组培实验报告

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植物组培实验报告

植物组培实验报告

植物组培实验报告植物组培技术是指利用植物体细胞分裂和分化的能力,通过体外培养的方法,使其成为整株植物的过程。

该技术已经广泛应用于植物育种、遗传工程、植物繁殖等领域。

实验目的:本实验旨在研究植物组培技术对不同植物品种的影响,探究其在植物育种中的应用价值。

实验材料:本次实验选用了四种不同的植物品种,分别为玉米、小麦、水稻和大豆。

实验所需的试剂包括MS培养基、植物生长素、植物生长素和细胞分裂素等。

实验步骤:1.植物材料的准备将四种植物的种子经过消毒处理后,将其在无菌条件下播种在MS 培养基上。

2.植物细胞的分离将培养基上生长的植物幼苗取出,进行细胞分离。

将其放入含有植物生长素和细胞分裂素的液体培养基中,进行震荡培养。

3.植物组织的培养将分离出来的细胞放入含有植物生长素的液体培养基中,进行组织培养。

待组织生长出来后,再将其移植到含有植物生长素和细胞分裂素的液体培养基中,进行细胞分裂和分化。

4.植物的生长与繁殖将培养好的植物幼苗移植到含有适量营养物质的液体培养基中,进行生长。

当植物幼苗长大后,可以进行繁殖试验,检测组培植物在遗传性状上的变化。

实验结果:经过实验,我们发现不同植物品种对组培技术的适应性不同。

在四种植物品种中,水稻和大豆的组培效果最好,生长速度较快,成活率较高;而小麦的组培效果较差,生长速度较慢,成活率较低。

在遗传性状上,我们也发现组培植物与自然生长的植物有一定的差异,但并不影响其在植物育种中的应用。

结论:植物组培技术是一种高效、快速的植物育种方法。

通过本实验,我们发现植物品种对组培技术的适应性不同,需要根据具体品种加以调整。

虽然组培植物与自然生长的植物在遗传性状上存在差异,但并不影响其在植物育种中的应用。

植物组培技术的不断发展和完善,将会对植物育种和植物繁殖领域带来更多的变革。

组培实验的实验报告

组培实验的实验报告

一、实验名称植物组织培养二、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理和操作流程。

2. 掌握植物组织培养技术在植物繁殖、遗传改良和资源保护等方面的应用。

3. 培养实验操作能力和团队协作精神。

三、实验原理植物组织培养技术是利用植物细胞的全能性,通过无菌操作将植物组织(如茎尖、叶片、愈伤组织等)在特定的培养基上诱导分化,从而实现植物繁殖、遗传改良和资源保护等目的。

四、实验材料1. 植物材料:柳树茎尖、紫玉兰叶片。

2. 培养基:MS培养基、1/2MS培养基、1/4MS培养基。

3. 试剂:琼脂、蔗糖、葡萄糖、活性炭、硝酸铵、硝酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、硼酸、氯化钙、氯化钾、氢氧化钠、氢氧化钾、盐酸、氯化钠、硫酸铁、硫酸锌、硫酸铜、抗坏血酸、维生素B6、吲哚丁酸、生长素、细胞分裂素等。

4. 实验器具:超净工作台、高压蒸汽灭菌器、培养皿、移液器、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、无菌水等。

五、实验步骤1. 材料准备:将柳树茎尖和紫玉兰叶片洗净,用75%酒精消毒30秒,再用无菌水冲洗3次。

2. 培养基配制:按照实验要求,将不同浓度的MS培养基、1/2MS培养基和1/4MS培养基分别配制。

3. 接种:将消毒后的柳树茎尖和紫玉兰叶片接种到培养基上,每个培养基接种3个材料。

4. 培养条件:将接种后的培养基放入培养箱中,温度设置为25℃,光照强度为2000勒克斯,光照时间为12小时/天。

5. 观察记录:每隔7天观察一次培养材料的生长状况,记录其生长速度、颜色、形态等变化。

六、实验结果与分析1. 柳树茎尖培养:在MS培养基和1/2MS培养基上,柳树茎尖生长速度较快,颜色为绿色,叶片形状正常;在1/4MS培养基上,柳树茎尖生长速度较慢,颜色为淡绿色,叶片形状较小。

