产中需要测定发酵液中糖质原料的消耗情况，以便掌握发酵过程。
葡糖糖、果糖、麦芽糖等为醛基、酮基或半缩醛基的糖都具有还原性，能使二价铜还原为一价铜，发酵液中的糊精、淀粉经过酸水解也能成为还原糖。
可根据其还原性，用一定量的斐林氏溶液将葡萄糖完全氧化，过量的斐林氏溶液与碘化钾作用而析出碘，然后用硫代硫酸钠来滴定，查表求的发酵液中的糖含量。
二、试剂：1、3N的盐酸溶液：浓硫酸一份加蒸馏水3份。
2、6N的氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠240.06克，溶解定容至1000毫升。
3、斐林氏溶液：A液：硫酸铜（五水硫酸铜）24克定容400毫升。
B液：酒石酸钾钠75克、氢氧化钠50克定容400毫升。
C液：碘化钾60克，定容200毫升。
A液、B液、C液混合为1000毫升溶液。
注意：配制时应按顺序配制，分别充分溶解，然后混合（A+B+C)摇匀备用。
4、4N的硫酸溶液：准确吸取化学纯浓硫酸111毫升于1000毫升的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
5、0.05N的硫代硫酸钠溶液：精确称取化学纯的硫代硫酸钠12.41克与碳酸钠0.1克，用新沸初冷蒸馏水溶解定容1000毫升。
（此溶液配置好后需隔一周才能使用，每月需标定一次）。
6、1%的酚酞指示剂：称取酚酞1克，溶于95%的乙醇中，定容至100毫升。
三、操作方法：样品：吸取0.5毫升样品（发酵滤液），放入100毫升的三角瓶中（做两只可对照），加入3N的盐酸10毫升加热3分钟，冷却后滴入酚酞指示剂2滴，用6N的氢氧化钠溶液调至红色，再加入斐林氏溶液10毫升，煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶油色为终点（在接近终点时加1%的指示剂，使之呈紫色）。
空白：在100毫升的三角瓶中加蒸馏水10毫升，然后加入斐林氏溶液10毫升煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶白色。
实验五_可溶性总糖的测定
实验五_可溶性总糖的测定一、实验目的1. 学习可溶性总糖的测定方法；2. 复习化学计量法的实验方法和操作技能；3. 培养准确测量和记录实验数据的能力。
二、实验原理可溶性总糖指的是能够在水中溶解的所有糖类的总和，一般包括葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖等。
在工业和农业中，可溶性总糖是一个重要的质量指标。
因此，测定可溶性总糖的含量也显得非常必要。
目前常用的测定方法包括：重铬酸盐法、酚硫酸法和硫酸亚铁法等。
本实验采用硫酸亚铁法进行测定，基本原理如下：在弱酸溶液中，硫酸亚铁可以与糖类发生还原反应，区别不同糖类的还原能力越强，反应速率越快，发生的还原反应也越强。
本实验中，使用葡萄糖标准液作为比较，计算样品中可溶性总糖的含量。
三、实验步骤1. 前期准备a. 准备好实验所需的硫酸亚铁标准液（0.05mol/L）、葡萄糖标准液（100mg/L）和蒸馏水；b. 将样品称重并加入干燥器中，加热干燥至恒定质量。
2. 样品制备a. 将称好的样品粉末加入容量瓶中，加入约100ml的蒸馏水。
注意：样品过多会导致实验误差的增大，因此加入的样品应正确控制；b. 将试管清洗干净，并使用蒸馏水冲洗干净。
用蒸馏水将等量的硫酸亚铁标准液加入试管中；c. 将试管放入加热水浴中，预热30-60秒后取出；d. 加入1ml样品溶液，并立即倒入试管中，密封试管盖，摇晃均匀，再放入加热水浴中加热约30分钟。
3. 反应终止a. 将反应物冷却至室温；b. 加入10ml饱和酸化锌溶液，摇匀，用蒸馏水冲洗实验瓶内壁，以便更好地收集浸出液。
a. 取出试管，将反应液加入移液瓶中，加入5-6滴淀粉指示剂；b. 取一只滴定管，将其充分洗净，并加入硫酸氢钾（1mol/L），加入10滴以上；c. 开始滴定，当液体从紫色变为无色时，停止滴定，记录所消耗的滴定剂的滴数。
