HPLC法测定参苓白术颗粒中人参皂苷的含量
[收稿日期] 2005203216
[通讯作者] 周芳,T el :(0311)83090610
HP LC 法测定参苓白术颗粒中人参皂苷的含量
周 芳
3
(石家庄市糖尿病研究院,河北石家庄 050011)
[摘要] 目的:建立HP LC 法测定参苓白术颗粒中人参皂苷的含量。方法:采用色谱柱:J ′sphere ODS 2H80,流动相:乙腈20105%磷酸溶液(1915∶8015),以人参皂苷为对照品,检测波长203nm 。结果:人参皂苷Rg 1在1104～512μg 、人参皂苷Re 在0148～214μg 范围内线性良好。人参皂苷Rg 1平均回收率98129%,RSD 为2163%;人参皂苷Re 平均回收率98117%,RSD 为
1182%。结论:该方法准确、灵敏,可用于参苓白术颗粒的质量控制。
[关键词] 人参皂苷;参苓白术颗粒;HP LC ;含量测定
[中图分类号] R28411 [文献标识码] B [文章编号] 100529903(2006)022*******
参苓白术颗粒是由人参、白术(炒)、茯苓等中药
组成,具有补脾胃,益肺气的功效,用于脾胃虚弱,食少便溏,气短咳嗽,肢倦乏力。人参为本方中君药,人参皂苷Rg 1、Re 为其所含主要活性成分之一,故选择测定人参皂苷Rg 1和Re 的总量作为参苓白术颗粒的质量控制指标。参照2000年版药典一部第6
页人参[含量测定]项下的方法[1]
,进行了方法学的研究,从而制定了正文中高效液相色谱法的含量测定。1 仪器与试剂111 仪器 美国HP1100高效液相色谱仪,G 1311A 四元泵,G 1313A 自动进样器,G 1316A 柱温箱,G 1315A 二极管矩阵检测器,HPCHE M 色谱工作站。
色谱柱:J ′sphere ODS 2H80(416mm ×150mm ),
4μm 。112 试剂 甲醇:色谱纯(天津四友);乙醇:分析纯(北京化工厂);对照品:人参皂苷Rg 1(G insenoside Rg 170329408),Re (G insenoside Re 075429809)均由中
国药品生物制品检定所提供,纯度为98%以上。
样品来源:参苓白术颗粒自制,批号030912、030915、030917。2 实验方法与结果211 色谱分析条件选择
21111 流动相 参考文献[1]
曾选用色谱条件为乙
腈20105%磷酸溶液(99∶400)、(20∶80),最后选定乙
腈20105%磷酸溶液(1915∶8015)为流动相,分离效果好,与其它成分无干扰。波长:203nm ,流速:110m L/min ,柱温:30℃,理论板数按人参皂苷Rg 1峰计算应不低于3000。21112 检测波长的选择 取人参皂苷Rg 1、Re 对照品溶液,在200～375nm 范围内扫描,结果在203nm 处有最大吸收,故选择203nm 为检测波长。21113 样品溶液的净化 本制剂为复方制剂,样品经甲醇提取,正丁醇萃取后直接进行高效液相层析,干扰成分较多,因此采用大孔树脂柱进行净化。净化时先用水洗脱,每30m L 收集一份;再用70%乙醇洗脱,每50m L 收集一份,用高效液相色谱仪检查,结果用水100m L 可将大部分干扰杂质除去,用70%乙醇100m L 可将人参皂苷Rg 1、Re 洗脱完全。212 对照品溶液的制备 精密称取110℃干燥至恒
重的人参皂苷Rg 1、Re 对照品适量,加甲醇制成每1m L 含人参皂苷Rg 1015mg 、人参皂苷Re 012mg 的混
合溶液,即得。
213 供试品溶液的制备 取本品14g ,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇100m L ,密塞,称定重量,加热回流提取3小时,放置至室温,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液50m L ,蒸干,残渣加10%氢氧化钠溶液5m L 使溶解,加水25m L ,并转移至分液漏斗中,用水饱和正丁醇提取4次,每次30m L ,合并正丁醇,以水反洗2次,每次50m L ,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加水2m L 使溶解,通过D101型大孔吸附树脂柱(内径115cm ,长10cm )上。先以水100m L 洗脱,弃去水液,
?
61?
再以70%乙醇100m L洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣
以甲醇溶解并转移至5m L量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0145μm)滤过,即得。
214 空白试验 空白溶液的制备:按处方中药味比例,自配不含人参的群药,按其工艺制成空白制剂,再按供试品溶液制备方法制备并测定,结果空白溶液在与人参皂苷Rg
1、Re对照品相同保留时间处未见明显色谱峰,故认为无干扰。
215 线性关系考察 取干燥至恒重的人参皂苷Rg1、Re对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1m L
含人参皂苷Rg
1
0152mg、人参皂苷Re0124的混合溶液。分别精密吸取2、4、6、8、10μL注入液相色谱仪,测定峰面积,以对照品进样量为横坐标,峰面积为纵
坐标,绘制标准曲线,结果表明,人参皂苷Rg
1
在1104～512μg、人参皂苷Re在0148～214μg范围内线
性良好。其回归方程为人参皂苷Rg
1
Y=-01649+ 3461856X,r=019996;人参皂苷Re Y=-101542+ 3411266X,r=019997。
216 精密度试验 取同一批样品(批号030912)按正文方法制成供试品溶液,精密吸取同一供试品溶
液,在所确定的HP LC条件下,进样10μL,重复进样5次,求得人参皂苷Rg
1、Re峰面积相对标准偏差< 3%,分别为1195%、2165%。
217 稳定性试验 取同一批样品(批号030912)按正文方法制成供试品溶液,精密吸取同一供试品溶液10μL,分别于配制后0、1、2、4、6、24h,依法测定,结
果人参皂苷Rg
1、人参皂苷Re的RS D分别为1180%、2183%,表明供试品溶液在24h内基本稳定。218 重复性试验 按上述方法,对同一批样品(批号030912)5份,在所确定的HP LC条件下进行测定,
结果人参皂苷Rg
1、Re的相对标准偏差为1177%,说明方法重复性良好。
219 回收率试验 采用加样回收法,精密称取已
知含量同一批号的样品(批号030912,人参皂苷Rg
1含量0120mg/g、人参皂苷Re含量0107mg/g),分别
精密加入人参皂苷Rg
1
对照品、人参皂苷Re对照品,按正文供试品溶液的制备方法制备并按上述色谱条件,测定,计算回收率,结果见表1。
表1 人参皂苷R g1、R e回收率试验
人参皂苷样品取样量
(g)
样品中人参皂苷的
含量(mg)
加入人参皂苷的
量(mg)
测出人参皂苷的
量(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RS D
(%)
Re715326015275018011288995121