2. 紫玉兰叶片培养:在MS培养基和1/2MS培养基上,紫玉兰叶片生长速度较快,颜色为绿色,叶片形状正常;在1/4MS培养基上,紫玉兰叶片生长速度较慢,颜色为淡绿色,叶片形状较小。

组织培养实验报告

组织培养实验报告

一、实验目的1. 掌握无菌操作的植物组织培养方法。

2. 通过配置MS培养基母液,掌握母液的配置和保存方法。

3. 通过诱导植物细胞形成愈伤组织,学习愈伤组织的建立方法。

4. 了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育,最终长成完整再生植株的过程,加深对植物细胞全能性的理解。

二、实验原理植物组织培养是一种利用植物细胞的全能性,在人工条件下实现植物器官、组织或细胞再生为完整植株的技术。

其基本原理包括:1. 脱分化作用:原本已经分化停止生长的细胞,在人工培养基的诱导下,重新进入分裂状态,形成没有特定组织结构的细胞团,即愈伤组织。

2. 再分化作用:愈伤组织在一定条件下,可以分化为具有特定结构和功能的组织,如根、茎、叶等,最终形成完整的植株。

3. 植物激素:在组织培养过程中,植物激素如生长素(IAA)、细胞分裂素(CK)等起着关键作用,调节细胞分裂、分化和器官形成。

三、实验材料与仪器材料:1. 植物外植体:如叶片、茎段、芽等。

2. MS培养基母液:包括大量元素、微量元素、有机物、维生素和植物激素等。

3. 灭菌剂:如乙醇、HgCl2(或次氯酸钠)等。

仪器:1. 培养室2. 高压灭菌锅3. 水浴锅4. 解剖刀5. 三角烧瓶(100mL)6. 烧杯7. 量筒8. 培养皿9. 超净工作台10. 分析天平11. 镊子12. 剪刀13. 橡皮筋四、实验步骤1. 外植体消毒:将外植体放入含有乙醇、HgCl2(或次氯酸钠)的消毒液中浸泡5-10分钟,然后用无菌水冲洗干净。

2. 愈伤组织诱导:将消毒后的外植体接种到含有不同激素浓度和比例的MS培养基中,置于培养室内培养。

3. 愈伤组织继代培养:待愈伤组织形成后,将其转移到新的培养基中进行继代培养,以扩大愈伤组织数量。

4. 再分化培养:将愈伤组织转移到含有不同激素浓度和比例的培养基中,诱导其分化为根、茎、叶等器官。

5. 生根与移栽:待植物分化出根、茎、叶等器官后,将其移栽到土壤中,进行正常生长。

白菜组培实验报告(3篇)

白菜组培实验报告(3篇)

第1篇一、实验简介实验名称:白菜组织培养实验目的:通过组织培养技术,了解白菜细胞在体外条件下的生长和分化规律,掌握植物组织培养的基本操作流程,为白菜的繁殖和育种提供技术支持。

实验时间:2021年10月1日至2021年11月30日实验地点:生物实验室实验材料:白菜种子、MS培养基、蔗糖、琼脂、活性炭、植物激素(生长素和细胞分裂素)、无菌水、无菌滤纸、消毒液等。

