氨基酸分析仪整理.ppt
Biochrom30氨基酸分析仪

峰面积重复性: ≤0.2% CV (甘氨酸) ≤0.4% CV (组氨酸) ≤0.5% CV (全部氨基酸平均)
分离度:全部氨基酸 >1.4; 平均值3.3
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是中国市场上唯一获得FDA市场准入许可,并符合联邦药物、食品和化妆 品条款的氨基酸分析仪。
唯一采用陶瓷泵的专用自动氨基酸分析系统,完全避免了传统不锈钢泵头 被含高盐的缓冲液侵蚀的危险,全机流路采用PEEK 惰性材料,使清洗维 护都变得简单。
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Biochrom 30 +氨基酸技术特点
具有氮气过压保护,防止试剂瓶过压爆瓶;茚三酮倒流保护,防止分析柱 被污染;液体流速误差自动调整功能,确保分析准确度。
意外断电可自动通过氮气压力系统冲洗管路,以防管路被降低温度后变粘 稠的茚三酮堵住。
生理体液型:游离氨基酸,Biochrom30 氨基酸分析仪目前可以分析最多 的56种氨基酸(锂盐系统分析)
避免液体跑dkshpage22biochrom30内置方法多种报告模板客户也可自己编辑全中文软件多媒体软件使用教学免除了软件引起的困惑dkshpage23dkshpage24dkshpage25dkshpage26dkshpage2743dkshpage28生理体液j加速分析标准图谱48种氨基酸570nmdkshpage29英国曼彻斯特皇家儿童医院提供dkshpage30英国曼彻斯特皇家儿童医院提供dkshpage31英国biochrom剑桥实验室提供dkshpage32biochrom氨基酸分析仪作为全球氨基酸分析仪的领导者是替欧盟制定现行饲料标准的德固赛公司唯一使用氨基酸分析仪该标准被包括中国在内的几乎所有国家作为目前饲料及食品的国家标准参照使用此国标也被一切使用水解蛋白分析的样品参照使用
氨基酸分析原理与方法

4.提高流动相PH值,氨基酸正电荷减少,吸附力减弱,最后从离子交换柱 上洗脱下来。洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基 酸。
5.氨基酸标准液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序有一定; 标准液各种氨基酸的浓度一定,洗脱峰的面积一定;由此可计算出样品中
• 生理体液样品首先要除去样品中的蛋白质,获得游离 氨基酸。除去蛋白质化学方法为:
• 1.苦味酸法 • 2.三氯醋酸法 • 3.磺基水杨酸法 • 4.乙醇沉淀法 • 常用方法为磺基水杨酸法:用4%磺基水杨酸,按1:3比
例与样品混合离心去蛋白,转速2万转以上离心10分钟 或更长一些时间。取上清液用样品稀释液稀释后上机 测定。(建议进样前用C18过滤柱处理一下为好)。
• 山东大学生命科学院发表的《低智儿童与正常儿童中氨 基酸的比较研究》一文着重叙述了血清中11种氨基酸的降 低可直接影响人体组织的正常发育、生长,从而导致儿童 智力发育不全。
• 军事医科院《条件性必需氨基酸在创伤愈合中的作用》 一文中叙述了条件性必需氨基酸在创伤愈合中的关系。
• 北京军区总医院《人胃癌组织及胃正常组织氨基酸的差 异研究》一文中通过对胃癌组织及自身胃正常组织氨基酸 的测定,探讨了肿瘤组织氨基酸代谢的变化规律。
LL--88880000氨氨基基酸酸分分析析仪仪 成成都都交交流流讲讲座座
吕守民 天美科技有限公司
目录
• 一、氨基酸分析仪 • 二、氨基酸 • 三、氨基酸分析仪基本分析原理 • 四、氨基酸分析仪法与HPLC的比较 • 五、样品的制备 • 六、应用
日立L-8800氨基酸分析仪简介
一、氨基酸分析仪: (一)氨基酸分析仪的构成(见图1) (二)氨基酸分析仪的流程图(见图2)
氨基酸含量的测定及分离鉴定ppt课件

实验结果:
丙氨酸 苯丙氨酸 天冬氨酸
L/㎝ d/㎝ Rf
原点到溶剂前沿距离为L,原点到层析点中心距离为d
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氨基酸的定量分析 —甲醛滴定法
一、目的:
初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点
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二、实验原理
水溶液中的氨基酸为兼性离子,因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基 。甲醛可与氨 基酸上的 —N+H3结合,形成 —NH—CH2OH、—N(CH2— OH)2 等羟甲基衍生物,使N+H3上的H+游离出来,这样就可以用碱滴定 N+H3放出H+,测出氨基氮,从而计算氨基酸的含量。
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五、计算
标准甘氨酸氨基氮的回收率=
VNaoH*0.0200mol/L 理论计算值
*14.008
理论计算值:取用氨基酸的体积乘以浓度,再乘以14.008 VNaoH 两次测定所用氨基酸的体积的平均值
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每毫升氨基酸溶液中含氨基氮的毫克数为
式中:V1为滴定样品消耗氢氧化钠的体积(ml); V2为滴空白消耗氢氧化钠的体积(ml); MNaOH 标准NaOH溶液的摩尔浓度
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思考题
1、甲醛法测定氨基酸含量的原理是什么? 2、根据滴定结果,总结分析此法在实际应用中的
优缺点。 3、为什么氢氧化钠溶液滴定氨基酸的—N+H3基上
的H+,不能用一般的酸碱指示剂?