715215015265016511175699186
817215016105019511551899108981171182
816825016077019511545298168
816325016042018511437398101
Rg1715326115065118031222295131
715215115043116031079798146
817215117443212031930799138981292163
8168251173652120319789101192
816325117265212031847296139
3 样品测定结果
分别精密称取不同批号的参苓白术颗粒,按供试品溶液制备法制备。分别精密吸取对照品溶液5μL,供试品溶液10μL,注入液相色谱仪,测定,结果三批样品中人参皂苷Rg
1、Re总量平均值分别为269185、27311
2、283145μgΠg。
4 讨论
参考文献[1]曾选用色谱条件为乙腈20105%磷酸溶液(99∶400)、(20∶80),最后选定乙腈20105%磷酸溶液(1915∶8015)为流动相,分离效果好,而与其它成分无干扰。
本制剂为复方制剂,样品经甲醇提取,正丁醇萃取后直接进行高效液相层析,干扰成分较多,因此采用大孔树脂柱进行净化。
上述分析方法精确度高,重现性好,简便,准确,可作为该制剂的含量测定方法。
[参考文献]
[1] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典[S].一部,北
京:化学工业出版社,2000.627.
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7
1
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比色法测定总皂苷含量
比色法测定总皂苷含量 1、仪器 紫外分光光度计、电热恒温水浴锅、电子分析天平、旋转蒸发器、大孔树脂柱(内径0．8 cm，长20 cm)。 试剂 无水甲醇、无水乙醇、正丁醇、冰醋酸、高氯酸和香草醛等均为分析纯；大孔树脂 DM-301、对照品、洋金花药品。 2、方法 2.1 对照品溶液的制备 取对照品 10 mg,加甲醇溶解定容至 10 ml，制成 1 mg／ml对照品溶液。 2.2供试品溶液的制备 取药材粉末(过4号筛)约0．2 g，准确称定，置于150 ml具塞锥形瓶中。精密加入50 ml 甲醇后，准确称重。浸泡60 min，超声提取30 min，再次称重，补加甲醇至超声前重量。过滤，精密移取续滤液25 ml于蒸发皿中，水浴蒸发至干，用5 ml水溶解残留物，所得溶液缓缓通过已处理好的大孔吸附树脂柱(径高比1：5)，以水50 ml洗脱，弃去水液，之后再以50 ml 95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干。用20 ml水分次将残留物溶解转移至60 ml分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取(4×20 ml)，合并正丁醇层，减压蒸干。残留物用70％甲醇溶解转移至10 ml量瓶中，定容，摇匀，即得。 2．3测定波长的选择 精密移取1．5 ml的对照品及l ml供试品溶液，于70℃水浴蒸发至干，加入5％香草醛一冰醋酸(临用新配)0．2ml，高氯酸0．8 ml，于60℃水浴显色15 min后流水冷却 lO min。加冰醋酸5 ml，摇匀。立即在紫外分光光度计于400～800 nm波长下扫描，同时空白溶液作参比。对照品及供试品的最大吸收波长均在475 nm，故选取475 nm为检测波长。 2．4线性关系考察 精密量取对照品溶液0．60，1．50，2．40，3．30，4．20 ml，置具塞试管中，于70℃水浴蒸发至干，加入5％香草醛-冰醋酸(临用新配)O．2 ml，高氯酸0．8 ml，于60℃水浴显色15min后流水冷却10 min。各加冰醋酸5 ml，摇匀，以同法平行处理的空白溶剂为空白，在475 nm处测定吸光度。以对照品质量c(mg)为横坐标，吸光度A为纵坐标，使用软件OriginPro 7．0进行回归分析，得到回归方程为：A=0．007 4+1．120 83c, r=0．999 97。在0．096—0．672 mg内线性关系良好。 2．5精密度试验 精密吸取对照品溶液1．5 ml，依“2．4”项下方法显色测定吸收度，连续测定5次，结果RSD为0．254％，说明仪器的测试性能良好。 2．6稳定性试验 取对照品和样品溶液，依“2．4”项下方法操作，按不同时间测定吸光度，结果见表1。2．7样品含量测定 取供试品溶液6份，每份精密吸取80 μ L，按“2．3”项的方法显色后，在540nm测定吸光度，计算样品含量。 2．8加样回收率试验 取供试品溶液8份，每份精密吸取80μL，加入0．2mg／mL齐墩果酸溶液50 u I。，按“2．3”项的方法显色后，在540hm测定吸光度，计算加样回收率。
保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究
保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究 发表时间：2014-08-26T15:20:35.077Z 来源：《医药前沿》2014年第20期供稿作者：张高飞于玥邬晓鸥李军 [导读] 本文建立的方法简单、便捷，准确性、重复性好，可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 张高飞于玥邬晓鸥李军 (深圳市药品检验所 518057) 【摘要】目的建立保健食品中人参总皂苷含量的测定方法。方法用水提取人参总皂苷类成分，经水饱和正丁醇萃取、氨试液洗涤除杂后，试样中的人参皂苷类成分在高氯酸的作用下与香草醛反应，产生特征的紫红色，在560nm下测定吸光度。结果人参总皂苷在0.0722～0.2165mg质量范围内与吸光度线呈良好的线性关系，平均回收率为95.9%。结论本文建立的方法简单、便捷，准确性、重复性好，可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 【关键词】保健食品人参总皂苷分光光度法 【中图分类号】R93 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）20-0217-02 皂苷类成分是参类中的主要活性物质, 具有滋补强壮，增强免疫，抗疲劳的功效[1]，常用的检测方法为紫外分光光度法[2-5]。目前市售含参类的保健食品有片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液等，均是以总皂苷含量来评价其产品的质量和功效。其测定方法大多都是按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的方法检测[6]，在实际应用中，主要存在以下问题：1、固定的树脂柱载样量与不确定的样品总皂苷含量之间的矛盾，部分样品存在柱容量超载的情况，测定结果偏差严重。2、部分样品经过大孔树脂柱除杂后，仍存在干扰比色测定的杂质。3、操作步骤欠规范，导致测定结果重现性差。