血细胞分析仪检测技术及临床应用
血液细胞检验质量控制在临床医学检验中的应用
血液细胞检验是临床医学检验中常用的一项检测项目，它通过对血液样本中的各种细胞进行计数和分类，能够为医生提供诊断疾病、评估治疗效果和预测疾病进展的重要信息。
在实际的检验过程中，为了保证检验结果的准确性和可靠性，血液细胞检验质量控制显得尤为重要。
本文将就血液细胞检验质量控制在临床医学检验中的应用进行全面评估与探讨。
1. 血液细胞检验的意义血液细胞检验是通过自动化血液细胞分析仪对血液细胞进行计数和分类，包括白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板等指标的测定。
这些指标反映了人体内部环境的一些重要变化，如免疫功能、贫血程度、出血倾向等，因此在临床医学中应用广泛。
2. 血液细胞检验的质量控制意义血液细胞检验作为临床医学检验的重要组成部分，其结果的准确性直接关系到临床诊断和治疗的有效性。
而血液细胞检验的质量控制就是针对这一需求而制定的一系列管理措施，旨在保证检验结果的准确性和可靠性。
3. 质量控制措施血液细胞检验的质量控制措施包括内部质控、外部质控和参比方法三个方面，这些措施的实施可以有效地提高检验结果的准确性和可靠性。
3.1 内部质控内部质控是指实验室根据已知的标准方法和标准样本，进行日常监控和验证仪器的性能和精度，以及人员操作的准确性。
通过定期检验和核查，可以及时发现并纠正检验过程中的误差和偏差，保证检验结果的准确性。
3.2 外部质控外部质控是指实验室通过参加各类质量评价活动，接受第三方机构组织的检验项目比对和评价，以验证和评估自身检验水平的一种手段。
通过参与外部质控，可以及时了解自身实验室的检验水平，找出存在的问题并进行改进，提高实验室的整体质量。
3.3 参比方法参比方法是指将实验室所测定的样本结果与已知的参考方法或参考标准进行比对和验证，以确定检验结果的准确性和可靠性。
参比方法通常应用于新仪器、重大变更或新方法的验证，以及其他质控措施失效时的应急处理。
4. 个人观点与结论在临床医学检验中，血液细胞检验是非常重要的一环，而血液细胞检验的质量控制则是保证检验结果准确性和可靠性的关键所在。
五分类血细胞分析仪的原理及使用
五分类血细胞分析仪的原理及使用五分类血细胞分析仪是一种用于检测和分析血液成分的仪器。
它可以通过血细胞图像和数值结果，对白细胞、红细胞和血小板等不同血细胞的形态和数量进行评估。
这种分析仪是临床检验中常用的重要工具之一，它可以为医生提供诊断和治疗血液相关疾病的依据。
1.光散射技术：血细胞通过细胞流的方式，单独流经流式细胞仪的光学系统。
当细胞经过时，被激光器产生的细胞射线所照射，部分光线会被细胞吸收，同时细胞会发生散射。
根据细胞对光的吸收、散射情况，可以区分不同种类的血细胞。
2.染色：血细胞分析仪会在细胞流过时，对其进行染色。
常用的染色剂有双峰染色剂，如吉姆萨染色剂。
染色剂可以使红细胞、血管壁和嗜酸性和嗜碱性粒细胞成为红色，而淋巴细胞和单核细胞成为蓝色。
通过这种染色，可以更好地区分不同细胞类型。
3.细胞计数：血细胞分析仪中的传感器会对流过的细胞进行计数。
根据流速和激光器的射线强度，感应器可以检测每个细胞的通过时间和数量。
根据这些信息，可以得到各种血细胞的数量。
4.数据分析：细胞计数和各种血细胞的数量数据会被仪器收集并保存。
然后，这些数据会被传送到计算机上进行后续的数据处理和分析。
计算机会根据事先设定的参数和阈值，对细胞进行分类，并生成血细胞分布和数量的图表和报告。
1.准备样本：从受测者的体内采集合适的血液样本，使用抗凝剂进行抗凝，以保持血液的流动性。
2.装载样本：将采集的血液样本注入到血细胞分析仪的装载仓中。
确保样本装载正确，避免气泡和污染。
3.开始测试：启动血细胞分析仪，设定所需的分析参数和样本标识。
确保仪器正常运行，并按照提示进行操作。
4.分析结果：待测试完成后，血细胞分析仪会自动生成血细胞分布和数量的图表和报告。
用户可以在计算机上查看和保存这些数据。
