常见实验用溶液的配制方法
化学实验中的溶液配制和稀释方法

化学实验中的溶液配制和稀释方法化学实验中,溶液的配制和稀释是非常重要的步骤。
溶液的配制和稀释方法直接影响实验结果的准确性和可靠性。
本文将介绍一些常用的溶液配制和稀释方法,帮助读者更好地进行化学实验。
一、溶液的配制方法1. 预先称量法:这是最常见的溶液配制方法之一。
首先,根据实验需要,确定所需溶质的质量或体积。
然后,使用天平或量筒等仪器准确称量或量取所需溶质。
最后,将溶质加入容器中,加入适量的溶剂,搅拌均匀即可。
这种方法适用于需要较高精度的溶液配制。
2. 浓度计算法:这是一种根据溶液的浓度计算配制方法。
首先,根据实验要求确定所需溶液的浓度。
然后,根据溶液的摩尔质量和浓度计算公式,计算所需溶质的质量或体积。
最后,使用预先称量法或体积计取法配制溶液。
这种方法适用于需要较为精确的浓度控制的溶液配制。
3. 体积计取法:这是一种根据溶液的体积计取配制方法。
首先,根据实验要求确定所需溶液的体积。
然后,使用量筒、移液管等仪器准确计取所需溶液的体积。
最后,将溶液加入容器中,加入适量的溶剂,搅拌均匀即可。
这种方法适用于需要较为精确的体积控制的溶液配制。
二、溶液的稀释方法1. 等量稀释法:这是最常见的溶液稀释方法之一。
首先,确定所需溶液的浓度和体积。
然后,将一定体积的浓溶液取出,加入等量的溶剂进行稀释。
最后,搅拌均匀即可得到所需浓度的溶液。
这种方法适用于需要较为简单的溶液稀释。
2. 浓度计算法:这是一种根据溶液的浓度计算稀释方法。
首先,根据实验要求确定所需溶液的浓度和体积。
然后,根据溶液的浓度计算公式,计算所需溶液的摩尔质量或体积。
最后,使用等量稀释法稀释溶液。
这种方法适用于需要较为精确的浓度控制的溶液稀释。
3. 体积稀释法:这是一种根据溶液的体积计算稀释方法。
首先,根据实验要求确定所需溶液的浓度和体积。
然后,使用量筒、移液管等仪器准确计取所需溶液的体积。
最后,加入适量的溶剂进行稀释。
这种方法适用于需要较为精确的体积控制的溶液稀释。
实验室常用溶液配制

实验室常用溶液配制实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30℃冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中,-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存,不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中,用水定容到10mL,用0.22um 的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl (或者CaCl:2H2O 1.4698g)溶于8mL超纯水中,定容到10mL,用0,22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中,并于-30℃保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(Yeast Extraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌,注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/L Tris-Cl(PH7.5)、15mmol/L NaCl 中,配成10mg/mL 的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存,一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7.5)成分:20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g 0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g 0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g 