【中鉴】实验1 制片技术(仅供参考) (1)
实验一中药显微鉴定技术

实验一中药显微鉴定技术【目的要求】1.把握常用细胞壁显微鉴定技术2.把握常用细胞内含物显微鉴定方法3.练习显微观看方法【仪器、试剂、材料】1.仪器生物显微镜,目镜测微尺,镜台测微尺,显微描画器,镊子,解剖针,载玻片,盖玻片,酒精灯,单面刀片,粉碎机,绘图板,铅笔等。
2.试剂水合氯醛试剂,苏丹Ⅲ试液,稀甘油试剂,盐酸,硝酸,碘化铋钾试剂,氯化锌碘试液,硫酸,α-萘酚浓硫酸试液,碘试液,间苯三酚试液,钌红试液,硝酸汞试液,乙醚,石油醚,90%乙醇,70%乙醇,α-萘酚乙醇溶液,稀盐酸,稀醋酸等。
3.药材样品牛膝、薄荷、石斛、4.药材粉末大黄、肉桂、山药、黄芪、金银花、红花、洋金花、半夏、桔梗、木香、穿心莲【实验内容】一、用于组织切片及粉末药材的封藏剂1.水合氯醛试液为常用优良的化学透亮剂之一,特点是能迅速透入组织,使干燥收缩的细胞逐步膨胀复原,并能溶解大多数细胞内含物,如淀粉粒、叶绿体、菊糖、树脂、蛋白质、挥发油等,使细胞组织清晰透亮,易于观看。
用水合氯醛装片可观看各种组织特点,各种结晶,如草酸钙结晶、碳酸钙结晶和硅质块,各类细胞形状,如导管、纤维、石细胞、木栓细胞等。
不加热装片可观看菊糖、橙皮苷结晶等。
天冷时,水合氯醛装片后易析出结晶,可加一滴稀甘油幸免。
2.稀甘油为物理性透亮剂,能较快的透入组织,形成良好的透光条件,一样作临时封藏剂,常用于观看胡粉粒和菌丝等。
3.甘油醋酸(斯氏液)用于观看淀粉粒或测量其大小的封藏剂。
也能够用乳酸酚溶液代替。
4.乙醇依照不同目的,选用不同浓度的乙醇装片。
50%以上浓度的乙醇能够固定乳管;80~90%浓度的乙醇能够固定和观看菊糖;95%的乙醇能够观看黏液细胞;100%乙醇可用于植物叶绿体脱色;低浓度(10~30%)乙醇能够代替水软化含黏液质的材料。
5.蒸馏水能够溶解水溶性物质,透入组织较快,但不能溶解大多数细胞内含物,透亮度差,易干燥。
可用于检查淀粉粒的有无或配合其他试剂检查细胞壁和细胞内含物的性质。
中药师考点:中药鉴定显微鉴定法

中药师考点:中药鉴定显微鉴定法
中药师考点:中药鉴定显微鉴定法
显微鉴定(microscopical identification)法是利用显微技术对中药进行显微分析,以确定其品种和质量的一种鉴定方法。
适用于性状鉴定不易识别的药材、完整的、破碎的或粉末状药材以及含饮片粉末的各种中成药制剂的鉴定。
显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定,通过显微镜观察药材的组织构造、细胞形状及内含物的特征、矿物的光学特性和用显微化学方法确定细胞壁及细胞内含物的性质或某些品种有效成分在组织中的分布等,用以鉴别药材的真伪与纯度甚至品质,以及对中成药是否按处方规定投料进行鉴定。
显微鉴定时可根据检品的`不同情况(完整药材、破碎药材、粉末或中成药等)选择具有代表性的供试品,根据各品种的显微鉴别项制作相应的制片,进行显微观察和鉴别。
(一)显微制片方法
1.横切面或纵切面制片
2.表面制片
3.粉末制片
4.解离组织片
5.花粉粒与孢子制片
6.磨片制片
7.含饮片
(二)植物细胞壁和细胞后含物性质的鉴别