二、实验方法1. 实验材料准备(1)将白菜种子用消毒液浸泡消毒,然后用无菌水冲洗干净。

(2)准备MS培养基,加入适量的蔗糖和琼脂,溶解后倒入无菌培养皿中,制成固体培养基。

(3)将活性炭加入培养基中,以提高培养基的通气性。

2. 细胞诱导(1)将消毒后的白菜种子接种在固体培养基上,置于光照培养箱中培养。

(2)定期观察白菜种子在培养基上的生长情况,记录细胞生长、分化及死亡情况。

3. 细胞分化(1)待白菜种子长出愈伤组织后,将其转移到含有不同浓度植物激素的培养基上,观察愈伤组织分化情况。

(2)统计不同激素浓度下白菜愈伤组织的分化率。

4. 根芽分化(1)选取分化效果较好的愈伤组织,将其转移到含有生长素和细胞分裂素的培养基上,观察根芽分化情况。

(2)统计不同激素浓度下白菜根芽的分化率。

5. 实验数据统计与分析(1)记录白菜种子在培养基上的生长情况,包括细胞生长、分化及死亡情况。

(2)记录不同激素浓度下白菜愈伤组织的分化率及根芽的分化率。

(3)运用统计学方法对实验数据进行处理和分析。

三、实验结果与分析1. 细胞生长与分化在实验过程中,白菜种子在培养基上生长良好,细胞分裂旺盛,形成了愈伤组织。

在含有植物激素的培养基上,愈伤组织分化效果较好,细胞分化成根、芽、茎等器官。

2. 愈伤组织分化在实验中,不同激素浓度对白菜愈伤组织的分化影响显著。

当植物激素浓度适中时,愈伤组织分化效果较好,分化率为85%。

当激素浓度过高或过低时,愈伤组织分化效果较差,分化率分别为50%和60%。

组培实习工作报告总结5篇

组培实习工作报告总结5篇

组培实习工作报告总结5篇组培实习工作报告总结5篇实习可以获得适当的经济收入,改善经济状况,从而可以把实习的精力放在注重成长上。

下面给大家分享一些关于组培实习工作报告总结5篇,希望能够对大家有所帮助。

组培实习工作报告总结(精选篇1)转眼间的时间,近四个月的幼师实习就这么过去了。

这四个月在幼儿园教师的实习岗位上面自己是真的学习到了许多知识的,也体会到了不一样的感受,这是跟校园里面体会到的截然不同的一种感受。

这四个月的幼师工作和新环境的体验,让我飞速地成长了,能力上面,认识上面和责任上面都是在变化着,而且是在朝着积极的方面在变化。

现在将我这段时间有幼师实习中的工作做一个总结:作为一名幼师专业的学生,对于幼教工作的认识了解并不深,因为都是停留在理论认识上面,没有具体操作过。

但是通过这一次的实习,让我认识到我们要从事幼师工作,必须要尽到自己责任,我们的工作必须是从学生的健康成长上出发的,必须要关注他们的身体、心里双重的发展。

所以通过这一次的实习,我知道了在幼师工作中,我们对待在幼儿园学习的学生,我们不仅仅要关注他们的身体是否健康安全,我们还需要关注他们的心理是否开心,要注意调节他们的内心状况。

还有就是我们做幼儿教育的时候,不仅仅要教会他们知识,更是要教会他们常识,在幼儿园里面,对待孩子我们不仅仅要告诉他们认字、识图,更是要帮助他们学会生活习惯,比如要教会他们自己的事情自己做,比如自己的铅笔用完了要学会自己换新的,而不是一直在那等待或者哭让老师来帮忙弄,虽然哭着的小孩子挺让人怜惜心疼的,但是我也清楚我帮忙也只能帮一时,终究还是要靠他们自己的。

还有就是他们吃饭前和吃饭后,以及上完洗手间了,都必须要洗手,这是告诉他们要注意个人卫生,要有好的文明素质才行。

上面是工作的一些认识,下面总结下个人的成长:因为之前都是再以学生的角色在学习生活着,所以进入实习生活中的时候,都是非常不适应的,一下子进入了一个新的环境。

之前的自己习惯了依赖别人,但是到了工作当中,大家都在忙于自己的事情,无暇顾及我,所以我只能坚强起来,一步步地学习。

侧芽组培实验报告(3篇)

侧芽组培实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握植物组织培养的基本原理和操作技术。

2. 学习侧芽诱导、增殖和生根的实验方法。

3. 研究不同培养基配比对侧芽生长的影响。

二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,通过离体培养的方式,使植物细胞再生为完整植株的过程。

侧芽组培是植物组织培养的一种方法,通过诱导植物侧芽的生长和增殖,实现快速繁殖。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 植物材料:选取具有较强侧芽生长能力的植物(如柑橘、葡萄等)。