本文针对总皂苷的提取方式、以及测定过程中的参数进行研究，建立了保健食品中人参总皂苷的测定方法。 1 仪器、材料与试药 岛津UV2450紫外分光光度计；瑞士梅特勒XS105DU电子天平；上海一恒电热恒温水浴锅；人参皂苷Re(中检所，批号110754-200822，含量88.8%)；儿童装高丽红参液，舒灵胶囊，舒慰快牌胃肠液均购自市场；水为蒸馏水，其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1供试品溶液的制备 固体试样：称取1 g样品，置100 mL容量瓶中，加水80 mL，超声提取30 min，放冷至室温，用水定容至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25 mL，进行萃取。 液体试样：吸取试样10 mL至分液漏斗中(含乙醇的保健食品，水浴挥尽乙醇)，加水至约25 mL，进行萃取。 在已处理好的试样中加入20 mL水饱和正丁醇，振摇萃取3次，取正丁醇层(必要时可离心)，合并提取液，用20 mL氨试液洗涤3次，置蒸发皿中100℃水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至25 mL量瓶中，甲醇定容，即得。 2.2 标准曲线的绘制 分别精密吸取人参皂苷Re标准溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL于10 mL具塞比色管中，水浴挥干溶剂，加入0.2 mL 5%香草醛冰乙酸溶液，再加入0.8 mL高氯酸，使残渣溶解，于60℃水浴加热10 min，冰浴冷却后，精密加入冰乙酸5 mL，摇匀，于560 nm波长处测定吸光度。取供试品溶液1 mL于10 mL具塞比色管中，自“水浴挥干溶剂”起操作。 3 方法学考察 3.1线性关系 取人参皂苷Re对照品0.01804 g，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，作为标准溶液，精密量取标准溶液0.4、0.6、0.8、 1.0、1.2 mL分别置10 mL比色管中，水浴蒸干，显色，以对照品的质量(mg)为横坐标，吸光度为纵坐标，得回归方程：y=4.4807x－ 0.0886，r=0.9997。结果表明，人参皂苷Re对照品质量在0.0722～0.2165 mg之间与吸光度呈良好的线性关系。 3.2 萃取次数 取舒灵胶囊、儿童装高丽红参液，按2.1制备样品水提取液，用水饱和正丁醇分别萃取3、4、5次，结果表明，萃取3次可将人参总皂苷提取完全(表1)。 表1 萃取次数比较结果 3.3热稳定性考察 由于正丁醇沸点较高，为此对人参皂苷的热稳定性进行考察，以便选取合适的水浴温度。取人参皂苷Re标准溶液0.6 mL，分别按60℃、100℃水浴蒸干、100℃水浴蒸干后继续放置30 min处理，测定结果分别为0.663、0.658、0.653，表明人参皂苷的热稳定性良好，因此水浴温度选为100℃。 3.4显色稳定性 取人参皂苷Re标准溶液0.3 mL，显色后每隔10 min测定其吸光度，结果表明，显色后的紫红色溶液不稳定，吸光度呈下降趋势，因此显色完成后需在10 min内完成测定。 3.5重复性试验 取舒灵胶囊按2.1下方法制备6份供试品溶液，分别测定，结果表明本方法重复性良好(表2)。
总皂苷检测方法-总皂苷含量测定法-实验流程图-李熙灿-XicanLi
总皂苷检测方法-总皂苷含量测定法（香草醛法）：实验流程图2017.10 【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Folium Sennae Protects against Hydroxyl Radical-induced DNA Damage via Antioxidant Mechanism: An in vitro Study. Botanical studies. 2014; 55:16. 【简介】皂苷广泛存在于中药及其他植物中，而且化学结构大同小异的皂苷往往同时存在。为了测定这些皂苷的总含量，便建立了总皂苷的检测方法。总皂苷的检测多使用分光光度法，并以某种标准品绘制工作曲线，依该曲线所建立的回归方程，计算其含量。 【溶液配制】 1.香草醛-冰醋酸溶液（测试液）配制：精密称取25mg香草醛，加冰醋酸定容至5mL。即制成5mg/mL 香草醛-冰醋酸测试液。 2.样品液配制：将待检测的样品用甲醇溶解，配成约5mg/mL的样品液。具体浓度视样品的溶解度而定， 但是必须有精确的数据。 3.齐墩果酸标准品溶液配制：精密称取齐墩果酸1mg，加甲醇定容至5mL，配成0.2mg/mL齐墩果酸标 准品溶液。（也可以使用其他的皂苷物质，如人参皂苷Rg3。但必须是纯的化合物） 4. 高氯酸：分析纯试剂。 5. 冰醋酸：即纯的无水乙酸（分析纯） 【检测方法与实验流程图】 【标准曲线绘制】（齐墩果酸） 取上述齐墩果酸溶液x μL （x=0，40，80，120，160，200），依“实验流程图”，在70℃水浴15mim 后呈桃红色。以第一份溶液（x=0）作为空白对照，测A540nm值。以“产物混合物”时的齐墩果酸的质量，为横坐标，A540nm值为纵坐标，绘制标准曲线。以此标准曲线计算，得线性回归方程。 【样品液的测定】 将上述“实验流程图”中的“齐墩果酸标准品溶液”换成样品液，进行实验，并测定其A540nm值。将此A540nm代入线性回归方程，即可计算出其总皂苷的含量（以齐墩果酸计）。 【说明】 1.此法是以齐墩果酸为标准品测得总皂苷的含量。所以，其结果应表示为，如：“某某提取物中含 有0.12mg/g的总皂苷（以齐墩果酸计）”。这并不意味着该提取物中真的就含有齐墩果酸。 2.“实验流程图”中，在“彻底挥干溶剂”一步中，如果溶剂挥干不彻底，哪怕是有一点点，都 会干扰。水也要彻底挥干。 1
三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进
作者简介:冯亮(1980-),男,正攻读药剂学专业的博士学位。3通讯作者(C orrespondent author ),jxh1013@https://www.360docs.net/doc/1d9124730.html, 三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进 冯 亮,蒋学华3,叶利民 (四川大学华西药学院,四川成都610041) 摘要:目的 用薄层扫描法(T LSC )和高效液相色谱法(HP LC )测定三七总皂苷中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参皂苷Rg 1(Rg 1)和三 七皂苷R 1(R 1)3种主要成分的含量,并对两种方法进行比较,为修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法 T LSC 法用正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层溶液为展开剂,27%硫酸无水乙醇溶液为显色剂,测定波长λs =535nm ,λR =460nm ;HP LC 法用C 18色谱柱,以乙腈-水线性梯度洗脱,0min (25∶75)～15min (45∶55);流速1.5ml ?min -1;测定波长200nm 。