1.细胞壁性质的鉴别
2.细胞后含物性质的鉴别
(三)显微测量
(四)显微临时制片常用封藏试液
(五)扫描电子显微镜和偏光显微镜的应用
1.电子显微镜(简称电镜)
2.偏光显微镜。
实验一 组织制片技术(一)

实验一组织制片技术(一)【实验原理】显微鉴定法就是利用显微镜、显微技术及显微化学方法等对中药进行分析鉴定的方法。
可以确定中药的真伪、纯度、品质以及建立鉴别标准。
目前多数用于品种鉴定,部分用于定量分析。
在鉴定过程中,以采用显微镜观察动、植物的组织构造、细胞形状、内含物的特征以及矿物的光学特性等为主要内容。
按照鉴定的方法可分为组织鉴定、粉末鉴定、显微常数测定和显微定量等。
组织鉴定是粉末鉴定的基础,以粉末鉴定应用最为广泛。
显微鉴定是一项专门技术,需要有植物(动物)解剖学、矿物学的晶体光学、植物显微化学等基本知识,并掌握显微制片、显微观察和描述、显微摄影和绘图、显微测量等基本技术。
显微鉴定的主要仪器有各类光学显微镜和电子显微镜等,通常使用光学显微镜。
【目的要求】1.掌握显微制片方法2.掌握显微测量的方法和放大倍数的使用3.掌握显微特征的观察与描述方法和显微绘图技术4.熟悉掌握显微测定尺的使用方法5.了解显微摄影技术与方法【仪器、试剂、材料】1.仪器生物显微镜,目镜测微尺,镜台测微尺,显微描绘器,镊子,解剖针,载玻片,盖玻片,酒精灯,单面刀片,粉碎机,绘图板,铅笔等。
2.试剂水合氯醛试剂,苏丹Ⅲ试液,稀甘油试剂,盐酸,硝酸,碘化铋钾试剂,氯化锌碘试液,硫酸,α-萘酚浓硫酸试液,碘试液,间苯三酚试液,钌红试液,硝酸汞试液,乙醚,石油醚,90%乙醇,70%乙醇,α-萘酚乙醇溶液,稀盐酸,稀醋酸等。
3.药材样品:牛膝、薄荷4.药材粉末:大黄、肉桂、山药【实验内容】一、显微鉴定1.组织鉴定组织鉴定是通过观察中药的组织构造特征来达到鉴定目的,主要用于个体较小的完整药材鉴别。
通常用以鉴别药材性状特征不明显或外形相似而组织构造不同的类似品、混淆品、代用品、伪品,或用于多来源药材的对比鉴别,也可用于确定某种化学成分的存在部位,以考查质量。
一般地说,组织鉴定对不同科属来源的药材鉴别比较容易,对于相同科属来源的药材鉴别比较困难。
《药材商品鉴定技术》实验一显微镜使用、粉末制片、测量

更不可倾斜拿。 6.新载玻片、盖玻片必须清洗干净并干燥后才能使用。 7.粉末取样多少以火柴头大小为宜,制片透亮为度。 8.盖玻片下的水液刚好在盖玻片内,不能溢出。
实验 显微观察的注意事项和粉末的制片
例:目镜为10*,物镜为40*时,测得淀粉粒直径占目微 尺9小格,则该淀粉粒直径为3.8μm*9=34.2μm
【实验步骤】
1.准备好下列器材:试剂、显微镜,临时制片用 具(酒精灯、载玻片、盖玻片、镊子、擦镜纸、吸 水纸等),水合氯醛试液,稀甘油,蒸馏水,中药 标本及粉末等。
2.操作 (1)显微镜的使用 (2)临时制片:请同学们分别制作稀甘油装片、水
异物的检查:是在目镜还是物镜上——转动目镜异物 随之而动,则目镜不清洁;反之在物镜上,再做相应的 清洁。
二、粉末制片
显微制片分类: A 临时制片、永久制片 B 组织制片、粉末制片、表面制片、 解离制片(氢氧化钾解离液、硝铬酸解 离液、氯酸钾解离液)、磨片切片等。
