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临床常见病原体检测方法及诊断意义

临床常见病原体检测方法及诊断意义简介本文介绍了临床常见病原体的检测方法及其诊断意义。

病原体检测对于正确诊断并治疗疾病至关重要，因为不同的病原体可能导致不同的病情和治疗方法。

常见病原体检测方法以下是常见病原体检测的一些常用方法：1. 病原体培养：通过将患者样本接种到特定培养基中，培养条件适合病原体生长繁殖，然后观察培养结果，鉴定病原体种类。

2. PCR（聚合酶链式反应）：通过扩增病原体DNA或RNA片段，使其数量增加到可以观察到的水平。

PCR可用于检测细菌、病毒、真菌等多种病原体。

3. 血清学检测：通过检测患者血液中的抗体或抗原，判断是否存在特定病原体感染。

血清学检测方法包括ELISA、免疫荧光等。

4. 影像学检查：通过X射线、CT、MRI等影像学技术，观察病变部位或病原体引起的影响，如肺部感染的阴影。

诊断意义病原体检测的诊断意义在于确定病原体种类及其数量，对选择合适的治疗方案和预后评估具有重要意义。

1. 确定病原体种类：不同的病原体可能导致不同的疾病，因此准确确定病原体种类有助于明确疾病的诊断。

2. 指导治疗方案：针对不同的病原体，可能需要使用特定的抗生素或抗病毒药物进行治疗。

病原体检测结果可以指导医生选择合适的治疗方案，避免盲目使用药物。

3. 预后评估：某些病原体可能与严重的疾病及不良预后相关。

通过病原体检测及其数量的评估，医生可以更好地评估患者的预后情况，采取相应的治疗措施。

结论临床常见病原体的检测方法及其诊断意义对于疾病的准确诊断和治疗具有重要作用。

通过选择合适的病原体检测方法，并正确解读检测结果，可以更好地指导医疗决策和改善患者预后。

临床感染之病原体检验

(二)细菌学检验程序
1. 细菌学检验见第一节血液感染及有关章节。 2. 病原体检测只对某些疾病诊断具有意义。
由于菌群复杂，正常寄生菌和种类繁多，一份咽拭子分离出来的细菌不一定与疾病有关，另外由于接受药物治疗，使某些细菌受到抑制，可影响阳性检出率。因此，在分析结果时应紧密结合临床。
3. 鼻咽拭子标本的检测有助于猩红热、风湿热、急性肾小球肾炎病人的临床诊断；还可检出化脓链球菌、奋森螺旋体、脑膜炎奈瑟菌、麻风杆菌等以协助诊断；对白喉、百日咳或口腔念珠菌感染的诊断有意义，应结合临床。
第四节上呼吸道感染
(一)常见病原体 1.革兰阳性
金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、厌氧菌、炭疽芽胞杆菌、白假丝酵母菌、放线菌、奋森螺旋体; 2.革兰阴性脑膜炎奈瑟菌、大肠埃希菌、肺炎克雷白杆菌、
铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌、不动杆菌、百日咳杆菌、军团菌、肺炎支原体
4. 呼吸道还可见病毒感染，常见普通感冒或流行性感冒，咽炎和扁桃腺炎等，均应结合临床进行诊断。
第五节下呼吸道感染
1.革兰阳性
(一)常见病原体
金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、
肺炎链球菌、A群链球菌、肠球菌、结核
分枝杆菌、白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆
菌、白假丝酵母菌、毛霉、曲霉;
2.革兰阴性脑膜炎奈瑟菌、黄色球菌、大肠
3.抗体检测
为病毒检测的快速诊断方法，较常用。 (1)中和试验：主要检测中和抗体lgG，此抗
体持续时间长有诊断意义，阳性率和特异性均高。双份血清效价4倍增高。 (2)特异性IgM抗体测定：此抗体在病后4天即可出现，2周可达高峰，常用于早期诊断。用 ELISA、间接免疫荧光法等检测，敏感性和特异性较高。

