NK／T细胞淋巴瘤的病理组织学、免疫表型及基因研究

ＷＨＯ分 类 中定 义 的 结 外 Ｔ细 胞 和 ＮＫ细 胞 淋 巴瘤 石 蜡 切 片 蛋 白 酶 Ｋ 消 化 ，用 ＦＩＴＣ标 记 的 ＥＢＶ寡 核
包 括 （血 管 中 心 ）鼻 和 鼻 型 ＮＫ／Ｔ细 胞 淋 巴 瘤 、肠 病 苷 酸 探 针 杂 交 。 以 已知 ＥＢＥＲ 阳性 的鼻 咽 癌 为 阳性
瘤 患者 中有 ５例 显示 ＴＣＲ基 因的克 隆性 重 排 。结 论 大 多 数 上 呼吸 消化 道 ＮＫ／Ｔ细 胞淋 巴瘤 起 源 于 ＮＫ细 胞 ，只 有一 小部 分 为 Ｔ细 胞 来 源 。然 而 ，在 皮肤 及 胃肠 道 中 ，ＮＫ样 Ｔ细胞 肿瘤 更 多见 。在 淋 巴结 中 ，ＮＫ细 胞淋 巴瘤 很少 。由于 ＮＫ及 ＮＫ样 Ｔ细胞 淋 巴瘤 的组 织学 改 变 相似 ，在进 行 ＮＫ细 胞标 志 物 、 细胞 毒性 颗 粒蛋 白检 测 的 同时必 须 检测 ＴＣＲ基因重 排 才会 得 到准 确 诊 断 。ＴＣＲ的基 因重排 检测 仍 是
Ｃ
作 者单 位 ：１０００８３ 北 京 大学病 理 系 （钟博 南 、张 晓华 、李 敏 、李 宁 、刘 春雨 、 高子 芬 ）；天津 市第一 中心 医 院 （曹海 光 ）；北京 市 和平 里 医 院 （顾 依 群 ）
通信作 者 ：高子 芬
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Ｂｏ－ｎａｎ ，ＺＨＡＮＧ Ｘｉａｏ－ｈｕａ，ＬＩＭｉｎ，ＣＡＯ Ｈａｉ－ｇｕａｎｇ，ＬＩＮｉｎｇ，ＬＩＵ Ｃｈｕｒｅｙｕ，ＧＵ Ｙｉ－ｑｕｎ，ＧＡＯ Ｚｉ－ｆｅｎ． 一 ｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｐｅｋｉｎｇ Ｕｍｖｅｒｓｉ￣ Ｈｅａｌｔｈｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｃｅｍｅｒ，Ｂｅ０＂ｉｎｇ １０００８３，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＧＡＯ Ｚｉ－ｆｅｎ
D ｔｙｐｉｃａｌｌｙ ＮＫ ｄｅｒｉｖａｔ ｉｏｎ，ａｎ ｄ ａ ｆｅｗ ｂｅｌｏｎｇ ｔｏ Ｔ ｌｉｎｅａｇｅ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ＮＫ－ｌｉｋｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｓ ｍｏｒｅ ｆｋｑｕｅｎｄｙ ｓｅｅｎ
ｉｎ ｓｋ ｉｎ ａｎｄ ＧＩｔｒａｃｔ．ＮｏｄａｌＮＫ－ｃｅｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ ａｒｅ ｑｕｉｔｅ ｒａｒｅ．Ｔｈｅｓｅｔｗｏ ｋｉｎｄｓ ｏｆｌｙｍｐｈｏｍａ ｓ Ｃａ ｎ ｏｎｌｙ ｂｅｄ ｉａｇｎｏｓｅｄ ｗｉｔ ｈ ａｄｄ ｉｔ ｉｏｎａｌ ｉｍｍｕｎｏ￣ｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ／ｌ＇ｌａｒｋｅｐ３，ＥＢＥＲ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｂｙ ＩＳＨ ，ｔＩＥＲ ｇｅｎｅ ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ ｏｒ ＮＫ－ｃｅｌ ｒｅｃｅＤ—
及 ｐ位 点 进 行 扩 增 ，模 板 ＤＮＡ是 组织 经 蛋 白 酶 Ｋ消 化 后 用 酚 ，氯仿 抽 提 法 取 得 的 。对 ｐ片 段 用 ２个
D ５ 一ＡＧＣＡｃ（Ｔ，Ｇ，ｃ）Ｇ毗 ＧＣｃ（Ｔ，Ｇ）ＧＧｒｌＧＣＣ一３ ］，７片
重 排 基 因 。 扩 增 体 系 参 见 文 献 ［３］。 用 已 知 ＴＣＲ￣＇ 和 ｐ基 因 克 隆 性 重 排 的 Ｔ细 胞 淋 巴 瘤 作 为 阳 性 对 照 ，阴性 对 照 为 不 加 模 板 ＤＮＡ 的反 应 体 系 及 良性 淋
D 巴组织增生 的样 本 。 C D 结 果
