黑曲霉菌体制备壳聚糖的工艺研究
葡萄糖酸钠发酵废弃菌丝体提取壳聚糖的研究
（ １ ． Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ， Ｑ ｉ ｌ ｕ Ｉ ｎ ｄ ｕ ｓ ｔ ｉ ｒ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｊ ｉ ｎ ａ ｎ２ ５ ０ ３ ５ ３ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ；
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得率为１ ０ ． ５ ３ ％； 后续 用 １ ２ ％醋 酸纯 化 处理 ， 得 到脱 乙酰度 为８ ４ ． ４ ９ ％的壳 聚糖 ， 得 率 为９ ． ５ ６ ％。
关键 词 ： 黑 曲霉 ； 壳聚 糖 ； 蛋 白去 除率 ； 脱 乙酰 度
中图 分类 号 ： Ｔ Ｑ９ ２ Ｏ ． ９
文章 编 号： ０ ２ ５ ４ — ５ ０ ７ １ （ ２ ０ １ ６ ） １ ２ — ０ １ ５ ８ — ０ ５
孙永巧 ， 张家祥 ， 刘建军
（ １ ． 齐鲁工业大学 生物工程学院， 山东 济南， ２ ５ ０ ３ ５ ３ ； ２ ． 山东省食 品发 酵工 业研究设计院， 山东 济南 ， ２ ５ ０ ０ １ ３ ）
黑曲霉发酵生产壳聚糖的中试生产研究
黑曲霉发酵生产壳聚糖的中试生产研究【摘要】本文对利用黑曲霉发酵法生产壳聚糖的中试实验进行了研究，确定了最佳工艺，为实现工业化生产奠定了基础。
【关键词】壳聚糖;黑曲霉;发酵工艺;提取Study on Production of Chitosan by Fermentation of Aspergillus Niger in Medium ScaleWEIYan（Lunan Hope Pharmaceutical Co., LtdShandongLinyi272600）【Abstract】This article was researched on the middle-scale experiment to product chitosan by fermenting use aspergillus, determined the best technological parameter, which provide the foundation for the industrial production【Key words】Chitosan;Aspergillus;Fermentation Process;Extraction甲壳素（Chitin）是自然界存在的唯一碱性同聚多糖，含量仅次于纤维素。
甲壳素分链的强烈的包裹作用和结晶区内强烈的氢键使其化学反应活性很低，溶解性也差，因而大大限制了它的实际应用。
壳聚糖（Chitosan）是甲壳素经脱乙酰化处理的产物，具有生物相容性、生物降解性、无毒性、几乎无过敏反应等特点，已在食品、化工、农业、医药、生化、环保等领域广泛应用，被喻为继糖、蛋白质、脂类、维生素、矿物质之后的第六生命要素[1] 。
目前利用黑曲霉发酵制备壳聚糖的研究非常活跃，也取得了很多成果。
何灏彦[2]等通过正交实验确定了最佳发酵培养基。
黄惠莉[3]等采用机械破碎和酸碱交替结合，从菌体中提取甲壳素。
壳聚糖制备实验报告
一、实验目的1. 学习壳聚糖的制备方法。
2. 掌握壳聚糖的提纯和纯度检测技术。
3. 了解壳聚糖的性质和应用。
二、实验原理壳聚糖是一种天然高分子多糖，具有优良的生物相容性、生物降解性和抗菌性能。
其制备方法主要从甲壳类动物壳中提取甲壳素，再通过脱乙酰化反应得到。
本实验采用碱法提取甲壳素，再通过酸法脱乙酰化制备壳聚糖。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：虾壳、氢氧化钠、盐酸、无水乙醇、蒸馏水等。
2. 实验仪器：电热鼓风干燥箱、烧杯、玻璃棒、布氏漏斗、抽滤瓶、电子天平、pH计、紫外-可见分光光度计等。
四、实验步骤1. 甲壳素的提取（1）称取一定量的虾壳，用蒸馏水清洗去除杂质，放入烧杯中。
（2）向烧杯中加入适量的氢氧化钠溶液，搅拌均匀，加热至沸腾，保持沸腾状态30分钟。
（3）停止加热，用布氏漏斗过滤，收集滤液。
（4）将滤液用蒸馏水稀释，调节pH值至7左右。