5. 比较样品a. 重复以上实验步骤，使用葡萄糖标准液代替样品。
注意：样品和标准液的操作方法和操作条件要保持一致；b. 比较两次实验结果，计算可溶性总糖的含量。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法嘿，朋友们！今天咱就来聊聊总糖含量的测定方法。
这可真是个有趣又重要的事儿呢！你想想看，糖在我们生活中那可是无处不在呀！从甜甜的糖果到美味的糕点，从可口的饮料到日常的食物，哪哪儿都有糖的影子。
那怎么知道这里面到底有多少糖呢？这就需要我们掌握测定总糖含量的方法啦！常用的一种方法就是斐林试剂法。
这就好像是一个神奇的魔法，能把看不见的糖给变出来让我们看到。
先把样品处理好，然后加入斐林试剂，经过一系列反应，就能根据产生的现象来推算出糖的含量啦。
就像侦探在破案一样，通过一点点线索找到真相！还有一种方法是蒽酮比色法呢！这个方法也很有意思，就好像是给糖穿上了一件特别的“衣服”，让它在特定的条件下显现出来。
通过测量颜色的变化，就能知道糖有多少啦。
另外啊，还有一些其他的方法呢，就像武林中有各种不同的武功秘籍一样，各有各的厉害之处。
测定总糖含量可不仅仅是为了好玩哦，它的用处大着呢！比如在食品行业，厂家得知道自己生产的东西里糖有多少，这样才能保证产品的质量和口感呀。
不然，太甜了或者不够甜，那可不行！在科研领域，研究人员也需要准确测定总糖含量来进行各种研究，这就像是给他们的研究搭起了一座坚实的桥梁。
那有人可能会问了，测这个难不难呀？其实呀，只要掌握了方法，也没那么难啦！就像学骑自行车一样，一开始可能会摇摇晃晃，但多练习几次就熟练啦。
咱就说，要是不知道这些测定方法，那不是像在黑暗中摸索吗？所以呀，了解总糖含量的测定方法真的很重要呢！这能让我们更清楚地了解我们吃的东西，也能在很多方面帮助我们做出更好的选择。
总之，总糖含量的测定方法是个很实用的知识，大家可得好好记住哦！学会了它，就像是掌握了一把打开甜蜜世界大门的钥匙，能让我们更深入地了解糖这个奇妙的东西呢！怎么样，是不是很有意思呀？赶紧去试试吧！。
总糖的测定实验报告
总糖的测定实验报告总糖的测定实验报告引言：总糖是指食物中所有可溶性糖类的总和，包括单糖、双糖和多糖。
在食品工业中，准确测定食物中的总糖含量对于产品质量的控制和消费者的健康至关重要。
本实验旨在通过一系列实验步骤，测定某种食品中的总糖含量，并探讨不同测定方法的准确性和可行性。
实验原理：总糖的测定方法有很多种，常用的有显色法、酶解法和高效液相色谱法。
本实验采用显色法进行总糖的测定。
该方法是利用总糖与酚酞反应，生成红色络合物，通过比色测定络合物的吸光度来确定总糖的含量。
实验步骤：1. 样品制备：将待测样品加入适量的蒸馏水中，充分溶解。
2. 酚酞溶液制备：将适量的酚酞溶解于蒸馏水中，制备成0.5%的酚酞溶液。
3. 反应体系制备：取适量的样品溶液和酚酞溶液混合，加入适量的硫酸，使反应体系呈酸性。
4. 反应与显色：将反应体系加热至沸腾，保持沸腾2-3分钟，使反应充分进行。
然后冷却至室温，观察溶液颜色的变化。
5. 吸光度测定：使用分光光度计，在波长为520nm处测定反应体系的吸光度。
6. 标准曲线绘制：取一系列不同浓度的葡萄糖溶液，按照上述步骤进行显色反应，并测定吸光度。
根据吸光度与浓度的关系，绘制标准曲线。
7. 总糖含量计算：根据样品的吸光度值，利用标准曲线得出样品中总糖的含量。
结果与讨论：通过实验测定，得到了待测食品中总糖的含量为X g/100g。
这个结果表明该食品中含有较高的总糖含量，可能对于某些人群来说，摄入过多的该食品可能会导致健康问题。
总糖的测定方法中，显色法是一种简便、快速的方法。
然而，该方法对于一些特殊的食品样品可能会产生干扰，导致测定结果不准确。
因此，在实际应用中，需要根据不同的食品样品选择合适的测定方法。
此外，本实验中使用了葡萄糖作为标准物质，绘制了标准曲线。
标准曲线的制备对于准确测定样品中总糖的含量至关重要。
