LDH同工酶
儿童血清LDH及同工酶分析
Ｐ ａｔ ａ ｌ ｉ ｌ ｄｃ ｒｃｉ ｌ ｉ ｃ ｉ ｎ ！ ｃ Ｃ ｎ ａ Ｍｅ ｉ
！ ！ ！
・
７９ ・
儿童血清 Ｌ ＤＨ 及 同工 酶 分 析
朱 小 明
（ 景德镇 市妇 幼保健 院儿科 ， 西 景 德镇 ３ ３ ０ ） 江 ３ ０ ０ 摘 要 ：目的 分析和研究儿童乳酸脱氢酶（ Ｄ 的临床检测意义， Ｌ Ｈ） 并设置出景德镇市妇幼保健院的正常参考范
３ ． ， ＤＨ ７９ ～ ２ ． ， ＤＨ４ ． ～ １ ． ， Ｄ ． ～ ７ １ ； 人 ： Ｄ ７ ． ～ ２４ ０Ｕ Ｉ， Ｄ ７ ４ Ｌ １ ． ２３ Ｌ ８ ６ １０ Ｌ Ｈ５ ７ ４ ． 成 Ｌ Ｈ １０ ０ ． ／ Ｌ Ｈｌ
２． ～ ３． ，Ｄ ８２ ～３ ． ％ ， ＤＨ３１． ～ ２ ． ， Ｄ ． ～ １． ， Ｄ ． ～ １． 。 儿 ０３ ２ １ Ｌ Ｈ２ ． ２ ８８ Ｌ ３７ １ ７ Ｌ Ｈ４８ ７ ６ ７ Ｌ Ｈ５ ４ ７ ６０
２ 结 果
儿 童 参 考 范 围 ： ＤＨ ９ ．１～ ２ ４ ５ Ｕ／ Ｌ １６ ５ ． Ｌ，
Ｌ ＤＨ１ ６ ２ ～ ３ ． ％ ， ＤＨ２３ ． ～ ３ ． ， ． ２ ２８ Ｌ ４ ０ ７４
１ 对 象 与 方 法
１ １ 对 象 ．
Ｌ ＤＨ３１ ． Ｖ ～ ２ ． ％ ， ＤＨ４６ ％ ～ １ ． ％ ， ７ ９ｏ ２３ Ｌ ．８ １０
２０ ０ ５年 １ Ｏ月 一２ ０ ０ ８年 ２月 ， 市第 一 幼儿 园 、 本
童与成人 的 Ｌ ＤＨ 活 力 有 显 著 性 差 异 （ ＜ Ｏ０ ） Ｐ ． １ 。儿 童 与 成 人 的 Ｌ ＤＨ 同 工 酶 的 分 布 顺 序 一 致 ， ： ＤＨ２ Ｌ Ｈ 即 Ｌ ＞ Ｄ
乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶高的原因
乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）同工酶高在临床检测中是常见的现象，常见于多种疾病和健康问题。
本文将从多个角度探讨乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶高的原因，分析可能的病因，以及对策和建议。
一、乳酸脱氢酶（LDH）同工酶高的原因1. 炎症反应乳酸脱氢酶属于细胞内酶，其同工酶高常见于组织损伤和炎症反应。
细胞受损或炎症导致细胞膜通透性增加，LDH释放入血液中，引起其同工酶浓度升高。
2. 心肌梗死急性心肌梗死时，心肌组织受损，LDH从心肌细胞释放入血液中，导致其同工酶浓度升高。
3. 肝脏疾病肝脏疾病如黄疸、肝炎、肝硬化等也会导致LDH同工酶高。
肝脏受损使得LDH释放入血液中增加。
4. 肌肉损伤肌肉损伤如挫伤、拉伤、运动过度等也会导致LDH同工酶高。
肌肉损伤使得细胞内LDH释放入血液中增加。
二、肌酸激酶（CK）同工酶高的原因1. 肌肉损伤肌酸激酶同工酶高的最常见原因是肌肉损伤，特别是骨骼肌损伤。
运动过度、挫伤、拉伤等导致的肌肉损伤可以使得肌酸激酶释放到血液中，引起其同工酶浓度升高。
2. 心肌梗死与LDH类似，心肌梗死导致心肌细胞损伤，CK释放到血液中增加，导致其同工酶浓度升高。
3. 肌无力慢性肌无力症患者也常伴有CK同工酶高。
肌无力症导致肌细胞的破坏和修复过程不断进行，CK不断释放入血液中。
4. 药物一些药物如他汀类药物、胰岛素等在长期或过量使用时也会导致CK同工酶高。
三、其他因素除了上述常见原因外，还有一些其他因素也可能导致LDH和CK同工酶高，如高温、中毒、代谢性疾病、感染、内分泌疾病等。
总结起来，乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶高的原因非常多样化，包括炎症反应、肌肉损伤、心肌梗死、肝脏疾病、肌无力、药物等因素均可能导致同工酶水平升高。
