猪繁殖与呼吸综合症与猪圆环病毒-2型对猪瘟抗体的影响
合集下载
猪瘟的主要致病机制以及临床诊断要点
疫病防治LIVESTOCK AND POULTRY INDUSTRY No.4,2245猪瘟的主要致病机制以及临床诊断要点刘东尧(西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌712100)摘要：猪瘟(classical swine fever)是威胁我国养猪业发展的重要传染病之一。
猪瘟病毒的持续性感染是防控猪瘟中最棘手的问题。
猪瘟病毒主要的致病机制是激活巨噬细胞，导致过渡的免疫反应而造成大量免疫细胞的凋亡、损伤。
在临床诊断中，非典型性猪瘟占比绝大多数。
临床表现温和，症状渐进。
与其他有相似症状的"瘟症"区分有一定难度。
从猪瘟病毒的病毒结构、复制过程、致病机制与病理表现与临床表现5个角度出发，阐述猪瘟的发生发展过程与临床诊断要点。
关键词：猪瘟；临床；诊断；猪病doi：10.12567/(.cnki.1008-0414.7021.02.6451猪瘟病毒概述猪瘟病毒(classical swine fever virus)属于黄病毒科瘟病毒属，是单股正链RNA病毒，具有囊膜，囊膜外具有纤突。
病毒粒子呈球形，核衣壳是对称的20面体。
位于病毒核心的RNA 总长约为12.3kB蛋白质编码区两端由NTR相连接。
基因组编码5种蛋白质。
4个结构蛋白和9个非结构蛋白。
4个结构蛋白分别是核心蛋白(C)和包膜糖蛋白E5E2和E rns。
9个非结构蛋白分别是N pu、p7、NS2-3、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B。
这些非结构蛋白在病毒复制增殖的过程中起到各种各样的作用。
CD46是猪瘟病毒感染细胞的主要受体,在用细胞培养猪瘟病毒时,通常情况使用猪源原代或者传代细胞来培养猪瘟病毒。
猪瘟病毒由受体介导的内吞作用进入细胞质，并且开始增殖。
在体外条件下，用于培养猪瘟病毒的细胞不产生病变。
宿主细胞膜表面的CD46与硫酸乙酰肝素被认为是介导病毒内吞的受体,E RNS首先与细胞膜表面的糖胺聚糖相互作用并且在E2E1异二聚体的辅助下与CD46相互作用，刺激细胞开始内吞带囊膜的病毒颗粒。
猪圆环病毒2型感染对猪瘟弱毒疫苗接种猪免疫应答的影响
中 Ｉ Ｆ Ｎ一 、Ｉ Ｌ 一 ２ 、Ｉ Ｌ 一 ４和 Ｉ Ｌ 一 １ ０ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的 表 达 水 平 。结 果 显
示 ，在 Ｃ Ｓ Ｆ弱 毒 疫 苗 免 疫 前 或 免 疫 后 感 染 Ｐ Ｃ Ｖ ２ ，均 会 导 致 Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ抗 体 水 平 低 下 ，血 清 抗 体 阳转 率 下 降 ，Ｐ Ｂ Ｌ Ｃ增 殖 活 性
ｓ ｅ ｍ ｉ ｎ ａ ｔ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｒ ａ ｖ ａ ｓ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｃ ｏ ａ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｄ ｏ ｅ ｓ ｎ ｏ ｔ ｐ ｌ ａ ｙ ａ ｍａ ｊ ｏ ｒ ｒ ｏ ｌ ｅ ｉ ｎ
ｔ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｃ ｌ ａ ｓ ｓ ｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｗ ｉ ｎ ｅ ｆ ｅ ｖ ｅ ｒ ．Ｖｅ ｔ Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ｏ ｌ ，２ ０１ ３ ，
着 仔 猪 日龄 的 增 长 而 呈 逐 渐 下 降 的趋 势 ；３ ５ — ４ ０天仔 猪 母 源
同病毒滴度 的 Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ 毒 株 ，推 测 毒 株 自身 对 疾 病 的 影 响 ，评 价 宿 主 和环 境 的 对 疾 病 影 响 力 。 给 断 奶 仔 猪 连 续 ３周 注 射 ４ 株Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ（ 其 中 ２株 为 新 分 离 毒 株 ，２株 为之 前 发 现 的 毒 株 ， 但 均 在 与丹 麦 猪 亲 缘关 系较 远 的 猪 种 中 未 曾检 测 到 ） ，并 进行
苗免疫前或 免疫后感染 Ｐ Ｃ Ｖ ２均 会 影 响 机 体 的 体 液 和 细 胞 免
疫 应 答 水 平 。导 致 Ｐ Ｂ Ｌ Ｃ 内 细胞 因 子 的 表 达 受 到 严 重 抑 制 并 发生 紊乱 。
１ ６ ２（ ２ － ４ ）： ３ ６ ０ — ３ ６ ８ ．
示 ，在 Ｃ Ｓ Ｆ弱 毒 疫 苗 免 疫 前 或 免 疫 后 感 染 Ｐ Ｃ Ｖ ２ ，均 会 导 致 Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ抗 体 水 平 低 下 ，血 清 抗 体 阳转 率 下 降 ，Ｐ Ｂ Ｌ Ｃ增 殖 活 性
ｓ ｅ ｍ ｉ ｎ ａ ｔ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｒ ａ ｖ ａ ｓ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｃ ｏ ａ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｄ ｏ ｅ ｓ ｎ ｏ ｔ ｐ ｌ ａ ｙ ａ ｍａ ｊ ｏ ｒ ｒ ｏ ｌ ｅ ｉ ｎ
ｔ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｃ ｌ ａ ｓ ｓ ｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｗ ｉ ｎ ｅ ｆ ｅ ｖ ｅ ｒ ．Ｖｅ ｔ Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ｏ ｌ ，２ ０１ ３ ，