结 果 T LSC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1、R 1的含量分别为31.07%、23.30%、9.35%;HP LC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、 Rg 1、R 1含量分别为30.46%、22.65%、5.83%。结论 HP LC 法能将多种皂苷很好地分离并检测,简便快速,减少了误差。其准 确度和测定结果的稳定性均优于T LSC 法。 关键词:薄层扫描法;高效液相色谱法;三七总皂苷;人参皂苷Rb 1;人参皂苷Rg 1;三七皂苷R 1中图分类号:R927 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2006)02-0187-03 Improvement of determination method of the main components in Panax notoginseng saponions FE NGLiang ,J I ANG Xue -hua 3,YE Li -ming (West China School o f Pharmacy ,Sichuan Univer sity ,Chengdu 610041,China ) Abstract :OBJECTIVE T LSC and HP LC were adopted to determine the contents of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions.And results of the tw o methods were compared ,which could provide the basis of revising the determination method in quality standard.METH ODS T LSC has been established with the upper layer of the mixture of butanol -ethyl acetate -H 2O (4∶1∶5)as developing s olvent ,and 27%sulphuric acid ethanol s olution as coloring reagent ,λs =535nm ,λR =460nm.HP LC was adopted with C 18column ,acetonitrile -H 2O (25∶75at 0min and 45∶55at 15min ,linear gradient elution )was used as m obile phase and detective wave 2length was set at 200nm.The flow rate was 1.5ml ?min -1.RESU LTS The content of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions determined by T LSC was 31.07%,23.30%and 9.35%;and that determined by HP LC was 30.46%,22.65%and 5.83%,respectively.CONC L USION HP LC could separate and determine various components in Panax notoginseng saponions and determine them.Its accuracy and stability are better than T LSC. K ey w ords :T LSC ;HP LC ;Panax notoginseng saponions ;G insenoside Rb 1;G insenoside Rg 1;Sanchinoside R 1C LC number :R927 Document code :A Article I D :1006-0103(2006)02-0187-03 三七是五加科人参属植物Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen 的干燥根;含有皂苷、多糖、氨基酸等多种化学成分。其中三七总皂苷(Panax noto 2 ginseng saponions )为其主要的有效成分,具有活血化 淤的功效。三七总皂苷含有人参皂苷Rb 1、Rb 2、Rc 、Rd 、Re 、R f 、Rg 1、Rg 2、Rh 1和三七皂苷R 1、R 2、R 3、R 4、R 6等20余种皂苷成分,均属达玛烷型(Dammarane type )四环三萜皂苷。其中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参 皂苷Rg 1(Rg 1)是三七总皂苷中含量最高的两个成分,而三七皂苷R 1(R 1)则是三七总皂苷的特征化合物[1]。对于三七总皂苷原料及其口服制剂,文献[2]规定采用比色法测定总皂苷含量。而比色法在操作过程中存在操作烦琐、影响因素多及重复性差等问题[3],尤其是不能分别测定三七总皂苷中各主要成 分的含量。为此,特建立了薄层扫描法(T LSC )测定 三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1和R 1的含量[4];同时建立了HP LC 含量测定法,并与T LSC 法进行比较,为重新修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。 1 实验部分 1.1 仪器与试药 LC -9A 高效液相色谱仪,SPD -6AV 紫外检测 器(日本岛津);CS -930薄层扫描仪;Dikma Diam on 2sil C 18色谱柱(200mm ×4.6mm ,5μ m ,美国Dikma 公司);硅胶G 板(大连化物所)。Rb 1、Rg 1和R 1对照 品(中国药品生物制品检定所);三七总皂苷(云南特 安钠制备厂);乙腈(色谱纯,美国Dikma 公司);水(超纯水);其余试剂均为分析纯。1.2 T LSC 法1.2.1 含量测定 取三七总皂苷样品约50mg ,精 华西药学杂志 W C J ?P S 2006,21(2):187～189
总皂苷的测定方法