在临床实践中，对于LDH和CK同工酶高的患者，需要仔细分析病史，结合其他相关检查，以明确疾病的诊断和治疗方案。
通过合理的用药、规范的运动、健康的生活习惯等方式，可以预防LDH和CK同工酶高的发生。
肌酸酶同工酶 乳酸脱氢酶 肌酸激酶-概述说明以及解释
肌酸酶同工酶乳酸脱氢酶肌酸激酶-概述说明以及解释1.引言1.1 概述肌酸酶同工酶、乳酸脱氢酶和肌酸激酶都是人体内重要的酶类蛋白质，它们在细胞内发挥着关键的生物学功能。
肌酸酶同工酶是一类酶体蛋白质，其功能涉及多种代谢过程，乳酸脱氢酶参与乳酸代谢并调节酸碱平衡，而肌酸激酶则与能量代谢密切相关。
肌酸酶同工酶的定义和功能广泛存在于人体的各种组织中，特别是肌肉组织中含量最丰富。
它们是一类催化酶，在细胞内负责催化肌酸转化为肌酸磷酸盐的反应。
肌酸是细胞内的一种重要能源储备物质，通过肌酸酶同工酶的催化作用，能够将肌酸转化为肌酸磷酸盐，进而参与细胞能量代谢过程中的肌酸磷酸盐-肌酸间的往复转化。
肌酸储备量与细胞能量代谢水平息息相关，对于维持肌肉健康功能起着重要作用。
乳酸脱氢酶在体内主要参与乳酸代谢的过程。
它可以催化乳酸的氧化还原反应，将乳酸氧化为丙酮酸，从而调节体内乳酸的产生和消耗。
乳酸是细胞糖酵解代谢过程中产生的副产物，过量的乳酸堆积会导致酸中毒，而乳酸脱氢酶的存在可以有效调节体内乳酸浓度，维持酸碱平衡。
肌酸激酶在细胞内是一种催化酶，主要参与肌酸磷酸盐-肌酸间的往复转化反应，并且与ATP合成相关。
肌酸激酶能够催化肌酸磷酸盐的合成反应，将肌酸与磷酸盐结合形成肌酸磷酸盐，并且ATP在此过程中起到能量供应的作用。
肌酸激酶的活性与细胞能量需求紧密相关，它在细胞能量代谢及肌肉功能方面发挥重要作用。
综上所述，肌酸酶同工酶、乳酸脱氢酶和肌酸激酶作为酶类蛋白质在细胞内发挥着重要的生物学功能，它们在相关代谢过程中起到调节和催化的作用，对于细胞能量代谢、酸碱平衡以及肌肉等方面的正常功能维持具有重要意义。
对这些酶类蛋白质的深入研究有助于更好地理解细胞代谢及人体健康的相关机制。
文章结构是一个长文中的组织框架，它有助于读者了解全文的整体架构和各个部分之间的关系。
本文的结构如下：1. 引言1.1 概述1.2 文章结构1.3 目的2. 正文2.1 肌酸酶同工酶2.1.1 定义和功能2.1.2 作用机制和重要性2.2 乳酸脱氢酶2.2.1 定义和功能2.2.2 作用机制和重要性2.3 肌酸激酶2.3.1 定义和功能2.3.2 作用机制和重要性3. 结论在这个文章结构中，引言部分将提供一个简要的背景介绍和研究目的，为读者提供整篇文章的背景和意义。
乳酸脱氢酶(ldh)正常值范围
乳酸脱氢酶(ldh)正常值范围
乳酸脱氢酶是观察心肌疾病、肝胆疾病等的重要指标之一，正常值范围是109-245U/L。
如果乳酸脱氢酶数值偏高，则需要警惕肝脏疾病、心脏疾病等，及时去医院咨询进行进一步检查确定数值增高的病因，数值偏低则不需要过度担心。
乳酸脱氢酶是催化乳酸和丙酮相互转化的同工酶，存在于肝脏、心脏、肾脏中。
乳酸脱氢酶偏低有可能是因为内分泌失调或者由过于劳累、睡眠不好、心情不好等原因引起，乳酸脱氢酶偏低一般不是很严重，经过调理即可恢复。
但是如果出现乳酸脱氢酶偏高就要引起重视了，常见原因如下：
1、乙肝患者血清中乳酸脱氢酶含量就会出现增高，这
是由肝细胞受损引起的。
2、肌营养不良的患者血清中可以观察到偏高的乳酸脱
氢酶。
3、肝脏疾病、肺部疾病、心脏疾病、肾脏疾病等都可
能会引起乳酸脱氢酶偏高。
医学知识之同工酶
同工酶同工酶(isoenzyme)是指催化的化学反应相同，酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。
这类酶存在于生物的同一种属或同一个体的不同组织、甚至同一组织或细胞中。
现已发现有数种同工酶。
