桉树组培快繁及其应用进展

现代物业?新建设 2012年第11卷第7期现代建设 Modern Construction

桉树是桃金娘科桉属植物的统称，共有945个种、亚种和变种（谢耀坚，2008），绝大多数原产于澳洲及邻近岛屿。19世纪引种至世界各地，目前有一百多个国家或地区栽培。

桉树具有种类多、适应性强、用途广、经济价值高的特点，是当前世界上最主要的木纸浆原料树种，也是我国南方主要的造林树及发展速生丰产林的战略树种。我国主要栽培区为云南、广东、广西及海南等南部省区，种植品种有蓝桉、直干蓝桉、柠檬桉、大叶桉及观叶型铜钱桉等。

桉属树种是异花授粉多年生木本植物，种间天然杂交导致杂种繁多，后代分化严重，因此有性繁殖难以保持树种优良性状（佘小涵，2002），导致实生苗造林的林分分化大、产量低、质量差；而采用扦插、压条等常规繁殖方法育苗的成活率低，难以提供大量苗木，大面积推广造林受到限制。组培快繁是在保持桉树优良品种特性的基础上进行的种苗无性快速繁殖，是其产业化、规模化的重要环节和关键技术（温茂元，2005）。

桉树组织培养始于20世纪60年代，随着技术的发展，越来越多桉树种类的快繁体系被建立，至2000年全世界约60种桉树进行过组织培养技术研究，绝大部分成功获得再生植株（谢耀坚，2000）。通过组培获得的桉树种苗具有保持母体优良性状、繁殖系数大、生长期短等优点，在种源缺少的条件下能很快地满足市场需求。因此，采用组织培养育苗是桉树优良品种快速繁殖的必要途径，对加速桉树人工林营建、提高其产量和质量有重要意义。本文通过阅读大量文献，并结合自身的实践经验，总结近几十年桉树组培快繁研究及其应用进展，为建立桉树高效快繁体系、加速桉树人工林营建步伐以及桉树品种资源的高效利用提供技术方法和理论依据。

1 组培快繁研究

1.1 外植体选取和消毒

1.1.1 外植体选取

桉树与其他多年生植物一样，有明显的生长期和休眠期，因此外植体的采集应在植株生长的旺盛时期。通常以春夏季节取材灭菌容易且易成活，秋冬季取材再生能力差、不易成活；雨季或湿热季节取材容易染菌、消毒不易成功（李云，2001）。因此，选取病害少、生理年龄小、再生能力强的芽或茎段作为组培的外植体，利于迅速建立离体快繁体系（熊丽，吴丽芳，2003）。佘小涵（2002）根据直杆蓝桉芽的萌动规律，取顶芽以下第4～6位腋芽和半木质化茎段进行诱导，发现其萌动率最高；而顶芽与其他部位腋芽的茎段易褐化。翁秋媛（2009）研究邓恩桉不同季节的外植体诱导效果和不同位置腋芽的萌动情况，发现春季（1～3月）取材效果最好，平均出芽率最高（75.8%），平均污染率最低（26.3%），平均褐化率也最低（19.2%）；其中，第2～7个芽位的茎段萌芽率较高，褐化率和污染率较低；顶芽虽污染率低，但褐化率最高；第8个芽位以下的茎段萌芽率很低，而且污染率和褐化率很高。由此可知，桉树外植体取材季节和部位不同，其诱导效果存在明显差异。春季桉树枝条中上部第4～7节茎段是外植体选取的最理想部位，因为其积累了丰富的营养物质和内源激素，受病虫侵害较少，外植体消毒和诱导成功率最高。

1.1.2 外植体消毒

植物材料的消毒是组织培养极为关键的一步。75%酒

桉树组培快繁研究及其应用进展

江海涛

（广西壮族自治区国有维都林场，广西　来宾　546100）

摘　要：本文主要对桉树茎段培养中初代诱导、继代增殖、壮苗和生根培养进行概括性介绍，总结桉树组培快繁研究进展。在此基础上，阐述了桉树组培快繁应用概况。为建立桉树高效快繁体系和加速桉树人工林营建步伐提供方法和依据。

