生物技术实验解析
生物技术的实验报告总结
一、实验背景随着科技的不断发展，生物技术已成为当今世界重要的研究领域之一。
生物技术涉及基因工程、细胞工程、酶工程等多个方面，旨在利用生物体或其组成部分进行技术创新和产品开发。
本实验旨在通过学习生物技术的基本原理和实验操作，掌握相关技术，提高学生的实验技能和创新能力。
二、实验目的1. 了解生物技术的基本原理和实验操作。
2. 掌握分子克隆、蛋白质纯化等生物技术实验方法。
3. 提高学生的实验技能和创新能力。
三、实验内容1. 分子克隆实验（1）目的：学习DNA的提取、连接、转化等分子克隆技术。
（2）原理：利用DNA连接酶将目的基因与载体连接，并通过转化将重组质粒导入宿主细胞。
（3）操作步骤：①DNA提取：取适量细胞，加入裂解缓冲液，进行细胞裂解。
②DNA纯化：利用离心柱纯化DNA。
③连接：将纯化后的目的基因与载体连接。
④转化：将连接产物转化至宿主细胞。
⑤筛选：通过PCR、酶切等手段筛选阳性克隆。
2. 蛋白质纯化实验（1）目的：学习蛋白质纯化的原理和实验操作。
（2）原理：利用蛋白质的物理化学性质，如分子量、电荷、亲和力等，通过层析、离心等方法进行纯化。
（3）操作步骤：①样品制备：取适量蛋白质样品，加入适当缓冲液。
②离心：通过离心去除细胞碎片和杂质。
③层析：利用层析柱进行蛋白质分离纯化。
④收集：收集纯化后的蛋白质样品。
四、实验结果与分析1. 分子克隆实验结果：通过PCR、酶切等手段筛选出阳性克隆，证实了目的基因已成功克隆。
2. 蛋白质纯化实验结果：通过层析、离心等方法，成功分离纯化了目标蛋白质。
五、实验讨论1. 分子克隆实验中，DNA提取和纯化是关键步骤。
实验过程中，应严格控制操作条件，确保DNA质量。
2. 在蛋白质纯化实验中，层析柱的选择和操作对实验结果有很大影响。
应选择合适的层析柱，并严格按照操作规程进行实验。
3. 实验过程中，要注意实验操作的安全性，如使用生物安全柜、穿戴防护用品等。
六、实验总结通过本次生物技术实验，我们掌握了分子克隆、蛋白质纯化等基本实验操作，提高了实验技能和创新能力。
生物技术实验报告
生物技术实验报告生物技术实验报告引言生物技术是一门涉及生物学和工程学的交叉学科，通过利用生物体的特性和生物分子的相互作用，来解决现实世界中的问题。
本实验旨在探索生物技术在实验室中的应用，以期增进对生物技术的理解和认识。
实验目的本实验的目的是通过使用PCR技术，对特定基因片段进行扩增，并通过凝胶电泳分析扩增产物。
通过这个实验，我们将学习PCR技术的原理和操作步骤，并了解如何使用凝胶电泳进行DNA分析。
实验材料和方法材料：- DNA样本- PCR试剂盒- 扩增引物- DNA电泳仪- 琼脂糖凝胶- DNA标记物方法：1. 准备PCR反应体系：将PCR试剂盒中的反应液与DNA样本、扩增引物混合。
2. 进行PCR扩增：将混合好的反应液放入PCR仪中，按照设定的温度和时间进行扩增。
3. 准备琼脂糖凝胶：将琼脂糖溶解在缓冲液中，倒入电泳仪中，等待凝固。
4. 准备样品：将PCR扩增产物与DNA标记物混合。
5. 进行电泳：将混合好的样品倒入琼脂糖凝胶槽中，进行电泳分析。
6. 分析结果：观察凝胶上的DNA条带，判断扩增是否成功。
实验结果与讨论在进行PCR扩增和凝胶电泳后，我们观察到在琼脂糖凝胶上出现了一些DNA 条带。
这些条带代表了PCR扩增产物的大小和数量。
通过比较这些条带与DNA 标记物的迁移距离，我们可以确定PCR扩增产物的大小。
在实验中，我们使用了PCR技术对特定基因片段进行扩增。
PCR技术通过利用DNA聚合酶酶的特性，在不断变化的温度条件下，使DNA链的两端进行反复扩增。
这种扩增过程可以快速产生大量目标DNA片段，从而使我们能够对其进行进一步分析。
凝胶电泳是一种常用的DNA分析方法，通过利用DNA的负电荷特性，在电场的作用下，使DNA片段在琼脂糖凝胶中迁移。