需要注意的是，使用血细胞分析仪前需要了解仪器的操作规则和安全注意事项。
此外，样本的质量会对结果产生重要影响，因此应确保样本采集和保存的正确性。
总之，五分类血细胞分析仪是一种常用的临床工具，它通过光散射技术和染色等原理，可以对血细胞进行分析和计数。
SYSMEX五分类血液分析仪XT2000i检测原理及临床应用
SYSMEX五分类血液分析仪XT2000i检测原理及临床应用血液分析作为临床诊断中一项重要的检测手段，能够为医生提供大量的重要信息，对疾病的诊断和治疗具有重要价值。
而SYSMEX五分类血液分析仪XT2000i作为一种先进的血液分析仪器，具备高精度、高效率以及丰富的功能特点，成为临床医生的得力助手。
本文将对其检测原理及临床应用进行探讨。
一．检测原理SYSMEX五分类血液分析仪XT2000i是一种光学显微镜系统，其检测原理基于多参数吸光度分析和流式细胞技术。
在检测时，仪器会利用流动细胞仪的原理，将待测血液样本通过分析装置中的微细管道，然后通过激光照射和光散射的方式，对细胞进行光学测量和成像。
具体来说，XT2000i采用了光散射定量法，利用激光器照射到细胞上，细胞散射的光经过集光镜聚焦后，落在光散射光路上的光电检测器上。
根据细胞的大小、形态、内部结构和染色性质，通过测量细胞的光吸光度和光散射，从而得到细胞的数量、形态及分类等信息。
此外，XT2000i还采用了流式细胞术原理，在经过光学检测后，仪器会将细胞通过网络计算机，计算机根据血细胞各种形状和各个血细胞的数量，计算血细胞的历史数值，根据历史数据分析出这种血细胞的血细胞信息。
二．临床应用SYSMEX五分类血液分析仪XT2000i在临床应用上具有广泛的价值和应用前景。
其应用主要体现在以下几个方面：1. 临床血液检测作为一种高精度、高效率的血液分析仪器，XT2000i在临床血液检测中可以提供各种血细胞计数、分类和形态参数等，并且能够对患者的血液指标进行快速、准确的分析。
这对于临床医生来说，可以提供血液疾病的确诊依据，辅助医生制定合理的治疗方案。
2. 慢性病管理XT2000i不仅在急性疾病的诊断中起到了至关重要的作用，同时在慢性病管理中也有着重要的应用价值。
通过定期对慢性病患者进行血液检测，可以及时监测患者的血液指标变化，从而对疾病的控制和预防提供有效的依据。
血细胞分析仪—血细胞分析仪检测原理(临床检验课件)
免疫学及临床检验教研室
①DIFF通道：中性、嗜酸、淋巴、单核细胞的检测通道。 溶血剂使红细胞和血小板迅速溶解，并在白细胞膜上 打出小孔及与嗜酸性颗粒结合，染料通过小孔进入白 细胞与核酸及细胞器结合，通过激光照射，产生不同 强度的荧光，荧光强度与细胞的核酸含量成正比。
②WBC/BASO通道：用酸性试剂将红细胞处理掉，除嗜碱 性粒细胞外其他白细胞均处理为裸核，利用FSC和SSC 信号将嗜碱细胞分离出来，此通道同时可获得WBC总数。
②溶血后对白细胞进行染色，染色后的标本进入鞘流池 进行双鞘流分析，由于淋巴、单核、中性以及嗜酸细胞对 染色剂的着色程度不同，细胞结构的光散射程度不同，产 生特定吸光率。
③嗜碱性粒细胞具有抗酸性，在WBC/BASO通道保持形态 完整，其他白细胞胞质溢出成为裸核，根据电阻抗得到嗜 碱性粒细胞直方图。
免疫学及临床检验教研室
免疫学及临床检验教研室
图3-10 体积（V）、电导（C）和光散射（S）法
图3-11 VCS细胞检测立体散点图
图3-12 VCS异常细胞检测 平面散点图位置
免疫学及临床检验教研室
（2） 双鞘流技术和细胞化学染色原理
①标本在第一鞘流液中经过电阻抗分析，得到细胞体积， 第二鞘流液对进行光吸收率分析，对细胞内容物进行测定。
免疫学及临床检验教研室
电阻抗法是三分群血液分析仪的核心技术，可准 确测出细胞（或类似颗粒）的大小和数量。
电阻抗法还与其他 检测原理组合应用于 五分类血液分析仪中。
图3-1 电阻抗法细胞计数原理
免疫学及临床检验教研室