关键词：桉树；组培快繁；应用；进展

中图分类号：S792.39 文献标识码：A 文章编号：1671-8089（2012）07-0064-04

［作者简介］江海涛（1976- ），女，广西恭城人，学士，工程师，

主要从事经济林研究。

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《植物组织培养》课程标准

《植物组织培养》课程标准课程名称：《园林植物植物组织培养》课程性质：职业能力必修课学分：3分计划学时：45 适用专业：园艺技术、园林技术、种子生产与经营专业 1.前言 1.1课程定位《植物组织培养技术》是一门园艺技术、园林技术等专业的基础课，也是一门实践性很强的课程。通过本门课程学习，主要培养学生将来能从事相关工作，如能够独立设计组培方案、具备培养基制备、进行无菌操作、快繁、控制污染、褐化、玻璃化等不良现象发生和分析解决问题的能力，还能够独立从事植物组织培养经营管理的工作。该课程以化学、植物学、植物生理学、遗传学等学科为基础建立起来的，为适应时代发展，结合当前高职教育改革实际，压缩理论课时，精选教学内容，增加单位时间内的知识传授量，增加实验实训课的课时。培养技能型、应用型人才，使课程教学朝着高职院校校企合作的办学模式，工学结合的人才培养模式，教学做合一的教学模式方向发展。 1.2设计思路本课程理论课时48学时。根据植物组织培养岗位对从业人员知识、能力和素质要求，以“应用”为主旨和特征，构建课程内容模块体系。课程内容打破传统的“老三段”模式，打破学科特性，理论知识要求“必需、够用”，实践教学突出能力培养，注重知识的应用性、实践性和针对性，并以此来构建组培课结构和内容体系。在实践教学上，以“项目教学法”为主导，强化实训项目的实用性。本课程一般按照“实验室设计与培养条件要求―培养基制备―无菌操作技术―器官培养―个体植物组织培养与园艺植物栽培”的顺序进行。 2．课程目标 2.1总体目标通过理论学习和实践锻炼，掌握植物组织培养的基本理论，能识别常见的污染、褐变、玻璃化等现象，掌握组培培养方案设计程序和器官培养要求，掌握组培各流程环节与技术要求。通过参观组培实验室，掌握组培实验室的场地选择和厂房设计的原理和方法；通过配制母液、培养基的制作、使用无菌操作技术，能熟练掌握培养基母液和激素母液的配制，并且能够独立完成培养基的制作和高压灭菌锅的使用，还要掌握不通植物材料无菌接种技术。通过个体植物组织培养的