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若样品中只含有单一的已知氨基酸,则可由此法滴定的结果算出氨基 酸的含量。若样品中含有多种氨基酸(如蛋白质水解液),测不能由 此法算出氨基酸的含量。 脯氨酸与甲醛作用后,生成的化合物不稳定,导致滴定后结果偏低; 酪氨酸含酚基结构,导致滴定结果偏高。
氨基酸测定仪测定操作规程

氨基酸测定仪测定操作规程1. 引言本操作规程旨在指导使用氨基酸测定仪进行氨基酸测定的操作流程,并确保准确、可靠地测定样品中氨基酸的含量。
2. 仪器和试剂准备•氨基酸测定仪•相应的试剂盒和标准品•电子天平•移液器和移液枪•显微镜和玻璃片3. 样品处理1.准备样品:选择需要测定氨基酸含量的样品,并记录每个样品的相关信息,如样品编号、来源等。
2.样品预处理:根据样品的特性,选择合适的预处理方法,如样品酶解、样品脱蛋白等,以保证测定结果的准确性。
3.样品稀释:根据测定方法的要求,将样品适当稀释,以确保在仪器检测范围内。
4. 仪器设置1.开启仪器:按照仪器的使用说明,正确开启氨基酸测定仪,并进行初始化操作。
2.设置参数:根据测定方法的要求,设置仪器的相应参数,如测定波长、积分时间等。
3.校准仪器:使用标准品进行仪器的校准,确保仪器的准确性和精确度。
5. 操作步骤1.取样和试剂加入:使用移液器或移液枪,取出预处理好的样品,加入试剂,并记录试剂的加入量。
2.反应和测定:将样品和试剂混合均匀,然后放入氨基酸测定仪中进行反应和测定。
确保每次测定都按照相同的时间进行,以保证结果的可比性。
3.数据记录与分析:根据仪器的测定结果,记录每个样品的氨基酸含量,并进行数据分析,如平均值、标准差等。
6. 结果计算与报告1.结果计算:根据仪器的测定结果和标准品的浓度,计算出样品中每种氨基酸的含量。
这部分可以使用计算软件或者自行编写程序进行计算。
2.报告撰写:根据实验结果,撰写相应的实验报告,并进行结果解释和结论汇总。
7. 安全注意事项•在操作过程中,严格遵守实验室的安全操作规程,佩戴实验室必要的防护用品。
•注意试剂的储存和使用方法,避免接触皮肤和吸入。
•避免样品交叉污染和仪器污染,每次操作后清洗仪器和工作台面。
8. 管理和维护1.仪器管理:定期对仪器进行维护和保养,保持仪器的良好状态。
如清洁仪器外壳、调试仪器等。
2.试剂管理:根据试剂的要求进行存储和保管,防止试剂过期或受污染。
氨基酸分析仪操作方法

氨基酸分析仪的操作流程及注意事项
操作流程
• 打开自动进样器,放入样品。 • 设置分析参数,如色谱柱、洗脱液、检测器等。 • 启动仪器,进行样品分析。 • 查看分析结果,进行数据处理。
注意事项
• 样品处理过程中,要保证样品的均匀性和代表性。 • 分析过程中,要保证仪器各部件的正常运行。 • 数据处理过程中,要保证数据的准确性和可靠性。
CREATE TOGETHER
SMART CREATE
氨基酸分析仪操作方法详解
01
氨基酸分析仪简介及工作原理
氨基酸分析仪的发展历程与应用领域
氨基酸分析仪的发展历程
• 20世纪50年代初期,出现了第一代氨基酸分析仪,主要用于蛋白质水解液中氨基酸的定量 分析。 • 20世纪60年代,出现了第二代氨基酸分析仪,采用了柱前衍生技术,提高了分析速度和灵 敏度。 • 20世纪80年代,出现了第三代氨基酸分析仪,采用了高效液相色谱技术,实现了氨基酸的 高灵敏度、高准确度分析。
氨基酸分析仪在医药领域的应用实例及案例分析
医药领域的应用实例
• 生物制品中氨基酸的纯度分析,评价生物制品的质量。 • 血液制品中氨基酸的分析,评价血液制品的营养价值。 • 药物研究中氨基酸的分析,评价药物的效果和安全性。
案例分析
• 某品牌奶粉中氨基酸的分析,发现某种氨基酸含量偏低,可能影响奶粉的营养质量。 • 某品牌酱油中氨基酸的分析,发现某种氨基酸含量偏高,可能影响酱油的风味和品 质。
氨基酸分析仪的分类