由于DNA片段的大小不同，迁移速度也不同，因此在凝胶上形成了不同大小的DNA条带。
通过与DNA标记物的比较，我们可以确定PCR扩增产物的大小。
在本实验中，我们成功地扩增了目标基因片段，并通过凝胶电泳分析得到了相应的结果。
2019生物技术生物化学实验讲义18页
2019⽣物技术⽣物化学实验讲义18页实验⼀糖的呈⾊反应和还原糖的检验⼀、实验⽬的1.学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的⽅法。
2.了解鉴定还原糖的⽅法及其原理。
⼆、实验原理糖经浓⽆机酸处理，脱⽔产⽣糠醛或糠醛衍⽣物。
戊糖形成糠醛，⼰糖则形成羟甲基糠醛。
这些糠醛和糖醛衍⽣物在浓⽆机酸作⽤下，能与酚类化合物缩合⽣成有⾊物质。
与⼀元酚如α⼀萘酚作⽤，形成三芳⾹环甲基有⾊物质。
与多元酚如间苯⼆酚作⽤，则形成氧杂蒽有⾊物质，反应式如下：通常使⽤的⽆机酸为硫酸。
如⽤盐酸，则必须加热。
常⽤的酚类为α⼀萘酚、甲基苯⼆酚、间苯⼆酚和间苯三酚等，有时也⽤芳⾹胺、胆酸、某些吲哚衍⽣物和⼀些嘧啶类化合物等。
有⼈认为，⽤浓硫酸作为脱⽔剂时，形成有颜⾊的产物与酚核的磺化有关，见如下反应式；（⼀）糖的呈⾊反应1．Molish反应(α～萘酚反应)本实验是鉴定糖类最常⽤的颜⾊反应。
糖在浓酸作⽤下形成的糠醛及其衍⽣物与α⼀萘酚作⽤，形成红紫⾊复合物。
在糖溶液与浓硫酸两液⾯间出现紫环，因此⼜称紫环反应。
⾃由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。
此外，各种糠醛衍⽣物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等皆呈颜⾊近似的阳性反应。
因此，阴性反应证明没有糖类物质的存在；⽽阳性反应，则说明有糖存在的可能性，需要进⼀步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。
2．蒽酮反应糖经浓酸⽔解，脱⽔⽣成的糠醛及其衍⽣物与蒽酮(10⼀酮⼀9，10⼀⼆氢蒽)反应⽣成蓝⼀绿⾊复合物。
3. Seliwanoff反应(间苯⼆酚反应)该反应是鉴定酮糖的特殊反应。
在酸作⽤下，⼰酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛。
后者与间苯⼆酚结合⽣成鲜红⾊的化合物，反应迅速，仅需20—30s。
在同样条件下，醛糖形成羟甲基糠醛较慢。
只有糖浓度较⾼时或需要较长时间的煮沸，才给出微弱的阳性反应。
蔗糖被盐酸⽔解⽣成的果糖也能给出阳性反应。
4．Bial反应(甲基间苯⼆酚反应)戊糖与浓盐酸加热形成糠醛，在有Fe3+存在下，它与甲基间苯⼆酚(地⾐酚)缩合，形成深蓝⾊的沉淀物。
实验室克隆技术解析
实验室克隆技术解析实验室克隆技术是一种重要的生物技术手段，它可以通过复制和重组DNA分子，实现对生物体的复制和改造。
本文将对实验室克隆技术进行详细解析，包括克隆的原理、方法和应用。
一、克隆的原理实验室克隆技术的原理是基于DNA的复制和重组。
DNA是生物体遗传信息的载体，通过复制和重组DNA分子，可以实现对生物体的复制和改造。
克隆的原理主要包括以下几个步骤：1. DNA提取：从目标生物体中提取DNA分子，通常使用化学方法或者机械方法进行提取。
2. DNA复制：将提取到的DNA分子进行复制，通常使用聚合酶链式反应（PCR）或者细菌的DNA复制机制进行复制。
3. DNA重组：将复制得到的DNA分子与载体DNA进行重组，通常使用质粒或者病毒作为载体。
4. 转化：将重组后的DNA分子导入到宿主细胞中，使其表达目标基因。
二、克隆的方法实验室克隆技术有多种方法，常用的方法包括限制性内切酶切割、DNA 连接、转化和筛选等。
1. 限制性内切酶切割：限制性内切酶是一种能够识别特定DNA序列并切割DNA分子的酶，通过限制性内切酶的作用，可以将DNA分子切割成特定的片段。