加100mL水进行溶解,NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入,SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液,溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中,过滤除菌PMSF配成10mM母液,溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L,使用时稀释10倍,用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43?, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30%丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中,加热至37℃溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于7.01 M Tris-Cl(pH6.8)60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml1.5 M Tris-Cl(pH8.8)90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml。
配制溶液的方法

配制溶液的方法溶液是化学实验中常见的一种物质状态,它由溶质和溶剂组成,可以是固体、液体或气体。
配制溶液是化学实验中的重要步骤,正确的配制方法可以保证实验的准确性和可靠性。
下面将介绍几种常见的溶液配制方法。
一、溶液的配制原理。
在配制溶液之前,首先要了解溶液的配制原理。
通常情况下,我们需要根据实验要求精确地配制出一定浓度和体积的溶液。
配制溶液的基本原理是根据溶质的质量或摩尔数,按照一定的比例加入溶剂中,然后充分搅拌使其溶解均匀。
二、常见溶液的配制方法。
1. 固体溶液的配制。
对于固体溶液的配制,首先需要称取一定质量的固体溶质,然后加入一定体积的溶剂中,通过搅拌或加热使其充分溶解。
在配制过程中,需要注意固体溶质的溶解度和溶解温度,以及溶液的稀释比例,确保配制出符合实验要求的溶液。
2. 液体溶液的配制。
液体溶液的配制相对简单,通常是直接按照一定比例混合不同体积的溶质和溶剂。
在配制过程中,需要注意不同液体溶质的密度和相容性,选择合适的容器进行混合,并充分搅拌使其均匀混合。
3. 气体溶液的配制。
气体溶液的配制通常需要通过气体通入溶剂或溶质溶解的方式进行。
在配制过程中,需要注意气体的通入速度和溶解度,以及溶液的稀释比例,确保配制出符合实验要求的气体溶液。
三、配制溶液的注意事项。
1. 选择合适的容器,配制溶液时,需要选择干净、无污染的容器,避免对溶液造成污染。
2. 控制溶质的质量或摩尔数,在配制溶液时,需要准确称取溶质的质量或摩尔数,确保溶质的添加量准确。
3. 充分搅拌或加热,在溶质加入溶剂后,需要充分搅拌或加热使其充分溶解,确保溶液的均匀性。
4. 注意溶解度和溶解温度,在配制固体溶液时,需要注意溶质的溶解度和溶解温度,选择合适的溶剂和配制条件。
5. 校正溶液的浓度和体积,配制完成后,需要对溶液的浓度和体积进行校正,确保符合实验要求。
以上就是配制溶液的方法,正确的配制方法可以保证实验的准确性和可靠性。
在实际操作中,需要根据实验要求选择合适的配制方法,并严格按照操作步骤进行操作,确保配制出符合实验要求的溶液。
化学实验中的常见溶液配制方法

化学实验中的常见溶液配制方法溶液配制是化学实验中常见的操作步骤之一,合理准确地配制溶液对于实验结果的准确性和可重复性至关重要。
本文将介绍几种常见的溶液配制方法。
一、母液稀释法母液稀释法是制备低浓度溶液的常用方法。
首先,根据实验需要制备高浓度的母液,然后通过逐步稀释的方法得到所需的低浓度溶液。
具体操作过程如下:1. 准备一瓶高浓度母液,浓度为C1,体积为V1。
2. 取出所需的溶质体积为V2(V1 > V2)。
3. 加入适量的溶剂,使总体积为V3(V3 > V1)。
4. 摇匀溶液,即可得到所需浓度的溶液。
二、固体溶解法固体溶解法适用于溶解固体物质制备溶液的情况。
具体操作步骤如下:1. 准备所需的固体溶质,并称取所需量。
2. 加入适量的溶剂,使溶质完全溶解。
3. 如有需要,使用磁力搅拌器或加热设备加速固体物质的溶解。
4. 摇匀溶液,即可得到所需溶液。
三、液体稀释法液体稀释法适用于使高浓度液体溶液变为低浓度溶液的情况。
具体操作步骤如下:1. 准备一瓶高浓度液体溶液,浓度为C1,体积为V1。
2. 取出所需的溶液体积为V2(V1 > V2)。
3. 加入适量的溶剂,使总体积为V3(V3 > V1)。
4. 摇匀溶液,即可得到所需浓度的溶液。
四、体积稀释法体积稀释法适用于根据已知溶液的浓度制备新的溶液的情况。