着 仔 猪 日龄 的 增 长 而 呈 逐 渐 下 降 的趋 势 ；３ ５ — ４ ０天仔 猪 母 源
同病毒滴度 的 Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ 毒 株 ，推 测 毒 株 自身 对 疾 病 的 影 响 ，评 价 宿 主 和环 境 的 对 疾 病 影 响 力 。 给 断 奶 仔 猪 连 续 ３周 注 射 ４ 株Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ（ 其 中 ２株 为 新 分 离 毒 株 ，２株 为之 前 发 现 的 毒 株 ， 但 均 在 与丹 麦 猪 亲 缘关 系较 远 的 猪 种 中 未 曾检 测 到 ） ，并 进行
苗免疫前或 免疫后感染 Ｐ Ｃ Ｖ ２均 会 影 响 机 体 的 体 液 和 细 胞 免
疫 应 答 水 平 。导 致 Ｐ Ｂ Ｌ Ｃ 内 细胞 因 子 的 表 达 受 到 严 重 抑 制 并 发生 紊乱 。
１ ６ ２（ ２ － ４ ）： ３ ６ ０ — ３ ６ ８ ．
猪圆环病毒2型感染与猪瘟混合感染的诊治
神 经症状 ： 牙 、 磨 痉 不 同程度的充血 ， 上有针尖大小的出 黏膜
挛 、 交叉 、 脚 站立不 血点。肺脏淤血、 肿大 ， 有散在 、 大而隆起
稳 。怀孕流产 、 木乃 橡皮状的硬块 ， 出现黄褐 色斑点散布于肺
伊胎 、 畸形 、 胎、 死 有 表面。 严重的病例 出现出血 ， 部分病例 尖
为猪圆环病毒 病与猪瘟混合感 染。
睑 黏在一起 。 拨开 眼睛 ， 结膜 苍 白 ， 贫 切面有灰白色坏死点或 出血斑点 。 有 此病变
血 表现 。 耳 、 在 四肢 在剖检 中占９ ％淋 巴结外观充血肿胀 ， ０ 切 内侧 、 下 有 出血 面周边 出血 ， 腹 呈红 白相 间的“ 大理石样” 。 斑 和 出血 点 ， 压 脾脏不肿大 ， 指 边缘发现楔 状梗死 区。 肾皮 不 褪 色 。 别 猪有 质 色泽变淡 ， 个 有点状 出血 。 膀胱黏膜表现
高度接 触性 传染 病 。 猪瘟可 以侵 害猪 的免疫 系统 （ 巴结 、 淋 脾脏 、 腺等 ） 官 ， 致免 疫力 低下 。 胸 器 导 圆环
病毒病 也可 以导 致猪 的免疫 系统 得到 抑制 。 当两种 免 疫低下 病 混合感 染 时 ， 害更加 严重 ， 当引起 危 应 养殖者 的高 度重 视 ， 掌握 圆环病毒 和 猪瘟感 染的联 合 防控措 施 。 本文 就一 起典型 的 圆环病 毒 ２ 型感染 与猪瘟 混 合 感染 病例 ， 阐述 具体 防控 措 施 。
譬
３ 实验窒检测
胶 中电泳 ， 在紫外透射仪 中观 察结果 。 结 瘟病毒和 圆环病毒２ 型亚临床感染状态 ，
在对照试验成立条件下 ， 圆环病 临床 上不表现 出症状 。 只有在断奶 、 冷热 根据临床症状、 流行病学特点 、 病理 果显示 ，
猪圆环病毒2型与猪瘟混合感染的诊疗报告
２ 病理变 化
２ 对全 场 ５ ８周 龄保育 猪紧 急接种猪 瘟脾 淋疫 ） ～ 苗， 其免 疫 剂量 是正 常 免疫 剂量 的 ３ ５倍 。采 集 不 ～ 同 阶段 猪群 的血 清进行 猪瘟抗 体检 测 ，发 现问题 及
时调整 免疫程 序 。 ３ 从 提 高猪 群 的免疫 力 着手 ． ） 比如 采用 各 阶段 猪全 进全 出 的方式 ， 少不 同群之 间的感 染 ； 减 加强 饲 养管 理 ， 减少 猪 群 的应激 因 素 ； 高猪 群营 养水 平 ， 提 增强抗 病能力 ； 做好 疾病 的疫苗 和药 物预 防工作等 。 ４ 在全 场小猪 饲料 中按每 吨饲料 添加 氟苯尼 考 ）
６ 中药 （ 芪多 糖 、 ０ｇ和 黄 板蓝 根 、 金银 花 等药 物 ）并 ， 在 患 猪 饮 水 中适 量 添加 水 溶 性 抗 生 素 和 复合 维 生 素， 以抵御 疾病 的侵袭 ， 减少 继发感 染 。 采用上 述 防治措施 后 ， 情很快 得 到控制 。 回 疫 经
访调 查 ， ３周后 发 病猪 病情 均 明显好 转 ， 食欲逐 渐 恢 复， 生产情况 基本 稳定 。
呈灰 黄色 ， 弥 漫性 针尖 状 出血 点或 坏死灶 ； 有 膀胱 有
少量 出血点 ； 胃底 黏膜有 少量 出血点 或溃疡 ； 别 患 个 猪在 回肠及肠 盲瓣有 不 同程度 的出血或 溃疡 。 ３ 实验室 检查
查 。根据临 床症状 、 病理 变化 开展 了猪 瘟 、 圆环病毒
２型 、 耳病 、 蓝 伪狂 犬病 、 菌学等 实验 室检 查 ， 细 结果
如下。
３１ 猪 瘟病毒 、 狂 犬病毒 、 繁 殖与呼 吸综合 征病 ． 伪 猪
毒 、 圆环病 毒检 测 采 用 常规 方法 分别 对 ３份病 料 提 取病 毒 Ｒ Ａ和 Ｄ Ａ， 用 Ｒ — Ｃ Ｎ Ｎ 采 Ｔ Ｐ Ｒ或 Ｐ Ｒ方 法 Ｃ 进行 猪瘟 、 繁 殖与 呼 吸综合 征 病毒 、 狂 犬病 毒 、 猪 伪 圆环病 毒等 病原检 测 ，结 果猪瘟 病毒 与猪圆 环病毒 ２型 为 阳性 ．猪 繁殖 与 呼吸综 合征 病毒 及伪 狂犬 病
２ 对全 场 ５ ８周 龄保育 猪紧 急接种猪 瘟脾 淋疫 ） ～ 苗， 其免 疫 剂量 是正 常 免疫 剂量 的 ３ ５倍 。采 集 不 ～ 同 阶段 猪群 的血 清进行 猪瘟抗 体检 测 ，发 现问题 及
时调整 免疫程 序 。 ３ 从 提 高猪 群 的免疫 力 着手 ． ） 比如 采用 各 阶段 猪全 进全 出 的方式 ， 少不 同群之 间的感 染 ； 减 加强 饲 养管 理 ， 减少 猪 群 的应激 因 素 ； 高猪 群营 养水 平 ， 提 增强抗 病能力 ； 做好 疾病 的疫苗 和药 物预 防工作等 。 ４ 在全 场小猪 饲料 中按每 吨饲料 添加 氟苯尼 考 ）
６ 中药 （ 芪多 糖 、 ０ｇ和 黄 板蓝 根 、 金银 花 等药 物 ）并 ， 在 患 猪 饮 水 中适 量 添加 水 溶 性 抗 生 素 和 复合 维 生 素， 以抵御 疾病 的侵袭 ， 减少 继发感 染 。 采用上 述 防治措施 后 ， 情很快 得 到控制 。 回 疫 经