总皂苷的测定方法（分光光度法） 本方法适用于功能性食品中总皂苷的测定。 本方法人参皂苷Re的最低检出量为2μg/mL。 一、方法提要 样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后，在酸性条件下，香草醛与人参皂苷生成有色化合物，以人参皂苷Re为对照品，于560nm处比色测定。 二、仪器 1.722分光光度计。 2.PT—大孔吸附树脂柱（河北省津杨滤材厂）。 3.超声波振荡器。 三、试剂 1.甲醇（分析纯）。 2.乙醇（分析纯）。 3.人参皂苷Re标准品（中国药品生物制品检定所）。 4.5％香草醛溶液：称取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至l00mL。 5.高氯酸（分析纯）。 6.冰乙酸（分析纯）。 7.人参皂苷Re标准溶液：精确称取人参皂苷Re标准品20.0mg，用甲醇溶解并定容至10mL，即每1mL含人参皂苷Re2.0mg。 8.重蒸水。 四、测定步骤 1.样品处理： （1）固体样品 称取1.0g左右样品于100mL烧杯中，加入20～40mL 85%乙醇，超声波振荡30min，再定容至50mL，摇匀，放置，吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣，进行柱分离。 （2）液体样品 含乙醇的酒类样品：准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中，蒸干，用水溶解残渣，用此液进行柱层析；非乙醇类液体样品：准确吸取1.0mL样品（如浓度高或颜色深，需稀释一定体积后再取1.0mL）直接进行柱分离。 2.柱层析
以PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离，准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱，用15mL水洗柱，以洗去糖分等水溶性杂质，弃去洗脱液，再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，于水浴上蒸干，以此作显色用。 3显色 在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL 5％香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣溶解，再加0.8mL高氯酸，混匀后移入l0mL比色管中，塞紧盖子于60℃以下水浴上加温15min取出，冷却后准确加入冰乙酸5.0mL，摇匀后以1.0cm 比色皿、于560nm处与人参皂苷Re标准管同时比色。 4标准曲线的绘制： 吸取人参皂苷Re标准溶液（2.0mg/mL）0、20、40、60、80、100μL（相当于人参皂苷Re0、40、80、120、160、200μg），于10mL比色管中，用氮气吹干，同4.（3）显色步骤测定吸光度。并绘制标准曲线。 人参总皂苷浓度为20～200μg/mL之间与吸光度值呈线性关系，相关系数（r）0.999。 五、结果计算 式中X——样品中总皂苷（以人参皂苷Re计）（g/kg或g/L）； m——试样质量或试液体积（g或mL）； V1——样品提取液总体积（mL）； V2——样品提取液测定用体积（mL）； m1——从标准曲线查得待测液中人参皂苷Re量（μg）。
参黄口服液中人参皂苷Rg1的含量测定(精)
参黄口服液中人参皂苷Rg1的含量测定 【摘要】目的用高效液相色谱（HPLC）法测定参黄口服液中人参皂苷Rg1的含量。方法色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶,流动相为乙腈0.05%磷酸。结果人参皂苷Rg1在0.251～ 2.15 μg之间呈良好的线性关系；制剂中人参皂苷Rg1的平均回收率为98.73 % (RSD=2.7 % ) 。结论该方法简便、准确、分离效果好 ,无干扰 ,可用于参黄口服液的质量评价。 【关键词】参黄口服液; 人参皂苷Rg1；高效液相色谱 Abstract：ObjectiveTo establish the quantitative method of ginsenoside Rg1 in Shenhuang Oral Liquid by HPLC. Methods The column was packed with 5 μm Diamonsil C18 stationary phase. The mobile phase consisted of acetonitrile-water.ResultsThe linear range was 0.251～ 2.15 μg.The average recovery was 98.73%(RSD was 2.7%).ConclusionThe method was convenient and accurate. It can te used as a method of quality evaluation for Shenhuang Oral Liquid. Key words：Shenhuang Oral; Ginsenoside Rg1； HPLC 参黄口服液是以人参、黄芪、柴胡等8味药材制成的中药复方制剂，系中药6类新药，具有健脾益气、解郁提神的功效。方中人参为主药，本实验以高效液相色谱法对参黄口服液中人参皂苷Rg1进行含量测定研究。 1 仪器与试剂 仪器：高效液相色谱仪：日本岛津公司（LC-2010A）,乙腈为色谱纯，Dikma 公司。对照品人参皂苷Rg1（批号0703－200118），为中国药品生物制品检定所提供。 2 方法与结果 2.1 色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；Dikma（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流动相为乙腈0.05%磷酸（20∶80）；检测波长203 nm。 2.2 对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品适量，加甲醇制成每毫升含人参皂苷Rg1 0.2 mg的溶液，即得。 2.3 供试品溶液制备精密量取本品10 ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取3次，10 ml/次，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，10 ml/次，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，10 ml/次，取正丁醇液蒸干，残渣加1%氢氧化钠溶液2 ml使溶解，置已处理好的D101大孔吸附树脂柱（直径1 cm，长10 cm）上，用1%氢氧化钠溶液50 ml洗脱，再用水50 ml洗脱，继用40%甲醇50 ml洗脱，最后用80%甲醇80 ml洗脱，收集80%甲醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，得到参黄口服液的色谱分离图。见图1。 2.4 精密度实验取人参皂苷Rg1对照品溶液，按样品测定法测定，共进样5次，结果RSD＝0.7%。结果表明，本法的精密度良好。
皂苷测定方法