白细胞计数时除加入一定量稀释液外还要加入 溶血剂，红细胞迅速溶解同时使白细胞膜通透性改 变，白细胞胞质中部分物质经细胞膜渗出，使细胞 膜紧裹在细胞核或存在的颗粒物质周围，所以经溶 血剂处理后含有颗粒的粒细胞比无颗粒的单核细胞 和淋巴细胞要大些。
三分类血液分析仪应用
血液分析仪特点 检测项目多 速度快 精度高 易操作
仪器基本结构
1、机械系统 2、电学系统 3、光学系统
检测原理
（一）电阻抗法 电阻抗原理，又称库尔特原理
1、白细胞计数和分类计数原理
仪器将体积为35～450fL的血细胞，分 为 256 个 通 道 （ channel ） 。 每 个 通 道 ： 1.64fl。根据细胞大小，分别置于不同的通 道中，显示血细胞体积分布直方图 (Histogram)。
经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生了 变化
第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞 （体积最小）。
第二群（90～160fl）单个核细胞区，（中间 细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱 性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。
第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细 胞（体积最大）。
三分群血液分析仪 正常白细胞分类模式图（直方图）
稀释效果
MCH MCV MCHC RBC
THANK !
（二）光散射法 组合应用 电学 光学 细胞化学等
1、白细胞检测 （ 1 ） 容 量 、 电 导 、 光 散 射 （ volume ， conductivity， scatter, VCS）法
原理
细胞体积技术（测量细胞 大小） 电导性技术（测量细胞内 部结构） 光散射技术（测量细胞形 态、细胞核和细胞颗粒）。
正常血小板直方图呈左偏态分布：2～30fl 分布，主要在2～15fl。
异常血小板直方图
三.仪器质量验证
可比性 (comparability)
指血液分析仪测定结果，与常规方法所 测结果相比较。显微镜法是血细胞检验 基础。 P＞0.05有可比性；P＜0.05无可比性。 结论：计数细胞越多、选用吸管、计数 盘越多，计数结果接近真值。 实际工作中，ห้องสมุดไป่ตู้检法很难达到此要求。
第23章血细胞分析仪的检测技术及临床应用
5、90 年代，将激光、射频、化学染色计数应用于对细胞特性的分析， 出现了五分群血液分析仪。
不同年代血细胞分析仪的检测参数
50 年代
60 年代
70 年代
白细胞
WBC
WBC
WBC
红细胞
RBC
RBC、HGB; RBC、HGB、HCT
MCV、MCH、MCHC
血小板
PLT
不同年代血液细胞分析仪的检测参数
再障
→
→
单纯小细胞性贫血
↓
→
8 血小板计数（PLT）：100～300×109/L（G/L） 9 血小板平均体积（MPV）：9.4～12.5fl
MPV 应与 PLT 相结合进行分析。 （1） 鉴别血小板减少的原因：
【1】 骨髓造血功能损伤时，PLT↓，MPV↓； 【2】 血小板在周围血中破坏增多时，PLT↓，MPV↑； 【3】 血小板分布异常时，PLT↓，MPV 正常。
⑵ MPV 作为骨髓造血功能恢复的早期指征：骨髓造血功 能衰竭时，MPV 与 PLT 同时持续下降，造血功能抑制越严 重，MPV 越小；当造血功能恢复时，MPV 增大先于 PLT 的 升高。
⑶ 其它：MPV 增大见于：骨髓纤维化、ITP、血栓性疾病、 脾切除、慢粒、巨大血小板综合症。
⑷ MPV 减小见于：脾亢、化疗后、再障、巨幼贫。
⑴ 检验人员根据图形变化，决定是否进一步镜检； ⑵ 提示操作者在镜检分类时注意异常细胞的存在。