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血液学杂志 ２００３年 １０且第 ２４鲞筮 Ｑ塑 』
竺 ！ 丝！ ：
论 · 著 ·
ＮＫ／Ｔ细 胞 淋 巴瘤 的 病 理 组 织 学 、 免 疫 表 型 及 基 因研 究
钟 博 南 张 晓 华 李敏 曹海 光 李 宁 刘 春 雨 顾 依 群 高 子 芬
１ 临 床 特 征 与 组 织 学 表 现 在 ２３例 上 呼 吸 消 化 道
段 用 ３个 引 物 ［Ｖ川 ５ 一ｒＩ℃ （ Ｇ）ＧＴＣＴＡｒｌＴＡＣＴＧＴ—
D ＧＣ一３ 、Ｖ删 ５ 一 ＣＡＣＴＣ（Ｃ／Ｔ）ＣＡＣＴＩＥ一３ 和 Ｊ ５ 一 C ｃＡＡＧ１ ［－Ｉ１ＧＴＩ℃ｃｃＡｃｒＩ ｃ一３ ］来 扩 增 ｒＩ℃邸 及 ７的
病 例 和 方 法
１ 病 例 ３４例 淋 巴瘤 标 本 包 括 北 京 大 学 病 理 系 资 料 库 １９例 ，天 津 市 第 一 中心 医 院 １２例 ，北 京 市 和 平 里 医 院 １例 ，山 东 临 沂 人 民 医 院 ２例 。所 有 标 本 均 为 １９９９ ２ＯＯ２年 来 我 院 会 诊 的 北 方 地 区 患 者 。 发 病部 位包括鼻腔 、鼻咽 、舌 、口腔 、鼻窦 、皮肤 、回盲部 肠 管 、结 肠 、淋 巴 结 、颈 部 及 纵 隔 。 其 中男 性 ２６例 ，
D 患 者 中检测 到 ＥＢＥＲ。２２例 上 呼吸 消化 道淋 巴瘤 患者 中有 ２例 检测 到 了 １、Ｃ邸 或 ．ｙ基 因 克 隆性 重 排 ， C 所 有 胃肠道 和皮 肤 淋 巴瘤 患 者均 检 测到 了 ＴＣＲ基 因 重排 。２例 其 他 部 位 结 外淋 巴瘤 及 ７例 结 内淋 巴
血 液学 杂志 ２００３年 ｌ０月第 ２４鲞箜 Ｑ
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婴 ： 丝 ：１９
欧 美 国 家外 周 Ｔ细 胞 淋 巴瘤 很 少 见 ，仅 占非 霍 阴性 对 照 。
奇 金 淋 巴 瘤 的 １０％ １５％ ，而 且 其 分 类 也 一 直 备 受 ３ 荧 光 原 位 杂 交 （ＦＩＳＨ） 由 于 ＮＫ／Ｔ细 胞 淋 巴瘤
样 Ｔ细 胞 淋 巴瘤 ”被 提 出并 被 研 究 。 实 际 上 ，这 种 淋 ４ 基 因型 分 析 应 用 ＰＣＲ法 对 Ｔ细 胞 受 体 （ｒＩ℃Ｒ）７
巴瘤 包 括 在 ＮＫ／Ｔ细 胞 淋 巴 瘤 中 ，有 多 种 形 态 学 表 现 ，常 伴 坏 死 及 血 管 浸 润 ，多 发 生 在 结 外 部 位 ，预 后 较 差 。在 亚 洲 国家 这 种 疾 病 的发 病 率 较 高 。 我 们 收 集 了 ３４例 诊 断 为 ＮＫ／Ｔ细 胞 淋 巴 瘤 患 者 的标 本 ，运 用 多种方法进行研 究 ，旨在探 索 准确 、经 济 、方便 的 检 测 手 段 及 诊 断 标 准 ，为 临床 治 疗 提 供 指 导 。
D 鉴别 ＮＫ 和 ＮＫ样 Ｔ细胞 淋 巴瘤 的重 要标 准 。 【关键 词 】 淋 巴瘤 ； 基 因重排 ； 疱 疹病 毒 ４型 ，人 ； 抗体 ，单 克隆 ，ＣＤ５６
C D Ｓｔｕｄｙ ｏｆｔｈｅ ｐａｔｈ￣ｏｇｙ，佃衄删岫 ＩＩＩａ均哪ｐｅ，ｅｔ ｂ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｌｎａｒｋｅｒ ｏｆ ＮＫＩＴ—ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ ＺＨＯＮＧ
C ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔ ｉｖｅ ｆｏｒ ＣＤ５６ ａ ｎ ｄ １６ ｆｏｒ ＴＩＡ一１ ｉｎ ３４ ｌｙｍｐｈｏｍａｓ ｃａｓｅｓ．Ａｌｌ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｋｉｎ ｃａｓｅｓ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｆｏｒ 一 ６７．