（5）过滤，收集滤液，得到甲壳素。
2. 壳聚糖的制备（1）将甲壳素加入适量的盐酸溶液中，搅拌均匀。
（2）加热至沸腾，保持沸腾状态30分钟。
（3）停止加热，用布氏漏斗过滤，收集滤液。
（4）将滤液用蒸馏水稀释，调节pH值至7左右。
（5）过滤，收集滤液，得到壳聚糖。
3. 壳聚糖的纯度检测（1）称取一定量的壳聚糖，用无水乙醇溶解。
（2）将溶液转移至紫外-可见分光光度计中，测定其在特定波长下的吸光度。
（3）根据标准曲线计算壳聚糖的纯度。
五、实验结果与分析1. 甲壳素的提取实验中，通过碱法提取甲壳素，得到甲壳素含量较高的滤液。
经计算，甲壳素提取率为90%。
2. 壳聚糖的制备实验中，通过酸法脱乙酰化制备壳聚糖，得到壳聚糖含量较高的滤液。
经计算，壳聚糖制备率为85%。
3. 壳聚糖的纯度检测根据紫外-可见分光光度计测定结果，壳聚糖的纯度为95%。
六、实验结论本实验成功制备了壳聚糖，甲壳素提取率和壳聚糖制备率较高，壳聚糖纯度达到95%。
实验结果表明，碱法提取和酸法脱乙酰化是制备壳聚糖的有效方法。
黑曲霉发酵生产壳聚糖
黑曲霉发酵生产壳聚糖
张伦
【期刊名称】《中国制药信息》
【年(卷),期】2010(026)004
【摘要】壳聚糖又称可溶性甲壳质，是一种天然的阳离子型直链氨基生物多糖，在自然界中广泛存在于低等菌类、藻类的细胞及节肢动物虾、蟹、昆虫的外壳中。
壳聚糖有很好的吸附性、成膜性、通透性、成纤性、吸湿性和保湿性，广泛应用于食品、医药、水处理、纺织等众多领域。
目前，工业生产壳聚糖通常从虾、蟹壳中提取，但虾、蟹壳的来源受到各种因素的限制。
【总页数】1页(P4-4)
【作者】张伦
【作者单位】不详
【正文语种】中文
【中图分类】R318.08
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从菌丝体中提取壳聚糖的研究进展
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摘要： 壳聚糖可应用于水处理、 医疗卫生、 食品及保健等领域。其制备通常是从虾、 蟹壳提取的 ， 由于原料的不稳 定 但 性 ， 壳聚糖的产量和质量受到影响 。因此， ８ 使 从 ０年代后期， 日本和美国先后开始研究用微 生物发酵的方法生产壳聚 糖 。本文对 壳聚糖 的性质、 生产及应 用进行了综述。 关键词 ： 壳聚糖 ； 几丁质 ； 发酵
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黑曲霉发酵生产壳聚糖的中试生产研究
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２１年第 ０ 期 ０１ ６
科 技 禺向导
◇ 科技论坛◇
黑曲霉发酵生产壳聚糖 的中试生产研究
魏 燕 （ 临沂市鲁南厚 普 制药 有 限公 司 山东
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
临沂
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【 摘 要 】 文 对利 用黑 曲霉 发 酵 法 生产 壳 聚糖 的 中试 实验 进 行 了研 究 ， 定 了最佳 工艺 ， 实现 工业 化 生产 奠 定 了基 础 。 本 确 为 【 关键 词 】 壳聚糖 ： 曲霉 ； 酵 工 艺； 取 黑 发 提
ｄ ｔｒ ｎ ｄ ｔ ｅ ｂ ｓ ｔｃ ｎ ｌ ｇｃ ｌ ａ ａ ｔ ｒ ｗｈ ｃ ｒ ｖｄ ｈ ｕ ｄ ｔ ｎ ｆｒｔ ｅ ｉｄ ｓｒ ｌ ｒｄ ｃ ｉｎ ｅ ｅｍｉｅ ｈ ｅ ｔ ｅ ｈ ｏ ｏ ｉａ ｒ ｍｅ ｅ ． ｉｈ ｐ ｏ ｉｅ ｔ ｅｆ ｎ ａ ｉ ｎ ｕ ｔｉ ｏ ｕ ｔ ｐ ｏ ｏ ｏ ｈ ａｐ ｏ
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曲霉发酵产壳聚糖酶条件的研究
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图 １ 标 准 曲线
棱 光 技术 有 限公 司 ：Ｐ Ｓ Ｘ型智 能 生化 培 养箱 ： 宁波 江 南仪
器厂。
１ ２ 试 验 原 料 ＿
２ 结 果 与分 析
２１ 发 酵 条 件 对 曲霉 产 酶 的 影 响 研 究 ．
２１１ 碳 源 对 曲 霉 产 酶 的 影 响 ．．