访调 查 ， ３周后 发 病猪 病情 均 明显好 转 ， 食欲逐 渐 恢 复， 生产情况 基本 稳定 。
呈灰 黄色 ， 弥 漫性 针尖 状 出血 点或 坏死灶 ； 有 膀胱 有
少量 出血点 ； 胃底 黏膜有 少量 出血点 或溃疡 ； 别 患 个 猪在 回肠及肠 盲瓣有 不 同程度 的出血或 溃疡 。 ３ 实验室 检查
查 。根据临 床症状 、 病理 变化 开展 了猪 瘟 、 圆环病毒
２型 、 耳病 、 蓝 伪狂 犬病 、 菌学等 实验 室检 查 ， 细 结果
如下。
３１ 猪 瘟病毒 、 狂 犬病毒 、 繁 殖与呼 吸综合 征病 ． 伪 猪
毒 、 圆环病 毒检 测 采 用 常规 方法 分别 对 ３份病 料 提 取病 毒 Ｒ Ａ和 Ｄ Ａ， 用 Ｒ — Ｃ Ｎ Ｎ 采 Ｔ Ｐ Ｒ或 Ｐ Ｒ方 法 Ｃ 进行 猪瘟 、 繁 殖与 呼 吸综合 征 病毒 、 狂 犬病 毒 、 猪 伪 圆环病 毒等 病原检 测 ，结 果猪瘟 病毒 与猪圆 环病毒 ２型 为 阳性 ．猪 繁殖 与 呼吸综 合征 病毒 及伪 狂犬 病
多重PCR检测猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒
通 过 对 反 应 体 系 的优 化 ， 建 立 了 可 同时 检 测 Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ、 Ｐ Ｃ Ｖ一 ２ 、 Ｐ Ｒ Ｖ、 Ｐ ＲＲ Ｓ Ｖ的 多 重 Ｐ Ｃ Ｒ方 法 。 灵敏 度 试 验 显
示， 该 方 法对 ４ 种 病原的核 酸浓度检 测极限分 别为 １ ． ３ １ ｐ ｇ ／ ￣ ｌ 、 ２ ． ２ ５ ｐ ｇ ／ ｐ ， １ 、 ９ ． ８ ６ ｐ ｇ ／ ｘ ｉ ｌ 、 ４ ． ６ ３ ｐ ｇ ／ ｘ ｉ ｌ ； 特 异 性 试 验 中， 能 够将 目标 检 测 病 原 同其 他 病 原 区分 开 来 。
病 原
引 物 序 列
登 录 号 基 因星 收 Ｌ ｂ ｐ
术 的基础上经过对体 系的稍加改进 ， 实现微型通量
化， 具 有 方便 、 快 捷 的特 点 。该研 究 拟 采用 多 重 Ｐ Ｃ Ｒ 技术 建立对 Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ、 Ｐ Ｃ Ｖ 一 ２ 、 Ｐ Ｒ Ｖ和 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ一 次 性 准 确、 快速 的检 测 方法 。
摘
要： 根据 Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ 上公 布的猪瘟病毒 Ｕ Ｔ Ｒ基 因 、 猪 圆环病毒 ２ 型Ｏ Ｒ Ｆ ２ 基 因、 猪 伪狂 犬病毒 ｇ Ｅ基 因
和 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 Ｎ基 因 ， 使 用生物 学软件 Ｐ ｒ ｉ ｍ ｅ ｒ Ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ２ ． ０设 计 并 合 成 了 ４对特 异 性 的 引 物 。
关键 词 ： Ｐ Ｃ Ｒ； 基 因； 检 测
中图分 类号 ： ￥ ８ ５
文献标 识码 ： Ｂ
文 章编 号 ： １ ０ ０ ４ — ５ ０ ９ ０ （ ２ ０ １ ３ ） １ １ － ０ ０ ０ ３ — ０ ３ 表 １ 多重 Ｐ ＣＲ引物
示， 该 方 法对 ４ 种 病原的核 酸浓度检 测极限分 别为 １ ． ３ １ ｐ ｇ ／ ￣ ｌ 、 ２ ． ２ ５ ｐ ｇ ／ ｐ ， １ 、 ９ ． ８ ６ ｐ ｇ ／ ｘ ｉ ｌ 、 ４ ． ６ ３ ｐ ｇ ／ ｘ ｉ ｌ ； 特 异 性 试 验 中， 能 够将 目标 检 测 病 原 同其 他 病 原 区分 开 来 。
病 原
引 物 序 列
登 录 号 基 因星 收 Ｌ ｂ ｐ
术 的基础上经过对体 系的稍加改进 ， 实现微型通量
化， 具 有 方便 、 快 捷 的特 点 。该研 究 拟 采用 多 重 Ｐ Ｃ Ｒ 技术 建立对 Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ、 Ｐ Ｃ Ｖ 一 ２ 、 Ｐ Ｒ Ｖ和 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ一 次 性 准 确、 快速 的检 测 方法 。
摘
要： 根据 Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ 上公 布的猪瘟病毒 Ｕ Ｔ Ｒ基 因 、 猪 圆环病毒 ２ 型Ｏ Ｒ Ｆ ２ 基 因、 猪 伪狂 犬病毒 ｇ Ｅ基 因
和 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 Ｎ基 因 ， 使 用生物 学软件 Ｐ ｒ ｉ ｍ ｅ ｒ Ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ２ ． ０设 计 并 合 成 了 ４对特 异 性 的 引 物 。
关键 词 ： Ｐ Ｃ Ｒ； 基 因； 检 测
中图分 类号 ： ￥ ８ ５
文献标 识码 ： Ｂ
文 章编 号 ： １ ０ ０ ４ — ５ ０ ９ ０ （ ２ ０ １ ３ ） １ １ － ０ ０ ０ ３ — ０ ３ 表 １ 多重 Ｐ ＣＲ引物
猪繁殖病和呼吸综合征病毒病临床症状
猪繁殖病和呼吸综合征病毒病的临床症状1、引起无症状、持续感染或严重甚至致死的疾病。
2、在巨噬细胞中复制、造成免疫抑制：猪繁殖和呼吸综合征病毒（PRRSV）感染猪后，主要是破坏肺泡巨噬细胞（PAMs），和肺血管巨噬细胞（PIMs），诱导旁观细胞以及外周单核细胞和肺泡巨噬细胞凋亡，同时引起血液的细胞总数和淋巴细胞数显著变化，造成免疫抑制。
PRRSV感染引起猪免疫功能的下降，特别是感染早期对免疫功能的抑制十分明显，有实验表明，对猪瘟弱毒苗的免疫效果有影响，其猪瘟抗体水平明显低于对照组；由于感染猪只的免疫功能受到影响，易继发其他病原体，造成继发感染或混合感染。
如圆环病毒2型、副猪嗜血血杆菌、放线杆菌、支原体等病原混合感染，给生产造成较大的损失与药费支出。