临床病原学检查

酸杂交技术、技术、芯片技术等）
细菌感染检查检验特点
•通过对标本直接显微镜检，病原菌的分离培养鉴定，病原菌的抗原检测，核酸检测和细菌感染后机体免疫应答产物的测定及药物的测定及药物敏感性试验，对细菌感染性疾病可作出及时、准确的病原学诊断。
7
革兰染色法（）
由丹麦医生于1884年创立。 1.步骤
诊断学
临床病原学检查
2
临床病原体检查目的
• 临床病原体检查目的: • 是确定感染的发生和性质，在疾病早期提
供恰当的治疗方案，并采取有效的预防措施，防止感染传播造成的危害。
各种不同病原体的实验诊断方法遵循以下基本原则
1.正确、规范采集和运送标本。 2.直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原，借助分子生物学的方法检测病原体核酸，结合病人的病史、症状或体征，快速作出初步诊断。 3.初步诊断同时，对病原体进行分离与鉴定。 4.检测机体对病原体的免疫产物。 5.参与临床选择抗菌药物，指导和监控微生物的治疗方案，避免耐药菌株的产生。
母婴垂直传播宫内传播分娩时微小皮损处传播产后母婴密切接触性传播
• 高 (>8%): 占45% • 一生感染的危险 >60% • 婴幼儿感染常见 • 中等 (2%～7%): 占43% • 一生感染的危险是 20%～60% • 感染存在于所有年龄组 • 低 (<2%): 占12% • 一生感染的危险 <20% • 许多感染发生在成人危险组
涂片结晶紫碘液酒精染色媒染脱色
革兰阳性菌
(Gram positive bacteria)
革兰阴性菌
(Gram negative bacteria)
复红复染
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临床本科11病原体检测汇总

第三节感染性病原体检测（自学）
第四节
病毒性肝炎血清学标志检测
病毒性肝炎有7型：HAV
HBV HCV
HDV HEV HGV TTV 甲、丙、丁、戊四型肝炎均会产生特异抗体，IgM型抗体阳性示急性感染或病毒在复制；IgG型抗体阳性示继往感染，传染性降低。抗HAV—IgG属保护性抗体，可终生阳性。
两瓶阴性
单瓶阳性
两瓶均阳性
两次培养为不同细菌
污染
两次培养为相同细菌
重新双部位采血培养
细菌鉴定/药敏实验
阳性报告
2、尿液标本
杂菌多，要求晨起中段尿或导尿管无菌操作。
3、呼吸道标本
痰液和鼻咽拭子均要求晨起清水漱口后采集 4、粪便标本取粘液脓血部位送检，怀疑2号病用碱性蛋白胨保养送检。 5、脑脊液应及时送检或床边接种，同时做血培养。体腔积液，采量多，做血培养。
抗—HCV：输血后肝炎
抗 HDV 检测须依赖
乙肝病毒存在戊肝抗体检查

肝炎病毒和病毒性肝炎的特征
病毒特征肝炎特征
急性肝炎急性肝炎慢性肝炎肝硬化。肝癌同上同上急性肝炎经口非经口 30天 60--70天 0.1--0.2% 约1%
类型直径(nm) 核酸所致肝脏病感染途径潜伏期急肝死亡率

HBsAg （ + ）示急慢性乙肝或携带者，具有传染性 ? ? HBsAb （ + ）示继往感染，现已恢复。 HBsAb属保护性抗体有中和作用。 HBeAg （ + ）示病毒在复制，有强传染性。且可胎传。 HBeAb （ + ）示病毒复制减少，传染性降低。一般认为HBeAb无保护性。 HBcAb（+）示病毒感染且复制，具有传染性（特别是IgM阳性）。HBcAb无保护性。