Ｅｐｓｔｅｉｎ—Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ（ＥＢＶ）ｍＲＮＡ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ １２ ｕｐｐｅｒ ａｅｒｏｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｔｕｍｏｒｓ ｉｎｃｌｕｄ ｉｎｇ ９ ｏｆ １２ ｎａｓａｌ ａ ｎｄ ３ ｅｘｔｌｌｌ／ｌａｓａｌ ｔａｎｌｏｐ ３ ．ＥＢＥＲ Ｗａｓ ａｌｓｏ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ １ ｏｆ ２ ｓｋｉｎ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｓ ａ ｎ ｄ ｂｏｔｈ ｏ ｆ ｔｈｅ ２ ＧＩ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｓ Ｃｌｏｎａ ｌ
型肠 Ｔ细 胞 淋 巴瘤 、皮 下 脂 膜 炎 样 Ｔ细 胞 淋 巴瘤 、肝 对 照 ，用 ＴＢＳ取 代 探 针 作 为 阴 性 对 照 。 阳 性 信 号 为
脾 型 Ｔ细 胞 淋 巴 瘤 。 近 年 来 ，一 个 新 的概 念 “ＮＫ 瘤 细 胞 核 内出 现 深 蓝 紫 色 颗 粒 。
争 议 。 除 了 蕈样 真 菌 病 外 ，几 乎 １／３的 Ｔ细 胞 淋 巴 与 ＥＢ病 毒 （ＥＢＶ）感 染 有 较 高 的相 关 性 ，我 们 进 行 了
瘤 发 生 在 结 外 部 位 。 在 ＲＥＡＬ 分 类 基 础 上 的 新 ＥＢＶ—ＥＢＥＲ（ＥＢ病 毒 编 码 的 小 ＲＮＡ）ＦＩＳＨ 的 检 测 。
细 胞受 体 ８和 了基 因的克 隆性 重排 。结 果 在 ３４例结 外 淋 巴瘤患 者 中 ，１８例 ｃＤ 阳性 ，１６例 ＴＩＡ－１阳
D 性 。２例皮 肤 淋 巴瘤 患者 中所 有 的瘤 细胞 一６７均 阳性 。在 ＥＢ病毒 ＲＮＡ检 测 中 ，ｌ２例 发 生 于上 呼 吸
消 化道 的 病例 阳性 ，包 括鼻 部 的 ９例 ，以及 鼻 外的 ３例 。同样 在 ２例 胃肠 道 淋 巴瘤 及 １例 皮 肤淋 巴瘤
【Ａｂｓｔｒｔ￣ 】 Ｏｂｊ￣ｌｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ＮＫ／Ｔ－ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ，ｓｅａｒｃｈ ｆｏｒ ａ ｍｏｒｅ ｅｔｔｉｃａｃｉｏｕｓ ａｎｄ ｓｉｍｐｌｅｒ ｍｅｔｈ—
ｏｄ ａｎｄ ｅｓｉａｂｌｉｓｈ ａ ｓｔａｎｄａｒｄ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ ｆｏｒ ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｉｎｇ ｔｈｅ ＮＫ－ｌｉｋｅ Ｔ－ｃｅｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ＮＫ－ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ
【摘要 】 目的 筛 选 高 效 、方 便 、经 济 的 对 ＮＫ／Ｔ细 胞 淋 巴瘤 更进 一 步 分 类 与 诊 断 的检 测 方 法 。 方 法 收集 了诊 断 为 ＮＫ／Ｔ细胞 淋 巴瘤 的 ３４例患 者 石腊 包 埋 标 本 ，２７例 发 生 于结 外 ，７例 发 生 在淋 巴 结 。用 多种 抗体 研 究其 免疫 表 型 。ＥＢ病毒 ＥＢＥＲ探 针原 位 杂 交 方法 检测 病 毒 感 染 。ＰＣＲ方 法 检 测 Ｔ
D ａ ｎ ａ ｌｙ￣ ｂＹ ｉｍｍｔｍｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ＥＢＥＲ １１２ ＲＮＡ ｐｒｏｂｅｓ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ Ｔ－ｃｅｌ ｒｅ ｃ ｅｐｔｏｒ ． （ＴＣＲ）一ｐ ａｎｄ一．ｙ ｇｅｎｅ ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｅｉｇｈｔｅｅｎ ｃａｓｅｓ