• 高效液相色谱法(HPLC):采用高压液相色谱技术,实现了氨基酸的高灵敏度、 高准确度分析。 • 气相色谱法(GC):采用气相色谱技术,分析了氨基酸的挥发性成分。 • 离子交换法(IE):采用离子交换技术,分析了氨基酸的阴离子成分。
氨基酸的测定PPT课件

双语例句
气相色谱法
(辨别燕窝的真伪)
反应原理:
1. 氨基酸标准溶液的配制
一定量的气体或液体分析物
被注入到柱一端的进样口中。
2.1样品水解:称取约50mg
当分析物在载气带动下通过
研碎的样品(如为燕窝饮品,则
茚三酮、谷氨酸、磷酸氢二钠、磷
用去离子水将谷氨酸和果葡糖浆
酸二氢钾、硼酸等。7200可见分光
配制成谷氨酸含量分别为
光度计等
50,25,12.5 , 6.25 μg/mL的果葡
糖浆样品。以未加谷氨酸的果葡
糖浆为空白,采用茚三酮法测定
准确称取100mg谷氨酸(纯度不低
其中的氨基酸含量。计算回收率
于99% ),溶于100 mL水中,即母
样品的检测与分析 分别取市售不同的胶原蛋白
粉、明胶、奶粉等样品,按上 述样品处理方法进行处理后进 样,测定不同样品中17种水解 氨基酸和经脯氨酸的含量。 若样品中检出有经脯氨酸,则 说明有胶原蛋白的存在,可作 为乳粉中是否添加动物胶原水 解蛋白的依据。
该方法样品处理简便易操 作,可以对羟脯氨酸直接进行 分析,避免了衍生产物的多样 性,也不涉及样品中氨基酸衍 生不彻底等问题,能快速、准 确地判断乳制品中是否添加了 动物胶原水解蛋白。
评价某种蛋白质的营养价值包括两个方面:一是 各种必需氨基酸含量是否丰富,二是必需氨基酸的构 成是否符合一定比例。
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随着食品科学的发展和营养知识的普及,食物蛋白质中必 需氨基酸含量的高低及氨基酸的构成,愈来愈得到人们的重 视。为提高蛋白质的生理效价而进行食品氨基酸互补和强化 的理论,对食品加工工艺的改革,对保健食品的开发及合理 配膳等工作都具有积极的指导作用。因此,食品及其原料中 氨基酸的分离、鉴定和定量也就具有极其重要的意义。
07 氨基酸分析检测

进样系统
• 通常使用耐高压的六通 阀进样装置 • 常压下进样
检测系统
• • • • (1)紫外-可见检测器 (2)光电二极管阵列检测器 (3)荧光检测器 (4)示差折光检测器
高效液相色谱法分离过程
进样口 混合器 色谱图 色谱柱 检测器 溶剂
在线检测
高压泵
高效固定相
高灵敏检测器
高压输送流动相 色谱柱多次使用
氨基酸测定方法详述
氨基酸专用系统配置
P200Ⅱ型或P230高压恒流泵 UV200Ⅱ或UV230紫外可见波长监测器 氨基酸专用色谱工作站 ZW型色谱柱恒温箱 氨基酸专用色谱柱(C18,5μ,250×4.6mm,Part No.20200031 ) 恒温水浴 酸度计 2台 1台 1套 1台 1支 选配 选配
高效液相色谱仪的组成
• • • • • • • • • 1、输液系统 储液瓶、脱气方法、高压输液系统(高压泵) 低压梯度洗脱和高压梯度洗脱 2、进样系统 3、色谱柱系统 4、柱温箱 5、检测系统 6、馏分收集器 7、控制系统
梯度洗脱装置
高压梯度: 利用两台高压输液 泵,将两种不同极性的 溶剂按一定的比例送入 梯度混合室,混合后进 入色谱柱。 低压梯度: 一台高压泵, 通过 比例调节阀,将两种或 多种不同极性的溶剂 按一定的比例抽入高 压泵中混合。
• • • • • • • • • • • • • • 定性和定量方法 (1)根据保留时间和紫外吸收谱进行定性分析。 (2)外标峰面积法进行定量测定。 (3)计算 a.标准曲线的绘制 以不同浓度的L-亮氨酸标准液测得的峰面积为纵坐标,L-亮氨酸 含量为横坐标绘制标准曲线,得到回归方程: Y=kX 式中Y:峰面积 X:L-亮氨酸标准品浓度 b.发酵液中L-亮氨酸含量计算方法 X= A/k 式中X:发酵液中L-亮氨酸含量,g/L A:样品的峰面积 k :回归方程所得值
氨基酸分析仪培训讲义

下面将日立氨基酸分析仪的构成、流程图 及特点给大家介绍如下: (一)氨基酸分析仪的构成
