组织铁含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
血清铁浓度检测试剂盒说明书
货号：MS2802 规格：100管/96样血清铁浓度检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁，该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。
测定原理：亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+，Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色，在520nm处有吸收峰，测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。
自备实验用品及仪器：离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。
试剂组成和配置：试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存。
临用前配制，加入15mL蒸馏水充分溶解。
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。
临用前配制，加入469μL冰醋酸，加入15mL蒸馏水充分溶解。
标准液：液体×1 支（EP管），100μmol/L Fe3+标准液，4℃保存。
测定：1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到520nm，蒸馏水调零。
2. 标准液解冻：提前取出标准液，置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管：取EP管，依次加入125μL蒸馏水，125μL试剂一，125μL试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却。
加入62μL氯仿（自备），充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液210μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520nm 测定吸光度，记为A空白管。
4. 标准管：取EP管，依次加入125μL标准液，125μL试剂一，125μL试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却。
加入62μL氯仿，充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液210μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520nm测定吸光度，记为A标准管。
5. 测定管：取EP管，依次加入125μL血清，125μL试剂一，125μL试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却。
二甲酚橙分光光度法测定铁含量
二甲酚橙分光光度法测定铁含量X丛晓英(内蒙古化工职业学院,内蒙古呼和浩特 010010) 摘 要:本实验通过利用分光光度计测定样品中微量铁的含量,本实验选定的显色剂为二甲酚橙先测定二甲酚橙的最大吸收波长K =570nm ,二甲酚橙-铁的最大吸收波长K =570nm ,二甲酚橙-盐酸的最大吸收波长K =450nm 。
然后进行了实验条件的摸索:最佳射入波长的选择、缓冲溶液的最佳波长、酸性条件的最佳波长、显色剂用量的最佳量。
在最佳实验条件下测定淀粉、蔗糖、自来水中的微量铁的含量。
关键词:二甲酚橙;分光光度法 中图分类号:T M351 文献标识码:A 文章编号:1006—7981(2012)02—0021—02 分光光度法指紫外,可见分光光度法,属于吸收光度法的一种.该方法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。
此课题主要应用为可见分光光度法的测定,分光光度法主要用于微量组分定量测定,也能用于常量组分的测定;可测单组分,也可测多组分。
1 实验部分1.1 仪器与试剂722分光光度计、FA 2004电子天平、HCL (0.05mol /L )、醋酸-醋酸钠缓冲溶液、铁标液(1g /L )、氯化铜溶液(1g /L )、氯化锌溶液(1g /L )、硫酸铝钾溶液(1g /L )、蔗糖溶液、淀粉溶液、自来水。
测定条件的确定及实验结果 二甲酚橙—铁稀液的最大吸收波长的确定以蒸馏水为参比确定二甲酚橙溶液最大吸收波长为570nm 。
以蒸馏水为参比确定铁标液与二甲酚橙(盐酸)的络合物的最大吸收波长为570nm 。
以蒸馏水为参比确定二甲酚橙和盐酸的混合物的最大吸收波长(取1.0ml 二甲酚橙,1.5ml 盐酸以蒸馏水定容至50ml)波长/nm综上所述:二甲酚橙的最大吸收波长K =570nm ,二甲酚橙-铁的最大吸收波长K =570nm ,二甲酚橙—盐酸的最大吸收波长K =450nm 。
根据显色反应的要求,二甲酚橙—铁稀液,二甲酚橙—盐酸溶液的对比度$K =570nm -450nm =120nm >60nm 正符合显色剂与有色化合物的对比度$K =60nm 以上。
维生素 B1(VB1)含量检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4374