仪器在35～450fl范围内分析，其中35～98fl定为 淋巴细胞，98～135fl定位中间细胞，135fl以上定 位为中性粒细胞，某一细胞的百分数%是其图上面积 与AL+AM+AG的比值。仪器在淋巴细胞、中间细 胞与中性粒细胞间设有一个正常的标准。电阻抗法 血细胞分析仪白细胞分类模示如图（图3）。
血细胞分析仪五分类检测技术及原理
血细胞分析仪五分类检测技术及原理血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着科学技术日新月异的发展，血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类，从二维空间进而转向三维空间，同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术，如鞘流技术、激光技术等。
下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。
1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法直流电阻抗法（DC）用于测量细胞体积大小。
激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况（细胞核以及颗粒情况），侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。
在嗜碱细胞通道中，使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。
幼稚细胞检查通道（IMI）可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象，在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多，对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解，而幼稚细胞不易被破坏，可通过电阻法检测出来。
综合各个测量方法，得到白细胞五分类的图形和数据。
这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。
2 电阻抗和射频电导联合检测法这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:（1）淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解，而使白细胞保持完整，细胞浆及核形态近似于生理状态，当这些细胞通过检测系统时，对白细胞进行电阻抗法（测量细胞体积）和射频电导法（检测细胞核和颗粒密度）的联合检测，结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。
血细胞分析仪的原理和应用
血细胞分析仪的原理和应用1. 概述血细胞分析仪是一种常用的医疗设备，用于快速、准确地分析人体血液中的细胞数量和形态特征。
本文将介绍血细胞分析仪的工作原理以及其在临床应用中的重要性。
2. 工作原理血细胞分析仪通过将血液样本经过特定处理后，使用光学、电子学等技术进行细胞计数和形态分析。
具体的工作原理如下：•细胞计数：血细胞分析仪会先将血液样本进行稀释处理，以保证细胞的分散性。
然后，样本通过流式细胞术的原理，细胞逐个通过一个狭窄的通道，在通道中通过时会和激光产生散射光。
通过检测这些光的强度和特征，可以得到细胞计数的结果。
•形态分析：在细胞计数的基础上，血细胞分析仪还能通过显微镜和图像处理技术对细胞的形态特征进行分析。
血细胞分析仪会采集细胞的图像，并根据形态参数（如大小、形状等）对细胞进行分类和分析。
3. 应用血细胞分析仪在临床应用中发挥着重要的作用，主要体现在以下几个方面：•疾病诊断和监测：血细胞分析仪可以帮助医生快速获得患者血液中各种细胞的数量和形态特征。
这对于诊断和监测各种疾病，如贫血、感染、恶性肿瘤等，具有重要意义。
例如，白细胞计数异常可提示是否存在感染，红细胞计数和血红蛋白浓度异常可帮助诊断贫血等。