1 三萜皂苷 三萜皂苷主要分布在植物界的石竹科、桔梗科、五加科、豆科中。桔梗、南沙参、党参、人参、三七、瞿麦、甘草、远志、紫菀、地榆等许多中草药都含有此类皂苷。不同的中草药其三萜皂苷的皂苷元或活性成分不同，比如人参皂苷的皂苷元为人参皂苷Rg1、Re 和Rb[9]；女贞子中三萜皂苷的皂苷元为齐墩果酸[10]。三萜皂苷的定量测定方法主要有比色法、薄层色谱法、高效液相色谱－紫外检测器法、高效液相色谱－二极管阵列检测器法。 1.1 比色法 比色法的原理是：三萜皂苷分子中缺少发色团和助色基，需要某种试剂与其反应形成发色基团后显色，在某个波长下测定其吸光度，再根据吸光度与浓度的关系（标准曲线），计算出样品的浓度，从而计算出样品中总皂苷的含量。常见的显色剂有香草醛－冰醋酸溶液和高氯酸体系或浓硫酸。比如徐睿庸等人利用分光光度法测定青钱柳叶中总三萜皂苷的含量，所采用的显色剂就是0.3mL的50g/L 香草醛一冰醋酸与0.6mL 的高氯酸。在显色剂与样品中的三萜皂苷反应后，80℃水浴10min，在波长550nm 处测定青钱柳叶中总三萜皂苷的吸光度，从而计算出含量。其化学反应原理是：强酸使羟基脱水而使其双键数目增加，又经双键位移后与显色剂缩合等反应形成共轭结构，最后在酸作用下形成碳正离子盐而显色[11]。而杨文志等人则认为显色机理是因为皂苷元中C3 和C12上的羟基与香草醛上的醛基发生反应，形成缩醛，成为新的共轭体系而显色[12]。孔燕君则采用浓硫酸作为显色剂，分别测定了人参、三七和男壮胶囊中三萜皂苷的含量。他认为人参皂苷分子上的糖基能被浓硫酸氧化脱水成糠醛衍生物，在60℃水浴2h 后在322nm 处有紫外吸收，测其吸光度，进而计算出人参、三七和男壮胶囊中的三萜皂苷含量[13] [14]。 1.2 薄层扫描法 傅强等人依据五加科植物人参三萜皂苷中人参皂苷Rg1 在薄层板上分离效果较好和荧光分光光度法高灵敏度的特点，建立了薄层色谱-荧光分光光度法测定人参中人参皂苷Rg1 薄层色谱法。展开剂为氯仿：醋酸乙酯：甲醇：水＝16∶2∶11∶12 的下层液体，显色剂为10的硫酸乙醇溶液，喷雾显色，95℃水浴中加热5min，在双波长薄层扫描仪下扫描，激发波长Ex=320nm，发射波长Em=400nm。实验表明：薄层色谱显色是定量的关键，用10%硫酸乙醇溶液喷雾显色要均匀，否则定量洗脱后测定荧光强度值有较大差异。在105℃加热5min，效果良好[15]。 1.3 高效液相色谱法 近年来，随着高效液相色谱仪的普及，越来越多的皂苷成分开始使用到了这项技术。由于它能有效处理非挥发性和极性较强的化合物，可以较好分离出主成分峰和杂质峰，能反映样品的真实含量，方法简便、准确、灵敏有利于产品质量的控制，从而使它成为了测定皂苷的一种最有效最常用的方法，但HPLC 仪器昂贵，而且要求有对照品。 1.3.1 高效液相色谱－紫外检测器法 该方法是HPLC 中测定有紫外吸收的皂苷常用方法，广泛应用于三萜皂苷如人参皂苷、女贞子中齐墩果酸含量的测定中。紫外检测器由于对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感，所以还能用于梯度淋洗，但它非通用检测器，它要求被测物质有较强的紫外吸收或本身无紫外吸收但转化后有吸收紫外线的基团。战佩英等人使用岛津高效液相色谱仪－紫外检测器（SPD-10A UV-V IS）工作站对女贞子药材中的齐墩果酸进行了含量测定。色谱条件是：C18 色谱柱(200mm×4.6mm，5μm)；流动相为甲醇-0.05%乙酸胺水溶液(86：14)；流速：0.8mL /min；检测波长：220nm；柱温25℃[10]。 1.3.2 高效液相色谱－二极管阵列检测器法 戚志华等人采用600 高效液相色谱仪－2996 二极管阵列检测器对不同产地、不同生长期的女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量进行了测定。其实验色谱条件如下：色谱柱：Lichrospher
紫外可见分光光度计测人参总皂苷
人参总皂苷 Renshen Zongzaogan TOTAL GINSENOSIDE GINSENG ROOT 本品为五加科植物人参JPanaa: ginseng C. A. Mey. 的干 燥根及根茎经加工制成的总皂苷。 【制法】取人参，切成厚片，加水煎煮二次，第一次2 小 时，第二次1. 5 小时，煎液滤过，合并滤液，通过D 1 0 1型大孔 吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用6 0 %乙醇洗脱，收集60% 乙 醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06?1.08(80°C)的清 膏，干燥，粉碎，即得。 【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末；微臭，昧苦;具 吸湿性。 本品在甲醇或乙醇中易溶，在水中溶解，在乙米或石油米 中几乎不溶。 【鉴别】（1)取本品O.lg，置试管中，加水2ml，用力振 摇，产生持久性泡沫。 (2)取本品O.lg，加甲醇10ml使’溶解，作为供试品溶液; 另取人参对照药材lg，加水100ml煎煮2 小时，滤过，滤液通 过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1cm，柱高为15cm) ,用水 洗至无色，弃去水液，再用6 0 %乙醇20ml洗脱，收集洗脱液， 蒸干，残淹加甲醇10ml使溶解，作为对照药材溶液。再取人 参皂苷R b i对照品、人参皂苷R gl对照品与人参皂苷R e对 照品，加甲醇溶解制成每lml各含2 m g 的混合溶液，作为对 照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验'，吸取上述三种溶 液各2M1，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙 酯-甲醇-水（15 : 40 : 22 : 10) 1 0 1以下放置的下层溶液为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以1 0 %硫酸乙醇溶液，在105°C加 热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365mn)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置， 日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。 【检査】粒度依法检查（通则0982第二法），能通过 1 2 0目筛的粉末不少于95% 。 干燥失重取本品，在105°C干燥至恒重，减失重量不得 过5.0% (通则0831) o 总灰分不得过6 . 0 % (通则2302)。 炽灼残渣不得过6 . 0 % (通则0841)。 重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法（通则 2321)测定，铅不得过3mg/kg;镉不得过0. 2mg/kg;砷不得
人参皂苷Rh_2含量测定方法及药理作用研究现状