2. DNA连接：将切割得到的DNA片段与载体DNA进行连接，通常使用DNA连接酶进行连接。
3. 转化：将连接后的DNA分子导入到宿主细胞中，使其表达目标基因。
转化的方法有多种，包括化学法、电穿孔法和冷冻法等。
4. 筛选：通过筛选方法，筛选出含有目标基因的克隆体。
常用的筛选方法包括抗生素筛选、荧光筛选和PCR筛选等。
三、克隆的应用实验室克隆技术在生物学研究和生物工程领域有着广泛的应用。
以下是一些常见的应用领域：1. 基因功能研究：通过克隆技术，可以将目标基因导入到宿主细胞中，研究其在生物体中的功能和作用机制。
2. 基因工程：通过克隆技术，可以将外源基因导入到宿主细胞中，使其表达目标蛋白质，用于生物制药和农业改良等领域。
3. 基因治疗：通过克隆技术，可以将正常基因导入到患者的细胞中，修复或替代异常基因，用于治疗遗传性疾病。
生物实验报告分析
生物实验报告分析
生物实验报告的分析可以从以下几个方面进行回答：
1. 实验目的和背景：首先要描述实验的目的和背景知识，包括为什么选择这个实验课题，以及相应的相关知识和研究背景。
例如，如果实验是关于光合作用的研究，可以介绍光合作用的基本原理和在生物学中的重要性。
2. 实验设计和方法：接下来要介绍实验的具体设计和实施方法。
包括实验的步骤、所使用的设备和材料以及实验条件等。
还应该详细描述实验中的控制组和实验组的设置情况，以及每一组的处理方式。
3. 结果分析：在这一部分，要详细地介绍实验结果并进行分析。
可以使用图表、表格等形式呈现实验结果。
分析时要注意对结果进行统计学处理，比较不同组别之间的差异是否显著。
可以使用t检验、方差分析等方法进行统计学分析。
4. 结果讨论：在结果讨论中，可以从实验结果的角度对实验目的进行回答。
讨论实验结果是否支持或反驳了实验假设，以及产生的原因。
同时，还可以讨论实验中可能存在的误差和不确定度，以及如何提高实验的可靠性和准确性。
5. 结论和展望：最后，要对整个实验进行总结，并提出未来的研究展望。
总结实验的主要结果和发现，并给出相应的结论。
此外，还可以讨论可能的改进方法和未来进一步研究的方向。
除了以上几个方面，回答分析问题还可以包括实验的优点和局限性、实验的影响和应用等。
在回答分析问题时，要结合实验具体内容进行具体分析，提供充分的论据和叙述，确保回答的准确性和完整性。
生物技术实验的操作步骤与结果解读
生物技术实验的操作步骤与结果解读生物技术是一门将生物学与工程学结合的学科，广泛运用于生物医学、农业、食品科学等领域。
而对于生物技术实验来说，合理的操作步骤以及准确的结果解读是保证实验结果准确性和可靠性的关键。
一、操作步骤1. 实验前准备：包括实验所需仪器设备的检查与校准，实验用试剂和培养基的准备，以及实验环境的消毒和无菌操作等。
2. 样品处理：根据实验的具体目的，合理选择样品并进行处理。
例如，如果实验需要分析某种蛋白质的表达水平，可以选择组织样品并对其进行细胞破碎和蛋白质提取等步骤。
3. 实验操作：根据实验的要求进行实验操作。
例如，如果实验需要进行PCR扩增，操作步骤可能包括DNA提取、引物设计、反应体系的配置、PCR反应条件的设置等。
4. 仪器操作：根据实验所需使用的仪器设备进行相关操作。
例如，如果实验需要使用电泳仪进行DNA分离，操作步骤可能包括：配置电泳缓冲液、装填样品、设置电泳条件等。
5. 结果分析：根据实验所得到的结果进行分析和解读。
例如，对于PCR扩增结果，可以通过凝胶电泳进行分析，观察扩增产品的大小和带型等信息。
二、结果解读1. 数据分析：根据实验所得到的数据进行统计和分析。
例如，对于PCR扩增的结果，在凝胶电泳图上可以观察到不同大小的扩增产物带，可以通过测量带的距离来估计扩增产物的大小。
2. 数据比较：将实验所得到的数据与对照组进行比较，评估实验结果的显著性。
例如，对于蛋白质表达水平的分析，可以比较不同组织或不同处理条件下的样品，从而评估差异的显著性。