永久制片
杠柳茎横切面详图
局部特征
杠柳茎的横切面详图
四、要爱护一切实验用标本、材料。实验进行前,不得随意 乱动或挑选,观察后放回原处,不得私自带出室外。试 剂及消耗性的材料,应按规定用量使用,不得浪费。
五、除特殊情况经教师同意外,实验报告应在实验课结束前 交给指导教师。
六、实验结束后,将实验桌上物品整理好,公共用具应放回 原处。
实验室注意事项
一、实验前的准备工作 准备好各种自备的实验用品(报告纸,2H或3H铅笔、橡皮、短尺、小
当测定时要用不同的放大倍数时,应分别标定。 例:书p427
(完整)(12级中药学)中药鉴定学实验讲义

(完整)2015(12级中药学)中药鉴定学实验讲义中药鉴定学实验讲义实验一组织制片技术与显微测量一、实验目的与要求1。
掌握徒手制片、粉末制片技术。
2.掌握中药的显微测量法。
3.掌握大黄的显微鉴别特征。
4。
熟悉永久制片、整体封固制片、表面制片的制片方法。
5。
识别所列中药标本。
二、实内容验1.徒手制片:(橘皮的徒手切片)动作要快,切片薄而完整.2.粉末制片:用木签取大黄粉末少许,放于一个载玻片上(中央),滴加水合氯醛2—3滴,用木签搅匀,在酒精灯上先均匀受热,然后把粉末置于酒精灯的外焰处加热,水合氯醛刚沸就马上移开,添加水合氯醛防止蒸干。
加热至粉末组织变为透明即可。
待玻片稍冷再滴加稀甘油一滴,盖上盖玻片,用吸水纸纸擦干净盖玻片周围。
于显微镜下观察.3.大黄粉末特征观察:(1)草酸钙簇晶(众多,棱角大多短钝);(2)淀粉粒(大多圆球形,脐点常呈星状和十字状);(3)网纹和具缘纹孔导管(具缘纹孔椭圆形或斜方形)。
4.显微测量定标:摄测微尺图片(拍摄时注意尽量保持测微尺水平)——图片保存——打开保存的测微尺图片,点击工具栏上的图标—-点击添加按钮—-画线,计算实际距离(多次测量)—-保存入库完成不同放大倍数下显微标尺的定标数据测量及标注:打开图片文件-—设定倍数(单击工具箱中的定标)-—选择定标号(当前倍率改为“是”)——测量测定大黄粉末中簇晶和淀粉粒的直径:选最大、最小和常见的中等大小的簇晶和淀粉粒各五粒,进行测量。
最后取平均值作为淀粉粒和簇晶的直径最大、最小和最常见值.5. 观察所列中药标本三、实验报告要求1.绘大黄粉末组织的显微特征图.2.记录定标过程,记录大黄簇晶、淀粉粒的直径测定结果实验二中药挥发油的含量测定一、目的要求1.掌握中药挥发油测定的原理2.掌握中药挥发油测定的两种方法3.了解中药挥发油测定的意义二、基本原理将含挥发油的中药与水共同蒸馏,在低于100℃时,挥发油与水一起蒸馏出来,凝集于刻度管中,冷却后,油水自动分离为两液层,根据刻度可以读出样品中挥发油的含量。
2.中药材显微鉴定实验

粉末生药的描述原则
先多数后少数 先特殊后一般
先感观后测试
粉末生药显微特征描述要点
淀粉粒
先描写单粒,后描写复粒,大小,脐 点和层纹,崩裂或糊化等. 草酸钙结晶 描述其晶形(如方晶,柱晶,针 晶,簇晶,砂晶,双晶等),大小,结晶存在部 位及稀密情况等. 厚壁组织 通常分为纤维和石细胞,描述 其名称(如韧皮纤维,木纤维,内果皮石细 胞等),形状,宽度,长度,胞壁增厚情况,是 否木化,纹孔与孔沟的形状特点等.