诊断学临床常见病原体检测

诊断学——临床常见病原体检测
掌 1、临床各类标本的采集、运送和检查的方法；
握 2、临床常见病原体的种类分布及变迁情况；
3、耐药病原体检测的意义。
熟
医院感染常见病原体的检查。
悉了 1、药敏试验的原理和方法
解 2、性传播疾病病原体检查的内容
一、临床各类标本的采集运送和检查方法二、病原体耐药性检测三、临床常见病原体检测四、病毒性肝炎检测五、性传播疾病病原体检测六、医院感染常见病原体检测
药物敏感试验
耐药筛选试验：以单一药物、单一浓度检测细菌耐药性。
折点敏感试验：是仅用特定抗生素检测细菌耐药性。
药物敏感试验
报告方法：
• 敏感(susceptible，S) S ：测试菌能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭。
• 耐药(resistant，R) R：测试菌不能被在体内感染部位可能达到的抗菌药物浓度所抑制。
执行标准均来自临床实验室标准协会（CLSI）
（一）概念
耐药性（drug resistance）：是指细菌对药物所具有的相对抵抗性。
固有耐药性（intrinsic resistance）：是由细菌染色体基因决定而代代相传的耐药，如肠道杆菌对青霉素的耐药。
获得耐药性（acquired resistance）：是细菌与药物反复接触后对药物的敏感性降低或消失，大多由质粒介导其耐药性，但亦可由染色体介导。
（一）细菌感染检查项目的选择
PCR技术基因探针技术
细菌感染
抗原抗体检测
培养
涂片镜检
（二）病毒感染检查项目的选择
特异性抗体检测
电镜检查
细胞培养
核酸检测（PCR）
（三）真菌感染检查项目的选择

临床病原体检查的常用方法

病原体是指侵犯人体、导致人体受感染的微生物，其中对人体伤害性最大的是病毒和细菌。

当人体被病原体入侵之后，这些微生物开始在人体中繁殖生长、释放毒性，进而导致人体出现不同的病症，这个过程就称为感染。

但是人体在被病毒入侵以后，能够激发人体内的抵抗力，与病毒对抗，这也就是我们常说的免疫力。

然后身体内部的免疫和入侵后的病毒，不断对抗，如果身体免疫能力强，那身体就不形成感染，病原体便会逐渐消失，如果身体免疫力较弱，无法对抗强悍的病毒，那将会形成感染，感染一旦恶化、扩散，就会对人体造成生命安全的威胁。

对抗感染性病毒，除了机体自身的免疫功能，还可以借助外力，比如抗菌药物，在药物的帮助下，可以有效击退病毒，将疾病治愈。

一、临床病原体检查临床病原体检查的目的主要是为了明确是否已经发生感染，确定病原体属于什么类型，其次是将体外抗微生物药物敏感实验结果呈现出来。

此外，检查临床病原体也是为了配合流行病学的调查，协助密切监察病毒的发生趋势，然后及时向有关部门报告。

一般来讲，展开一次临床病原体检查，首先要通过医生和护士采集标本，然后由检验师送往检验科进行检验，检验科通过直接显微镜检查、血清学检查、细菌培养等方式进行检验，然后出具检验报告，最后再由医生明确诊断，分析后予以合理的用药。

二、临床病原体标本采集在采集标本的过程中，要遵循以下几个原则，第一，要根据患者的患病史，同时结合患者的临床表现，确定采集什么类型的标本，然后再选择患者病变发生明显的部位进行采集；第二，要明确采集标本前，患者是否使用过抗生素药物，一般在发病的早期，患者会采取抗生素药物治疗，来对抗病毒，如果患者使用过抗生素，要在标本采集上注明，以免影响标本的检验结果；第三，采集标本的环境要干净卫生，采集后的标本要置于无菌器皿中，并且密封完好，以免在采集、运送过程中被污染；第四，标本在采集之后，必须立刻贴上标签，和检验申请单一起送入检验科，以免出现差错。

总之，要遵循无菌、及时、符合要求、标清注明的原则。

实验诊断-临床常见病原体检测：性传播疾病病原体检测

实验诊断-临床常见病原体检测：性传播疾病病原体检测性传播疾病病原体检测性传播疾病（sexually transmitted disease， STD）简称性病，是一类能通过各种性接触、类似性行为及间接接触而传播，主要侵犯皮肤、性器官和全身脏器损害的疾病。