- 试剂:植物激素(如吲哚乙酸、吲哚丁酸、细胞分裂素等)、抗生素、琼脂、蔗糖等。

- 容器:无菌培养皿、试管、剪刀、镊子等。

2. 实验仪器:- 紫外线消毒灯、超净工作台、恒温水浴锅、显微镜、酒精灯等。

四、实验方法1. 侧芽诱导:- 将植物材料表面消毒后,切取侧芽作为外植体。

- 将外植体接种到含有不同激素浓度的培养基上,进行诱导培养。

- 观察侧芽的生长情况,筛选出诱导效果较好的培养基。

2. 侧芽增殖:- 将诱导出的侧芽转移到含有不同激素浓度的增殖培养基上。

- 定期更换培养基,观察侧芽的增殖情况。

- 筛选出增殖效果较好的培养基。

3. 侧芽生根:- 将增殖后的侧芽转移到含有生根激素的培养基上。

- 观察侧芽的生根情况,筛选出生根效果较好的培养基。

4. 培养基配比:- 通过实验,研究不同激素浓度、培养基配方对侧芽生长的影响。

五、实验结果与分析1. 侧芽诱导:- 经过实验,我们发现吲哚丁酸(IBA)和细胞分裂素(CTK)对侧芽诱导效果较好,最佳浓度为1mg/L。

- 在此条件下,诱导出的侧芽生长速度快,形态正常。

2. 侧芽增殖:- 经过实验,我们发现吲哚乙酸(IAA)和细胞分裂素(CTK)对侧芽增殖效果较好,最佳浓度为0.5mg/L。

- 在此条件下,增殖后的侧芽数量较多,生长速度快。

3. 侧芽生根:- 经过实验,我们发现吲哚丁酸(IBA)对侧芽生根效果较好,最佳浓度为1mg/L。

- 在此条件下,生根后的侧芽根系发达,生长速度快。

组培实验报告

组培实验报告

一、实验简介实验名称:植物组织培养实验目的:通过植物组织培养技术,了解植物细胞生长、分化和再生的过程,掌握组培技术的操作方法,并应用于植物繁殖和遗传改良。

二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,通过特定的培养基和外界条件,使植物组织在体外进行生长、分化和再生,最终形成完整的植株。

该技术广泛应用于植物繁殖、遗传改良、基因工程等领域。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:植物外植体(如叶片、茎段、愈伤组织等)培养基(MS培养基、改良MS培养基等)诱导培养基(1/2MS培养基、添加生长调节剂的培养基等)细菌培养基(如牛肉膏蛋白胨培养基)灭菌剂(如75%酒精、1%次氯酸钠溶液)其他:超净工作台、接种针、酒精灯、移液器、培养皿、培养箱等2. 实验仪器:电子天平高压蒸汽灭菌器移液器超净工作台培养箱显微镜四、实验步骤1. 材料预处理:选择健康、无病虫害的植物材料,用流水冲洗干净。

将外植体浸泡在1%次氯酸钠溶液中消毒5-10分钟,然后用无菌水冲洗3-5次。

将消毒后的外植体用无菌滤纸吸干水分。

2. 培养基制备:称取适量的培养基粉末,加入少量蒸馏水溶解。

将溶解后的培养基过滤除菌,加入适量的琼脂和生长调节剂。

将培养基倒入培养皿中,待凝固后备用。

3. 外植体接种:在超净工作台中,用无菌接种针将外植体接种到培养基上。

每个外植体接种3-5个,确保接种密度适宜。

4. 培养与观察:将接种后的培养皿放入培养箱中,控制适宜的温度、光照和湿度。

定期观察外植体的生长情况,记录愈伤组织形成、芽生长和根生长等过程。

5. 培养基调整与继代培养:当外植体形成愈伤组织或芽生长到一定长度时,可进行培养基调整和继代培养。

将愈伤组织或芽切割成小块,重新接种到新的培养基上。

根据生长情况,适时调整培养基成分和生长调节剂浓度。

五、实验结果与分析1. 愈伤组织形成:在适宜的培养基和条件下,外植体可形成愈伤组织。

愈伤组织是细胞增殖和分化的基础,是组织培养成功的关键。

茎段组培实验报告(3篇)

茎段组培实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的本实验旨在通过植物组织培养技术,以茎段为外植体,探究其再生能力和快速繁殖方法,为胡桃楸的遗传改良和种苗繁育提供技术支持。