3. 结果解释：根据实验结果以及先前的研究知识，对实验结果进行解释和推断。
例如，如果实验观察到某种基因的表达水平显著上调，可以推断这个基因可能在特定生物过程中发挥重要作用。
4. 实验重复和验证：为了验证实验结果的可靠性和重复性，可以进行实验的重复和验证。
通过多次重复实验，可以进一步确定实验结果的稳定性和统计学显著性。
5. 结果报告：最后，根据实验所得到的结果撰写实验报告。
生物实验总结
生物实验总结一、实验目的通过本次生物实验，旨在加深对生物学基本概念和原理的理解，提高实验技能，培养科学思维和创新能力。
二、实验内容1. 观察植物细胞的结构和功能。
2. 分析动物细胞的结构和功能。
3. 探究细胞分裂的过程和意义。
4. 研究基因的遗传规律和表达调控。
5. 了解生物多样性和生物进化的证据。
三、实验方法与步骤1. 植物细胞观察：取新鲜植物叶片，用显微镜观察细胞结构，记录观察结果。
2. 动物细胞观察：取动物组织样本，用显微镜观察细胞结构，记录观察结果。
3. 细胞分裂实验：培养细胞，观察细胞分裂过程，记录实验数据。
4. 基因遗传实验：选择实验材料，设计杂交实验，分析遗传规律。
5. 生物多样性调查：收集生物样本，进行分类和鉴定，了解生物多样性。
四、实验结果与分析1. 植物细胞观察：观察到植物细胞具有细胞壁、叶绿体等结构，这些结构对于植物的生长和发育具有重要作用。
2. 动物细胞观察：观察到动物细胞具有线粒体、高尔基体等结构，这些结构对于动物的生理功能具有重要作用。
3. 细胞分裂实验：观察到细胞分裂过程中的染色体变化，证实了细胞分裂是生物体生长和繁殖的基础。
4. 基因遗传实验：通过杂交实验，验证了孟德尔遗传定律，进一步理解基因的遗传规律和表达调控。
5. 生物多样性调查：调查发现，生物具有丰富的多样性，生物进化理论可以解释这种多样性。
五、实验总结本次生物实验加深了我们对生物学基本概念和原理的理解，提高了我们的实验技能，培养了我们的科学思维和创新能力。
通过实验，我们认识到了生物学的重要性，更加坚定了我们投身于生物学研究的决心。
在今后的学习和研究中，我们将继续努力，为生物学的发展做出贡献。
生物检测技术实验报告
一、实验目的1. 掌握生物检测技术的基本原理和操作方法。
2. 了解常见生物分子的检测方法及其应用。
3. 培养严谨的实验态度和团队协作精神。
二、实验原理生物检测技术是指利用生物化学、分子生物学、免疫学等原理，对生物样本中的特定物质进行定性和定量分析的方法。
本实验主要涉及以下几种检测技术：1. 比色法：通过溶液颜色变化来检测生物分子，如蛋白质、糖类、脂肪等。
2. 电泳法：利用分子在电场中的迁移速率差异，对生物分子进行分离和鉴定。
3. 免疫学检测：利用抗原-抗体反应，检测生物样本中的特定蛋白质。
三、实验器材与试剂1. 实验器材：离心机、电泳仪、凝胶成像系统、显微镜、移液器、试管等。
2. 试剂：蛋白质标准品、糖类标准品、脂肪标准品、抗体、酶联免疫吸附剂、凝胶电泳试剂、染色剂等。
四、实验步骤1. 蛋白质检测（1）制备蛋白质样品：取适量生物组织，用组织匀浆机处理，离心取上清液。
（2）进行电泳：将蛋白质样品与凝胶电泳试剂混合，加样到电泳槽中，进行电泳分离。
（3）染色：用考马斯亮蓝染色，观察蛋白质条带。
（4）分析结果：根据蛋白质条带与标准品条带比对，鉴定蛋白质种类。
2. 糖类检测（1）制备糖类样品：取适量生物组织，用组织匀浆机处理，离心取上清液。
（2）进行比色法：将糖类样品与比色试剂混合，在特定波长下测定吸光度。
（3）分析结果：根据吸光度与标准品吸光度比对，鉴定糖类种类。
3. 脂肪检测（1）制备脂肪样品：取适量生物组织，用组织匀浆机处理，离心取上清液。
（2）进行比色法：将脂肪样品与比色试剂混合，在特定波长下测定吸光度。
（3）分析结果：根据吸光度与标准品吸光度比对，鉴定脂肪种类。
4. 免疫学检测（1）制备抗体：制备针对特定蛋白质的抗体。