具体操作步骤如下:1. 准备一瓶已知浓度溶液,浓度为C1,体积为V1。
2. 确定所需浓度为C2,体积为V2的新溶液的配制比例。
3. 根据配制比例,计算所需溶质的体积为V3。
4. 取出计算得到的体积为V3的已知浓度溶液。
5. 加入适量的溶剂,使总体积为V2。
6. 摇匀溶液,即可得到所需浓度的溶液。
总结:化学实验中,溶液配制是非常重要的一个环节,合理准确地配制溶液对实验结果具有重要影响。
本文介绍了母液稀释法、固体溶解法、液体稀释法和体积稀释法等常见的溶液配制方法。
通过掌握这些方法,可以快速、准确地配制出所需浓度的溶液,保证实验获得准确可靠的结果。
溶液的配制方法

溶液的配制方法溶液的配制是化学实验中常见的操作,正确的配制方法能够确保实验结果的准确性和可重复性。
下面将介绍一些常见的溶液配制方法及注意事项。
一、固体溶解法。
固体溶解法是最常见的配制溶液的方法之一。
首先,需要准备所需的固体试剂和溶剂。
然后,按照一定的比例将固体试剂加入溶剂中,并用搅拌棒充分搅拌直至固体完全溶解。
在此过程中,需要注意控制溶解温度和搅拌时间,以确保溶液的均匀性和稳定性。
二、液体稀释法。
液体稀释法适用于需要配制低浓度溶液的情况。
首先,准备一定浓度的原液溶液和纯溶剂。
然后,按照一定的比例将原液溶液加入纯溶剂中,并用搅拌棒充分搅拌。
在此过程中,需要注意控制加入原液的比例和搅拌的均匀性,以确保配制出所需浓度的溶液。
三、溶液稀释法。
溶液稀释法适用于需要配制高浓度溶液的情况。
首先,准备一定浓度的原液溶液和纯溶剂。
然后,按照一定的比例将原液溶液取出一定量,加入纯溶剂中,并用搅拌棒充分搅拌。
在此过程中,需要注意控制取出原液的比例和搅拌的均匀性,以确保配制出所需浓度的溶液。
四、注意事项。
在进行溶液配制时,需要注意以下几点:1. 精确称量,使用精密天平进行精确称量,确保所配制的溶液浓度准确。
2. 搅拌均匀,在溶解固体试剂或稀释液体溶液时,需要充分搅拌,以确保溶液的均匀性。
3. 温度控制,一些试剂在溶解过程中会产生热量,需要控制溶解温度,避免溶液过热或结晶析出。
4. 容器选择,根据所配制溶液的性质选择合适的容器,避免发生化学反应或溶液泄漏。
5. 标签标注,配制好的溶液需要标注溶液名称、浓度、配制日期等信息,以便后续使用和识别。
在实验室中,正确的溶液配制方法不仅能够保证实验结果的准确性,还能够保障实验人员的安全。
因此,熟练掌握溶液配制方法并严格按照操作规程进行操作是非常重要的。
希望以上介绍的方法和注意事项能够对大家在实验中的溶液配制工作有所帮助。
配制溶液的方法

配制溶液的方法配制溶液的方法概述:配制溶液是化学实验中常见的操作,正确的配制可以保证实验结果的准确性和可重复性。
本文将介绍配制溶液的方法及注意事项。
一、准备工作1.1 确定所需溶液种类和浓度。
在进行实验前,需要确定所需的溶液种类和浓度。
根据实验要求选择合适的化学品,确定所需量并计算出相应的质量或体积。
1.2 准备容器和仪器。
根据所需量选择合适大小的容器,并用去离子水或其他适当的清洗剂清洗干净。
需要用到称量仪器、分液器等其他仪器时,也需要提前做好准备。
二、配制步骤2.1 稀释法稀释法是最常见也是最简单的一种配制方法。
具体步骤如下:(1)将所需质量或体积的化学品加入干燥无水容器中;(2)加入足够量去离子水或其他适当溶剂,使得总体积达到预定值;(3)充分混合后即可使用。
2.2 标准曲线法标准曲线法适用于需要精确测定某种物质浓度的实验。
具体步骤如下:(1)准备一系列已知浓度的标准溶液;(2)分别取一定量标准溶液和待测样品,加入相同体积的试剂;(3)按照实验要求进行反应或处理;(4)根据实验结果绘制标准曲线,并由此计算出待测样品的浓度。
2.3 比色法比色法是通过比较待测溶液与已知标准溶液之间颜色深浅的差异来确定其浓度的方法。
具体步骤如下:(1)准备一系列已知浓度的标准溶液;(2)分别取一定量标准溶液和待测样品,加入相同体积的试剂;(3)按照实验要求进行反应或处理,并记录吸光度值;(4)根据吸光度值绘制吸光度-浓度曲线,并由此计算出待测样品的浓度。
三、注意事项3.1 安全第一。
在配制溶液时,需要注意化学品的毒性和危险性,正确佩戴防护设备,避免发生安全事故。
3.2 严格按照实验要求操作。
根据不同实验的要求,选择合适的配制方法和试剂,遵循实验步骤和注意事项,确保实验结果准确可靠。
3.3 注意容器和仪器的清洁度。
使用前需要将容器和仪器彻底清洗干净,避免杂质对实验结果的影响。
3.4 混合均匀。
在加入试剂后需要充分混合均匀,以确保每个部分的浓度相同。
化学实验中的溶液配制方法有哪些?