•临床研究：血细胞分析仪广泛应用于医学研究领域，研究人员可以通过分析不同人群或实验组细胞的数量和形态特征，了解不同疾病的发生机制、病程进展等。
•药物研发和药效评估：血细胞分析仪在药物研发和药效评估中也起到重要的作用。
研究人员可以通过观察药物对细胞数量和形态的影响，评估药物的疗效和毒副作用，从而指导临床应用。
•血液库管理：血细胞分析仪还可以应用于血液库管理，用于测定捐献者的血细胞计数和分类，保证血液库中血液质量的安全和可靠。
4. 使用注意事项使用血细胞分析仪需要注意以下几个方面：•操作规范：操作人员需要遵循相关的操作规范和使用说明，确保操作的准确和可靠性。
•样本处理：样本的处理对血细胞分析仪的结果影响重大，操作人员需要掌握好样本的采集、预处理和稀释等步骤。
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直方图:表示细胞群体分布情况的图形
纵轴：一定体积大小范围内的细胞频率 横轴：体积（fL） 横坐标为体积，纵坐标是血细胞的相对数量
计算机将白细胞体积从 35—450fl 分为 256 个通道，每个通道 1.64fl，样本中的白细胞依 照大小被分别放在不同的通道中，由此，就产 生了按照大小、数量绘制的直方图，将各个通 道的峰值点用曲线相连产生白细胞直方图。
析仪，可以把PLT和RBC的分界点人为地 设置在5-30f1的范围内，在实测样本时， 仪器根据PLT和RBC的分布曲线，自动在
所设定的范围内寻找最低点，以得到正
确的PLT. RBC及相关参数的结果，这就
是浮动界标.
2.WBC :
当直方图出来后，
由软件程序自动判别并寻找直方图上三
个区域的起止点（即第一个高峰起止和
血细胞分析仪检测是临床诊断工 作中最常用的实验方法之一
40年代后期美国库尔特先生 (W.H.Coulter)发明了粒子计数技 术(电阻抗法),50年代初期应用于 血细胞计数
血细胞分析仪检测原理
一.电阻抗法(库尔特原理)
1.血细胞具有非传导性质(不良导体) 2.E=I x R→脉冲信号 3.脉冲信号大小与细胞体积成正比 4.脉冲信号的多少代表细胞数量
电导法可辨别体积相同而性质不同的两 个细胞群（如；小淋巴和嗜碱）
3。射频技术； 在测量小孔的内外电极装有直流和高
频两个发射器，因此在小孔周围产生直 流和射频两种电流，直流电仅能测量细 胞大小，而射频可透入细胞内，测量核 的大小及颗粒的多少。
利用阻抗+射频技术可将淋巴、单核、 粒细胞区分。
4.过氧化物酶染色技术
淋巴细胞：35-90fl; 中间细胞：90-160fl; 粒细胞>160fl
依照三群细胞在白细胞体积分布的直方 图上所分布区域的面积，计算得出每群 细胞的百分比，并依照白细胞计数总数， 求得每群细胞的绝对值。
注意:各厂家的溶血剂配方不完全相同,对 白细胞膜的作用程度不同,而各厂家对仪 器的各类WBC区分设置也不尽相同.
细胞的三分群：
各种细胞在溶血剂中，经溶血剂中表面 活性剂对细胞膜表面的脂蛋白作用后而 分群，由于RBC膜表面的脂蛋白含量最少 而易被破坏溶解,白细胞的细胞浆漏出， 仅留下核与颗粒并使细胞缩小，原来最 大的单核细胞经溶血剂作用后，体积就 落在了小的淋巴和大的中性粒细胞之间， 这样就按照溶血剂作用后体积大小，将 白细胞分成三群。
浮动界标技术
1.RBC/PLT :
为便于识别，
在RBC/PLT通道一般把体积大于30f1的细
胞计为红细胞(RBC)，而把体积小于30f1 的细胞计为血小板(PLT)。一般的血细胞 分析仪，PLT和RBC的分界点是固定的(例 如30f1处)，这种情况属于固定界标。但
也有例外的情况，有些公司的血细胞分
RBC及相关参数的检测
RBC检测→电阻抗原理
脉冲信号高度的叠加→HCT
单个脉冲信号高度的均值→MCV
RBC:36—360fL区间分析
RDW:仪器将不同大小的脉冲信号分别贮 存在不同通道,计算出相应的体积和数目, 再统计处理得到RDW,用RBC体积的CV或 SD表示.