（2）进行酶联免疫吸附试验：将抗体与酶联免疫吸附剂混合，加入生物样本，进行抗原-抗体反应。
（3）分析结果：根据酶联免疫吸附剂的颜色变化，鉴定生物样本中是否存在特定蛋白质。
五、实验结果与分析1. 蛋白质检测：实验中观察到蛋白质条带，与标准品条带比对，鉴定出蛋白质种类。
细胞生物学实验方法与技术
细胞生物学实验方法与技术1. 光镜观察（Light Microscopy）光镜观察是一种常用的研究细胞形态和结构的方法。
通过使用光学显微镜，可以观察到细胞的外形、细胞器的位置和结构等特征。
该技术使用涂片制备技术，将细胞固定、染色、封装在玻璃片上，然后在显微镜下进行观察。
2. 电镜（Electron Microscopy）电镜是一种高分辨率的显微镜技术，它可以观察到细胞的微观结构和细胞器。
电镜利用电子束来代替光束，通过变焦电镜透射电子显微镜和扫描电子显微镜两种类型，可以观察到更高分辨率的细胞结构。
3. 组织培养（Tissue Culture）组织培养是一种将细胞或组织从活体中分离并培养在人造环境中的方法。
这种方法常用于研究细胞生长、增殖和发育过程。
组织培养可以通过使用培养基、细胞培养皿和细胞培养箱等设备来提供细胞所需的营养和环境。
4. 免疫染色（Immunostaining）免疫染色是一种用来检测和定位蛋白质或其他分子在细胞中的位置的方法。
这种方法利用抗体的特异性结合来检测蛋白质的位置。
首先，细胞固定并渗透，然后使用特定的抗体与目标分子结合，最后通过荧光标记或酶反应等方法来观察染色的细胞。
5. 荧光显微镜（Fluorescence Microscopy）荧光显微镜是利用荧光探针来观察样品的显微镜技术。
该技术可以用来检测和可视化特定分子或结构的位置和数量。
通过对样品进行荧光染色或利用荧光蛋白表达来标记细胞的特定结构或分子，可以在荧光显微镜下直接观察到。
6. 流式细胞术（Flow Cytometry）流式细胞术是一种高通量细胞分析技术，可以快速准确地分析和计数大量的单个细胞。
该技术利用细胞标记剂和流动性流式细胞术仪器，通过激光照射细胞并检测细胞的荧光光谱，可以分析细胞表面分子的表达、细胞大小和复杂性等信息。
生物实验技术实验报告
实验名称：植物细胞质壁分离与复原一、实验目的1. 观察植物细胞质壁分离与复原现象；2. 了解植物细胞渗透调节作用；3. 掌握显微镜操作技术。
二、实验原理植物细胞在正常生理状态下，原生质层与细胞壁之间存在着一定的压力差，当外界溶液浓度低于细胞液浓度时，细胞吸水膨胀；当外界溶液浓度高于细胞液浓度时，细胞失水收缩。
当细胞处于一定浓度的溶液中时，细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质构成原生质层，原生质层具有选择透过性。
当外界溶液浓度高于细胞液浓度时，细胞失水，原生质层与细胞壁逐渐分离，发生质壁分离现象；当外界溶液浓度低于细胞液浓度时，细胞吸水，原生质层逐渐恢复与细胞壁的接触，发生质壁分离复原现象。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱鳞片叶、蔗糖溶液、蒸馏水、滴管、显微镜、载玻片、盖玻片等。
2. 仪器：酒精灯、酒精、蒸馏水、烧杯、量筒、剪刀、镊子等。
四、实验步骤1. 取洋葱鳞片叶，剪取约0.5cm×0.5cm的透明鳞片，放入载玻片中。
2. 用滴管滴加适量的蒸馏水于载玻片上的洋葱鳞片叶，盖上盖玻片，制成临时装片。
3. 在显微镜下观察洋葱鳞片叶细胞的正常状态。
4. 用滴管滴加适量的蔗糖溶液于载玻片上的洋葱鳞片叶，盖上盖玻片，制成临时装片。
5. 在显微镜下观察洋葱鳞片叶细胞的质壁分离现象。
6. 用滴管滴加适量的蒸馏水于载玻片上的洋葱鳞片叶，盖上盖玻片，制成临时装片。
7. 在显微镜下观察洋葱鳞片叶细胞的质壁分离复原现象。
