实验室管理考试重点

方法学评价：是通过实验途径测定分析方法的技术性能，并评价其是否可接受，其目的在于明确该方法是否具有足够的方法性能来说明检测系统的可靠性及可以满足临床需求，检测系统的性能评价是方法学评价的具体实施，具体内容包括：准确度、精密度、检测限、生物参考区间和可报告范围。

POCT：即床旁检验，指在患者医疗现场对任何医疗措施所需进行的检验，在患者身边或病房对其包括血、尿或其他样本在内的标本所进行的检验，这类检验方式可由实验室人员或非实验室人员完成。参考方法：是准确度与精密度已经充分证实，干扰因素少，系统误差与重复测定的随机误差相比可以忽略不计，有适当的灵敏度、特异度及较宽的分析范围。主要用于鉴定常规方法，也用于二级参考物和质控血清的定值。

室间质量评价（EQA）：又称外部质量评价，是多家实验室分析同一样本，由外部独立机构收集和反馈实验室测定结果，并以此评价实验室对某类或某些检验项目的检验能力，因此室间质量评价又称能力验证（PT）

室内质量控制（IQC）：临床实验室的质量控制，往往按照一定频率定性或定量地检测稳定样品中的某种或某些成分，并将测定值标在符合一定统计学规律的质控图上，运用设定的判断限或质控规则对控制图上的测定值进行评估，以此推测同批次患者标本的检测质量是否在控，这一过程就是室内质量控制。

实验室工作人员，采用一定的方法和步骤，连续评价实验室工作的可靠程度，诣在监控本实验室常规工作的精密度，提高本实验室常规工作中批内，批间样本检测的一致性，以确定实验结果是否可靠，可否发出报告的一项工作。

正确度：指多次测量结果的均值与被测量真值之间的一致程度，用偏倚表达。表示系统误差。

偏倚:是实验结果偏离可接受参考值的系统偏离。

医学实验室：又称临床实验室，是为诊断、预防、治疗人体疾病或评估人体健康提供信息为目的，对来自人体的各种标本进行生物学、微生物学、免疫学、化学、血液免疫学、血液学、生物物理学、细胞学、病理学或其他检验的实验室。并可以提供其检验结果咨询、解释和进一步检查提供建议。

准确度：指一次测量结果与被测量真值之间的一致程度（是系统误差与随机误差的综合），以不准确度来衡量。

气溶胶：是指悬浮于气体介质中的粒子，一般直径为0.001~100μm的固定态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。

实验室认可：是指经授权的认可机构对实验室的管理能力和技术能力按照约定的标准进行评价，并将评价结果向社会公告并正式承认其能力的活动，以表明经认可的实验室具有从事特定任务的能力。功能灵敏度：重复测定变异系数CV为20%的检测限样本浓度，即在预期检测限附近几份不同浓度的样本重复性试验测定结果中，变异系数CV为20%的检测限样本浓度或最先出现的（均值-3s）大于空白样品的（均值+3s）作为功能灵敏度，功能灵敏度反映了方法能可靠测定的最低浓度。

校准：是指在规定条件下，为确定测量仪器或测量系统所指示的量值或实物量具或参考物质所代表的量值与对应的由标准所复现的量值之间关系的一组操作。

不确定度：指在统计控制状态下，表征合理地赋予被测量之值的分散性。标准不确定度：指以标准差表示的测量不确定度。

溯源性：通过一条具有规定不确定度的不间断的传递链或实验室间的比对等，使测定结果或标准值能够与规定的参考标准（通常是国家或国际标准）联系起来，使测定结果的准确性得到技术保证和验证，称量值的溯源性。

测定结果或标准量值通过连续的比较链与给定的标准相联系的属性，给定的标准通常是国家或国际标准，比较链中的每一步都有给定的不确定度。

实验室的主要危害源：生物危害源、化学危害源及物理危害源（包括放射性核素的辐射、紫外线和激光光源照射、电、噪声）。

全过程质量控制：是指从临床医生开出检验申请医嘱开始至实验室检测完成，并将检验结果发至临床整个过程中一系列检验质量的方法和措施。根据ISO15189的内涵，将其分成：分析前、分析中和分析后的质量控制三个方面。

实验分析方法包括：根据准确度与精密度不同分，决定性方法、参考方法和常规方法。

循证检验医学对检验人员的要求：必须对检验方法、检验结果精确度以及结果的实用性进行系统评价。

Ped:即误差检出概率，是指常规分析中分析误差发生时，质控规则及组合能有效发现或检出的概率，相当于临床诊断试验的灵敏度。理想的质量控制方法Ped为1.00，即可以100%的检出有误差的分析批次，在临床检验控制的实际操作过程中，Ped在90%~99%之间是可以接受的。