维生素B1（VB1）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:UPLC-MS-4374规格:50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体35mL×1瓶4℃保存稀释液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体6mL×1瓶4℃保存试剂二液体7mL×1瓶4℃保存试剂三液体6mL×1瓶4℃保存试剂四液体15mL×1瓶4℃保存试剂五液体8mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、提取液：内含不溶物，使用前摇匀；2、标准品：10mg维生素B1。
临用前加入1mL稀释液，配成10mg/mL（即10000µg/mL）的标准液。
产品说明：维生素B1（Vitamin B1）又称硫胺素，以辅酶形式参与糖的分解代谢，在生物体能量代谢中有重要的作用。
VB1在碱性条件下还原铁氰化钾生成亚铁氰化钾，亚铁氰化钾与Fe3+在弱酸条件下生成普鲁士蓝，测定布鲁士蓝在704nm下的特征吸收峰，即可反映VB1的含量。
技术指标：最低检出限：7.366µg/mL线性范围：7.8125-250µg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：将样本磨碎，按照质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入0.6mL提取液）加入提取液，60℃浸提30min，加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，13000g离心10min，取上清测定（动物组织、豆类种子等蛋白含量较高的样本建议离心20-30分钟或反复离心2-3次至上清无浑浊）。
血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity,TIBC)试剂盒说明书
货号：MS2811 规格：100管/96样血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity，TIBC)试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力，其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。
测定原理：Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物，在562nm处有特征吸收峰。
碱性条件下，血清转铁蛋白可以与Fe3+结合，剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+，此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关；酸化后，转铁蛋白结合的Fe3+释放，并且进一步被还原 Fe2+，此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。
A2减A1与TIBC浓度呈正比。
自备实验用品及仪器：天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。
（临用前根据用量将A液和B液按1:1混合）试剂四：液体 7mL×1 瓶，4℃保存。
测定操作表：1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至562nm。
血清总铁结合力计算公式：总铁结合能力定义：37℃条件下，每升血清结合Fe3+的μmol数。
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y=0.5478x+0.0281，R2=0.9981总铁结合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.5478×V反总÷V样=20.99×（ΔA-0.0281）b. 用 96 孔板测定的计算公式如下第1页，共2页标准曲线：y=0.2739x+0.0281，R2=0.9981总铁结合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.2739×V反总÷V样=41.98×（ΔA-0.0281）V 反总：反应总体积，0.46mL；V 样：反应中样本体积，0.04mL注意事项：1. 吸光值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
Fe说明书
铁（Fe）测定试剂盒（亚铁嗪比色法）使用说明书【产品名称】通用名称：铁（Fe）测定试剂盒（亚铁嗪比色法）商品名称：英文名称：Reagent Kit for Iron (Fe) Test (Ferrozine Colorimetry) 【包装规格】SI7967 R1 7 × 50 ml R2 2 × 42 mlSI7753 R1 2 × 64 ml R2 2 × 16 mlSI7754 R1 8 × 60 ml R2 2 × 60 mlSI7553 R1 4 × 50 ml R2 1 × 50 mlSI7554 R1 6 × 100 ml R2 2 × 60 mlSI7253 R1 3 × 20 ml R2 3 × 5 mlSI7254 R1 4 × 50 ml R2 2 × 20 mlSI5054 R1 2 × 100 ml R2 2 × 20 mlSI0054 R1 4 × 100 ml R2 1 × 100 mlSI0001 R1 1 × 64 ml R2 1 × 16 ml朗道校准血清CAL2350 1 × 5ml【预期用途】本试剂盒用于检测人体样本中铁离子的含量，临床上主要用于贫血的辅助诊断。