在实际应用中，可以根据需要选择其他合适的标准物质，并制备相应的标准曲线。
结论：通过本实验，我们成功测定了某种食品中的总糖含量，并探讨了不同测定方法的准确性和可行性。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法嘿，朋友们！今天咱们就像探险家一样，去探寻一下总糖含量的测定方法，这可就像是在糖果王国里寻找宝藏的秘密地图哦。
首先呢，有一个超级经典的方法，就是斐林试剂法。
这斐林试剂啊，就像是一个超级侦探，专门去揪出那些藏起来的糖分子。
把斐林试剂和含有糖的溶液混合在一起，就像是一场盛大的舞会开始了。
溶液里的糖分子就像一个个穿着华丽舞裙的舞者，迫不及待地要和斐林试剂中的铜离子共舞呢。
然后通过加热，这个舞会就进入了高潮，糖分子和铜离子在热热闹闹的氛围中发生反应，最后生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
这沉淀就像是舞会后留下来的精美纪念品，我们根据这个沉淀的量就能大致算出总糖的含量啦，是不是很神奇呢？就好像通过舞会后的垃圾量能算出来了多少宾客一样夸张。
还有一个方法是蒽酮比色法。
蒽酮就像是一个有着神奇魔法的小巫师，它能把糖变成有色的物质。
当把蒽酮试剂加入到含糖溶液里，就像是小巫师挥动魔法棒一样，溶液瞬间就发生了变化。
糖分子就像是被施了魔法的小木偶，乖乖地变成了一种有着特殊颜色的化合物。
然后我们把这个有色溶液放到比色计里，就像是把小木偶放在舞台上展示一样。
比色计通过检测颜色的深浅，就能知道糖的含量了，这感觉就像是看木偶戏的观众通过木偶的大小来判断它的年龄一样有趣。
另外，DNS法也很有趣哦。
DNS试剂就像是一个超级贪婪的大胃王，它遇到糖分子就“吃”个不停。
糖分子和DNS试剂发生反应后会变色，这就好比大胃王吃了不同的食物后脸上会沾上不同颜色的酱料一样滑稽。
我们再根据颜色的变化来确定总糖的含量，就像是通过大胃王脸上酱料的颜色来判断他吃了多少食物呢。
在这些测定方法里，每一个步骤都要小心翼翼的，就像走钢丝一样。
要是哪个环节出了差错，那就像是在演奏交响乐的时候突然弹错了一个音符，整个结果就会变得乱七八糟。
比如说加热的温度不对，就像是把烤箱的温度调错了，烤出来的蛋糕要么没熟要么焦了，测出来的总糖含量也就不准了。
总糖含量的测定虽然听起来有点复杂，但是当我们把它想象成一场有趣的游戏或者一个奇妙的故事，就会觉得充满乐趣啦。
实验五总糖的测定-蒽酮比色法
苯酚-硫酸法两种测量固体含糖量的方法选择一种比较适合的自己的方法两种方法可以对比下那种更好苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
编辑本段原理多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
编辑本段试剂1．浓硫酸：分析纯，95.5%2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。
3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。
（每次测定均需现配）4．标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。
5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8． 6mol/L 盐酸编辑本段操作1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
2．样品含量测定：①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。
最后一次将残渣一起到入离心管。
注意：总的溶液不要超出10毫升。
（既不要超出离心管的容量）。
②离心，转速3000转/分钟，共三次。
第一次15分钟，取上清液。
后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。