Pfr：即假失控概率，当分析过程正确进行时，除了方法的固有误差外，在没有其他误差加入的情况下，如果质量控制规则判断为失控，称为假失控，假失控出现的可能性称为假失控概率，这相当于临床诊断试验的特异性，理想的质量控制方法Pfr为0，即所选质控规则对无误差分析批次均判定为在控，在临床检验控制的实际操作过程中，Pfr<5%是可以接受的。

ROC曲线的临床应用：①选择最佳分界值②诊断效率分析：曲线下面积越大，其诊断价值就越大③对检验结果的评价

实验室用水等级：①一级水：基本上去除了溶解或胶状的离子和有机污染物，适用于最严格的分析需求如高压液相色谱分析。一级水可由二级水经过石英玻璃蒸馏水器或离子交换混合床处理后，在经过0.2μm孔径的膜过滤来制备。②二级水：无机物、有机物或胶体污染物含量非常低，适合于灵敏的分析，临床实验室大部分检测如生化和免疫分析等均运用二级水。二级水可由多次蒸馏、离子交换或反渗透后连接蒸馏而制成。③三级水：适用于大部分实验室的试验和试剂制备，如一般的化学分析试验、自动化仪器的冲洗、配制微生物培养基、高压灭菌和普通洗涤等。三级水可由单级蒸馏、离子交换或反渗透制成。

参考区间：在上下参考限之间的范围，利用参考区间进行解释时应注意参考人群的代表性和参考个体的入选标准。

质量管理体系的构成：由组织结构、程序、过程和资源四部分组成。实验室认可的过程：①申请认可阶段②受理阶段③评审阶段④推荐阶段⑤资料上报阶段⑥批准发证阶段

性能评价包括：①灵敏度②特异度③预测值（含阳性预测值和阴性预测值）④诊断指数⑤诊断效率（含阳性似然比和阴性似然比）

批内不精密度：20天共有80个结果，40对。每对结果间的差是每批的批内差，在20天共有40批，这些差值客观反映了较长时间内

的批内不精密度。

批间不精密度：对每批的双份结果以均值表示，一天做2批，2批均值间的差表示这一天的批间差，减去批内差的成分，即为批间不精密度。

天间不精密度：求每天的均值，20天共有20个均值，这些均值间的差表示天间差，扣除内含的批间差因素即为天间不精密度。

总不精密度：将批内不精密度、批间不精密度和天间不精密度以方差形式相加就可以得到样品的均值下具有的总不精密度。

室间质量评价计划的成绩要求：①以偏倚评分方法计算成绩，每次活动每个分析项目在可接受范围内的检测结果应该大于等于80%，否则称为本次活动该分析项目室间质评成绩不满意②每次室间质评所有评价项目的总成绩需大于等于80%为可接受成绩，否则称为本次室间质评成绩不满意③在规定的回报时间内实验室未能将室间质评的结果回报给室间质评组织者，将定为不满意，室间质评成绩得分为0④对同一分析项目，连续两次活动或连续三次中的两次活动为达到满意，则称为室间质量评价活动不成功⑤所有参与评价的项目连续两次活动或连续三次中的两次活动未达到满意的成绩则称为不成功的室间质量评价成绩⑥对于不满意的室间质量评价成绩，实验室必须及时查找原因并采取纠正措施，必要时进行培训并保留文件记录。实验室对文件记录必须保存两年以上。

建立室内质量控制图的步骤：levey-Jennings单值质控图的一般做法：测定至少20份质控品，计算20个测定结果的平均数和标准差，定出控制线，一般以?x±2s为警告限，?x±3s为失控限，以后每分析批随患者样本测定质控品，将所得的质控结果标在质控图上。质控图中心线和标准差的确立：质控图的中心线对应于质控品测定结果的平均数。中心线和标准差必须由实验室使用自己的检测系统对质控品进行检测和确定，定值质控品给出的标示值和给出的标准差只能作为参考，不能直接用于质控图。对于稳定期较长的新批号质控品应与即将用完的旧批号质控品一起平行测定一段时间；对于稳定期较短的质控品，则需在3~4天内，每天分析同一水平的质控品3~4瓶，每瓶重复测定2~3次。

多规则质控方法每一规则的含义：①12S：一个质控测定值超过?x ±2s质控限，作为警告规则，并启动其他规则进一步检验质控数据是否在控。②13S：一个质控测定值超过?x±3s质控限时，则判断为该分析批为失控。这一规则主要对随机误差敏感，但也对大的系统误差产生响应。③22S：当两个连续的质控测定值超过?x+2s 或?x-2s质控限时，则判断为失控。两个测定值可以是同一质控物，也可以是两个不同的质控物。该规则对系统误差敏感。④R4S：当在同一批内高和低的质控测定值之间的差或极差超过4s时，则判断为失控。这一规则对随机误差敏感。⑤41S：当4个连续的质控测定值同时超过?x+1s或?x-1s质控限，则判断为失控。连续的质控测定值可能发生在同一质控物或不同质控物的测定值。这一规则对系统误差敏感。⑥10?x：当10个连续的质控测定值落在平均值的同一侧，则判断为失控。连续的质控测定值来源于几个分析批中，这一规则对系统误差敏感。