3、基因组表现出非常的易变性：很多生物学和遗传学证据表明，PRRSV有不同的毒株或分离株。
各分离株的毒力、抗原性差异较大，所引起呼吸道症状、繁殖障碍的能力和病变有较大的的差异。
这种经常变异导致机体被动免疫和获得性免疫对PRRSV的识别能力均降低，从而逃避免疫系统的识别及中和抗菌素体或细胞毒性T细胞的杀伤作用。
4、持续感染和隐性感染带毒：猪PRRSV的持续感染是该病在流行病学上的一个重要特征。
PRRSV存在于感染猪的血清﹑淋巴结﹑脾﹑肺等组织，可以存在很长时间，并不断向环境排毒。
5、PRRSV具有抗体依赖性感染增强现象（ADE现象）：当病毒和抗体产生抗原抗体复合物后，借助抗体（AB）的FC片段与靶细胞的FC受体结合，从而促进病毒进入细胞。
且PRRSV在猪群中长期持续感染。
当中和抗体滴度很高时，机体可阻止病毒的再次入侵。
当中和抗体水平较低时，病毒增殖进一步加强，进一步感染周围的易感猪只。
ADE现象对防制PRRS工作带来一定的困难。
一例猪圆环病毒Ⅱ型与猪瘟混感的诊治
一
例猪国环病毒 Ⅱ型与 狺瘟混感的诊治
岳伟敏
（ 河 北省 无极 县职 业技 术 中学 ， 河北石 家庄 ０ ５ ２ ４ ６ ０ ）
猪 瘟是 由猪 瘟病 毒 引起 的一 种 急性 、热 性 、 高 度接 触 性 的传 染病 ， 可 引起 各种 年 龄 阶段 的猪
腔 出血 ， 个 别 猪 出现 神 经症 状 ： 磨牙 、 痉挛 、 脚 交 叉、 站 立不 稳 。怀 孕母 猪 出现流 产 。
５ ． ２紧 急 接 种
病原 。 有 目的 防治 ， 防 止滥 用 药 物 造 成 耐 药 菌株 的 产生 。贻 误 治 疗 时 机 和造 成 不 必 要 的 经济 损
１发 病情 况 ２ ０ １ ３年 ９月 中旬 ， 无 极 县 张段 固镇某 养 猪 场
有 散在 局 灶 性 出血斑 点 ； 气 管 内有 粉 红 色泡 沫 样 分 泌 物 。心 内膜 轻微 出血 ， 脾 脏表 面 形 成丘 状 出 血， 肿大 ， 边 缘 有 锯 齿 状 梗 死灶 ， 肾脏 肿 大 ， 皮 质
猪 开始 采食 ， 以后 慢慢 康 复 。
６小 结
５ ． １ 加 强饲 养 管理 ． 隔 离消毒
对 发 病 死 亡 的猪 只 ， 进行无害化处理 ： 对 病
６ ． １猪 场混 合或 继发 感 染要 早 发现 ， 早诊断 ， 以便 采取及 时有效 的措 施 猪 群 发病 后 不能 仅凭 经 验诊 断 ， 要尽 快 到有 化验 条件 的相 关 部 门进行 实 验室 检 测 ， 及 早 确定
密 布 或散在 针 尖大 的 出血点 。膀 胱黏 膜表 面表 现 不 同程度 的 充血 。 胃底 部 、 十二指 肠 有 弥 漫性 出
血点 。 回肠 和 结 肠 段肠 壁 变 薄 ， 盲 肠 上 弥 散 着 纽 状溃 疡 。 ４实验 室检 验 ４ ． １细 菌 学检 验
例猪国环病毒 Ⅱ型与 狺瘟混感的诊治
岳伟敏
（ 河 北省 无极 县职 业技 术 中学 ， 河北石 家庄 ０ ５ ２ ４ ６ ０ ）
猪 瘟是 由猪 瘟病 毒 引起 的一 种 急性 、热 性 、 高 度接 触 性 的传 染病 ， 可 引起 各种 年 龄 阶段 的猪
腔 出血 ， 个 别 猪 出现 神 经症 状 ： 磨牙 、 痉挛 、 脚 交 叉、 站 立不 稳 。怀 孕母 猪 出现流 产 。
５ ． ２紧 急 接 种
病原 。 有 目的 防治 ， 防 止滥 用 药 物 造 成 耐 药 菌株 的 产生 。贻 误 治 疗 时 机 和造 成 不 必 要 的 经济 损
１发 病情 况 ２ ０ １ ３年 ９月 中旬 ， 无 极 县 张段 固镇某 养 猪 场
有 散在 局 灶 性 出血斑 点 ； 气 管 内有 粉 红 色泡 沫 样 分 泌 物 。心 内膜 轻微 出血 ， 脾 脏表 面 形 成丘 状 出 血， 肿大 ， 边 缘 有 锯 齿 状 梗 死灶 ， 肾脏 肿 大 ， 皮 质
猪 开始 采食 ， 以后 慢慢 康 复 。
６小 结
５ ． １ 加 强饲 养 管理 ． 隔 离消毒
对 发 病 死 亡 的猪 只 ， 进行无害化处理 ： 对 病
６ ． １猪 场混 合或 继发 感 染要 早 发现 ， 早诊断 ， 以便 采取及 时有效 的措 施 猪 群 发病 后 不能 仅凭 经 验诊 断 ， 要尽 快 到有 化验 条件 的相 关 部 门进行 实 验室 检 测 ， 及 早 确定
密 布 或散在 针 尖大 的 出血点 。膀 胱黏 膜表 面表 现 不 同程度 的 充血 。 胃底 部 、 十二指 肠 有 弥 漫性 出
血点 。 回肠 和 结 肠 段肠 壁 变 薄 ， 盲 肠 上 弥 散 着 纽 状溃 疡 。 ４实验 室检 验 ４ ． １细 菌 学检 验
猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒2型混合感染的诊断与防治
左 右开始 出现咳 嗽 、 气喘 等呼吸障 碍， 成年 猪群也 有呼吸 障 加入１ 离心管， ． ｍＬ ５ 按照Ｈｉｈ Ｐ ｒ Ｖｉ ｌＲＮ ｉ （ ｏｈ ｇ ｕｅ ｒ Ａ Ｋ ｔ Ｒ ｃ 公 ａ 碍 表现 ， 但病 情轻微 。 发病 猪群投服 替米 考星 、 酸土 霉 司生产） 对 盐 试剂盒使用说明书操作抽提病毒核酸。 素等 药物 ， 几天后 症状 渐渐减 轻 。 但停 药５ ｄ 又 复发 ， ～６ ， ３２１ ＲＴ Ｐ Ｒ检测 ．．２ ． －Ｃ 参照Ｇ ｎ ａ ｋ ｅｅ Ｂ ｎ 公布的Ｐ Ｒ Ｒ２３ Ｒ Ｓ Ｖ ３２
ｓ ｎ ｒ ｍｅＰ ｙ ｄ ｏ ， ＲＲＳ ｉｌ ）ｔ 猪圆环 病毒２ ｐ ｒ ｉ ｅ ｉｃ ｖ ｒ ｓ 脾 脏肿大， 型（ｏ ｃｎ ｃｒ ｏ ｉｕ 腹面有红色点状突起； 个别肺脏局部见肉变或小米 ２Ｐ Ｖ一 ） ， Ｃ ２混合感染。 粒 至黄豆粒大小出血斑， 多数无异常 。 肠道、 胃、 肾脏 、 膀胱 、 扁
３２ 病 原 的ＰＲ 测 ． Ｃ检
取上述脏器按头混 合分别剪碎后匀浆研磨 ， 冻溶３ 次后， 离
ห้องสมุดไป่ตู้
窝发生 。 发病 初毛色变 灰暗 、 立。 来， 逆 后 渐渐 出现腹 泻 、 消 心 。 清和 沉 淀 分别 收集 备 用 。 上 ．． Ｃ 瘦、 死亡 ， 个别 猪站立 不稳 。早期 用干扰 素治 疗能 见明显好 ３２ １ ＲＴ～Ｐ Ｒ检测病 料 中的 猪繁殖与 呼吸综 合征病 毒