草莓组织培养

草莓的组织培养一、茎尖 1．概述通过对草莓茎尖离体培养的试验研究表明：取草莓茎尖为外植体，以0．35 mm大小为宜；用MS+0.5 mg/L 6-BA+O.2 mg/L NAA培养基．不定芽再生率高；以1/2 MS+O.1 mg/L IBA 生根效果最好。 2.结论（1）再生途径：草莓刚抽出的匍匐茎的茎尖（2）灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理，最后用无菌水冲洗5～8次，接种于诱导培养基中。诱导培养基为MS+0．5 mg／L6一BA+0．2mg／L NAA+3 蔗糖(w／v)+0．5﹪卡拉胶，pH值为5.6～5.8。每个灭菌处理接种2O枚外植体，l5d后观察记录外植体的污染、死亡、无菌成活生长等情况。（3）培养基： ①芽诱导试验，于MS培养基附加0．2 mg／L NAA、IAA、IBA不同种类生长素的培养基中，20d后调查记录幼芽分化情况。 ②继代培养与扩大繁殖，MS培养基附加0.5 mg/L6-BA、0.01 mg/L NAA。 ③根诱导试验, 用1/2 MS附加不同浓度(mg/I )IBA 有0．05、0．1、0．2、0．5及不加IBA的5个处理. （3）条件：培养基均在1～ 1.1大气压下热压灭菌20min。培养温度(25± 2)℃。每日光照12h，光强2 000Lux。（1）再生途径：用其花药、花蕾、叶、叶柄、子叶、下胚轴等作外植体进行离体培养。（2）灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理. （3）培养基：①MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L(浓度单位,下同)；②MS+6一BA0.5+KT 0.5；③MS+BA2.0+IAA 1.0；④MS+BA2.0+NAA0.5+2,4-D0.1；⑤MS+BA2.0+IBA0.1。以上培养基各加CH 100 mg/L，蔗糖20g/ L(①为30g/ L)。 ①用于花药诱导培养基； ②用于花药幺伤组织分化培养； ③、④用于其余5种外植体(叶盘、叶柄、下胚轴、子叶、花蕾)诱导培养；⑤仅用于花蕾培养。（4）条件：培养条件均为12 h光照12 h黑暗。光强度1200-1500lx、温度(25 ±2)℃。三、叶片以红颊、章姬、丰香草莓叶片为试材，对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究，建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明，基因型、不同激素种类和配比直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素，不同激素配比是不定芽产生的关键因素。叶片愈伤组织的诱导培养基以MS+TDZ 2~3mg／1较理想，芽伸长的理想培养基为MS+6一BA 0．3～O．5mg／l，生根培养基以1／2MS+IBA0．3mg／1较适宜，移栽成活率可达90％以上。 2.结论（1）再生途径：先采取当年生匍匐茎茎尖培养繁殖，建立起三个品种的无性繁殖系；再从继代3周的无菌苗上剪取叶片作为外植体，进行不同的处理，每瓶接10片叶盘，每处理重复5瓶。（2）灭菌方法：于121℃下高温高压蒸汽灭菌20min。

蓝莓组培快繁技术实例 · 附配方

蓝莓（Vaccinium corymbosum）属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。本试验以蓝莓半木质化茎段为外植体，并通过瓶外生根技术，建立起植株再生体系。 1 材料与方法 1.1 外植体材料及培养条件 1.1.1 外植体选择高灌蓝莓半木质化茎段。 1.1.2 外植体预处理及灭菌剪取蓝莓半木质化枝条，立即去掉上部叶片带回室内，剪成带有一个叶芽2-3厘米长茎段，在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒2-3分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5-8分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剪去茎段两端约 0.5-1厘米，立即接种到初代培养基中。 1.1.3 培养条件诱导培养基：改良WPM + ZT 1.0mg/L 增殖培养基：改良WPM + IAA 0.1mg/L + ZT 2.0mg/L 复壮培养基：改良WPM + IBA 0.1mg/L WPM具体改良为：以硝酸钙 684mg/L、硝酸钾 190mg/L、EDTA铁钠 73.4mg/L和盐酸硫胺素0.1mg/L代替原WPM培养基中的硫酸钾、氯化钙、硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠。以上培养基均加蔗糖3%，琼脂0.7%，pH值5.2。培养温度为25℃，光照强度为2000lx，光照时长为12-16时/天。

2 结果与分析 2.1 初代诱导培养将处理好的外植体立即接种到诱导培养基中，5-6天叶芽开始萌动，10天开始展叶，20天腋芽长到1厘米长，30天腋芽长到1.5-2.5厘米长。 2.2 继代增殖培养将初代培养长出的茎剪成1.5-2厘米长茎段转接到增殖培养基中。30-35天增殖5-7倍，增殖苗生长健壮。 2.3 复壮培养将继代苗剪成1-1.5厘米茎段，转接到壮苗培养基，复壮培养30-40天，复壮苗高5-6厘米且粗壮。 2.4 瓶外生根培养