三、绘图的基础知识
画图之前,应根据实验指导要求绘图的数 量和内容,在图纸上首先安排好各个图的 位置比例,并留出书写图题与注字的地方。 先绘草图,用HB铅笔轻轻地在图纸上勾 画出图形的轮廓,再对细小的部分逐步添 加。线条要一笔勾出,粗细均匀,光滑清 晰,接头无叉和痕迹(切忌重复描绘)。 绘图及注字一律用铅笔。实验题目写在绘 图报告纸的上方,图题和所用的植物材料 的名称和部位写在图下方,并注明放大倍 数。
非腺毛:完整的非腺毛由1~8个细胞组成, 常弯曲,壁厚2~7 µm,外壁有细密疣状突 起。 表皮细胞:叶片上表皮细胞表面观不规则 形,垂周壁略弯曲;下表皮细胞垂周壁波 状弯曲,细胞中常含淡黄色橙皮苷结晶; 气孔直轴式。 导管 木纤维
薄荷
茎横切面显微特征
表皮为1列长方形细胞。 皮层薄壁细胞数列,排 列疏松,四棱角处由厚 角细胞组成。 内皮层明显。 韧皮部狭。 形成层成环。 木质部在四棱处发达。 髓薄壁细胞大,中心常 有空洞。
菌类生药--茯苓粉末显微特征
用稀甘油装片,可见 无色不规则形颗粒团 块、末端钝圆的分枝 状团块及菌丝。菌丝 细长,稍弯曲,有分 枝,无色或带棕色 (外层菌丝)。 遇水合氯醛液粘化成 胶冻状,加热团块物 溶化。
制片——精选推荐
徒手切片法1. 特点和应用徒手切片法又称手工切片法,它是一种观察高等植物体内部结构的简单易行的制片方法。
优点是简单节省,只要一把锋利的剃刀或一把单(双)面刀片,就能做活体或鉴定观察,但也有一些不足,如切片的厚薄不均,不能作连续切片,有些材料处理较困难等。
2. 制片步骤1)取材依据研究或观察目的取材,尽量挑选新鲜、有适当坚韧性、能抗刀压的材料。
材料的大小,以适于抓握、粗细长短合适为准。
对叶片、幼根等细小、柔软的材料,应同时考虑选用适当的夹持物。
2)切片选用锋利的刀片,人坐直,双手和臂保持自然状态。
抓握材料以左手的拇指、食指和中指为主,食指尽量保持水平,拇指位置略低于食指;右手执刀,刀口向内,刀身尽量保持水平。
切片时,用臂力自左前方向右后方拉切。
注意保持切面的平整和湿润,切下的薄片,及时用毛笔刷入水中,理想的切片应是完整、均匀、近于半透明的薄片。
3)固定切好的薄片一般以70%的酒精固定15~30分钟,或作为临时观察,或制成永久制片。
4)染色、脱水、透明、封片常用染色法有“苏木精-番红法”和“番红-苯胺蓝法”,以不同酒精浓度进行梯度脱水,以系列二甲苯溶液或樟脑油透明,最后以中性树胶封片。
如只作临时观察,则选用10%左右的水配甘油作透明剂,并可保湿数小时。
5)整理、贴标签封片后,应及时贴上标签。
标签上写明材料名称、取材器官、切片方向、制片人和制片日期等。
石蜡制片法1. 特点和应用石蜡制片法诞生于1882年,是观察植物体内部细微结构和组织发育动态过程的重要技术之一。
凡能承受石蜡制片过程中各种药剂处理的材料都可用此法,它能将植物材料切成较薄(2~4μm)、均匀且连续的切片,为其他制片方法所不及。
但石蜡制片法需时较长,设备药品需要量大,易使材料变硬、变脆,有些质地坚硬的材料需经特殊处理,才能得以顺利切片等。
尽管如此,仍然受到人们的青睐而被广泛应用。
2. 制片步骤1)取材根据研究目的与要求,选取健全、有代表性的植物器官或组织。
《中药鉴定学》实验内容36学时【范本模板】
实验项目一:粉末制片技术和大黄的鉴别1、实验目的和要求(1)掌握粉末制片技术的方法(2)掌握大黄的粉末特征(3)掌握大黄的理化鉴别2、实验内容(1)应用粉末制片技术观察大黄的粉末结构特征粉末制片法将生药粉末制成显微观察片的一种方法粉末制备:将大黄用粉碎机粉碎成粉末,再用药典规定的5—6号筛子过筛,使粉末较细而均匀,有利于制片观察.制片试液选择:若需观察薄壁细胞、淀粉粒、油滴或黏液细胞时,加水或醋酸甘油作试液。
若观察纤维、石细胞、导管、晶体等,加水合氯醛试液透化,有利观察。
大黄粉末:淡黄棕色.1)草酸钙簇晶众多.棱角多短钝。
2)大型导管多为网纹,非木化或微木化,少有具缘纹孔导管及细小螺纹导管。