如6-磷酸葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、酸性和碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酸、肌酸磷酸激酶、核糖核酸酶、过氧化酶和胆碱酯酶等。
其中乳酸脱氢酶最为大家所熟悉，乳酸脱氢酶(LDH)有五种同工酶，它们的分子量在130，000～150，000范围内，都由四个亚基组成。
LDH的亚基可以分为两型：骨骼肌型(M型)和心肌型(H型)。
M、H亚基的氨基酸组成有差别，可用电泳分离。
其免疫抗体无交叉反应。
两种亚基以不同比例组成五种四聚体即为一组LDH同工酶LDH1(H4)、LDH2(H3M)、LDH3(H2M2)、LDH4(HM3)和LDH5(M4)。
电泳时都移向正极，其速度以LDH1为最快，依次递减，以LDH5为最慢。
若用12M尿素或5M盐酸胍溶液处理，M亚基和H亚基可以分开，但此时LD H无酶的活性。
【注意事项】大家在用药的时候，药物说明书里面有三种标识，一般要注意一下：1.第一种就是禁用，就是绝对禁止使用。
2.第二种就是慎用，就是药物可以使用，但是要密切关注患者口服药以后的情况，一旦有不良反应发生，需要马上停止使用。
3.第三种就是忌用，就是说明药物在此类人群中有明确的不良反应，应该是由医生根据病情给出用药建议。
如果一定需要这种药物，就可以联合其他的能减轻不良反应的药物一起服用。
大家以后在服用药物的时候，多留意说明书，留意注意事项，避免不良反应的发生。
本文到此结束，谢谢大家!。
第四章实验五乳酸脱氢酶_LDH_同工酶的分离纯化
NAD+：10 mL NBT：10 mL PMS：2 mL 0.5 M PH7.6 Tris-HCl: 15 mL 0.5 M乳酸钠：15 mL 0.1NaCl：5 mL 去离子水：43 mL
共计100 mL
四、实验操作
1.样品处理：1 g 组织切碎，加 pH 7.4 Tris-HCl缓 冲液10 mL，匀浆，10,000 g ，4℃，离心10 min，上
离子交换剂结构：以Sephadex-QAE A-50为例
葡聚糖 -N+(CH3)3 –Cl基质 功能基团 平衡离子
电荷基团 反离子
离子交换剂的种类
1 按基质种类不同： 离子交换树脂，离子交换纤维素，离子交换凝胶等
2 按功能基团不同： 强酸型 含磺酸基团 (R-SO3H)， 中等酸型 含磷酸基团 (-O-PO2H4) 弱酸型 含酚基、羧基 强碱型 含季胺基团 [-N+(CH3)3]，弱碱型 含叔胺、伯胺基团[-N(CH3)2] 3 按平衡离子的性质不同：
ABC
D
E
A280
5 10 15 20 25 30 35 40 50
洗脱体积
4.聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定：活性电泳 只做分离胶，胶倒好直接插上试样梳，进行聚合
编号 1 2 3 4 5
总体积
溶液名称 30% Acr –0.8% Bis pH 8.9 Tris -HCl TEMED 10% AP H2O
三、实验试剂
1、20 mM Tris-HCl，pH 7.4缓冲液； 2、A液: 20 mM Tris-HCl，pH 6.3缓冲液 3、B液: A液含60 mM NaCl 4、C液: A液含100 mM NaCl 5、D液: A液含150 mM NaCl 6、E液: A液含240 mM NaCl 7、QAE-Sephadex A-50准备：取1克QAE-Sephadex A-50于烧杯中加入100 mL A
乳酸脱氢酶;肌酸激酶;肌酸激酶同工酶
乳酸脱氢酶、肌酸激酶和肌酸激酶同工酶是人体生理过程中不可或缺的重要酶类。
它们在能量代谢、肌肉损伤和疾病诊断等方面发挥着重要的作用。
本文将分别从乳酸脱氢酶、肌酸激酶和肌酸激酶同工酶的功能、结构及临床应用等方面进行介绍和探讨。