五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶细胞在正常生理状态下，细胞质与细胞壁紧密相连，原生质层与细胞壁之间无空隙。
2. 当洋葱鳞片叶细胞处于蔗糖溶液中时，细胞失水收缩，原生质层与细胞壁逐渐分离，发生质壁分离现象。
3. 当洋葱鳞片叶细胞处于蒸馏水中时，细胞吸水膨胀，原生质层逐渐恢复与细胞壁的接触，发生质壁分离复原现象。
六、实验结论1. 植物细胞质壁分离与复原现象是由于细胞渗透调节作用引起的。
2. 通过显微镜观察，可以清晰地观察到洋葱鳞片叶细胞的质壁分离与复原现象。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验一酵母细胞的固定化1.实验目的掌握酵母细胞的固定化方法。
2.原理利用固定包埋法将酵母物细胞用物理的方法包埋在载体之中。
这种方法既操作简单，又不会明显影响生物活性，是比较理想的方法，目前应用最多。
其理想的固定化载体应是应对微生物无毒性，传质性能好，性质稳定，不易被生物分解，强度高、寿命长，价格低廉等。
通常选用海藻酸钙、角叉藻聚糖、聚丙烯酰胺凝胶、光硬化性树脂、聚乙烯醇等。
3.试剂和仪器设备鲜酵母、海藻酸钠、无水氯化钙，烧杯、尼龙布、注射器带7号平针头、搅棒、恒温水浴、试管、分光光度计4.实验步骤（1）称取海藻酸钠0.75g于100mL烧杯中，加25mL蒸馏水搅匀，在沸水浴中溶胀15min，得A液。
（2）取一个50mL烧杯，加入鲜酵母5g和25 mL馏水，搅匀，得B液。
（3）待A液冷却后，将B液与A液混合，用尼龙布过滤，得C液。
（4）称取2.2g无水CaCl2，溶解于200 mL蒸馏水中。
（5）用注射器带7号平针头将C液垂直注入CaCl2溶液中制备固定化细胞，固化30min，过滤、洗涤，称重。
5.实验数据及其处理记录固定化酵母细胞的质量。
固定化酵母细胞的质量为：0.75g6.问题讨论如何验证固定化酵母细胞的催化能力？(1)观察制作的凝胶珠的颜色和形状如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定化的酵母细胞数目较少。
如果形成的凝胶珠不是圆形或者椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败。
（2）观察发酵的葡萄糖溶液利用固定酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生很多气泡，同时会闻到酒味。
（3）检查凝胶的黏性和弹性。
思想感悟经过这次酵母细胞的固定化实验，我不仅掌握了酵母细胞的固定化方法，同时也通过对注射器的使用，明白了固定化细胞时，针头应垂直于液面且保持较近的距离，同时注射时速度应相应提高，以保证自液面下落的固定化酵母直径较小，因为缓慢低价会导致在流出针头时，由于黏弹力会使液体聚集形成较大的液滴，而快速注射形成水流则会避免该现象。
实验二蛋白的酶解及水解度的测定1．实验目的通过本实验，要求掌握酶水解蛋白质和测定水解度的原理，并掌握蛋白质水解度的测定方法。
2．原理（1）蛋白质酶水解.蛋白质的酶法水解就是利用蛋白水解酶在一定条件下对蛋白质分子进行催化水解，使蛋白质大分子降解成不同链长的小分子。
与酸碱催化的水解反应相比，它的反应条件温和，副反应少，水解效率高。
酶水解蛋白质主要受温度、pH值、加酶量、底物浓度及反应时间的影响。
根据不同的蛋白水解酶及底物情况，可设定不同的水解条件进行反应，作比较后，选择最佳的反应条件。
（2）水解度测定方法当蛋白质中的肽键全部被水解生成氨基酸时，则水解度为100％，没有被水解时，其水解度为0。
由于蛋白质水解时每裂解一个肽键就生成一个-NH2和一个-COOH基，因此，在测定蛋白质水解度时，只要定量的测定新生成的-NH2和-COOH基的量就可以计算出h值，这样就可以算出蛋白质的水解度。
常见的测定水解度的方法有甲醛固定法、茚三酮法、三硝基苯磺酸法(TNBS)、三氯乙酸法和pH-STAT法。