RBC计数中WBC含量可忽略不计,但在白 血病或WBC异常增高时则对RBC及其相 关参数有明显影响.
光散射特别具有对细胞颗粒的构型和 颗粒质量的区别能力，从而将三种粒细 胞区分。
利用高低角度光散射可同时对PLT和 RBC进行计数.高角(5-15°)测量RBC数, 检测PLT内容物.低角(1-3°)检测 RBC\PLT体积.
2。电导法
根据细胞壁能产生高频电流的性质采用 高频电磁探针，测量细胞内部结构、核 浆比、细胞内颗粒大小和密度。
过氧化氢酶含量:嗜酸粒细胞＞中性粒细 胞＞单核细胞. 淋巴和嗜碱粒细胞无
由于酶反应阳性程度不同,通过激光束时 的吸光度也就不同,加上光散射及特殊溶 血剂的作用可进行五分类.
5.核酸荧光染色技术
利用聚次甲基荧光染色液对有核细胞的核酸 (DNA/RNA)进行荧光染色。采用半导体激光流 式细胞检测，获得WBC/DIFF散点图并得到新 的检测参数IG和OTHER。通过对散点图的分析， 可获得LYMPH、MONO、EOS、NEUT+BASO 及NRBC和Ret的测定结果。最早的全自动网织 红分析仪R-1000TM，用荧光染料碱性槐黄； 最新采用的是聚次甲基染料，用来进行WBC四 分类、网织红细胞测定、有核红细胞测定，该 染料被红色半导体激光（波长为633nm）激发 后发出660nm或更高波长的红色荧光。
PLT检测:电阻抗原理 PLT和RBC一起同时被检测 PLT体积分布:2—28fL,不同仪器的PLT直
方图 范围不一. MPV:是PLT体积分布直方图的产物 MPV与PLT成非线性负相关 PCT参考范围是一不恒定参数 PDW:是PLT体积分布直方图的产物 PLCR:＞12散射光、 侧向散射光、侧向荧光)进行白细胞分类的测 定。
前向散射光：细胞大小信息。所采集的前向散 射光信号用于对WBC/BASO的测定。 侧向散射光：反映细胞核及颗粒的信息(主要 是颗粒的复杂性) 。所采集的侧向散射光信号 用于WBC/BASO和WBC/DIFF的测定。 侧向荧光：通过对核酸(DNA和RNA)进行染色， 荧光信号提示细胞核酸的信息。所采集的侧向 荧光信号用于WBC/DIFF 的测定。
测定原理：亚铁血红素中的Fe2+离子被 十二烷基磺酸钠氧化，形成SLS-HGB衍 生物，在550nm波长进行比色测定。
SLS-Hb法测定与ICSH的参考方法相比， 具有非常高的相关性(r=0.999)。
二.血细胞检测技术的发展（五分类）
1。光散射法(Scatter):
来自激光光源的单色光束在10°-70°对细胞进行扫描,提供细胞结构、形 态的光散射信息。
第二个高峰地点）作为界标线，并以此
为依据进行判读，由于设计理念的不同，
稀释液和溶血剂对细胞的作用不同于固
定界标，因此，浮动界标的wbc直方图很
少有能超过350fl的横坐标。直方图每次
的结果是不一样的，因此界标线的位置
也是不一样，这就形成界标线的移动，
就是浮动界标
Hb检测:与WBC一起被检测
SLS-HGB检测血红蛋白：