动物多糖--总糖的测定
1.硫酸蒽酮法（1）样品处理：称取0.1g样品（动物），以E/S比为1/25的比例，加入0.004g酸性蛋白酶定容至10mL容量瓶中，在pH=2,温度在37℃下，进行水解5h，水解后在100℃灭酶3min。
将经酶处理过的样品用5mL注射器经0.45um针孔滤膜过滤，收集滤液，并取1mL 滤液定容至50mL容量瓶中待用。
（2）紫外分光检测：准确称取0.1g葡萄糖（分析纯），溶解并用蒸馏水定容到100ml后，分别取出1ml、2ml、3ml、4ml、5ml分别加入到50的容量瓶中，并用蒸馏水定容到50ml,配成了浓度分别为20ug/ml、40ug/ml、60ug/ml 、80ug/ml、100 g/ml, 以蒸馏水做对照空白，各取1ml于试管中，再加入4ml蒽酮试剂，迅速浸入冰水中冷却，待几只试管均匀加完后，一起浸入100℃恒温水浴锅中，为防止水分蒸发，应在试管口上加塞。
自温度重新升至100℃起计时，准确保温10min后取出，用流动水冷却。
然后，于室温中平衡片刻（约10min左右），再在分光光度计上，进行光谱扫描，检测在波长620nm有最大吸收峰，选择620nm紫外检测波长，用0.5cm厚度的比色杯进行比色。
其标准曲线制作如表1.1 所示：表1.1 葡萄糖标准曲线结果标样号浓度（ug/ml）吸光度(ABS)1 20.000 0.067282 40.000 0.257233 60.000 0.438604 80.000 0.589235 100.000 0.74802多糖含量（%）=（样品浓度×稀释倍数×样品体积）/式样称重量×100%。
2．苯酚-硫酸法（1）标准曲线的制备: 准确称量干燥至恒重的葡萄糖标准品0.020g,置于体积500mL的容量瓶中定容并摇匀,得到葡萄糖的标准溶液。
以2.0mL蒸馏水作为空白样,依次取0.4mL, 0.6mL, 0.8mL, l.0mL, 1.2mL,1.4mL, 1.6mL,1.8mL 葡萄糖标准溶液,用蒸馏水补足至2.0mL,在每个样品中按顺序加入浓度为6%的苯酚溶液l.0mL,98%的浓硫酸5.0mL,静置10min后摇匀,室温下放置20min,再在分光光度计上，进行光谱扫描，检测在波长490nm有最大吸收峰，选择490nm紫外检测波长，用0.5cm厚度的比色杯进行比色，测得吸光值。
滴定法测量总糖
总糖的测定（直接滴定法）滴定, 蒸馏水, 葡萄糖, 酒石酸, 试剂1 原理样品中原有的还原糖和水解后转化的还原糖，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，根据消耗样液量计算总糖。
2 仪器实验室一般常用仪器。
3 试剂3．1 浓盐酸（比重1.18）。
3．2 30%氢氧化钠。
3．3 0.1%甲基红指示剂。
3．4 葡萄糖标准溶液：精确称取1.000g经过105℃烘干至恒重的葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并用水稀释至1000mL的容量瓶中，摇匀，备用。
3．5 斐林氏试剂甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基兰，用蒸馏水溶解。
移入1000mL 棕色容量瓶中，用蒸馏水定容。
乙液：称取50g酒石酸钾钠，75g氢氧化钠及4g亚铁氰化钾，用蒸馏水溶解，移入1000mL 容量瓶中，用蒸馏水定容。
斐林氏溶液的标定：吸取斐林氏甲液和乙液各5mL于150mL三角瓶中加水10ml，从滴定管中滴加约9.5mL葡萄糖标准溶液（3.5.3.4）控制在2min内加热至沸，趁沸以1滴/2s的速度滴加葡萄糖标准溶液（3.5.3.4）。
滴定至蓝色退尽为终点。
记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。
同时平行操作三份，取其平均值计算第10mL（甲乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）。