本试验采用茚三酮法测定蛋白质的水解度，其原理如下：茚三酮在弱酸性溶液中与氨基酸共热，引起氨基酸氧化脱氢、脱羧反应生成氨，茚三酮、反应产物氨和还原性茚三酮共同反应，生成紫色化合物。
利用化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比，可通过测定570nm处的光密度，测定氨基酸的含量。
3.试剂和仪器设备(1) 材料：地鳖酶解液(2) 试剂：10％NaOH 溶液、标准L-亮氨酸（固体）、1％SDS溶液、0.2125M的磷酸缓冲溶液（pH8.2）、茚三酮、KIO3、0.1N的HCl溶液、Arazyme蛋白酶(5000U/g)(3) 仪器设备：粉碎机、磁力搅拌机，pH计、离心机、旋转式恒温振荡器、紫外可见分光光度计、分析天平、电子秤、移液管（1mL、10mL）4．实验步骤：⑴试剂的配制① 0.5mmol/L甘氨酸标准储备液制备：准确称取37.53mg甘氨酸定容至1000mL容量瓶中，于0℃条件下保存备用；甘氨酸标准使用液制备: 分别吸取上述溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于试管中，用蒸馏水补足至1mL，相当于0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mmol/L；②碘酸钾KIO3稀释液制备：称取1.0g碘酸钾溶于蒸馏水中并稀释至300mL，再加入200mL95%乙醇溶液，混匀备用；③茚三酮显色剂制备：称取0.5g茚三酮，用95%乙醇溶解并定容至100mL，此溶液在低温条件下用棕色试剂瓶可保存两周。
④ pH 5.4，2mol/L醋酸缓冲液：A 2mol/L醋酸 20mL冰醋酸加入到173mL蒸馏水中，混匀；B 2mol/LNaAc 50gNaAc用305mL蒸馏水溶解，混匀；用A将B调节到pH 5.4。
⑵原料处理选取干地鳖虫或榨油后的水分含量低，用粉碎机以60目过筛对原料进行粉碎。
⑶加水调酸：每次取粉碎好的原料5.0g放入250mL的三角瓶中，按料水比1：20加蒸馏水到三角瓶中，将料液混匀。
用10％NaOH溶液调节料液的pH值到8.2，混匀。
⑷酶解：向已调pH值的料液中加入Arazyme蛋白酶0.3000g，将三角瓶置入旋转式恒温振荡器内，在37℃、150r/min进行酶解。
⑸灭酶：水解1小时后，取出三角瓶在80℃下灭酶15min。
⑹离心分离：5000r/min下离心10min，倒出上清液即水解液，稀释20倍备用。
⑺水解度的测定：①标准曲线的制定：取25mL磨口具塞比色管6支，分别加入甘氨酸标准溶液1.0mL，再向各管分别加入pH5.4 2mol/L醋酸缓冲液，茚三酮显色剂各1.0mL，再向各管中加入蒸馏水，使各管的总体积为5.0mL，摇匀、盖塞、在沸水浴中加热15min后，取出，用冷水冷却15min，再向各管中加入5.0mL KIO3稀释液并摇匀，30min后于570nm测其吸光度。
标准曲线的绘制：y=2.6409x-0.0544R2=0.9322②测定水解液的水解度：取水解液1.0mL，再向各管分别加入pH5.4，2mol/L 醋酸缓冲液，茚三酮显色剂各1.0mL ，再向各管中加入蒸馏水，使各管的总体积为5.0mL 摇匀、盖塞、在沸水浴中加热15min 后，取出，用冷水冷却15min ，再向各管中加入5.0mLKIO 3稀释液并摇匀，30min 后于570nm 波长处测其吸光度。
5.实验数据及其处理水解度（Degree of hydrolysis,DH ）是指蛋白质中的肽键被水解的百分数，其计算公式为：DH= h / h tot ×100% 令x=0.563 y=1.43H= =1.91mmol/gh - 蛋白质水解后每克蛋白中被裂解的肽键的毫摩尔数（mmol/g ﹒蛋白质） h tot - 每克原料蛋白中肽键的毫摩尔数（mmol/g ﹒蛋白质）据实验结果表明，大豆蛋白（Soy protein ）, 酪蛋白（Casein ），明胶蛋白（gelatin ）中肽键的毫摩尔数各为7.75，8.0，11.1mequiv/g ，而花生蛋白或花生粕蛋白中肽键的毫摩尔数，到目前还没有实验结果的推荐值。