一、乳酸脱氢酶1.功能乳酸脱氢酶（LDH）是一种存在于细胞质中的酶，它参与了乳酸的代谢过程。
在有氧环境下，LDH将乳酸转化为丙酮酸，从而释放出能量。
而在缺氧环境下，LDH则参与乳酸的产生过程，帮助细胞维持能量代谢的平衡。
2.结构LDH是由四个亚基构成的四聚体蛋白质，这四个亚基可以分为两种类型：M亚基和H亚基。
在人体中，有5种不同的亚基组合形式，它们分别存在于不同的组织和细胞中。
3.临床应用LDH在临床上是一个重要的生化指标，它可以用于辅助诊断心肌梗死、溶血性贫血、癌症和肝脏疾病等疾病。
通过LDH的测定，可以帮助医生判断疾病的严重程度、进行病情的监测和评估治疗效果。
二、肌酸激酶1.功能肌酸激酶（CK）是一种主要存在于肌肉组织中的酶，它参与了肌肉中肌酸磷酸酶系统的能量代谢过程。
在肌肉受损或缺氧的情况下，肌酸激酶会被释放到血液中，因此成为了一种用于诊断和监测肌肉损伤的生化指标。
2.结构肌酸激酶是一个由两个亚基构成的二聚体酶，这两个亚基分别被称为B亚基和M亚基。
在人体中，有三种不同类型的肌酸激酶异构体，它们分别被称为CK-MM、CK-MB和CK-BB。
3.临床应用在临床实践中，CK的测定常用于评估心肌梗死、肌肉疾病、运动损伤、中风和肝脏疾病等疾病。
通过监测血清中CK水平的变化，可以帮助医生对患者的病情进行评估和诊断。
三、肌酸激酶同工酶1.功能肌酸激酶同工酶（CK-M）是肌酸激酶中的一种同工酶，与肌酸激酶具有相似的生物学功能和结构。
它主要存在于心肌组织和脑组织中，因此也被用作评估心肌和脑组织损伤的生化指标。
2.结构肌酸激酶同工酶和肌酸激酶有着相似的二聚体结构，但其在组织分布和生物学特性上有所不同。
(修改版)琼脂糖电泳检测LDH同工酶
一、实验目的
1. 掌握琼脂糖凝胶电泳的原理 及琼脂糖凝胶板的制备； 2. 熟悉琼脂糖凝胶电泳分离LDH同工酶的方法 及组织匀浆的制备、制点样槽、点样、 显色。
二、实验原理
带电粒子在直流电场中向所带电荷相反的方 1.电泳：
向移动的现象。
能催化功能相同而酶的分子结构、理化 2.同工酶： 性质及免疫学特性不同的一组酶，称为同工酶。
六、实验结果
乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱
七、方法学评价
(一)电泳法
琼脂糖凝胶法
1. 优点：灵敏度高，样品取量少，无拖尾现象。 2. 缺点：点样不能过多，否则影响区带效果。 醋酸纤维薄膜法 1.优点:应用普遍、简便、快速、分离清晰
2.缺点：点样量少，LDH4和LDH5易受电热的影响而失活。
聚丙烯酰胺凝胶法 1.优点：分辨率高 2.缺点：试剂昂贵，有一定的毒性，操作繁琐
八、临床意义
八、临床意义
1.急性心肌梗死：LDH1、 LDH3↑
LDH1/ LDH2 ↑>1 2.肝细胞受损:LDH ↑ LDH5 ↑↑ LDH4↑
3.胃癌、结肠癌、胰腺癌:LDH3↑ 4.前列腺癌: LDH5/ LDH4↑>1 5.骨骼肌急性损伤: LDH4、 LDH5↑
思考题
正常成年人血清LD同工酶活力电泳结果为
电泳结束后，加显色凝胶加载凝胶玻片上，
置37℃烤箱中，15分钟。
五、注意事项
1. 标本需新鲜，室温保存，PBS液浸泡。 2. 底物显色液须临用前配制，用棕色试剂瓶装， 避光保存于50 ℃水浴箱，复溶后无效。 3. LDH4、LDH5对冷热均敏感，应严格控制温 度，底物显色液如超过50℃，血清标本放置 温度过低，均容易破坏LDH4、LDH5。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
LDH同工酶
定义1：具有相同底物，但电泳迁移率不同的酶。
可来简介
用电泳方法将LDH同工酶分离，分析其酶谱，发现脊椎动物各组织中有五条酶带。
每条酶带的酶蛋白都是由四条肽链组成的四聚体，LDH有两类肽链，A（M）或B（H），各有不同同工酶