apoA 21concentation in bamsters fed a lithogenicdiet [J ].J He patol ,2001,35(5):550. [15] Schmidt AM ,Hori O ,Cao R ,et al ..A novel cellular receptor for advanced glycation and products [J ].Diabetes ,1996,45(Suppl 3):S 77. [16] Clark J M ,Diehl AM.Hepatic steatosis and type 2di 2 abetes mellitus[J ].Ourr Diab Re p ,2002,2(3):210.[17] Swidsinski A ,L udwing W ,Pahlig H ,et al ..Molec 2 ular evidence of bacterial colonization of cholesterol gallstones[J ].Cast roenterolog y ,1995,108(3):860. [18] Spranger J ,Kroke A ,Waki H ,et al ..Adiponectin and protection against type 2diabetes mellitus [J ].L ancet ,2003,361(9353):228. [19] Wang SN ,Yeh YT ,Yu ML ,et al ..Serum adiponec 2 tin levels in cholesterol and pigment cholelithiasis[J ].B r J S urg ,2006,93(8):981. [20] 邹玲梅,陆春红.2型糖尿病患者血清C 肽、血脂水平 与胆结石关系探讨[J ].临床医学,2007,32(6):680. [收稿日期] 2009204216 3[通迅作者] 朴惠顺(1964— ),女(朝鲜族),副研究员,硕士,研究方向为抗肿瘤药物活性成分分离. 人参皂苷Rh 2含量测定方法及药理作用研究现状 李学哲1,朴惠顺23 (1.延边大学附属医院肿瘤内科;2.延边大学药学院:吉林延吉133000) [关键词] 人参皂甙类;抗肿瘤剂(中药);黑色素瘤;食管癌;前列腺肿瘤 [中图分类号] R 28515 [文献标识码] A [文章编号] 100021824(2009)022******* 人参是五加科人参属植物,是传统的名贵药材.近年来,众多学者报道了人参单体的药理作用,特别是抗肿瘤作用,而研究发现人参中的抗肿瘤有效成分主要为人参多糖和人参皂苷.随着对人参研究的深入,日本学者首次从红参(人参经蒸制、烘干后得到的制成品)中发现了人参皂苷Rh 2.这种皂苷是次生苷,是加入过程中由某些二醇组皂苷受热降解后生成的.金凤燮等[1] 报道了酶转化法生产Rh 2等人参稀有皂苷,提取效果较传统方法提高了500～700倍,实现了工业化生产,为Rh 2的实际应用提供了 可行性.本文对人参皂苷Rh 2含量的测定方法及药理作用进行了综述.1 Rh 2含量测定方法 蒋磊等[2]报道,采用H PL C 法测定Rh 2准确含量,其测定条件中流动相为甲醇2乙腈2水为8∶8∶1,流动速度为1mL/min ,紫外检测波长为203nm , 色谱柱为Thermo Hypersil ODS 2(25010mm ×415mm ,510μm ),柱温为室温,回收率高于99174%,RSD 小于1183%,达到了药典规定.在该 色谱条件下,人参皂苷Rh 2的保留时间均为8～10 min ,并确定了人参皂苷Rh 2的R 型和S 型含量的 高效液相色谱条件为Thermo Hypersil ODS 2(25010mm ×415mm ,510μm )色谱柱,流动相为
白英中总皂苷的含量测定
白英中总皂苷的含量测定 作者：甄会贤，齐烨，陈扬，孙立新 【摘要】目的建立白英中总皂苷的含量测定方法。方法选用薯蓣皂苷元为对照品，采用分光光度法，高氯酸显色，在410 nm处测定吸光度，计算白英中总皂苷含量。结果薯蓣皂苷元的质量浓度在8.91～29.70μg/ml范围内与吸光度值呈良好线性关系（r=0.999 2），方法的平均回收率为95.9%（n＝9），RSD为1.5%；不同来源的白英药材中总皂苷含量有较大差异。结论该方法操作简便、准确、灵敏、重现性好，可用于白英药材的质量控制。 【关键词】白英总皂苷薯蓣皂苷元分光光度法 Abstract:ObjectiveTo study the assay method of total saponins in Solanum lyratum Thunb. .MethodsSelecting diosgenin as control article，colorating with perchloric acid，determining absorbability in the point of 410nm by adopting spectrophotometric method,then calculating total saponins in Solanum lyratum Thunb..ResultsThe calibration curve was linear over the range of 8.91～29.70 μg/ml with the correlation of 0.9992. The average recoveries of diosgenin was 95.9%（RSD=1.5%,n= 9）. The samples from different areas contained
人参皂苷测定及其药理作用的研究概况
人参皂苷测定及其药理作用的研究概况 摘要：人参(P anax g inseng C. A. M eyer) 为五加科人参属植物, 具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神等作用〔1〕。现代药物学研究证明: 人参皂苷(ginsenoside) 是人参中重要的活性物质, 因此人参皂苷含量的多少评价人参内在质量的重要指标之一。迄今为止, 人们已从人参各部位(人参根、芦头、茎叶、花、花蕾及参果) 共分离得到20 多种人参皂苷, 可分为20S2原人参二醇(p rotopanaxadiol) 类、20S2原人参三醇(p rotopanaxatriol) 类和齐墩果酸(oleanolic acid)类三类。对于人参中人参皂苷的含量测定, 国内外研究的都比较多, 常用的测定方法主要有: 高效液相色谱法、薄层扫描法、分光光度法及重量法等。本文主要讨论这些方法测定的结果, 即不同采收期和不同年限的人参中人参皂苷的含量变化, 以及人参各部位人参皂苷的含量变化等, 以期为综合利用人参资源, 扩大人参药用部位, 合理进行人工种植和炮制提供一定参考。 关键词：人参皂苷人参总皂苷八种主要皂苷含量测定药理作用 1、人参总皂苷的测定 1.1 样品的制备取人参粉（40目）1g，置50ml磨口圆底烧瓶中，精密加入甲醇25ml与沸石少许，摇匀，称重，放置过夜后于水浴中保持微沸回流6小时，添加甲醇至原重离心分离，精密吸取上清液5或10ml（视含量而定），挥去甲醇，将提取物残渣仔细移入1ml容量瓶中，容器用少量甲醇洗涤，洗液合并，精密稀释至刻度。 