经临 床症 状 观 察、 理 剖 检和 实验 室 检测 ， 诊 为 猪繁殖 要病变 为全身淋巴结 （ 病 确 包括腹股沟 、 腰椎下、 肠系膜 、 肺门、 颌
与 呼 吸 综 合 征 （ ｏ ｃｎ ｒ ｐ ｏ ｕ ｔｖ ａ ｄ ｅ ｐ ｒ ｔ ｒ 下淋巴结等） ｐ ｒ ｉｅ ｅ ｒ ｄ ｃｉ ｅ ｎ ｒ ｓ ｉａ ｏ ｙ 呈灰黄色， 水肿， 切面乳白色。 个别肝脏有出血斑；
猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪圆环病毒2型感染、猪伪狂犬病与猪附红细胞体病的诊断
果检 出率 分 别 为 ３． ％ ８ ６ 、９ ４ 、 １ 、 ８ ６ 。 ６４ 、． ％ ７ ． ％ ５ ．％ ２． ％ ７
关键词 ： 疫病； 猪； 混合感染 ； 检测 中图分类号 ：８ ２ ２ 文献标识码： ￥５．８ Ｂ
文章编号：０ ５ ９ ４ ２ １ ）５ ０ ５ — ２ １０ — ４ Ｘ（０ ０ ０ — ０ ３ ０
； 羊 痘大规模 免疫接种 ， 后羊痘疫 情 防止疫情 的扩散 。当地兽医对此病 比 苗） 二是羊痘对 新引进 的羊和某些品 之 在博 州基 本消停 。 因此 ，９ ８年 以后 ， 较 了解， １９ 特别是岁数较大的兽 医。 种 的羊 （ 白萨福 克羊） 如 高度敏感 。 ４ 调 查结 果 分 析 很 少农户 再进行 羊痘 免疫了。 是 自 但 ２ ０ — ０ ６ 的羊痘疫情给 博州 ０５２０ 年 通过 这两次 调查 ， 以得 出以下 可 ２ ０ 年夏季 以来 ， ０５ 羊痘疫情又卷土 重 牧 民带来 巨大 的经 济损 失， 也使得 他 来 ， 博州 ， 在 尤其 是赛里木 湖一带 ， 流 们普 遍认 识 到羊 痘 的危 害 性和 疫 苗 结 论 ： 行普遍 。上面所述仅是两个案例 。 接种 的重要性 。 因此 ，０ ５ 以后， ２０ 年 博 第一 ， 老 疫 区 ， 在 羊痘 虽然 致 病 ２ ０ 年我们在 访 问中 ， 了解 到 州 的羊群 羊痘免疫 率很高 ， ０６ 还 羊痘疫 情 性和 致死性 都不很高 ， 但因免疫 不全 当地 农牧 民家庭 经济一般 仍很 困难 。 自２ ０ ０ ８年 以后 ， 又处于消停状态 。 面 、畜主缺乏 必要的疫病 防护知 识， 对他们而 言 ， 几元和 十几元 的疫苗 费 ３ 内蒙一起 羊痘疫情调查和分析 而难 以断绝 。 第二 ， 对于新 引进 的羊 和某些 品 用不是 一笔小 的费用 。因此 ， 疫情 在 ２０ 年 ７ ９ 间， ０６ － 月 内蒙古兴安 盟 如本 文所述 的新疆细毛羊和 流行强度 较弱 的年 份 ， 多数 并不免 科右前旗一个从澳大 利亚引进 的 白萨 种 的羊， 大 疫羊痘 。 这是羊痘在此地长期存在 的 福 克羊 群发 病 。该羊群 有种 母 羊 ９ 白萨福 克羊 ， ９ 羊痘 的致病 性和致死性 主要原 因 。此 外 ， 当时当地农牧 民不 只 ， 种公羊 ８ ， 只 羔羊 ３ 只 。 ０ 病羊初期 都很 高， 这类 的羊需要用 效果确切 对 了解疫病 防控的基本 知识 ， 对羊 痘 的 体 温高达 ４ ℃ ，表 现 出流 鼻涕和 眼 的 疫 苗 进 行 免 疫 。 １ 第三 ， 一个地 区通 过几年 大规模 危害普遍认识不够 。 被采访的农牧 民 泪 ， 脸和嘴唇肿胀 ， 同时皮下 出现大量 但此成 果随时可 在没有受 到羊 痘冲击之 前 ， 有半 数 以 的结节 ， 病羊精 神不振 ， 消瘦 ， 呼吸极 免疫可 以清 除羊痘 ， 上从来没有听说过羊痘 。 有些即使听 度 困难 ， 严重者 于 ｌ ０目内死亡 。共有 能被外地传 入 的羊 痘毁于一 旦 ， 导致 说过 羊痘 ，但 是对 其 危害 性 认识 不 ８ 只 发 病 ，２ （ 羊 ｌ ２ ４只 种 ７只 ， 羊 ２ 疫 情重新暴 发 ， 以在全 国范围 内统 羔 ５ 所 足 。例如 ， 前面 提到 的畜 主知道其村 只） 死亡 ， 直接经济损 失达 ４ 多万元 。 ０ 行动来消 灭羊痘 的意义非常重 要 。 庄 已经发生 了非常严重 的羊痘疫情 ， 同群的黑萨福克 、蒙古羊和 山羊均未 另一方面 ， 由于羊痘 临床 易于诊 断 、 但 仍不进行羊痘 免疫 ； 其邻居竟 然 见发病。 而 在发病前和发病期间， 免疫 了 疫 苗便宜且 效果好 、病 原变异 小、 潜 捡 回被抛弃 的病 羊 ， 将羊 痘引入 自家 ３ 次羊痘疫苗， 未见 明显效果。 伏 感染和野 生动物 疫源少 ， 因而 易于 羊群 。 经 临床 诊断和 实验 室 Ｐ Ｒ检测 ， 消 灭 。各发达 国家均早 己消灭羊痘 ， Ｃ 调查中，我们还 了解到羊痘 疫苗 诊断为绵羊痘 。 追溯疫情发病原 因： 一 如 英 国在 １６ 年 就消灭 了羊痘 。与 ８６ 的免疫效果很好 ， 而且很安全， 于接 是免疫失败 （ 对 从所用疫苗中未检出绵 羊 痘相 似 的人 类 疫病 天 花也 是最 早 种 怀孕 的母 羊一 般 也 不会 引起 流产 羊痘病 毒或 山羊痘病毒 ，这可能与免 被 消灭 的人类 疫病 。 （ 是要防止在抓 羊时对 母羊造成 紧 疫失败 有关 ，此疫苗是当地新换的疫 参 考文献 （ 但 略） 张和不适） 疫苗的紧急免疫也能有效 苗，没有采用 以前免疫效果确切 的疫 ，
关键词 ： 疫病； 猪； 混合感染 ； 检测 中图分类号 ：８ ２ ２ 文献标识码： ￥５．８ Ｂ
文章编号：０ ５ ９ ４ ２ １ ）５ ０ ５ — ２ １０ — ４ Ｘ（０ ０ ０ — ０ ３ ０