《植物组织培养技术》组培技术研发

《植物组织培养技术》组培技术研发模块介绍本模块针对组培研发岗位的工作职责与任职要求，编排了试验方案设计和数据调查与分析二个实训项目，主要内容包括组培的基本理论、提高组培苗遗传稳定性的措施、组培试验方案的制订等，重点阐述了组培快繁的程序与类型、组培研究的技术路线与试验设计方法、组培快繁的常见问题、组培数据调查与分析方法等。在理论学习的同时，开展项目实践活动，培养学生会设计组培试验、撰写试验方案、编制组培试验观察表和技术指标统计分析，具备组培研发工所要求的理论知识、技能水平和相应的职业素质。模块结构设计见表1。表1 模块结构设计项目1 组培试验方案设计一、学习目标（一）终极目标能够根据培养对象和培养目的科学设计试验方案。（二）促成目标 1.熟悉信息搜集途径和文献检索方法，提高信息搜集与处理能力； 2.清楚组培研究的内容与技术路线、试验方案的体例与撰写要求； 3.熟悉组培基本理论，清楚组培快繁程序、类型与试验设计方法； 4.熟悉组培苗遗传稳定的影响因素与提高措施； 5.培养团队精神、创新意识和科学思维方法。

二、学习内容 1.组培基本理论； 2.组培快繁程序； 3.组培快繁类型与再生途径； 4.提高组培苗遗传稳定性的措施； 5.信息搜集途径与方法； 6．组培研究内容（影响因素）； 7.组培研究的技术路线； 8.组培试验设计方法； 9.组培试验方案格式。三、知识点 1.植物细胞全能性理论（植物细胞全能性理论、根芽激素理论）； 2.组培快繁程序（初代培养、继代培养、生根培养）； 3.组培快繁类型（无菌短枝型、丛生芽增殖型、器官发生型、胚状体发生型、原球茎发生型）； 4.提高组培苗遗传稳定性的措施； 5.信息搜集途径与方法； 6．组培研究内容（影响因素）； 7.组培研究的技术路线； 8.组培试验设计方法（单因子试验设计、双因子试验设计、正交试验设计）； 9.组培试验方案格式。四、技能点 1.组培信息搜集与处理能力； 2.组培试验方案设计能力。五、教学重点 1.细胞全能性理论； 2.组培快繁程序与快繁类型（植株再生途径）； 3.组培研究的内容与技术路线；

苹果树组培快繁技术实例 · 含配方

苹果的组织培养是采用无菌培养技术，将来自优良植物的茎尖、腋芽、叶片、鳞片、块根和球茎等器官以及它们的组织切片进行离体培养，使之在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。由于离体技术处理严格，所以很容易脱除一些细菌病原及病毒，是复壮品种的有效措施。已成功脱除的病毒和病害有苹果褪绿叶斑病毒、花叶病病毒、轮纹病等。苹果矮化砧、抗寒砧的组织培养也已成功。苹果脱毒组培技术流程具体如下。

一外植体材料选择与处理早春，将上年芽接或切接的盆栽长富2号苹果苗移人温室，待新梢长出3～5片新叶时，放入热处理箱中，37℃恒温热处理30d或32℃与37℃每8h变换一次，变温热处理60d。脱毒率可达80％以上。热处理结束后，从盆栽苗嫩梢上采集生长旺盛、长约2～3cm顶梢，流水冲洗10min，去掉小叶。70％乙醇浸泡30s，蒸馏水冲洗后放入0.1％HgCI。中消毒10min，无菌水冲洗3～5次，解剖镜下迅速剥取1.0mm的茎尖进行分离培养，接种于起始培养基上。

二培养基制备 1.1 芽诱导适宜苹果芽诱导培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。诱导的芽生长正常可发育成新梢。 1.2 继代培养选择诱导的芽丛切割成单芽茎段，转接于设计的继代培养基上。适宜的苹果继代培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖4％+琼脂0.36mg/L。培养条件：光照强度2000～ 2500lx，光照时间14～16h/d，适宜温度为25℃±2.0℃。40d后增殖6.1倍。 1.3 生根培养选择生长正常的继代培养苗，剪成单芽茎段，插入生根培养基中，苹果适宜的生根培养基为：1／2MS+IAA1.5mg/L+蔗糖25％+琼脂0.36％。培养30d后，平均4～6条根／苗，长达0.5～1.0cm。根白且粗，多直接生于茎基部。

