氨基酸分析仪实验指导
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氨基酸分析仪实验
测试中心吕雪娟
一、实验目的
了解氨基酸分析仪的主要结构及工作原理,掌握氨基酸分析的过程,前处理方法。
二、原理
氨基酸分析仪的分析原理是基于各种a一氨基酸的酸碱性、极性及分子大小的差异,用阳离子交换树脂在柱上进行层析分离,用几种不同pH值和离子强度的缓冲溶液依次将它们洗脱,从柱子上分离和洗脱下来的各种氨基酸在反应柱中与茚三酮进行加热反应,反应产物用可见光分光光度计进行检测,根据检测信号的大小计算出各种氨基酸的含量。
氨基酸和茚三酮反应
氨基酸分析仪结构示意图
二、操作步骤
1.准备工作
1.1缓冲液和茚三酮溶液的配制及正确放置
1.2氮气压力调整
1.2.1打开氮气钢瓶阀,调节其压力至50-100KPa(0.5-1.0Kgf/cm2)。
1.2.2顺时针轻轻旋转氮气调节器,使压力读数为34-40KPa(0.35-0.4Kgf /cm2)。
1.2.3脱气瓶中液体的更换
1.3放置自动进样器清洗瓶,向清洗瓶(C-1,1L)中盛上蒸馏水,放置于指定的位置并拧上盖子。
2.开稳压器
3.启动L-8800ASM应用程序
3.1系统初始化,OK
3.2打开Module Operation界面
3.3泵1流速设定----缓冲液的清洗,打开泵1的排液阀;清洗完毕,关闭泵1;
3.4泵2流速设定—一缓冲液的清洗,打开泵2的排液阀;清洗完毕关闭泵2;
3.5自动进样器流路和针头清洗,除气泡,重复此过程三次。
3.6泵的压力归零
4.分析程序
4.1选择应用程序
4.2选择分析方法
4.3输入待测样品的信息,编辑样品表,保存;
4.4打开数据采集监控画面
4.5选择样品表
4.6打开泵1和泵2
4.7按样品表顺序放置样品。
4.8单击监控屏幕下方的Start Series按钮,开始样品测试。
4.9开始结束后,关闭采集监控画面
4.10关闭L-8800ASM应用程序
4.11关电源
三、实验报告要求
1.实验原理及分析条件;
2.实验结果。