； 羊 痘大规模 免疫接种 ， 后羊痘疫 情 防止疫情 的扩散 。当地兽医对此病 比 苗） 二是羊痘对 新引进 的羊和某些品 之 在博 州基 本消停 。 因此 ，９ ８年 以后 ， 较 了解， １９ 特别是岁数较大的兽 医。 种 的羊 （ 白萨福 克羊） 如 高度敏感 。 ４ 调 查结 果 分 析 很 少农户 再进行 羊痘 免疫了。 是 自 但 ２ ０ — ０ ６ 的羊痘疫情给 博州 ０５２０ 年 通过 这两次 调查 ， 以得 出以下 可 ２ ０ 年夏季 以来 ， ０５ 羊痘疫情又卷土 重 牧 民带来 巨大 的经 济损 失， 也使得 他 来 ， 博州 ， 在 尤其 是赛里木 湖一带 ， 流 们普 遍认 识 到羊 痘 的危 害 性和 疫 苗 结 论 ： 行普遍 。上面所述仅是两个案例 。 接种 的重要性 。 因此 ，０ ５ 以后， ２０ 年 博 第一 ， 老 疫 区 ， 在 羊痘 虽然 致 病 ２ ０ 年我们在 访 问中 ， 了解 到 州 的羊群 羊痘免疫 率很高 ， ０６ 还 羊痘疫 情 性和 致死性 都不很高 ， 但因免疫 不全 当地 农牧 民家庭 经济一般 仍很 困难 。 自２ ０ ０ ８年 以后 ， 又处于消停状态 。 面 、畜主缺乏 必要的疫病 防护知 识， 对他们而 言 ， 几元和 十几元 的疫苗 费 ３ 内蒙一起 羊痘疫情调查和分析 而难 以断绝 。 第二 ， 对于新 引进 的羊 和某些 品 用不是 一笔小 的费用 。因此 ， 疫情 在 ２０ 年 ７ ９ 间， ０６ － 月 内蒙古兴安 盟 如本 文所述 的新疆细毛羊和 流行强度 较弱 的年 份 ， 多数 并不免 科右前旗一个从澳大 利亚引进 的 白萨 种 的羊， 大 疫羊痘 。 这是羊痘在此地长期存在 的 福 克羊 群发 病 。该羊群 有种 母 羊 ９ 白萨福 克羊 ， ９ 羊痘 的致病 性和致死性 主要原 因 。此 外 ， 当时当地农牧 民不 只 ， 种公羊 ８ ， 只 羔羊 ３ 只 。 ０ 病羊初期 都很 高， 这类 的羊需要用 效果确切 对 了解疫病 防控的基本 知识 ， 对羊 痘 的 体 温高达 ４ ℃ ，表 现 出流 鼻涕和 眼 的 疫 苗 进 行 免 疫 。 １ 第三 ， 一个地 区通 过几年 大规模 危害普遍认识不够 。 被采访的农牧 民 泪 ， 脸和嘴唇肿胀 ， 同时皮下 出现大量 但此成 果随时可 在没有受 到羊 痘冲击之 前 ， 有半 数 以 的结节 ， 病羊精 神不振 ， 消瘦 ， 呼吸极 免疫可 以清 除羊痘 ， 上从来没有听说过羊痘 。 有些即使听 度 困难 ， 严重者 于 ｌ ０目内死亡 。共有 能被外地传 入 的羊 痘毁于一 旦 ， 导致 说过 羊痘 ，但 是对 其 危害 性 认识 不 ８ 只 发 病 ，２ （ 羊 ｌ ２ ４只 种 ７只 ， 羊 ２ 疫 情重新暴 发 ， 以在全 国范围 内统 羔 ５ 所 足 。例如 ， 前面 提到 的畜 主知道其村 只） 死亡 ， 直接经济损 失达 ４ 多万元 。 ０ 行动来消 灭羊痘 的意义非常重 要 。 庄 已经发生 了非常严重 的羊痘疫情 ， 同群的黑萨福克 、蒙古羊和 山羊均未 另一方面 ， 由于羊痘 临床 易于诊 断 、 但 仍不进行羊痘 免疫 ； 其邻居竟 然 见发病。 而 在发病前和发病期间， 免疫 了 疫 苗便宜且 效果好 、病 原变异 小、 潜 捡 回被抛弃 的病 羊 ， 将羊 痘引入 自家 ３ 次羊痘疫苗， 未见 明显效果。 伏 感染和野 生动物 疫源少 ， 因而 易于 羊群 。 经 临床 诊断和 实验 室 Ｐ Ｒ检测 ， 消 灭 。各发达 国家均早 己消灭羊痘 ， Ｃ 调查中，我们还 了解到羊痘 疫苗 诊断为绵羊痘 。 追溯疫情发病原 因： 一 如 英 国在 １６ 年 就消灭 了羊痘 。与 ８６ 的免疫效果很好 ， 而且很安全， 于接 是免疫失败 （ 对 从所用疫苗中未检出绵 羊 痘相 似 的人 类 疫病 天 花也 是最 早 种 怀孕 的母 羊一 般 也 不会 引起 流产 羊痘病 毒或 山羊痘病毒 ，这可能与免 被 消灭 的人类 疫病 。 （ 是要防止在抓 羊时对 母羊造成 紧 疫失败 有关 ，此疫苗是当地新换的疫 参 考文献 （ 但 略） 张和不适） 疫苗的紧急免疫也能有效 苗，没有采用 以前免疫效果确切 的疫 ，
猪瘟合并猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)感染
维普资讯
２０ ４
中 国 兽 医 学 报 ２０ 年 ５ 第 ２ 卷 第 ３ ０６ 月 ６ 期 Ｃ ｉ ＪＶ ｔ ｃ ｈ ｅ Ｓｉ ｎ Ｍａ Ｏ ６ ｏ ２ Ｎ ． ｙ２Ｏ Ｖ １ ６ ｏ３ ．
猪 瘟 合 并 猪繁 殖 与呼 吸综 合 征 病 毒 （ ＲＲ Ｖ） 猪 圆 环病 毒 ２型 （ ＣＶ２ 感 染 Ｐ Ｓ 和 Ｐ ）
一
２０ ０ ４年 初 以 来 ， 州 地 区 有 几 个 规 模 化 猪 场 陆 续 发 生 仔 杭 猪 腹 泻 、 育 猪 呼 吸 困 难 的 疾 病 。 次 发生 时 ， 生 素 有 效 ． 保 初 抗 但 不 久再 次 发生 时抗 生 素 治 疗 无 效 。 病 率 、 亡 率 较 高 。经 过 发 死 全 面 检 查 ， 认 这 几 个猪 场 发 生 了毒 （ Ｒ Ｖ） 猪 圆 环 病 毒 ２型 （ Ｃ ） 染 。 Ｐ ＲＳ 和 Ｐ Ｖ２感
２ Ｃ保 存 备 用 。 Ｏ
１６ Ｐ Ｒ Ｖ 的 Ｒ —ＣＲ检 舅 ． Ｒ Ｓ ＴＰ
Ｒ 为 ２ Ｌ 反 应 体 积 ： × Ｔ ５ ５
ｂ ｆ ｒ４ Ｌ， ０ ｍｍｏ ／ ＮＴＰ ２ Ｌ，２ ｕｆ ｅ ｌ ｌＬ ｄ ５ ｍｍｏ／ ｇ ２ｌ ｌＬ Ｍ ＣＩ
ｙ ＲＮ ｉ ｌ Ｌ． 下 游 引 物 各 ｌ Ｌ， 取 的病 毒 Ｒ ３ Ｌ． Ａｓ ｎ 上 提 ＮＡ １ ｙ ６ 用 １ ｉ， 即 冰 浴 ２ｒｉ， 入 Ｍ— Ｖ ｌ Ｌ， Ｌ，５Ｃ作 ５ｒ ｎ 立 ａ ｎ加 ａ ＭＬ ４ Ｃ １ｈ Ｐ Ｒ 总体 积 为 ５ Ｌ， 括 ：Ｏ Ｃ Ｒ ｂ ｆ ｒ４ ２ 。 Ｃ Ｏ 包 １ ×Ｐ ｕｆ Ｌ。 ｅ ２ ｏ／ Ｃ ２ ． Ｌ， ５ｍｍ ｌＬＭｇ Ｉ１４ 超纯 水 ３ Ｌ， Ｔ 产物 ｌ Ｌ， ａ ４ Ｒ Ｏ Ｔｑ
２０ ４
中 国 兽 医 学 报 ２０ 年 ５ 第 ２ 卷 第 ３ ０６ 月 ６ 期 Ｃ ｉ ＪＶ ｔ ｃ ｈ ｅ Ｓｉ ｎ Ｍａ Ｏ ６ ｏ ２ Ｎ ． ｙ２Ｏ Ｖ １ ６ ｏ３ ．
猪 瘟 合 并 猪繁 殖 与呼 吸综 合 征 病 毒 （ ＲＲ Ｖ） 猪 圆 环病 毒 ２型 （ ＣＶ２ 感 染 Ｐ Ｓ 和 Ｐ ）
一
２０ ０ ４年 初 以 来 ， 州 地 区 有 几 个 规 模 化 猪 场 陆 续 发 生 仔 杭 猪 腹 泻 、 育 猪 呼 吸 困 难 的 疾 病 。 次 发生 时 ， 生 素 有 效 ． 保 初 抗 但 不 久再 次 发生 时抗 生 素 治 疗 无 效 。 病 率 、 亡 率 较 高 。经 过 发 死 全 面 检 查 ， 认 这 几 个猪 场 发 生 了毒 （ Ｒ Ｖ） 猪 圆 环 病 毒 ２型 （ Ｃ ） 染 。 Ｐ ＲＳ 和 Ｐ Ｖ２感
２ Ｃ保 存 备 用 。 Ｏ