满天星组培快繁技术实例 · 含配方

满天星 Gypsophila elegans 满天星，又名为霞草、重瓣丝石竹，原产地中海沿岸，属石竹科多年生宿根草本花卉。为常绿矮生小灌木，其株高约为65～70cm，茎细皮滑，分枝甚多，叶片窄长，无柄，对生，叶色粉绿。由于它花型小、浅色、花姿蓬松具立体感，气质高雅清秀，给人以朦胧感，花序群体效果极佳，是重要的陪衬花，为当今最流行的切花之一，十分畅销。

满天星种苗多采用边生产切花，边利用植株下部发生的腋芽进行插扦获得。用这种方法，满天星繁殖系数较低，种苗品质参差不齐，较难获得大批量的优质种苗。一些单瓣种可用种子繁殖。商品化切花生产的，种苗繁殖以组培为主，采用茎尖培养，繁殖系数高，根系生长状况好，花枝挺拔，色泽纯正，切花质量高。满天星组织培养繁殖速度快，生根率高，无畸形变异，过渡苗驯化成活率高，与其他花卉组培相比，易获得成功，但普遍存在玻璃化现象。 1、初代培养诱导培养基为1/2MS+0.3mg/L 6-BA+0.1mg/L KT+0.3mg/L NAA，或MS+1.0mg/L 6- BA+2.0mg/L KT+0.3mg/L NAA+0.2mg/L IAA，各培养基加3％～4％蔗糖0.6％～0.7％琼脂。培养温度25～27℃，光照强度2000～2200lx，光照时间每天12～16h。剪取满天星母株上生长较粗壮的嫩梢，剪去展开叶片，留下生长较嫩的叶片，将外植体放在烧杯中，用自来水冲洗10～20min，然后加入少量家用洗衣粉或洗洁精少许，加入少量的水，用小毛刷搅拌2～5min。用此方法重复数次，再用自来水冲洗干净满天星茎尖上的洗涤液。把冲洗净的满天星茎尖外植体放入75％的酒精中约3～5min，再用0.1％的升汞浸泡外植体 5～7min，或在10％的漂白粉清洗液中浸泡10～15min，再用无菌蒸馏水冲洗5～7次，即得无菌外植体，置于无菌操作台中的培养皿中待用。然后将嫩茎切成lcm左右的带芽茎段，腋芽切取0.5～1.0cm长的茎尖，接种到诱导培养基上。

第一节植物组培快繁工厂的设计

第一节植物组培快繁工厂的设计第一节植物组培快繁工厂的设计一、组培苗生产规模的确定生产规模的确定首先应根据市场需求、生长的植物种类和经济实力来确定，例如，木本植物比草本植物的培养周期长，设计时必须比草本植物多增30%的空间、设备。植物种苗无糖微繁殖工厂化生产程序包括①入选品种外植体的筛选及获取; ②外植体灭菌诱导培养; ③快速繁殖; ④生根培养; ⑤出瓶过渡炼苗; ⑥包装进入市场等工艺。一般一个熟练的接种工人根据繁殖品种的不同，年生产量可达15―20万苗。即规划一个年生产量达500万株的组培室，需设25―30个无菌操作位置。当无菌操作位置数量确定后，即可计算出接种室的需求面积。按日生产组培苗的数量及培养周期计算需要的培养架数量，以此为基础很容易就可计算出培养室的需求面积，一般为1台无菌工作台或者说一个无菌操作位置，需配备净培养面积（放置培养物的面积）7-10平方米，无菌操作室与培养室的面积比例为1：2，围绕组培工厂建设，其它必备的配套设施设备及操作用具购置的数量，应以每个无菌工作台的需求量计算，解剖刀、镊子、刀片等常用工具还要有充足的备用量。室外应有相应的温室配套，生产品种栽培展示区等，其面积的大小应根据不同的植物种类来确定。因此组培工厂的建设，需要认真规划、仔细计算、合理投资，使之既有系统性又适用，才能充分发挥最大的生产潜力。在市场竞争中，尽量降低生产成本，提高产品质量和确保品种的可靠性。二、组培种苗工厂的设计植物组培育苗工厂应选址在安静、清洁、可避开各种环境污染源的地方，以减少污染，降低生产成本确保工作的顺利进行。根据已确定的生产规模，设计组培生产车间时，要全面了解组培工作中所需的最基本的条件，以便因地制宜地利用现有房屋改建或新建组培工厂，尽量做到合理布局。通常按工作程序先后，安排成一条连续的生产线，避免环节错位，增加日后工作的负担或引起混乱。组织培养的生产线主要包括培养器皿清洗；培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌；无菌操作材料的表面灭菌和接种；进入培养室培养；试管苗出瓶、移栽等。各个房间的面积要合理安排，做到大小适中，工作方便，减少污染，节省能源，使用安全。图5.1所示的是一种组培生产车间设计的平面布置图：图5.1组培生产车间的设计