绘图(2)大黄的理化鉴别微量升华:大黄粉末微量升华得黄色针状结晶,高温则得棱状至羽毛状结晶.3、实验仪器仪器:生物显微镜、酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、吸水纸、火柴、绘图铅笔、铁片、金属圈、石棉板。
试剂:水合氯醛、甘油、水药材:大黄粉末4、实验学时 4学时实验项目二:表面制片技术和甘草粉末鉴别1、实验目的要求(1)掌握表面制片技术(2)掌握补骨脂的表面特征(3)掌握甘草的粉末特征2、实验内容(1)应用表面制片方法观察补骨脂的果皮特征表面制片方法系将表皮组织制成显微观察片的一种方法。
适用于观察叶片、花瓣、花萼的表皮组织的形状、气孔、腺毛、非腺毛的类型和角质层的纹理以及各种细胞内含物等的显微特征.补骨脂:壁内腺:类圆形,表皮细胞多达数十个至百个,中心细胞较小,多角形,周围细胞径向延长,辐射状排列,腺体腔内有众多油滴.绘图(2)应用粉末制片技术观察甘草的粉末结构特征在载玻片上加水合氯醛2—3滴,放入粉末,并用镊子尖头或解剖针搅拌均匀,用镊子夹住玻片,放在酒精灯上加热,见冒烟起泡时立即取下,切勿烧干,再加水合氯醛试液l—2滴,重复2-3次,见粉末颜色较浅组织透明后,再加1-2滴水合氯醛试液,防止片内结晶.再盖上盖玻片。
实验一 中鉴显微技术08.3
应无气泡或仅有小气泡
石蜡切片制片程序简介: 当选择好材料后,实验的 主要过程有以下步骤:固定或软化—>冲洗—>脱水
—>透明—>浸蜡—>包埋—>切片—>贴片—>烘片—>
脱蜡—>二重染色—>封片A)材料的固定或软化: 最 好用新鲜的固定材料(新鲜材料要迅速杀死植物细胞, 最大程度保持组织和细胞的自然状态,这就是所说的 杀死和固定)。
3、图版的排列设计、大小和放大倍数(以后介绍) 4、修正铅笔图 5、图注和图名 6、注意事项:突出重点、大小适中。
四、实验练习:
●封藏剂使用练习
1.山药粉末 2.甘草粉末 淀粉粒 + 甘油醋酸装片 纤维 +水合氯醛试液 ▲ 形状、脐点、层纹 形状、颜色
●显微化学试剂使用练习
1.山药粉末 2.小茴香粉末 3.党参粉末 淀粉粒 + 甘油醋酸装片 + 稀碘液 糊粉粒 + 稀甘油装片 + 碘试液 + -萘酚+浓硫酸 菊糖 + 稀甘油或水合氯醛试液 形状、脐点、层纹 蓝黑色 胚乳细胞中小颗粒 棕色或棕黄色 形状、颜色 溶解,浓紫色
2、详图中各类细胞的表示法: 单线条法:适于薄壁细胞 双线条法:适于略增厚壁的细胞 三线条法:适于成群的厚壁细胞及导管;单个散在时,采 用双线条法。 3、各型铅笔的使用: HB型:粗线条。绘厚壁细胞、导管的外缘线; H型:中线条。绘薄壁细胞、结晶体、淀粉粒等; 3H型:细线条。绘厚壁细胞、导管的内缘线、层纹、纹孔 等
(5)α -萘酚试液
加-萘酚试液,再加浓硫酸,菊糖溶解,溶液显紫红色。
(6)钌红溶液 粘液质显红色。加墨汁,各种组织均为黑色,粘液细胞呈透明状。或 用95%乙醇装片后,自玻片一边引入一滴蒸馏水,粘液质膨胀溶解而扩散。 (7)稀醋酸 草酸钙结晶不溶解。 (8)稀盐酸 草酸钙结晶和碳酸钙结晶均溶解,而碳酸钙结晶溶解时产生气泡。 (9)20%硫酸 草酸钙结晶和碳酸钙结晶均溶解,并生成硫酸钙针晶,但碳酸钙结晶 溶解时产生气泡。
中药鉴定专项技能—显微鉴定技术
三、显微镜使用注意事项
1.搬动显微镜时,要一手握镜臂,一手扶镜座,两上臂紧靠 身体。切勿一手斜提或前后摆动,不要发生太大震动,以防镜 头或其他零件跌落。
2.观察标本时,显微镜离实验台边缘应保持一定距离(5cm), 以免显微镜翻倒落地。
3.使用时要严格按步骤操作,熟悉显微镜各部件性能,掌握 粗、细调节钮的转动方向与载物台升降关系。转动粗调节钮向 下时,眼睛必须注视物镜头。
二、使用方法
(2)高倍镜的使用
①依照低倍镜操作步骤,先用低倍镜找到清晰物像。
②将需要观察的部分移到视野的中央。
③眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜40X。
④眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,直至视野内看到清晰的物 像为止。此时应把聚光器的孔径光阑适当调大,使之与物镜的镜口率相匹配。光 源的强度也应调高。
党参菊糖(水合氯醛装置)
五、装置液的作用
水合氯醛装 置液的作用
➢使细胞膨胀,便于观组织、细胞及 其内含物特征。 ➢去除细胞表面或内部杂质。 ➢增强透明度。
五、装置液的作用
稀甘油装置 液的作用
➢增加透明度。 ➢防止气泡生成。 ➢防止水合氯醛结晶析出。
显微鉴定技术
目录
CONTENTS
01 02 03
二、测微尺的使用方法
中药粉末制片
目录
CONTENTS
01
02
03 04 05
粉末临时制片操作要领 水装片或斯氏液装片 水合氯醛加热透化装片 水合氯醛或乙醇装片 装置液的作用
一、粉末临时制片操作要领
➢粉末用量:米粒大小,尽可能少。 ➢每次滴加装置液2~3滴。 ➢每次滴加装置液后需要搅拌均匀。 ➢控制搅拌范围约为盖玻片大小。 ➢如加热透化,则重复进行3~4次, 沸即离火,勿烧干、焦。
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金银花腺毛
金银花花粉粒
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四、叶表皮撕片
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叶表皮撕片适用对象及操作 ¾适用对象:观察表皮细胞、气孔、毛茸。 ¾材料:通常为叶下表皮。
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天花粉粉末——淀粉粒
水合氯醛加热透化装片 ¾适用于除淀粉粒、菊糖以外的组织、细 胞、细胞后含物的观察。 ¾装置液:水合氯醛(水合三氯乙醛)、 稀甘油。 ¾需要加热。
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¾装片 将切片以镊子夹出,置于滴加了甘油的载 玻片上,加上盖玻片;或滴加水合氯醛加热透 化,滴加稀甘油后加上盖玻片。
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木栓层 毛茸 皮层 韧皮纤维 /中柱鞘纤维 韧皮部 木质部 髓部
天花粉粉末——石细胞
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天花粉粉末——石细胞
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天花粉粉末——具缘纹孔导管
水合氯醛或乙醇装片 ¾适用于观察菊糖。 ¾装置液:水合氯醛或乙醇。 ¾不可加热,否则菊糖溶解。
目镜 镜筒 镜臂 物镜 载物台 集光器及光阑 细调 推进器 粗调 镜座 光源透镜
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低倍镜
油镜 高倍镜
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物镜 ¾低倍镜:4×、10 × ——用于观察整体结构、寻找特定特征。 ¾高倍镜:40 ×、100 ×(油镜) ——用于观察特定细微结构与组织特征, 油镜较为少用。
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徒手切片——桑枝横切面
作业与思考 1. 实验完成后,应如何对显微镜进行保养? 2.在显微镜下如何寻找和观察特定的组织、 细胞和细胞内含物? 3.制作粉末水合氯醛透化片的操作应注意哪 些方面? 4.显微制片中水合氯醛和稀甘油具有什么作 用?