１６ Ｐ Ｒ Ｖ 的 Ｒ —ＣＲ检 舅 ． Ｒ Ｓ ＴＰ
Ｒ 为 ２ Ｌ 反 应 体 积 ： × Ｔ ５ ５
ｂ ｆ ｒ４ Ｌ， ０ ｍｍｏ ／ ＮＴＰ ２ Ｌ，２ ｕｆ ｅ ｌ ｌＬ ｄ ５ ｍｍｏ／ ｇ ２ｌ ｌＬ Ｍ ＣＩ
ｙ ＲＮ ｉ ｌ Ｌ． 下 游 引 物 各 ｌ Ｌ， 取 的病 毒 Ｒ ３ Ｌ． Ａｓ ｎ 上 提 ＮＡ １ ｙ ６ 用 １ ｉ， 即 冰 浴 ２ｒｉ， 入 Ｍ— Ｖ ｌ Ｌ， Ｌ，５Ｃ作 ５ｒ ｎ 立 ａ ｎ加 ａ ＭＬ ４ Ｃ １ｈ Ｐ Ｒ 总体 积 为 ５ Ｌ， 括 ：Ｏ Ｃ Ｒ ｂ ｆ ｒ４ ２ 。 Ｃ Ｏ 包 １ ×Ｐ ｕｆ Ｌ。 ｅ ２ ｏ／ Ｃ ２ ． Ｌ， ５ｍｍ ｌＬＭｇ Ｉ１４ 超纯 水 ３ Ｌ， Ｔ 产物 ｌ Ｌ， ａ ４ Ｒ Ｏ Ｔｑ
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
１ 试 验材 料
２ 取 预包 被 的检测 板 （ 据样 品 多少 ， 拆 开分次 ． ２ 根 可 使用 ）将 稀 释好 的待检 血 清取 １０ｐ ， ０ Ｌ 入 到检 测 Ｌ加 板孔 中 。阴性 对照 和 阳性对 照 各设 ２孔 ，每 孔 １０ ０ Ｌ 轻轻 振 匀 孔 中样 品 （ 。 勿溢 出 ）置 ３ ￣温 育 ３ ， ７Ｃ ０
《 江西畜牧兽 医 ￣）０２ 杂 ） １ 年第 ４ ２ 期
文章编号 ：Ｏ４ ２４ （ｏ ２ ０ 一 ｏ ２ ０ ｌ Ｏ— ３ ２２ １ ） ｏ １ — ２ ４ 中图分类号 ： ８ ８２ ￥ ５ ．８ 文 献 标 识码 ： Ｂ
・ 实验研究 ・
稽繁殖与呼幔偿舍庄与磁固环病毒 － 稽瘟搋体的影响 ２型
Ｙ Ｑ Ｌ 一５Ｉ Ｘ － Ｓ ７ ＳＩ
Ｓ Ｚ一９７
２ 试验方 法
・
３１ 标准 对照血 清 的检测 ．
１ ・ ２
《 西畜 牧兽 医杂 志）０ ２年 第 ４期 江 ） １ ２
・ 实验研 究 ・ 蓝 耳 疫 苗 ， 中数 据 显 示 在 ２０ 、０ ７年 ， 肥 猪 表 ０ ６２ ０ 育 的猪繁 殖 与 呼吸综合 症 抗体 阳性率 分别 为 ２ ．３ 、 ０６％
温 育 ３ ｉ。 ０ｍ ｎ
猪瘟 病 毒 Ｅ ＩＡ抗 体 检测 试剂 盒 、 繁殖 与 呼 ＬＳ 猪 吸综合 征病 毒 Ｅ ＩＡ抗体 检测 试 剂盒 、 圆环病 毒 ＬＳ 猪 ２型 Ｅ ＩＡ抗 体检 测试 剂盒 均 购 自武 汉科前 动 物生 ＬＳ 物 制 品公 司 ， 有效 期 内使 用 。包 括 已包 被 好抗 原 在 的微 孔 板 ， 准 阴 、 标 阳性对 照血 清 ， 猪 Ｉ— Ｐ结 抗 ｇ ＨＲ 合 物 ，０倍 浓 缩 洗 涤 液 ，ＭＰ底 物 四 甲 基 联 苯 胺 ｌ Ｔ （ ＭＰ 液 、 Ｔ ） 双氧水 （ ： 液 ， ＨＯ ） 终止 液 ， 品稀 释液 等 。 样
ｍｉ ｎ。
．
１１ 被检 血清 ． 猪场 育肥猪 在 接种 猪瘟 疫苗 后 ３ ０ｄ随机 采血 ， 血样 经 处 理后 获 取血 清 （ 血液 冷 凝 ， ０ ｍｉ ３００ｒ ｎ离 ／ 心 ５ｍｎ 取 上清 液 ）各 年份 采取 血 清 分别 为 ：０ ６ ｉ， ， ２０
年 １ ６ ，０ ７年 ２ ６份 ，０ ８年 ２ １ 。 ２ 份 ２０ ３ ２０ ２ 份
１ 主要 仪器设 备 （ ． ３ 见表 １ ）
表 １
仪 器设 备 名 称
电子 天 平
２ 洗涤 ５次， ． ５ 方法同上 。每次均在干净吸水纸上
拍干。
２ 在 每 个 孔 中先加 底 物液 Ａ一 滴 （０ ）再 加 ． ６ ５ 、 底 物液 Ｂ一滴 （０Ｉ ）混匀 ， ５ Ｌ ， ｘ 室温 （８ ２℃） １℃～ ５ 避光
此次试验共做标准 阳性 和阴性血 清各 ２ 份 ， Ｏ
反应后 测 定 ０ ６０值 ，阳性 血 清平 均值 为 ０１ ， Ｄ３ ．２ 阴 性血 清平 均值 为 １ ８ ． 。对 照 系统正 常 ， ０ 试验 成立 。
３ ． ％， 明部分育肥猪已经感染 了猪繁殖与呼吸 ６４ 说 ４ 综合症病毒 。 猪繁殖与呼吸综合症病毒嗜好在 Ｐ Ｍ Ａ
陈欠 林 １３ ， 兰 ， ｊ，￣ ｌ ｔＪ 梁卫 华
（ ． 市农 业 良种研 究所 ， 西 宜春 １宜春 江
３６０ ；． ３０ ０２江西省 畜牧技 术推 广站 ）
在 ２ ０ ～ ０ ８年 期 间 ， 用 Ｅ ＩＡ方 法 ， 猪 ０６ ２０ 运 ＬＳ 对
２ 在血清稀释板中按 １ ０的体积稀释待检血清 ． １ ： ４
生化 培 养 箱
微 量 加 样 器
Ｏ ６０ Ｄ ３ 值必须大于或等于 １ 试验才成立。当样 品 ． ０ 检测 的 Ｏ ６０ Ｄ ３ 值大于 ０ ５ ． 时判为阳性 ，小于 ０ ５ ３ ． ３
时判 为 阴性 。
３ 试 验结 果
冰 箱
Ｂ Ｄ一１ ９ Ｃ ９
பைடு நூலகம்
数 显 立式 压 力蒸 汽 灭 菌 器 自动 双 蒸 水 蒸 馏 器 、 低 温 冰 箱 超
用 猪 瘟 病 毒 Ｅ ＩＡ抗 体 检 测 试 剂 盒 检 测 的 阴 ＬＳ 性 对照 平均 Ｏ ６０值 必须 小 于 ０３ Ｄ３ －，阳性对 照平 均
台式 高速 离心机
全 自动 酶 标仪
Ｔ Ｉ＿ ６ —Ｇ ， １ Ｂ
ＭＫ３型 Ｓ Ｘ一 ５ Ｂ Ｚ型 Ｐ １０ —
ＦＰ ｒ ｓ ｍ ａ Ｆ ｅ ｈ ｎ
１２ 主要 试 剂 ．
２３ 甩 掉板 孔 中的溶 液后 用 洗 涤 液洗 板 ，共 ５次 ， ． ２０ ０ 孑 ， 次 静 置 ３ｍｉ 掉 ， 在 干 净 吸 水 纸 Ｌ每 ｎ倒 再 上拍 干 。 ２４ 在 每个 孑 中加 羊抗 猪酶 标二 抗 １０Ｉ ， ３ ￣ ． Ｌ ０ Ｌ 置 ７Ｃ ｘ
（９ Ｌ样 品稀 释液 中加 ５ Ｌ待检血 清 ） 此外 ， １５ｔ ｘ 。 阳
性 对 照和 阴性对 照 也按 ｌ ０稀释 ，即 ２ ４Ｉ ： ４ ３ Ｌ样 品 ｘ 稀 释液 中加 ６ Ｌ对 照血 清 。
瘟 抗 体 检 测 的 血 清进 行 了对 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 症 病 毒 、 圆环 病 毒一 猪 ２型 的抗 体 水 平 的监 测 ， 以期 了 解 育 肥 猪 群 中 繁殖 与 呼吸 综 合 症 和 猪 圆 环 病 毒一 ２ 型 的感 染情 况 ， ３种病 毒抗 体水 平 之 间的关 系 ， 寻求 更好 地解 决实 际 问题 的措 施 。