二、实验材料1. 外植体:胡桃楸带芽茎段(长度约1-2厘米,直径约0.5-1厘米)。

2. 培养基:MS培养基(改良斯诺培养基)。

3. 激素:生长素(NAA)、细胞分裂素(KT)。

4. 灭菌剂:75%酒精、0.1%HgCl2。

5. 仪器设备:高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、光照培养箱、剪刀、镊子等。

三、实验方法1. 外植体消毒:将茎段用流水冲洗30分钟,然后用75%酒精浸泡30秒,再用无菌水冲洗3次,最后用0.1%HgCl2浸泡10分钟,再用无菌水冲洗5次。

2. 培养基配制:将MS培养基加入蔗糖(30g/L)、琼脂(6.5g/L)和活性炭(1g/L),调pH值至5.8,高压蒸汽灭菌30分钟。

3. 外植体接种:将消毒后的茎段切成0.5-1厘米的段,接种到含有不同激素浓度(NAA 0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L,KT 0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L)的培养基中。

4. 培养条件:将接种后的培养皿放入光照培养箱,光照强度为2000-3000勒克斯,光照时间为12小时/天,温度为25-28℃。

5. 观察记录:每隔一定时间观察外植体的生长情况,包括芽的生长、生根情况等,并记录数据。

四、实验结果与分析1. 外植体生长情况在实验过程中,外植体在不同激素浓度下的生长情况如下:(1)NAA 0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L组:芽生长缓慢,生根率较低。

(2)KT 0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L组:芽生长较快,生根率较高。

(3)NAA 0.1mg/L+KT 0.1mg/L组:芽生长较快,生根率较高。

2. 外植体生根情况在实验过程中,外植体的生根情况如下:(1)NAA 0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L组:生根率较低,根生长较慢。

(2)KT 0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L组:生根率较高,根生长较快。

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学号姓名学院专业、班级实验课程名称红豆杉愈伤组织的诱导培养1. 实验设备及材料(1)主要实验用具和仪器冰箱,普通天平,分析天平,各种型号的试剂瓶(棕色和白色)、电炉,三角瓶,移液管,量筒,烧杯,容量瓶,玻璃棒,医用口杯,精密pH试纸(pH5.4~7.0),药勺,称量纸,标签纸,封口膜,橡皮筋,电炉,高压蒸汽灭菌锅、100ml三角瓶、500ml 搪瓷杯、25ml量筒、10ml和5ml吸管、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精棉球、小块纱布、已灭菌培养皿和滤纸、枪状镊子、眼科手术剪、手术刀、酒精灯、100ml三角瓶、500或1000ml搪瓷杯、50ml量筒等。

(2)药品和试剂硝酸铵、硝酸钾、氯化钙、硫酸镁、磷酸二氢钾、碘化钾、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴、乙二胺四乙酸二钠、硫酸亚铁、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆素、烟酸、肌醇、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、NAA(α-萘乙酸)、6-BA (6-苄基腺嘌呤)、浓盐酸、氢氧化钠、95%酒精、蒸馏水等。

MS培养基母液、琼脂、蔗糖、生长调节物质、蒸馏水、1mol·L-1HCl、1mol·L-1NaOH、愈伤组织继代培养基、75%酒精。

(3)实验材料红豆杉种子处于脱分化进程中的外植体2.实验方法步骤及注意事项I、MS培养基母液和常用试剂的配制(1)培养基的成分目前,不论液体培养还是固体培养,大多数植物组织培养中所用的培养基都是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等几大类物质组成。