【检验原理】血清样本中与转铁蛋白结合的铁，在酸性介质中从转铁蛋白中解离出来，再被还原剂抗坏血酸等还原为二价铁，后者与亚铁嗪络合成紫红色复合物，在562nm处该复合物有特定吸收峰，其吸光度与血【主要组成成分】氯化胍 4.5mol/L硫脲100mmol/L R2：亚铁嗪 1.7mmol/L 抗坏血酸40mmol/L不同批号试剂盒各组分不能互换。
【储存条件及有效期】未开封的试剂2~8℃密闭避光保存（勿冷冻），有效期为18个月。
分光光度法测铁含量
分光光度计测定工业盐酸中的铁含量周次：双周二一、实验目的1.掌握一种测定溶液中铁含量的实验方法。
2.掌握分光光度计的测试原理和使用方法。
3.学习如何选择吸光度分析的实验条件。
二、实验原理分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。
但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。
所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b(cm)成正比。
其定律表达式：A=abc（a是比例系数）。
当c的单位为mol/l时，比例系数用ε表示，则A=εbc称为摩尔吸光系数。
其单位为L·mol-1·cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。
邻二氮菲可测定试样中铁的总量的条件和依据：邻二氮菲亦称邻菲咯啉（简写phen），是光度法测定铁的优良试剂。
在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物（（Fe(phen)3）2+）。
此配合物的lgK稳= 21.3，摩尔吸光系数ε510= 1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。
所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下：2 Fe3+ + 2 NH2OH·HCl →2Fe2+ + N2 + H2O + 4H+ + 2Cl-测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜，用邻二氮菲可测定试样中铁的总量。
三、仪器与药品752型分光光度计1台；容量瓶（50mL）7只；量筒（100mL）1个；烧杯（100mL）4只；胖肚移液管（25 mL）2支；刻度移液管（10 mL）2支；洗耳球1只。
100μg·mL-1铁标准溶液；0.15% 邻二氮菲水溶液；10%盐酸羟胺溶液；1mol·L-1乙酸钠溶液；1 mol·L-1 NaOH溶液；6 mol·L-1 HCl（工业盐酸试样）。
血清铁测定试剂盒说明书50T
本试剂盒仅用于科研、实验室血清铁测定试剂盒说明书50T一、原理：在酸性溶液和还原剂的作用下，使运铁蛋白中铁与蛋白分离，使血清中的高铁还原成亚铁，后者与双吡啶结合成粉红色的络合物，在一定范围内，铁离子的多少与色泽成正比。
二、试剂的组成与配制：1、100mg/L铁标准贮备液：1ml 溶液一瓶，4℃保存3个月。
2mg/L铁标准应用液的配制：取铁标准贮备液0.2ml加蒸馏水定溶至10ml, 4℃保存。
2、铁显色剂：2号甲粉剂一支，2号乙粉剂一支，二号丙液100ml×1瓶，4℃保存6个月。
用时将甲、乙二粉剂倒入丙液中，充分混匀，溶解，即为铁显色剂，4℃避光保存。
2mg/L铁标准应用液(ml)0.5血清(ml) 0.5 铁显色剂（ml） 1.51.51.5混匀后，沸水浴5分钟，（空白及标准管可以不煮），冷却后离心，3500转/分，离心10分钟，取上清液1.0ml,0.5cm光径，波长520nm,双蒸水调零，测各管吸光度OD值。
四、计算与举例：1、计算公式：血清铁（mg/L）=空白管吸光度标准管吸光度空白管吸光度测定管吸光度??×标准浓度（2mg/L）血清铁（umol/L）=空白管吸光度标准管吸光度空白管吸光度测定管吸光度??×标准浓度(35.81umol/L)*标准管铁含量为2000ug/L,铁原子量为55.847，所以标准管铁含量为35.81umol/L 2、举例：取血浆0.5ml按操作表进行血清（浆）铁测定，在520nm处，0.5cm光径，测定各管吸光度为：空白管0.000，标准管0.038，测定管0.037，则计算如下：血清铁(umol/L)=空白管吸光度标准管吸光度空白管吸光度测定管吸光度??×标准液浓度=0038.00037.0??×35.81=34.87（umol/L）五、注意点：1、玻璃器材需严格清洗，避免铁的污染，建议最好用一次性塑料试管。
2、若上清浑浊，可再用另一试管再次离心后比色。
铁离子(Fe)测定试剂盒(Ferene法)产品技术要求
铁离子（Fe）测定试剂盒（Ferene法）组成：试剂盒由试剂1（R1）、试剂2（R2）和校准品（选配）组成：试剂1（R1）：醋酸缓冲液：200mmol/L，硫脲：42mmol/L， Trion X-100：0.50%；试剂2（R2）：呋喃三嗪二钠盐：2mmol/L，盐酸羟胺：200mmol/L。
校准品（选配）：单水平的液态校准品，在盐酸缓冲液中添加Fe离子，稳定剂<0.1%。
定值范围：（80.0～120.0）μmol/L。