包括梅毒、淋病、艾滋病、软下疳、性病淋巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎、生殖器疱疹、尖锐湿疣、生殖器念珠菌病、细菌性阴道病、滴虫病等20余种疾病，其中前3种属于《中华人民共和国传染病防治法》规定管理的乙类传染病。

一、流行病学和临床类型（一）流行病学1.病原学细菌（淋病奈瑟菌，杜克雷嗜血杆菌等）、病毒（人类免疫缺陷病毒，人乳头瘤病毒，单纯疱疹病毒-Ⅰ等）、支原体（解脲脲原体，生殖支原体等）、螺旋体（梅毒螺旋体等）、衣原体（沙眼衣原体D-K型，L1，L2，L3型等）、真菌（白念珠菌等）和原虫（阴道毛滴虫等）。

2.传播途径性行为传播、间接接触传染、血液与血制品传播、对胎儿与新生儿的传播、职业传播（二）常见临床类型1.获得性免疫缺陷症（AIDS）又称艾滋病，由人类免疫缺陷病毒（HIV）通过结合细胞表面的CD4蛋白受体进入易感细胞引起部分免疫系统被破坏。

2.梅毒（shyphillis）是由苍白密螺旋体引起的疾病，一般过程可分为三个阶段：一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒。

3.淋病（gonorrhea）由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖系统的急性或慢性化脓性感染。