1、输液单元(泵与管路) 作用:输送缓冲液、反应液在流路系统 中流动。
2、进样单元(自动进样器) 作用:将样品在流动相的带动下送入仪 器体系中。
3、分离单元(离子交换柱、柱温箱)
作用:主要是样品的分离、将混合的样 品分离成单一组分。
从目前的情况来看,别的仪器产品厂家有的已 退出中国市场、且仪器的使用年限已有20几年, 具我们了解的情况来看,基本大多数都已报废 停用(如贝克曼121M、6300型)。近期进入国 内市场的一两家仪器生产商,在国内的占有率 也非常小、而且售后服务也不到位。日本日立 公司的一切从最早的分析时间12小时、4小时、 70分钟、直至降到现在的30分钟一个分析程序 (快速20分钟),而且操作软件非常得心应手 简便快捷,最小检测限为3pmol。无论从市场 占有率上、还是售后服务上都是最好的。
(4)泵(高速反馈、实时控制技术):
日立氨基酸分析仪 采用双柱塞串联往 复泵,此种泵采用了高速反馈实时控制 技术,最大的优点是脉动小、流速稳定、 噪音低,所采用的这种泵它可保证所供 液体流量恒定、流速稳定。流量是否恒 定关系到峰的重复性、分辨率和定量的 准确。流速如果不稳定会产生脉动,它 可导致检测器噪音增大、最小检测量增 加灵敏度下降。实时控制技术系统采用 了一个高速传感器,对内部压力进行实 时监控,在柱塞换向的时间区段内、系 统压力有所下降趋势时
精氨酸 甘氨酸 胱氨酸 酪氨酸
非必需氨基酸 谷氨酸
天门冬氨酸 丙氨酸 丝氨酸 脯氨酸
羟脯氨酸
动物的必需氨基酸除上述8种外,还有精氨 酸、组氨酸共10种。 中性氨基酸:在分子式中具有一个氨基和 一个羧基,这样的氨基酸叫中性氨基酸。 酸性氨基酸:在分子式中羧基多于氨基具 有酸性,这样的氨基酸叫酸性氨基酸。 碱性氨基酸:在分子式中氨基多于羧基具 有碱性,这样的氨基酸叫碱性氨基酸。 什么叫必需氨基酸:人体每日总有一定量 的组织蛋白分解成氨基酸,然后再进一步 分解成水
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茚三酮衍生原理
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氨基酸分析仪的分类
➢水解蛋白型:分析常见18种氨基酸,可加入标准品扩 展至20多种(钠盐系统分析)
➢生理体液型:游离氨基酸,常见43种,Biochrom30+ 氨基酸分析仪目前可以分析最多的56种氨基酸(锂盐 系统分析)
➢氧化水解型:主要用于含硫氨基酸的准确分析(饲料) (钠盐系统分析)
茚三酮: • 特殊配方生试剂无需混合,无需低温保存即可在常温氮气保护下
保存一年 柱温箱二次加热功能 • 柱温箱有预热模块,可将缓冲液在进入分离柱之前预热,使之达
到柱温,缓冲液不会受到外界温度变化影响。
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仪器参数
检测限:2.5pmol (S/N=2,天冬氨酸) 9pmol (全部氨基酸平均)
请参看/coa/) ▪ 中国计量器具认证
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COA认证
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COA17029
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目录
1. 水解蛋白标准谱图 2. 原理及特点 3. 仪器特点介绍 4. 技术参数 5. 仪器配置 6. 仪器配套设备 7. 图谱实例 8. 总结
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Biochrom 30+ 氨基酸分析 仪标准图谱
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什么是氨基酸分析仪?