1.2 总皂苷的测定用微量注射器吸取上述样品溶液10至20μl（视皂苷含量而定），在硅胶薄层上点成线状，用氯仿-甲醇-水（70:55:10）展开，依溶剂达到顶端，将板取出，使溶剂然全挥去，置碘蒸气中数秒，待色点刚显出，立即取出，画出斑点位置，用冷风将碘完全吹尽，用小刀将色点刮入10ml磨口带塞试管中，精密加入5%香荚醛-冰醋酸溶液0.2ml与高氯酸0.8ml，混匀，密塞置60℃水浴中加热15分钟，立即冷却，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，离心，取上清液在波长560nm处比色测定，同时取与色点同样大小的空白硅胶加显色剂显色，作为空白对照。测得的吸收度由人参二醇标准曲线查得相当于人参二醇（A）微克数，由下式计算含量。 生药总皂苷%=A×2.5×100／W W：点药量相当于生药的微克数 2.5：Rb组皂苷平均分子量与人参二醇分子量之比。 2、八种主要皂苷的测定 2.1 仪器和试药 2.1.1 仪器Agilent 1100系列高效液相色谱仪（美国安捷伦公司），包括G1379A真空脱气机、G1367A自动进样机、G1311A四元泵、G1316A柱温箔和G1315B检测器；KU-DOS-SK2200H超声发射器（上海科导超声仪器公司）；METTLERAE240型十万分之一电子天平（德国梅特勒公司）；DJ-04药材粉碎机（上海淀久公司）
总皂苷含量测定的方法学验证
总皂苷含量测定的方法学验证 试剂：Amberlite-XAD-2大孔树脂Sigma化学公司 U.S.A. 中性氧化铝层析用 100-200目 人参皂苷Re 购自中国药品生物制品鉴定所 正丁醇、乙醇、高氯酸、冰乙酸分析纯 香草醛溶液：称取5g香草醛，加冰乙酸并定容至100ml。 人参皂苷Re标准溶液：精确称取人参皂苷Re标准品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0ml，即每毫升人参皂苷Re2.0mg。 实验步骤： 供试品溶液：（1）试样处理：吸取2.0ml试样于25ml容量瓶中，加水定容至刻度，取1.0ml进行柱层析。 （2）柱层析：用10ml注射器作层析柱，内装3cm Amberlite-XAD-2大孔树脂，上加1cm中性氧化铝。先用25ml70%乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25ml水洗柱，弃去洗脱液，精确加入1.0ml以处理好的试样溶液，用25ml水洗柱，弃去洗脱液，用25ml70%乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，置于60℃水浴挥干。以此作显色用。 （3）显色：在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2ml 5%香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣都溶解，再加0.8ml高氯酸，混匀后移入5ml带塞刻度离心管中，60℃水浴上加热10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0ml，摇匀后，以1cm比色池于560nm波长处与标准管一起进行比色测定。 对照品溶液（4）标准管：吸取人参皂苷Re标准溶液（2.0mg/ml）50μl放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60℃），或热风吹干（勿使过热），以下操作从“3.2 柱层析”起，与试样相同，测定吸光度值。 空白溶液（5）空白溶液：吸取甲醇溶液50μl放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60℃），或热风吹干（勿使过热），以下操作从“3.2 柱层析”起，与试样相同，测定吸光度值。 1.确定最大吸收波长（波层扫描） 精密量取对照品溶液于1cm吸收池中，以空白试剂作参比，在分光光度计上从波长42-650 nm，每隔10 nm测定一次吸光度。 2.线性关系考察——标准曲线的制备： 分别紧密量取10、20、30、40、50、60、70μl对照品溶液，吸取人参皂苷Re标准溶液（2.0mg/ml）50μl放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60℃），或热风吹干（勿使过热），以下操作从“3.2 柱层析”起，与试样相同，测定吸光度值。以吸收值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 3. 专属性试验： 阴性样品：辅料+无皂苷的中药 供试样品 4.精密度试验 4.1重复性 在同一批样品中取2ml样品6份，分别按照上述方法配制成供试品溶液，测定吸光度值。 4.2 中间精密度 不同日期，重复操作重复性试验。将重复性实验数据合并，共12个数据分析RSD值。 5. 稳定性试验 取供试品溶液适量，按照测定法测定吸光度值，分别在0、2、4、6、8h各测定一次。
不同产地续断中总皂苷的含量测定
不同产地续断中总皂苷的含量测定 作者：刘永，卫莹芳，闫婕，郭山山，王化东，谢达温 【摘要】目的测定全国不同产地续断药材中总皂苷的含量，为全面评价续断药材质量提供依据。方法以齐墩果酸为对照品，用紫外-可见分光光度法测定。结果9个省、市37个药材样品中总皂苷含量在2.20%～19.91%，平均加样回收率为100.32%，RSD为1.78%。不同产地续断药材中总皂苷的含量存在差异，其中湖北鹤峰县野生续断总皂苷含量最高。结论此方法准确、可行，可作为续断药材的质量评价方法。 【关键词】续断；总皂苷；紫外-可见分光光度法 续断为川产道地药材之一，来源于川续断科川续断属植物川续断Dipsacus asperoides C．Y．Cheng et T．M．Ai的干燥根［1］。具有补肝肾、强筋骨、续折伤、止崩漏的功效，临床上主要用于腰膝酸软，风湿痹痛，跌扑损伤等［1］。据报道［2～4］，续断补肝肾、强筋骨、续折伤的主要活性成分是三萜皂苷类成分，现已分离鉴定出22种三萜皂苷。随着对续断研究的不断深入，特别是在软组织损伤、腰膝酸软、腰椎骨质增生等方面的广泛应用，使其需求量大增。为了评价续断质量的优劣，本实验以齐墩果酸为指标，采用紫外分光光度法测定续断中总皂苷的含量，从而为全面评价续断药材质量提供依据，
为合理开发利用续断药材资源提供科学依据。 1 仪器与材料 1.1 仪器UV-1100紫外-可见分光光度仪(上海天美科学仪器有限公司)，KQ-3200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），万分之一电子天平(德国赛多利斯BP-121S)，十万分之一电子天平(日本岛津LIBROR AEG-45S)。 1.2 样品与试剂续断采自和购自全国9个省、市37个药材样品（见表2），均经成都中医药大学鉴定教研室卫莹芳教授鉴定为川续断Dipsacus asperoides C．Y．Cheng et T．M．Ai的干燥根；齐墩果酸对照品(批号：110709-200505，购自中国药品生物制品检定所)；甲醇、乙醇、冰乙酸、高氯酸、香草醛等试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 测定方法依据本文以齐墩果酸为对照品测定续断药材中总皂苷的含量,通过总皂苷和齐墩果酸皂苷元与香草醛-高氯酸反应在可见区都能获得稳定的特征吸收峰。 2.2 对照品溶液的配制称取齐墩果酸对照品适量，精密称定，