但是，利用一种底物进行酶解，选择最佳反应条件时，h tot 是固定不变的，产生变化的是根据不同反应条件下水解后每克蛋白中被裂解的肽键的毫摩尔数。
所以，本实验可以用h 来表示蛋白质水解程度。
据测定，干地鳖虫蛋白质含量在60%以上，以60%计；花生粕的蛋白质含量为39.752%，计算时以40%来计算。
(参考Adler-Nissen, Determination of the Degree of Hydrolysis of Food Protein Hydrolysates by Trinitrobenzensulfonic acid ,1977)6．问题讨论⑴ 以花生粕作为水解原料的意义在哪里？充分利用花生压榨制油后的资源，而且花生粕蛋白质营养价值高,含量高达40%.氨基酸配比合理，富含人体必须氨基酸。
⑵ 在国内食品加工中常用的蛋白质分解酶是什么？ 胃蛋白酶，凝乳酶，胰蛋白酶、组织蛋白酶⑶ 从韩国引进的高效蛋白质分解酶Arazyme 的特点是什么？Arazyme 酶是蜘蛛肠道中分离出的共生微生物所分泌的一种高效金属蛋白酶。
1*401*100310*43.13-特点：蛋白分解能力，更有效的分解动植物蛋白质，耐受高温，低温、较宽的PH范围；具有一定的抗菌活性；有高效率的催化能力，具有高度专一性，作用条件较温和，生物效应是瞬时的。
⑷本实验中的注意事项是什么？1.实验中要用具塞比色管的目的是为了加热时确保安全。
2.使用醋酸缓冲液是为了给显色反应创造环境。
3.花生粕的蛋白质含量为39.752%，计算时以40%来计算思想感悟经过这次蛋白的酶解及水解度的测定实验，我不仅学到了酶水解蛋白质和测定水解度的原理，还学到了蛋白质水解度的测定方法。
蛋白的酶法水解就是利用蛋白水解酶催化水解，使蛋白质大分子降解成不同链长的小分子。
而测定其水解度则需要依靠茚三酮法，生成的紫色化合物在570nm下测定的光密度，得出氨基酸的含量。
另外，绘制标准曲线时，为了获得更为准确的标准线，需要舍去误差较大的数据，为今后的实验数据处理积累了经验，而使用醋酸缓冲液创造显色环境也为提供了一定的参考。
实验三酶解物肽含量的测定1.实验目的随着对多肽生理功能认识的深入，多肽的提取及含量的测定也具有重要的意义。
本实验主要目的是掌握利用BCA法测定肽含量的方法及原理。
2．实验原理二价铜离子在碱性条件下可以被蛋白质分子中的肽键还原成一价铜离子，一价铜离子和独特的BCA Solution A（含有BCA）相互作用产生敏感的颜色反应。
两分子的BCA螯合一个铜离子，形成紫色的反应复合物。
该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系，因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。
3.试剂和仪器设备（1）原料和试剂原料：地鳖虫酶解物或花生粕酶解物，BCA蛋白质定量试剂盒，蒸馏水试剂：①0.9% NaCl：称取2.25gNaCl，用蒸馏水定容至250mL；②0.5mg/mL BSA标准液移取2.5mL 5mg/mL的BSA标准品，加入0.9%NaCl稀释至25mL，既得0.5mg/mL的BSA标准液；③稀释酶液：取地鳖酶解液（工艺同实验三）加入，加入等体积的10%TCA混匀，静置10min，3000rpm离心15min，取上清液，稀释10倍，备用。
（2）仪器设备恒温水浴锅、分光光度计、pH计、移液枪、分析天平、秒表或定时钟。
4.实验步骤：（1）将试剂A摇匀，用10mL移液管移取10mL试剂A到小试剂瓶中，用移液枪向其中加入200uL的试剂B（即试剂A与试剂B的量要满足A:B=50:1）,充分混匀。