A=W*V/1000式中：A——10ml斐林氏甲乙液，相当于葡萄糖克数，g；W——称取葡萄糖克数，g；V——滴定时所消耗葡萄糖的毫升数，mL；1000——葡萄糖的稀释倍数。
4 测定步骤4．1 称取适量匀样（根据含糖量而定，要求滴定消耗样品液体积约在10mL左右。
）于250mL 容量瓶中，加水100mL，加入盐酸5mL摇匀，将容量瓶置于温度为68~70℃恒温水中转化，转化10min，取出置流动水中迅速冷却至室温，加1%甲基红指示剂2滴，用30%氢氧化钠中和至中性，用水稀释至刻度，摇匀，注入滴定管中备用。
4．2 预滴定：吸取斐林氏甲、乙液各5mL，放入150mL三角瓶中，再加入10mL水，在电炉上加热至沸，从滴定管中滴入转化好的糖液（3.5.4.1）至蓝色退尽即为终点。
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2.3.2 样品溶液正式测定：吸取5.0mL斐林氏甲 液 及 5.0mL 乙 液 ( 先 加 乙 液 再 加 甲 液 ) ， 置 于 150mL锥形瓶中，加蒸馏水25mL，从滴定管中 滴 加 比 预 测 体 积 少 1~2mL 的 样 品 溶 液 ， 加 入 玻 璃珠3~5粒，控制在2min内加热至沸，然后趁沸 继续以每2秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色褪去， 出现粉红色(或浅黄色)终点，记录消耗样液的总 体积。同法平行操作2~3份，得出平均消耗体积。
➢如果滴定后样品液的颜色变浅后又再 变深，说明滴定过量，需重新滴定。
5.滴定时反应液不变色的原因及处理：
➢可能是样液含糖量过少或斐林试剂太 浓；
➢ 应加大称样量； ➢ 或减少稀释倍数； ➢ 或减少斐林试剂的用量，可各取1～
3mL， 计算时按比例折算。
2.3 样液测定 2.3.1 样品溶液预测：吸取5.0mL斐林氏甲液及 5.0mL乙液（先加乙液再加甲液），置于三角瓶中， 加蒸馏水25mL，加入玻璃珠3~5粒，控制在2min 内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管 中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液 颜色变浅时，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝 色褪去，出现粉红色(或浅黄色)为终点。
实验一 总糖的测定
1. 实验原理
斐林试剂法是利用斐林试剂的甲、乙液混合后， 甲液的硫酸铜与乙液的氢氧化钠作用生成天蓝色的氢 氧化铜沉淀，该沉淀在碱性溶液中与乙液的酒石酸钾 钠反应生成复杂的化合物（酒石酸钾钠铜）。酒石酸 钾钠铜是一种氧化剂，糖类的水解物都含有具还原性 的醛基或是酮基，在碱性条件下煮沸能使斐林试剂中 的二价铜离子还原为一价的氧化亚铜。根据斐林试剂 完全还原所需的糖量，计算出样品的总糖含量。
3. 计算
X
M
m V的含量（以葡萄糖计），%； m — 10mL斐林试剂相当于还原糖（以葡萄糖计）
的质量，g； V — 测定时平均消耗样品溶液的体积，mL；
M — 样品质量，g。
4.变色过程：
➢样液由深蓝色→蓝紫色→紫红色→红 色
➢或由深蓝色→蓝紫色→黄绿色→黄红 色
2. 操作方法
2.1 样品处理：将样品在组织捣碎机中捣成匀浆，称取约10--20g样品，溶解后置于250mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度， 混匀，静置,过滤60-70mL。
2.2 样品转化：吸取处理好的样液50mL于100mL容量瓶中， 加盐酸5mL，摇匀。置水浴中加热，使溶液在2~2.5min内升 温至70℃，保持7.5~8min，使全部加热时间为10min。取出 迅速冷却至室温。用20%NaOH溶液中和（加入酚酞指示剂 1~2滴），样液至微红色为止，加蒸馏水至刻度，摇匀，注入 滴定管中。