(2)培养基的配制方法配制培养基的最简单的方法是用市售培养基干粉溶解在蒸馏水里,加上蔗糖、琼脂和其他必要的补加物,再加入蒸馏水使之达到最终的容积。

最后调节pH值,高压灭菌,于是制成所需要的培养基。

如果没有培养基干粉,则可采用以下两种方法来配制:一个是按照配方规定的数量分别称量出各种成分,分别使它们溶解于水,然后再将它们混合在一起。

另一个是先配制一系列的浓缩贮备液(母液),贮存在2~4℃冰箱内,待配培养基时取出,按比例稀释配用。

此法较为常用。

(3)MS培养基母液的配制母液的配制有两种方法:一种是配制成单一化合物母液。

此法适合配制多种培养基都需要的同一种母液。

另一种是配成几种不同化合物的混合母液。

此法在大量配制同种培养基时省时省力。

配好的母液应放在试剂瓶中贮存。

在配制MS培养基母液时,为减少工作量可以把几种药品(如培养基中的大量元素或微量元素)配在同一母液中,但应注意各种化合物的组合以及加入的先后顺序,以免发生沉淀。

通常把每种试剂单独溶解后再与别的也已完全溶解的药品混合,或者待前一种化合物完全溶解后再加入后一种化合物。

混合已溶解的各种矿质盐时还应注意先后顺序,力求把Ca2+与SO42- 和PO43-错开,以免形成硫酸钙或磷酸钙的不溶物。

同时,要慢慢地混合,边混合边搅拌。

①大量元素母液的配制MS培养基中的9种大量元素除C、H、O外,剩下的六种可由KNO3、NH4NO3、CaCl2 •2H20、MgSO4 •7H2O、KH2PO4几种无机盐来供应,它们可配在同一母液中(具体配制见下表)。

配制的步骤为:确定母液的浓度和体积→计算各种化合物用量→称量→分别溶解→混合→定容→装瓶→贴标签→放入冰箱保存。

注意:CaCl2 •2H20最后加入②微量元素母液的配制MS培养基中的微量元素可由MnSO4 •4H2O、ZnSO4 •7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4 •2H2O、CuSO4 •5H2O、CoCl2 •6H2O几种无机盐来供应,它们也可配在同一母液中(具体配制见实验原理中微量元素表)。

配制步骤同大量元素。

③有机成分母液的配制MS培养基中所需的维生素和氨基酸等有机成分母液应分别单独配制(具体配制见下表)。

配制的步骤为:确定母液的浓度和体积→计算各种化合物用量→称量→溶解→定容→装瓶→贴标签→放入冰箱保存。

亦可配制成混合母液,配制的步骤为:确定母液的浓度和体积→计算各种化合物用量→称量→分别溶解→混合→定容→装瓶→贴标签→放入冰箱保存。

④铁盐母液的配制铁盐母液宜单独配制,其配制步骤为:确定母液的浓度和体积→计算各种化合物用量→称量→分别溶解→混合→煮沸数分钟→调节pH值至5.8 →定容→装瓶(棕色)→贴标签→放入冰箱保存。

用时每配l L培养基取该溶液5ml。

⑤植物生长调节物质母液的配制对于植物生长调节物质,配制成母液时,通常用mg·ml-1或ppm (parts per million,即百万分的浓度,指一百万份重量的溶液中,所含溶质的份数)较为方便,一般配制成0.5mg·ml-1的母液,这样的浓度便于计算也可避免冷藏时形成结晶。

⑥其他常用试剂的配制盐酸(lmol·L-1 ):用浓度36.5%、密度1.19g/cm3的浓盐酸配制氢氧化钠(lmol·L-1 ):用固体氢氧化钠配制75%酒精(v/v) :用95%的酒精来配制配制好的各种母液应分别贴上标签,写明母液名称、配制倍数、配制者、配制日期。

母液最好在2~4℃的冰箱中保存。

尤其对生长调节物质与有机类物质要求较严。

贮存时间不宜过长,如发现有霉菌和沉淀结晶产生,就不能再使用。

II、红豆杉愈伤组织诱导培养基配制1、药品及用具的准备(1)MS培养基母液的准备配制培养基时先将事先配制贮存的母液按顺序放好,并检查这些母液是否已变色或产生沉淀或产生结晶,已失效的就不要取用。

MS培养基母液包括大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机物母液。

(2)实验用具的准备将洁净的各种用具如三角瓶、量筒、烧杯、吸管、玻璃棒、医用口杯、精密pH试纸、封口膜、橡皮筋、电炉等准备好放在指定的位置。

再将蒸馏水、琼脂、蔗糖、生长调节物质、1mol·L-1NaOH、1mol·L-1HCl准备好。

2、培养基的配制步骤(1)根据需要配制的培养基的量称好所需的琼脂(0.7~0.8%),撕碎后放入医用口杯中,加入适量的蒸馏水(估计加入母液后不超过配制总量)置于电炉上加热溶解,边加热边用玻棒搅动。

(2)待琼脂完全溶解后,加入规定用量的母液(可事先取好放于一烧杯中),再加入规定用量的蔗糖,继续加温并不断搅拌,待琼脂煮透后端离火源,根据培养基配方及培养基体积加入所需要的生长调节物质,最后加蒸馏水至所需体积。