校准品具有批特异性，详见瓶签。
预期用途：本产品用于体外定量测定人体血清或血浆中铁离子的含量。
2.1 外观液体双试剂：R1：无色透明液体； R2：黄绿色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3溯源性根据GB/T 21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，该校准品可溯源至国家标准物质GBW08616。
2.4 试剂空白吸光度在37℃、600 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度（A）应<0.3。
2.5 分析灵敏度测定浓度为50μmol/L时，吸光度差值（△A）应在(0.085～0.180) 范围之间。
2.6 线性范围在[2，120]μmol/L线性范围内，线性相关系数r2≥0.996。
在（50，120]μmol/L范围内的相对偏差≤10%；测定结果[2，50]μmol/L时绝对偏差≤5.0μmol/L。
2.7 重复性试剂盒测试项目重复性 CV< 6%。
2.8 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应< 6%。
2.9 准确度相对偏差：用参考物质作为样本进行检测，测量结果与参考物质靶值的相对偏差应不超过±10%。
2.10稳定性2.10.1效期稳定性原包装试剂（含校准品）在（2～8）℃下有效期为18个月，取失效期的试剂盒检测其试剂空白、分析灵敏度、线性范围、重复性、准确度应分别符合2.4、2.5、2.6、2.7、2.9的要求。
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组织铁含量检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4350
规格：50T/48S
产品内容：
提取液：液体55mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×2瓶，4℃保存；临用前配制，加入7.5mL蒸馏水充分溶解，试剂一变黑后则不能使用；
试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；临用前配制，加入375μL冰醋酸，加入12mL蒸馏水充分溶解；溶解后4℃保存一周；
标准液：液体3mL×1瓶，1μmol/mL Fe3+标准液，4℃保存；临用前稀释8倍即0.125μmol/mL的标准溶液进行实验，现用现配。
产品说明：
铁是人体必须的微量元素之一，它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分，帮助氧的运输，促进脂肪氧化。
缺乏铁元素容易造成贫血、代谢纷乱，并影响机体的免疫功能。
亚硫酸钠还原Fe3+生成Fe2+，Fe2+进一步与2,2’-联吡啶显色，在520nm处有吸收峰，测定该波长吸光度即可计算铁含量。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、氯仿、冰和蒸馏水。
测定操作：
1、样本处理：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。
4000g4℃离心10分钟，取上清。
2、操作步骤：
（1）可见分光光度计预热30min，波长调至520nm。
蒸馏水调零。
（2）加样表：
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加入试剂（μL）空白管测定管标准管蒸馏水400--
--400
0.125μmol/mL标准
液
样本-400-
试剂一200200200
试剂二400400400
混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却；加入200μL氯仿（自备），充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液800μL，加入1mL玻璃比色皿，于520nm立即测定吸光度，分别记为A空白管，A测定管，A标准管，计算ΔA标准=A标准管-A空白管，ΔA测定=A测定管-A空白管。
3、组织铁含量计算：
（1）按组织鲜重计算:
组织铁含量（μg/g鲜重）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷W
= 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W
（2）按组织蛋白浓度计算
组织铁含量（μg/mg prot）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷（Cpr×V提取）
= 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr。
C标准液：0.125μmol/mL Fe3+标准液；55.845：Fe的相对分子质量，55.845μg/μmol；Cpr：样品蛋
白浓度，mg/mL；W：样品质量，g；V提取：提取液体积，1mL。
注意事项：
1、当ΔA大于1时，建议将样品用提取液稀释后进行测定；ΔA过小时，可增加酶促反应时间（1h或2h）或
增加加入的样品体积来测定。
2、试剂一溶解变黑后则不能使用；试剂二有毒性，做好防护措施。
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