4.非淋菌尿道炎（non-gonococcalurethritis，NGU）主要是由沙眼衣原体、解脲脲原体等通过性接触所引起的尿道炎症。

5.生殖器疱疹（genitalherpes）和尖锐湿疣(condyloma acuminatum) 分别由单纯疱疹病毒和人乳头瘤病毒所引起的性病。

6.软下疳（chancroid）由杜克雷嗜血杆菌(Haemophilus ducreyi) 感染而引起的性病。

二、检查项目和临床应用（一）AIDS病原体检测1.HIV的分离培养病毒培养是检测HIV感染最精确的方法。

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复制出相应的动物模型
建立新的检测方法
• PCR法 • 间接免疫荧光法 • ELISA
直接显微镜检查的目的与评价（1）
• 染色标本目的：了解细菌的形态、染色性或观察宿主细胞内包涵体。
• 评价：为临床初步诊断提供依据。如CSF找到抗酸杆菌，应初步考虑结核分枝杆菌感染。
革兰氏阳性球菌革兰氏阴性杆菌
• The specimen was received in a fixative which kill any microorganism present.
• The specimen is dried. • The specimen has been received for
anaerobic culture from a site known to have anaerobes as part of normal flora.
粪便标本采集
• 自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清洁容器中送检。
• 排便困难者，采用直肠拭子采集。 • 怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻，立即接
种或将标本置于碱性蛋白胨或卡-布运送培养液送检。 • 传染性腹泻应连续送检3次。
生殖道标本
• 男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。
生殖道标本
• 女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌物。怀疑厌氧菌感染，应采用阴道后穹隆穿刺法，并立即接种于厌氧平板。
病原体抗原与抗体的检测
• 特异性 IgM可作为感染性疾病的早期诊断指标，且可区分原发与复发感染。
• 特异性 IgG，尤其双份血清的滴度呈4倍或4倍以上升高，考虑病原体感染。
• 排除交叉抗原的影响，病原体抗原检测可明确感染的病原体。
第二节临床常见病原体检查
• 临床常见病原体为：细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次体以及寄生虫等。
• 疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器硬下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，立即送检。
脑脊液
• 由临床医生采用腰椎穿刺，抽取2-3ml，置于无菌容器中立即送检，不能暂时保存于冰箱中。
胸腹水等穿刺液标本
• 标本采集应在用药前或停止用药后1~2天后进行。
• 用无菌注射器抽取可疑标本，分别置于抗凝与不抗凝无菌容器中立即送检。
生物药物敏感试验结果。
细菌分离培养与鉴定的结果评价
• 正常人群的无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为感染的病原体。
• 存在正常菌群的标本检测到细菌，应结合细菌的量考虑是否为致病菌。
• 如临床表现支持感染，但培养阴性，应考虑为标本不合格、培养不恰当等因素。
• 直接镜检找到病原体，而培养阴性，应考虑有L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。
病毒分离培养与鉴定的结果评价
• 必须结合流行病学资料、临床表现、标本来源及病毒种类加以分析。
• 从组织、血液以及脑脊液中分离到病毒可明确诊断。
• 从呼吸道、肠道等分离到病毒，如该病毒人体不能长期携带，有诊断价值，如麻疹病毒、流感病毒等。反之需相应的临床表现，才有病原学意义，如巨细胞病毒，肠道病毒等。
Байду номын сангаас
墨汁染色找新型隐球菌
抗酸染色
直接显微镜检查的目的与评价（2）
• 不染色标本：用于观察病原体的大小、形态与运动等特性。
• 结果评价：部分病原体可借此初步诊断，如暗视野显微镜下见弹簧状螺旋体，应怀疑梅毒螺旋体的感染。
病原体分离培养与鉴定的目的
• 明确感染病原体。 • 为临床提供体外抗微
细菌感染检查项目的选择
• 普通细菌：常采用直接镜检、分离培养与鉴定明确病原体。
• 难培养或培养要求高的细菌：综合运用免疫学或分子生物学检测，如结核分枝杆菌感染以及幽门螺杆菌感染等。
• 上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结果分析时应予考虑。
痰标本的采集
• 采集时间：晨痰，且在取痰前用清水反复漱口。
• 方法：（1）自然咳痰法：（2）气管镜下采集法；（3）气管穿刺法。
尿标本的采集
• 无菌采集中段尿 • 如考虑厌氧菌感染，
采取膀胱穿刺法采集标本。 • 排尿困难者考虑导尿采集标本。
血液标本的采集
• 适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症的病人。
• 一般在抗生素使用前，于发热初期或高峰期采血。
• 24小时内采血2~3次可提高阳性率。 • 血液与培养基的比例为1：10，一般成人
血量10~20ml，婴儿1-5ml。
血液标本的采集方法
呼吸道标本采集
• 类型：鼻咽拭、痰和经气管采集的标本。
临床病原体检查
临床病原体检查目的
• 明确感染是否发生以及病原体的类型。 • 提供体外抗微生物药物敏感实验的结果。 • 密切监视烈性传染病与新的传染病的发
生，及时向行政主管部门报告。 • 配合相关机构进行流行病学调查。
检验科可拒收部分标本
• The specimen transport time exceeds 2 hours postcollection and the specimen is not preserved.
• 怀疑厌氧菌感染，采用床边接种为宜。
脓液及创伤感染分泌物标本
• 开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采取脓液或病灶深部分泌物，置于斯氏运送培养基送检。
• 封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取，怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。
• 大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉纤多点采取脓液或分泌物，置于无菌试管中送检。
• 阴性不能排除病毒感染。
病原体核酸的检测
• 聚合酶链式反应：扩增病原体微生物特异的 DNA或 RNA片段。
• 探针杂交法：通过已知序列的探针与病原体的核苷酸杂交，用以了解病原体的有无。
病原体核酸检测结果评价
• 是检测病原体微生物最灵敏的方法，但具有一定的假阳性与假阴性。
• 阳性只表明存在某种病原体的核酸，是否正被感染应结合临床具体分析。
检查方法
• 直接显微镜检查。 • 病原体抗原与抗体的检测。 • 病原体核酸的检测。 • 病原体的分离培养与鉴定。
SARS（severe acute respiratory syndrome ）病原体
的确定
电子显微镜发现为某种冠状病毒
基因组测序锁定为新型冠状病毒
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