氨基酸分析仪是基于阳离子交换柱分离、 茚三酮柱后衍生、光度法测定的离子交换色谱 法为基础的全自动氨基酸分析仪器。此类分析 方法由Moore和Stein于1958年发明,并于1972 年获得诺贝尔奖,是当今国际和国家标准以及 仲裁和涉外标准方法。
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蛋白水解法的两个国家标准
▪ GBT 5009.124-2003 食品中氨基酸分析 酸水解法:测定天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨 酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸 、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、 精氨酸、脯氨酸
▪ GBT 18246-2000 饲料中氨基酸的测定 酸水解法:同上 氧化水解法:测定半胱氨酸和蛋氨酸 碱水解法:色氨酸
Biochrom 30+ 全自动氨基酸分析仪
瑞士华嘉有限公司 产品支持:张晓明
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Biochrom 30+ 氨基酸分析仪
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Biochrom 全自动氨基酸分析仪,全球氨基酸分析仪的领 导者 ,40年应用历史,全球2000用户的选择;全球最早的氨 基酸标准《欧盟饲料标准》由该机全程试验、验证,此标准 此后被包括中国在内的几乎所有国家参照做为水解蛋白分析 的标准;中国市场上唯一获得FDA市场准入许可,并符合联 邦药物、食品和化妆品条款的氨基酸分析仪。唯一在市场上 出具毫无争议的涉外仲裁结果的全自动氨基酸分析仪
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▪ 中国市场上唯一获美国FDA市场准入许可 ▪ 并符合联邦药物、食品和化妆品条款510(k) ▪ 符合ISO 9001:2000 ▪ 符合ISO 13485:2003 ▪ 符合ERNDIM 2005认证 ▪ 符合EU Directive 98/79/EC认证 ▪ 符合COA认证(所有使用的化学试剂及其成分认证,
Biochrom 30+特点介绍
意外断电保护:以外断电可自 动通过氮气压力与系统压力形 成的压差带动冲洗液冲洗管路 ,以防管路被降低温度后变粘 稠的茚三酮堵住。
茚三酮倒流保护:防止由于误操 作导致分析柱被污染。
液体流速误差自动调整 功能:确保分析准确度 。
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Biochrom 30+特点介绍
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氨基酸基础知识
▪ 从各种生物体中发现的氨基酸已有180多种,但是参与蛋白质组 成的常见氨基酸只有20种。 天冬氨酸(Asp)、苏氨酸(Thr)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸( Glu)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、半胱氨酸(Cys)缬 氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸( Leu)、酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)、组氨酸(His)、 赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、脯氨酸(Pro)、色氨酸( Trp)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)
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Biochrom 30+特点介绍
氮气保护系统: • 防止缓冲液、衍生试剂被氧化,延长试剂寿
命 • 防止氧气进入缓冲液,导致样品中易氧化组
分被破坏,影响分析结果 • 用而不耗,节约成本 • 氮气过压保护,防止由于氮气阀没有调节好
而引起缓冲液、衍生试剂瓶发生爆炸的危险
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保留时间重复性:≤0.05% CV (精氨酸) ≤0.07% CV (丙氨酸) ≤0.1% CV (全部氨基酸平均)
峰面积重复性: ≤0.2% CV (甘氨酸) ≤0.4% CV (组氨酸) ≤0.5% CV (全部氨基酸平均)
分离度:全部氨基酸 >1.4; 平均值3.3
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Biochrom 30+特点介绍
• 采用世界最大的色谱填 料生产 商原安玛西亚色谱填料填装色 谱柱
• 色谱柱4.6200mm(高效) 所有氨基酸分析仪中最长的色 谱柱,可达到高分辨的效果
•色谱柱采用惰性PEEK材料,使得每次分析完成后的再生清洗可采用高 浓度氢氧化钠溶液,同样的分析时间(净分析时间+再生时间)下,净分 析时间最长,从而达到最好的分析效果。并可加温至99℃的高温,对于 氢氧化钠无法清洗的污染物,如:高脂、高糖污染物达到很好的分解清 洗作用,延长色谱柱使用寿命。
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Biochrom 30氨基酸分析仪原理图
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Biochrom 30+特点介绍
配置两个高压小体积 电子陶瓷泵,并配有 泵头自动冲洗装置, 可避免传统不锈钢泵 头被高盐缓冲液长期 腐蚀导致的磨损、漏 液的情况;除此之外 所有与液体接触的管 路、接头色谱柱的部 件都采用惰性PEEK材 料,使得仪器在耐用 性上达到了无与伦比 的程度。