的免疫性质，按排列组合可形成符合于电泳酶带数的五种同工酶。
LDH1及LDH5分别由纯粹的4条B链（B4）和4条A链（A4）形成，称为纯聚体；而LDH2、LDH3和LDH4都是由两类肽链杂交而成的，分别可写成AB3、A2B2、A3B，称为杂交体。
编辑本段分类
基因性同工酶或原级同工酶
由不同基因产生的肽链而衍生的同工酶。
这里所指的不同基因可以在不同染色体或在同一染色体的不同位点上，例如LDH中A、B两条肽链的基因分别在第11及第12对染色体上，唾液淀粉酶和胰淀粉酶的基因在第1对染色体的不同位点上。
这类同工酶因分子结构差异较大，彼此间无交叉免疫。
但同工酶的不同基因也可以是同源染色体的等位基因，这种成对的等位基因上两个基因结构不同的情况，在遗传学上称为杂合子。
杂合子在同一个体中可合成同一种酶的两种不同
肽链，或亚基，这两种亚基尚可杂交，形成同工酶。
在生物群体的不同个体中，有时同一基因位点上的一个（对杂合子来说）或一对（对纯合子来说）基因也可发生遗传变异，从而产生变异的酶，出现群体中的遗传多态。
不同个体中这些遗传变异的酶也属于基因性同工酶。
其在免疫学上常有交叉反应。
由同一基因转录出前体核糖核酸（前体RNA），经过不同的加工剪接过程而生成多种不同的mRNA，再转译出多种肽链，从而组成同工酶。
这类同工酶因发现较晚，在国际上尚无统一命名，彼此间也有交叉免疫。
次生同工酶或转译后同工酶
由同一基因、同一mRNA转译生成原始的酶蛋白，再经过不同的化学修同工酶试剂
饰，如酰胺基水解、磷酸化、肽链断裂、糖链上的糖基增减等形成不同结构的酶蛋白，它们的免疫性往往相同。
国际生化协会命名委员会（CBN）建议只将原级同工酶列为同工酶，而将次生同工酶称为共合酶，但不少生化学家还是把上述各类酶的不同结构形式都包括在广义的同工酶概念中。
编辑本段功能
在动、植物中，一种酶的同工酶在各组织、器官中的分布和含量不同，形成各组织特异的同工酶谱，叫做组织的多态性，体现各组织的特异功能。
大多数基因性同工酶由于对底物亲和力不同和受不同因素的调节，常表现不同的生理功能，例如动物肝脏的碱性磷酸酯酶和肝脏的排泄功能有关，而肠粘膜的碱性磷酸酯酶却参与脂肪和钙、磷
的吸收。
对LDH催
化的可逆反应，心肌中富含的LDH1及LDH2在体内倾向于催化乳酸的脱氢，而骨骼肌中丰富的LDH4及LDH5则有利于丙酮酸还原而生成乳酸。
所以同工酶只是做相同的“工作”（即催化同一个反应），却不一定有相同的功能。
编辑本段应用
在生物学中，同工酶可用于研究物种进化、遗传变异、杂交育种和个体发育、组织分化等。
例如最原始的脊椎动物七鳃鳗（Lamprey）只有一种LDH肽链，进化到较高级的鱼类才有A、B两类肽链。
又如通过对地理分布不同的物种间某一同工酶谱的普查可以推测物种的地理来源。
动、植物的遗传变异可通过子代和亲代同工酶谱的比较来鉴别。
法医学中也可用多种同工酶谱的分析来鉴定亲子关系。
细胞杂交或植物杂交育种后是否出现新品种也可用周工酶谱的比较来确定。
在个体发育中，从胚同工酶图谱
胎到出生，再到成年，随着组织的分化和发育，各种同工酶谱也有一个分化转变的过程。
某型同工酶在胚胎的大多数组织中出现，成为主要型式，称为原始型同工酶。
但出生后在某些组织中逐渐减少而被另一型同工酶取代，后者在胚胎组织中几乎不存在或含量极微，只在分化成熟的少数组织中存在，称为成年型同工酶。
在植物的不同发育阶
段，同样可见同工酶谱的相应改变。
在医学方面，同工酶是研究癌瘤发生的重要手段，癌瘤组织的同工酶谱常发生胚胎化现象，即合成过多的胎儿型同工酶。
如果这些变化可反映到血清中，则可利用血清同工酶谱的改变来诊断癌瘤。
此外。
因同工酶谱有脏器特异性，故测定血清同工酶常可较特异地反映某一脏器的病变，如血清的LDH1（B4）或MB型肌酸激酶（CK-MB）增加是诊断心肌梗塞较特异的指标，较测定血清LDH或肌酸激酶（CK）总活力更为可靠。
[1]。