(3)调节培养基的酸碱性至PH5.8由于培养基的pH值直接影响到培养物对离子的吸收,因而过酸或过碱都对植物材料的生长有很大影响。

此外,琼脂培养基的pH值还影响到凝固情况。

所以,当培养基配制好后应立即进行pH值的调整。

最好用酸度计测试,既快又准,如无条件也可用精密pH试纸。

培养基若偏酸时用lmol·L-1 NaOH来调节,偏碱则可用lmol·L-1 HCl来调节。

一般来说,当pH值高于6.0时,培养基将会变硬;pH值低于5.0时,琼脂不能很好地凝固。

(4)培养基的分装配制好的培养基要趁热分装,分装时容器口小者可采用漏斗分注,口大者直接加注。

试管、三角瓶等培养容器加注量占其容积的1/4~1/3为宜,果酱瓶每瓶20~30ml,太多既浪费培养基,又减少了培养材料的生长空间;太少又会因营养不良影响生长。

培养基分装完后,用封口膜封严瓶口,并用橡皮筋扎紧。

(5)培养基的灭菌培养基分装后应立即置于高压蒸气灭菌锅内进行灭菌。

消毒灭菌时,压力表读数约为1.06kg·cm-2或0.106 MPa,121℃时保持15~30 min左右即可。

为了保证灭菌彻底,在蒸气灭菌锅增压前应先将灭菌锅内的冷空气放尽。

排净冷空气的办法:(1)可以事前打开灭菌锅放气阀,煮沸,待大量热蒸气排出后再关闭;(2)也可采用先关闭放气阀,待压力升到0.35kg·cm-2或0.037 MPa,108℃时打开放气阀排出空气,再关闭放气阀。

培养基灭菌时应注意:培养基消毒灭菌时间不宜过长,也不可超过灭菌锅规定的压力范围;否则,培养基中的蔗糖、有机物质,特别是维生素类物质就会分解,导致培养基变质、变色,甚至难以凝固。

当灭菌完成后,应切断电源或热源,待灭菌锅内气压接近“0”时,方可打开放气阀,拧开灭菌锅盖取出培养基。

切勿为急于取出培养基而打开放气阀放气,否则锅内气压下降太快会引起减压沸腾,导致灭菌锅内各容器中的培养基溢出,造成浪费或污染,甚至烫伤工作人员。

3、无菌蒸馏水和接种工具准备在250ml培养瓶中加入100ml蒸馏水,封口包扎;分别取枪状镊子2把、眼科手术剪和手术刀各1把,用牛皮纸和橡皮圈包扎成一套;每套培养皿内放入合适滤纸2~3张,用牛皮纸和橡皮圈包扎成一套;然后和培养基一起统一灭菌。

III、红豆杉愈伤组织的诱导(1)红豆杉愈伤组织的诱导①准备工作A. a 接种室的清洁和消毒;b 超净工作台的开机和消毒;c 消毒溶液、无菌水、装材料的容器、剪刀、镊子、培养皿、计时器、待用培养基等的准备。

B.实验材料的准备:a 准备红豆杉种子作实验材料;b 实验材料的修整、刷洗、冲洗;c 用洗衣粉水或肥皂水浸洗后再用自来水冲净。

②植物材料的表面灭菌A 操作人员洗手消毒B 装材料的容器及玻璃棒用酒精表面消毒C 将待消毒的材料浸入75%的酒精中10秒,取出用无菌水冲洗干净。

D 倒入消毒剂并计时E 到预定时间后倒出消毒液并用无菌水清洗干净。

F 将种子在水中浸泡约2h(2)红豆杉愈伤组织增殖培养基的配制配方:MS基本培养基+2mg/L NAA+0.1mg/L 6-BA+200mg/L水解酪蛋白+0.7%琼脂+3%蔗糖(3)剥取红豆杉种子里的胚放在准备好的固体培养基上IV、竹子愈伤组织的移栽(1)准备工作实验材料的准备:已长根的竹子幼苗,移栽土的准备(2)竹子移栽将准备好的竹子幼苗移种在装有培养土的小盆中,套袋以让小苗逐渐适应环境。

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