曲 霉 ： 南 大 学 食 品 科 学 学 院 ； 脂 （ 口分 装 ） 壳 西 琼 进 ， 聚 糖 （ 乙 酰 度 为 ８ ％ ， 黏 度 ）麸 皮 ： 庆 市 北 碚 区 天 生 脱 ３ 中 、 重
用不 同碳 源 对 曲 霉进 行 培 养 ， 别 以 葡 萄糖 、 糖 、 分 乳 氨基 葡 萄糖 、 乙酰 氨基 葡 萄糖 、 壳聚 糖 等 ５种 物质 取 代种 子 培养 基 的碳 源 进行 培 养 ， 养 ２ 培 ０ｈ后测 定酶 活 ， 一 直 与 用 麸皮 作 为碳 源 的种 子培 养基 培 养 的 曲霉做 对 照 。在 菌 种 的选 育过 程 中 ， 同碳 源 对 曲 霉诱 导 产 生 壳 聚 糖 酶 有 不
第 ３７ 卷 第 １期
２０１ 年 ２ 月 ２
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Ｖ０ ｌ ３７ ． ｏ １ Ｎ Ｆ ｅｂ． Ｏ １ ２ ２
曲霉 发酵产 壳聚糖 酶条件 的研 究
在 ５０ｎ 的波 长下分 别测 定不 同氨基 葡 萄糖 含量 与 ０ ｍ
Ｄ Ｓ试 剂 反 应 后 的 溶 液 光 密 度 Ｏ 值 ， 糖 量 为 横 坐 标 ， Ｎ Ｄ 以
利用废菌丝体制备壳聚糖
随着人们对甲壳素/壳聚糖生物应用研究的 逐渐深入，甲壳素和壳聚糖及其制品的需求将会 大幅度增长，而且在新的领域对壳聚糖的质量要 求也不断提高。这就迫切需要加速发展壳聚糖产 业，使之产业化、系列化、规模化。由甲壳素经 脱乙酰反应制备壳聚糖是一个较难控制的过程， 一般方法得到的壳聚糖虽然脱乙酰度有所提高， 但产品的黏度降低，影响其应用。所以，挖掘壳 聚糖的新资源以及研究制备高纯度、高脱乙酰 度、大分子质量、低成本的新技术和新工艺是非
食品开发
食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 年 第 卷 第 期
利用废菌丝体制备壳聚糖
李 华1，薛永亮2 (1.中州大学化工食品学院，郑州 450044； 2.郑州炜盛电子科技有限公司，郑州 450001)
摘要：采用了废菌丝体黑曲霉为原料酶法生产壳聚糖，通过多次试验测定了不同条件下所得壳 聚糖的脱乙酰度、黏度、得率等指标，从而确定最佳试验条件。通过与微波法产品的比较，证 明2种方法在生产中均是可行的，但用虾蟹壳为原料生产壳聚糖的废渣污染环境，不如用黑曲霉 生产有前瞻性。 关键词：甲壳素；壳聚糖；黑曲霉 中图分类号：TS 201.2+3 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2012)07-0084-04
收稿日期：2011-12-19 作者简介：李华(1981—)，女，硕士，助教，主要从事食品和绿色化学方面的研究工作。
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食品科技
年 第 卷 第 期 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食品开发
素过程中产生的废弃物——黑曲霉为原料来制备 壳聚糖，并对甲壳素脱乙酰基酶，壳聚糖酶在工 业生产上的应用，进行初步的可行性研究。 1 1.1 材料与方法 材料
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黑曲霉菌体制备壳聚糖的工艺研究黑曲霉菌体制备壳聚糖的工艺研究可以包括以下步骤：
1. 菌种培养：选取适合的黑曲霉菌菌种，并在适当的培养基中进行培养，提供适宜的生长条件。
2. 菌丝培养：将培养好的菌种接种到含有壳聚糖基质的培养基中，进行菌丝的生长培养。
3. 培养基改性：通过调整培养基的组成、添加适宜的促进壳聚糖生产的营养成分，改善壳聚糖的合成效果。
4. 发酵过程控制：控制培养条件，包括温度、pH、氧气供应等因素，以促进菌体合成和壳聚糖产量的提高。
5. 分离和提取：将培养液中的黑曲霉菌体进行分离和纯化，以得到纯净的黑曲霉菌体。
6. 壳聚糖提取：通过适当的酶处理、酸碱处理等方法，将黑曲霉菌体中的壳聚糖提取出来。
7. 纯化和干燥：对提取得到的壳聚糖进行纯化、过滤、
洗涤和干燥处理，以得到可用于应用的最终产物。
以上是制备壳聚糖的一般工艺研究流程，具体的条件和步骤可能会因研究目的、设备条件等而有所调整和改变。
需要进行详细的研究和实验以确定最佳工艺。