樱桃组培快繁技术研究

樱桃组培快繁技术研究摘要：以甜樱桃品种高砂、顽童和中国樱桃品种莱阳矮樱为试材，以MS与F14为基本培养基进行组织培养试验。对增殖率和成苗率等指标进行研究。结果表明，用F14做培养基3个樱桃品种茎尖组培苗的增殖系数比MS高，F14上高砂、顽童和莱阳矮樱的增殖系数分别是4．17、3．78和5．0，MS上则分别是3．33、3．22和4．17；在F14上，樱桃茎尖组培成苗率莱阳矮樱为83．3％，高砂23．3％，顽童16．7％；在F14添加植物生长调节剂的增殖培养基中，以F14+6-BA 1．0mg／L+IBA 0．5mg／L+GA32．0mg／L对高砂和顽童的茎尖组培苗增殖系数大，以F14+6-BA 1．Omg／L+IBA 0．1mg／L+GA 2．0mg／L对高砂组培苗的增殖系数大，促进节间伸长的效果好：在一步生根法培养基F14+IBA 1．0mg／L上，平均生根率高砂较顽童高；在F14+IBA 1．0mg／L上添加活性炭500～1000mg／L时，可有效提高顽童的生根率。关键词：樱桃；茎尖；组织培养；快速繁殖组织培养技术的发展为果树的育种工作带来许多方便，也为长期保存果树种质资源提供了新的手段?。研究表明，通过茎尖外植体进行樱桃组培繁殖，可达到快速繁殖苗木和脱去病毒病的效果。 1 材料和方法试材为甜樱桃品种高砂、顽童．中国樱桃品种莱阳矮樱，均来自辽阳市农林科学院果树基地。试验采用F14和Ms 为基本培养基；F14+蔗糖30 L+琼脂7 L为分化培养基；F14+植物生长调节剂为增殖培养基，添加的植物生长调节剂有6一苄基氨基嘌呤(6．BA)、赤霉素(GA )和吲哚丁酸(IBA)，具体配方见表3；F14+IBA和MS+IBA为生根培养基。F14+IBA 1．0mg／L为一步生根法培养基。F14+IBA 1．0mg／L+活性炭为试验活性炭作用的培养基。培养基的pH值为5．6～5．8，分装在lO0ml三角瓶中，在121℃下灭菌20分钟，在黑暗条件下保存备用。 1．1 试材的预处理取樱桃芽露绿的一年生成熟枝条，剪成带一个芽、长约2cm的枝段，用刀将芽从枝段上削下来(带些木质部)，剥除芽鳞片，去除茎表皮，用洗洁精浸泡3分钟，在流水中冲洗60～90分钟，在超净工作台上用70％酒精消毒30秒钟，用无菌水冲洗3次(每次1～2分钟)，再用0．1％氯化汞消毒15分钟，置无菌水中浸泡20分钟，用无菌水冲洗4次，待接种。 1．2 试材的接种培养在超净工作台上将经预处理的试材用镊子剥除芽外部的叶原基，去除木质部，切下1mm大小的茎尖，接种于分化培养基F14+蔗糖3O L+琼脂7 L上培养。培养温度25±2cC，光强2000～2500K．每天光照l6小时。 1．3 评价指标微茎尖成苗数=萌发后能正常增殖继代、具有成苗能力的微茎尖数。成苗率(％)=成苗微茎尖数／接种微茎尖数×100 增殖芽数=接种1个芽25天后增殖的所有芽数增殖系数=转接后芽数／转接前芽数生根率(％)=生根嫩梢数／接种嫩梢数×100 2 结果与分析 2．1 不同樱桃品种间茎尖组培成苗率的差异在F14基本培养基上，接种甜樱桃品种高砂、顽童和中国樱桃莱阳矮樱的茎尖，高砂的成苗率为23．3％，顽童16．7％，莱阳矮樱83．3％(表1)。在组培中发现，甜樱桃萌发率较低，接种后的第2天伤口处及茎尖边缘褐变，之后有的茎尖周围发生大量愈伤组织，延缓了茎尖的萌发及成苗时间，甚至导致死亡。而中国樱桃莱阳矮樱则萌发率和成苗率均高，组培容易。