化学实验中的溶液配制方法有哪些?
在化学实验中,溶液的配制是一项常见的操作。
下面列举了化学实验中常用的溶液配制方法:
1. 直接溶解法:将固体试剂直接加入溶剂中,并充分搅拌使其溶解。
这种方法适用于溶解度较高的固体试剂,如盐类、糖类等。
2. 加热溶解法:对于溶解度较低的固体试剂,可以使用加热溶解法。
首先将溶剂加热至适当温度,然后慢慢将固体试剂加入,并充分搅拌直至溶解。
3. 体积配制法:对于需要较精确配制浓度的溶液,可以使用体积配制法。
首先确定所需浓度和体积,然后按照比例将相应的溶质和溶剂加入中,最后补足至目标体积。
4. 稀释法:当需要配制低浓度溶液时,可以使用稀释法。
首先配制高浓度溶液,然后再将其逐渐稀释至目标浓度。
5. 混合法:某些溶液需要多个试剂的配制,可以使用混合法。
首先将其中一个试剂溶解,然后再逐渐加入其他试剂,并充分搅拌
直至溶解。
在进行溶液配制时,还需要注意以下几点:
- 选择适当的溶剂:根据试剂的性质和溶解度选择合适的溶剂,确保试剂能够完全溶解。
- 控制溶液的pH值:对于具有酸碱性质的试剂,需要通过添
加酸或碱调节溶液的pH值,以达到所需的条件。
- 精确称量试剂:在进行体积配制或稀释法时,需要精确称量
试剂和溶剂,以确保配制出准确的浓度。
总之,化学实验中的溶液配制方法多种多样,根据具体实验要
求选择合适的配制方法,并严格遵循相应的操作步骤,在实验中保
证安全和准确性。
实验室常用溶液配制

实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30℃冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中,-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存,不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中,用水定容到10mL,用0.22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl (或者CaCl:2H2O 1.4698g)溶于8mL超纯水中,定容到10mL,用0,22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中,并于-30℃保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(Yeast Extraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌,注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/L Tris-Cl(PH7.5)、15mmol/L NaCl 中,配成10mg/mL 的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存,一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7.5)成分:20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g加100mL水进行溶解,NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入,SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液,溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中,过滤除菌PMSF配成10mM母液,溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L,使用时稀释10倍,用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43−, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30%丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中,加热至37℃溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于7.01 M Tris-Cl(pH6.8)60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml1.5 M Tris-Cl(pH8.8)90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml。
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常见实验用溶液的配制方法[日期:2005-1-9] 来源:作者:[字体:大中小]一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份贮存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。
分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20℃。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
10mg/mlRnase (无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。
溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。
用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。
(配制过程中要戴手套)5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。
10N氢氧化钠(NaOH):溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10%SDS(十二烷基硫酸钠):称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。
用水定容至1L。
2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。
100%三氯乙酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。
(稀释液应在临用前配制)2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg的X-gal于1ml 的二甲基甲酰胺(DMF),用铝箔包裹装液管,贮存于-20℃。
100×Denhardt试剂(Denhardt’s regent)成分及终浓度配制100ml溶液各成分的用量2%聚蔗糖(Ficoll,400型)2%聚乙烯吡咯烷酮(PVP-40)2%BSA(组分V)水 2g2g2g加水至总体积为100ml依照上表称取各组分,溶于水中定容。
过滤除菌及杂质,分装成小份于-20℃贮存。
10×标准DNA连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端连接)成分及终浓度配制10ml溶液各成分的用量0.5mol/L Tris-HCl100mmol/L MgCl2100mmol/L DTT2mmol/L ATP5mmol/L 盐酸亚精胺(可选)0.5mg/ml BSA(组分V)(可选)水 5ml 1mol/L 贮液1ml 1mol/L 贮液1ml 1mol/L 贮液200ul 100 mmol/L 贮液50ul 1 mmol/L 贮液0.5ml 10 mg/mL 贮液2.25ml将配制好的缓冲液分装成小份,贮存于-20℃。