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¾操作:以镊子自下表面夹住少许叶片,往 一侧撕取表皮。将撕下的表皮外表面朝上 置于滴有1~2滴水的载玻片上,使其自然展 开,盖片观察。
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何首乌叶下表皮组织 广州中医药大学 黄海波bobhwang65@
稀甘油装置液的作用 ¾增加透明度。 ¾防止气泡生成。 ¾防止水合氯醛结晶析出。
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三、整体透化装片
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整体透化装片的目的与操作 ¾目的:避免出现有些组织在粉末中破碎 或不完整而影响观察。 ¾材料:多为叶或花。
五、徒手制片
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徒手制片的目的及材料
¾目的:观察组织构造、细胞特征 ¾材料:新鲜、干燥或经固定的材料
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常用固定液——FAA固定液: 70%乙醇 90ml
福尔马林(37%~40%甲醛) 5ml 冰醋酸 5ml
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¾加盖玻片时应先一侧接触装置液,缓缓 放下,最后抽出镊子,以排除气泡。 ¾以吸水纸吸去溢出的装置液。 ¾稍放置后,镜检。
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水装片或斯氏液装片 ¾适用于观察淀粉粒。 ¾装置液:蒸馏水或斯氏液(甘油醋酸)。 ¾不可加热,否则淀粉粒糊化。
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¾取材 材料分割成适当大小,直径必须小于 盖玻片。 ¾材料软化或冲洗 坚硬的干燥材料于稀甘油10%醋酸液中 煮至表面无气泡。 固定材料需在流水中冲洗12小时以上。
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¾操作:取新鲜或已软化的中药材,用拇指及 食指和中指夹住材料,下端用无名指托住,另 外一只手持刀片,自左向右移动手腕,牵曳切 片。 ¾操作时材料的断面与刀口须经常用水湿润。 ¾以毛笔将切好的薄片移入在盛水培养皿 中浸泡。
寻找组织、细胞等方法 在低倍镜下以“之”字形运动
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使用过程及使用后的保养 ¾显微制片必须将多余的装置液清理干净, 以免沾染镜头。 ¾如目镜与物镜被沾染,则以镜头纸从中 央向四周以划圆圈的方式擦拭。必要时 还要使用去污剂擦拭。
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使用注意与技巧 ¾先低倍后高倍,即先整体后局部 ¾之字形扫描式寻找需要观察的特征 ¾由低倍镜转成高倍镜后,只能使用微调 ¾高倍镜观察时,应通过控制光源强度、 集光器高低、虹彩光阑的张合,并结合 微调,使被观察物清晰。
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党参菊糖(水合氯醛装置)
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水合氯醛装置液的作用 ¾使细胞强透明度。
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¾使用完毕后,移去玻片,按上述方法擦 拭,将最低倍物镜转入光路,载物台复位。 ¾关闭电源,拔下插座,盖上防尘罩。 ¾在相应使用登记本上签名。
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二、粉末临时制片
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粉末临时制片操作要领 ¾粉末用量:米粒大小,尽可能少。 ¾每次滴加装置液2~3滴。 ¾每次滴加装置液后需要搅拌均匀。 ¾控制搅拌范围约为盖玻片大小。 ¾如加热透化,则重复进行3~4次, 沸即离火,勿烧干、焦。
实验一 显微镜的使用保养 与中药临时制片技术
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一、显微镜的使用和保养
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显微镜的结构 ¾镜座 ¾镜臂 ¾镜筒 ¾载物台 ¾光路系统:目镜、物镜、集光器、光源
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¾操作:切或剪取叶或花约4mm2 ,外表朝 上,透化后观察。 ¾装置液:水合氯醛、稀甘油。 ¾需要加热。
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金银花两种非腺毛