失控时原因的查找步骤：①仔细查看质控图上质控数据点的分布，分析所违背的质控规则，大致确定误差的类型，区分是随机误差还是系统误差。②建立常见失控原因与误差类型的联系。③分析系统的新进改变与失控之间的关系。④对于大型自动化分析仪器首先应分析在室内质控失控之前有无改变分析系统的完整性。⑤对于手工操作介入较多的项目应认真回顾操作的全过程，有无更换操作人员、有无定量方面的错误、有无计算方面的错误，排除人为因素后，分析是否存在校准品、试剂、比色计等方面的原因。

临床化学设备操作精密度评价（CLSI EP5A）

1、实验方法：①试剂和校准物：同一批号②样本：基质与临床样本相似，2个以上浓度③实验天数：20天以上④实验次数：每天2批，每批2个样本，每次样本重复2次

2、实验程序：对稳定的试验样品（通常为基质效应较小的两个水平的质控品）每天做2批实验，批间时间间隔不小于2小时，每批样品做双份测试，共20天。一天内得到2对结果，20天共得40对80个结果，每对结果间的差就是批内差，20天内共40批，这些差值就反映了批内不精密度。对每天每批的双份结果求均值，每天两批均值间的差就表示这些天的批间差，对20天的批间差统计后减去批内不精密度就是真正的批间不精密度。对每天4个数据求均值为每天均值，每天均值间的差表示天间差，对20天的天均值统计后减去批间不精密度就是真正的天间不精密度。将批内不精密度、批间不精密度、天间不精密度以方差形式相加就可得到样品的均值下具有的总不精密度。

3、不精密度判断标准：批内不精密度CV应为CLIA88指标的1/4，总不精密度CV应为CLIA88指标的1/3，实际上也可直接将80个数据作均值和标准差统计同样可求出S总。

临床检验结果的正确度用患者标本进行方法学比较和偏倚评估（CLSI EP9A）

1、比较方法的选择：用作比对的分析方法必须仔细选择，因为实验结果的解释依赖于比较方法结果的正确性的假设。可能时比较方法应选择“参考方法”或具有溯源性的检测方法。试验方法和参考方法之间的任何差值指的是试验方法，即误差是由于试验方法导致，因为参考方法的正确性已有记录。有时选择的比较方法并不意味着方法具有正确性，大多数常规实验方法归为此类。必须仔细解释试验方法和常规方法之间的任何差异，如果差别很小，则两方法具有相同的相对的准确度，如果差别很大并医学上不可接受，则需要识别哪一方法是不准确的。用回收和干扰试验来初步判断哪个方法更适合作为比较方法。

2、实验方法：待评定方法

3、实验程序：①实验全程必须处于完全质量管理控制下②每天分别用比较方法（X）和实验方法（Y）进行测定③每份标本在同一系统或同一方法做双份测试，在两个小时内完成量方法对同批标本的测试④测定顺序：12345678，87654321⑤测定次数：至少测定5天，共40个样本。

4、判断标准：以美国临床实验室修正法规对室间评估的允许误差的1/2为允许限值。在各个临床医学决定水平浓度Xc处了解新方法Y引入后相对于X方法的系统误差SE，如果SE小于CLIA88允许误差的1/2，则认为新方法可替代原有方法或新方法能满足实验室对正确度的质量要求。

实践循证检验医学必须具备三个基本条件：○1具有扎实的检验医学理论基础和专业技能○2具有一定的临床流行病学基础○3具有现代化的信息收集手段，熟悉当前最佳的相关研究成果。

ROC是受试者工作特征曲线：首先将测定结果分层，计算其灵敏度及特异度，一般要求至少有5组连续分组的数据；然后以真阳性率（灵敏度）为纵坐标，假阳性率（1-特异度）为横坐标，将其各层

结果绘图，连接各点使成曲线，其中离左上角最近的一点，即其临界值。

戈登指数：又称正确指数，是指灵敏度和特异度之和减去1，是综合评价真实性的指标，理想的试验应为1。

参考区间：是指正常人解剖、生理、生化等各种数据的波动范围。又称参考范围，过去又称为正常值范围，这些数据因人、环境、生理状况的改变而在一个范围内波动。

参考区间应注意下列因素：参考人群的特点及其选择、取样本时的环境与生理条件、样本的收集与贮存、假阳性和假阴性总是不可避免的、各实验室应建立自己的参考区间。

CLIA88：《临床实验室改进法案修正案》

LIS：临床实验室信息系统，由计算机、通信设备、网络硬件、网络软件、通信协议标准组成。

HIS：医院信息系统

临床基因扩增实验室应当设置以下区域：试剂储存与准备去、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。