100 mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions)可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液,-80℃可贮存至少6个月。
10mmol/L dNTP混合液成分及终浓度配制20ul溶液各成分的用量10mmol/L dATP10mmol/L dCTP10mmol/L dGTP10mmol/L dTTP水 2ul 100 mmol/L dATP 贮液2ul 100 mmol/L dCTP 贮液2ul 100 mmol/L dGTP 贮液2ul 100 mmol/L dTTP 贮液12ul20%PEG 8000/2.5M NaCl成分及终浓度配制10ml溶液各成分的用量质量浓度为20%聚乙二醇2.5mol/L 氯化钠水 20g50ml 5 mol/L 氯化钠或 14.6g 固体氯化钠补足100ml加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中,加水至终体积100ml,用磁力搅拌器搅拌溶解。
20×SSC成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量300mmol/L 柠檬酸三钠(二水)3mol/L 氯化钠水 88.2g175.3g补足1L溶解柠檬酸三钠(二水)和氯化钠于约0.9L水中,加几滴10N NaOH溶液调pH 为7.0,用水补足体积至1L。
DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水加100ul DEPC 于 100ml 水中,使DEPC的体积分数为0.1%。
在37℃温浴至少12h,然后在15 psi 条件下高压灭菌20min,以使残余的DEPC失活。
DEPC会与胺起反应,不可用DEPC处理Tris缓冲液。
甲酰胺(deionized formamide)直接购买或加Dowex XG8 混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中,用磁力搅拌器轻轻搅拌1h,可去除甲酰胺中的离子。
经Whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份,充氮气于-80℃贮存(防止氧化)。
磷酸缓冲液(phosphate buffer)按照下表所给定的体积,混合1 mol/L 的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L 磷酸氢二钠(双碱)贮液,获得所需pH的磷酸缓冲液。
配制 1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)贮液:溶解138g于足量水中,使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。
1mol/L 磷酸二氢钠(ml) 1mol/L 磷酸氢二钠(ml)最终pH值877850815775735685625565510450390330280 123150185225265315375435490550610670720 6.06.16.26.36.46.56.66.76.86.97.07.17.2TE(用于悬浮和贮存DNA)成分及终浓度配制100ml溶液各成分的用量10mmol/L Tris-HCl1mmol/L EDTA水 1ml 1mol/L Tris-HCl(pH7.4-8.0,25℃)200ul 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)98.8mlTris缓冲液(Tris-HCl buffer)将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中,再根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至1L。
浓盐酸的体积(ml) pH8.6142128.53846566671.376 9.08.88.68.48.28.07.87.67.47.2二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液电泳缓冲液50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水 242g57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱445 mmol/L 硼酸盐10 mmol/L EDTA水 54g27.5g 硼酸20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L染料1%溴酚蓝(bromophenol blue)加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。
用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。
凝胶上样液(gel loading solutions)6×碱性凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.3 N 氢氧化钠6 mmol/L EDTA18%聚蔗糖(400型)0.15%溴甲酚绿0.25%二甲苯青FF水 300ul 10N 氢氧化钠120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)1.8g15mg25mg补足到10ml6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF5 mmol/L EDTA15%聚蔗糖(400型)水 1.5ml 1%溴酚蓝1.5ml 1%二甲苯青FF100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)1.5g补足到10ml6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.25%溴酚蓝0.25%二甲苯青FF15%聚蔗糖(400型)水 2.5ml 1%溴酚蓝2.5ml 1%二甲苯青FF1.5g补足到10ml6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF5 mmol/L EDTA50%甘油水 1.5ml 1%溴酚蓝1.5ml 1%二甲苯青FF100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)3ml3.9ml6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF5 mmol/L EDTA40%聚蔗糖水 1.5ml 1%溴酚蓝1.5ml 1%二甲苯青FF100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)4g补足到10ml10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.2%溴酚蓝0.2%二甲苯青FF200 mmol/L EDTA0.1%SDS50%甘油水 20mg20mg4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)100ul 10% SDS5ml补足到10ml三.常用培养基LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。