显色 １ ｎ ０ｍｉ。
２ 在 每个 孔 中加 终 止液 １ （０ｐ ）１ ｎ内测 ． ７ 滴 ５ ． ，０ｍｉ Ｌ 定结 果 （ 定前 在震 荡器 上轻轻 震动 一下 ） 测 。 ２８ 测定 Ｏ ． Ｄ值
主要 仪 器 设 备
型 号
ＹＰ ２Ｎ ２０
以空白孔调零 ， 在酶标仪上测定各孔 的光密度 （Ｄ ３ ） ， Ｏ ６ ０值 所用波长为 ６０ｎ 。 ３ ｍ ２ 判断标准 ． ９
２ 取 预包 被 的检测 板 （ 据样 品 多少 ， 拆 开分次 ． ２ 根 可 使用 ）将 稀 释好 的待检 血 清取 １０ｐ ， ０ Ｌ 入 到检 测 Ｌ加 板孔 中 。阴性 对照 和 阳性对 照 各设 ２孔 ，每 孔 １０ ０ Ｌ 轻轻 振 匀 孔 中样 品 （ 。 勿溢 出 ）置 ３ ￣温 育 ３ ， ７Ｃ ０
《 江西畜牧兽 医 ￣）０２ 杂 ） １ 年第 ４ ２ 期
文章编号 ：Ｏ４ ２４ （ｏ ２ ０ 一 ｏ ２ ０ ｌ Ｏ— ３ ２２ １ ） ｏ １ — ２ ４ 中图分类号 ： ８ ８２ ￥ ５ ．８ 文 献 标 识码 ： Ｂ
・ 实验研究 ・
稽繁殖与呼幔偿舍庄与磁固环病毒 － 稽瘟搋体的影响 ２型
Ｙ Ｑ Ｌ 一５Ｉ Ｘ － Ｓ ７ ＳＩ
Ｓ Ｚ一９７
２ 试验方 法
・
３１ 标准 对照血 清 的检测 ．
１ ・ ２
《 西畜 牧兽 医杂 志）０ ２年 第 ４期 江 ） １ ２
・ 实验研 究 ・ 蓝 耳 疫 苗 ， 中数 据 显 示 在 ２０ 、０ ７年 ， 肥 猪 表 ０ ６２ ０ 育 的猪繁 殖 与 呼吸综合 症 抗体 阳性率 分别 为 ２ ．３ 、 ０６％
温 育 ３ ｉ。 ０ｍ ｎ
猪瘟 病 毒 Ｅ ＩＡ抗 体 检测 试剂 盒 、 繁殖 与 呼 ＬＳ 猪 吸综合 征病 毒 Ｅ ＩＡ抗体 检测 试 剂盒 、 圆环病 毒 ＬＳ 猪 ２型 Ｅ ＩＡ抗 体检 测试 剂盒 均 购 自武 汉科前 动 物生 ＬＳ 物 制 品公 司 ， 有效 期 内使 用 。包 括 已包 被 好抗 原 在 的微 孔 板 ， 准 阴 、 标 阳性对 照血 清 ， 猪 Ｉ— Ｐ结 抗 ｇ ＨＲ 合 物 ，０倍 浓 缩 洗 涤 液 ，ＭＰ底 物 四 甲 基 联 苯 胺 ｌ Ｔ （ ＭＰ 液 、 Ｔ ） 双氧水 （ ： 液 ， ＨＯ ） 终止 液 ， 品稀 释液 等 。 样
ｍｉ ｎ。
．
１１ 被检 血清 ． 猪场 育肥猪 在 接种 猪瘟 疫苗 后 ３ ０ｄ随机 采血 ， 血样 经 处 理后 获 取血 清 （ 血液 冷 凝 ， ０ ｍｉ ３００ｒ ｎ离 ／ 心 ５ｍｎ 取 上清 液 ）各 年份 采取 血 清 分别 为 ：０ ６ ｉ， ， ２０
年 １ ６ ，０ ７年 ２ ６份 ，０ ８年 ２ １ 。 ２ 份 ２０ ３ ２０ ２ 份
１ 主要 仪器设 备 （ ． ３ 见表 １ ）
表 １
仪 器设 备 名 称
电子 天 平
２ 洗涤 ５次， ． ５ 方法同上 。每次均在干净吸水纸上
拍干。
２ 在 每 个 孔 中先加 底 物液 Ａ一 滴 （０ ）再 加 ． ６ ５ 、 底 物液 Ｂ一滴 （０Ｉ ）混匀 ， ５ Ｌ ， ｘ 室温 （８ ２℃） １℃～ ５ 避光
此次试验共做标准 阳性 和阴性血 清各 ２ 份 ， Ｏ
反应后 测 定 ０ ６０值 ，阳性 血 清平 均值 为 ０１ ， Ｄ３ ．２ 阴 性血 清平 均值 为 １ ８ ． 。对 照 系统正 常 ， ０ 试验 成立 。
３ ． ％， 明部分育肥猪已经感染 了猪繁殖与呼吸 ６４ 说 ４ 综合症病毒 。 猪繁殖与呼吸综合症病毒嗜好在 Ｐ Ｍ Ａ
陈欠 林 １３ ， 兰 ， ｊ，￣ ｌ ｔＪ 梁卫 华
（ ． 市农 业 良种研 究所 ， 西 宜春 １宜春 江
３６０ ；． ３０ ０２江西省 畜牧技 术推 广站 ）
在 ２ ０ ～ ０ ８年 期 间 ， 用 Ｅ ＩＡ方 法 ， 猪 ０６ ２０ 运 ＬＳ 对
２ 在血清稀释板中按 １ ０的体积稀释待检血清 ． １ ： ４
生化 培 养 箱
微 量 加 样 器
Ｏ ６０ Ｄ ３ 值必须大于或等于 １ 试验才成立。当样 品 ． ０ 检测 的 Ｏ ６０ Ｄ ３ 值大于 ０ ５ ． 时判为阳性 ，小于 ０ ５ ３ ． ３
时判 为 阴性 。
３ 试 验结 果
冰 箱
Ｂ Ｄ一１ ９ Ｃ ９
பைடு நூலகம்
数 显 立式 压 力蒸 汽 灭 菌 器 自动 双 蒸 水 蒸 馏 器 、 低 温 冰 箱 超
用 猪 瘟 病 毒 Ｅ ＩＡ抗 体 检 测 试 剂 盒 检 测 的 阴 ＬＳ 性 对照 平均 Ｏ ６０值 必须 小 于 ０３ Ｄ３ －，阳性对 照平 均
台式 高速 离心机
全 自动 酶 标仪
Ｔ Ｉ＿ ６ —Ｇ ， １ Ｂ
ＭＫ３型 Ｓ Ｘ一 ５ Ｂ Ｚ型 Ｐ １０ —
ＦＰ ｒ ｓ ｍ ａ Ｆ ｅ ｈ ｎ
１２ 主要 试 剂 ．
２３ 甩 掉板 孔 中的溶 液后 用 洗 涤 液洗 板 ，共 ５次 ， ． ２０ ０ 孑 ， 次 静 置 ３ｍｉ 掉 ， 在 干 净 吸 水 纸 Ｌ每 ｎ倒 再 上拍 干 。 ２４ 在 每个 孑 中加 羊抗 猪酶 标二 抗 １０Ｉ ， ３ ￣ ． Ｌ ０ Ｌ 置 ７Ｃ ｘ
（９ Ｌ样 品稀 释液 中加 ５ Ｌ待检血 清 ） 此外 ， １５ｔ ｘ 。 阳
性 对 照和 阴性对 照 也按 ｌ ０稀释 ，即 ２ ４Ｉ ： ４ ３ Ｌ样 品 ｘ 稀 释液 中加 ６ Ｌ对 照血 清 。
瘟 抗 体 检 测 的 血 清进 行 了对 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 症 病 毒 、 圆环 病 毒一 猪 ２型 的抗 体 水 平 的监 测 ， 以期 了 解 育 肥 猪 群 中 繁殖 与 呼吸 综 合 症 和 猪 圆 环 病 毒一 ２ 型 的感 染情 况 ， ３种病 毒抗 体水 平 之 间的关 系 ， 寻求 更好 地解 决实 际 问题 的措 施 。
显色 １ ｎ ０ｍｉ。
２ 在 每个 孔 中加 终 止液 １ （０ｐ ）１ ｎ内测 ． ７ 滴 ５ ． ，０ｍｉ Ｌ 定结 果 （ 定前 在震 荡器 上轻轻 震动 一下 ） 测 。 ２８ 测定 Ｏ ． Ｄ值
主要 仪 器 设 备
型 号
ＹＰ ２Ｎ ２０
以空白孔调零 ， 在酶标仪上测定各孔 的光密度 （Ｄ ３ ） ， Ｏ ６ ０值 所用波长为 ６０ｎ 。 ３ ｍ ２ 判断标准 ． ９