植物无糖组培快繁技术

植物无糖组培快繁技术一、无糖组培技术原理无糖组培快繁技术是由日本千叶大学的古在丰树教授上世纪八十年代末发明。它是一种全新的植物组织培养技术，是环境控制技术和组织培养技术的有机结合。它以CO2代替糖作为植物体的碳源，利用工程技术手段调节组培微环境的空气、光照、温度、湿度等影响因子，促进植物光合作用，使组培植物由兼养型转变为自养型，从而促进植物的生长发育。经大量实验研究证明，该项研究成果已成为世界领先技术。目前，中国、美国、英国、韩国等国家已将该项技术应用于种苗工业化生产中。该技术于1997年由国家外国专家局和昆明市科技局委托昆明市环境科学研究所从日本引进。二、无糖组培技术优势由于植物无糖组培以CO2代替糖作为植物体的碳源，对植物无糖组培微繁殖中的容器换气次数、光照强度、CO2浓度、培养基质、植物生长调节剂进行调节，并通过监测反馈结合植株生长特性建立符合植株生长要求的稳定供气系统和温度调控系统，从而解决了传统组织培养中存在的污染率高、植物生长发育不良、生长迟缓、生理功能紊乱、玻璃苗、畸形苗多等问题。据相关资料报道，无糖组培快繁技术与传统的植物组织培养技术相比，显著提高苗的质量和产苗率，可缩短培养周期，种苗生产综合成本降低。经大量实验研究证明，该项

研究成果已成为世界领先技术。无糖组培生产工艺简单，流程缩短，技术和设备的集成度提高，降低了人工操作强度，更易于在规模化生产上推广应用。三、无糖组培技术国内外研究进展无糖组培快繁技术通过多年的试验研究和生产示范，在引进消化吸收国外先进技术的基础上，结合国情，昆明市环境科学研究所研制开发了无糖培养微繁殖生产的配套设施，获得三项专利。目前，该项技术已初步应用于非洲菊、彩色马蹄莲、灯盏花、甘薯、葡萄、满天星等植物并获得成功。上述研究结果表明，无糖组培技术培育出的苗具有抽叶多、植株健壮、节间距短、根系发达、干物质积累多、光合自养能力强等优良的生物学性状。美国、韩国、英国、日本等国家已将该项技术应用于生产，并显示出了巨大的优势和良好的效果。无糖组培快繁技术可解决传统组织培养中存在的诸多问题，显著提高种苗质量，缩短培养周期，提高产苗率，降低生产成本。但目前，该项技术在药用植物方面的应用研究，除云南农大王荔课题组报道外尚未见其它报道。

草莓组织培养研究进展

[摘要] 从草莓组织培养类型（草莓茎尖组织培养、草莓花药培养、草莓叶片、叶柄组织培养）开始，介绍了近几十年国内外草莓组培的研究现状和进展。 [关键词]草莓;组织培养; 草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，是世界上七大水果之一，素有“水果皇后”的美称。草莓果实色泽艳丽，芳香多汁，酸甜适度，鲜美可口，营养丰富，每百克果实内含有蛋白质1g，脂肪，糖4～12g，酸～2g，无机盐，粗纤维，Vc45～120mg，比苹果和葡萄高10多倍，并含有丰富的磷、钙、铁、锌等矿物质，其中锌的含量是香蕉的4倍以上，比柑橘高6倍以上，比苹果高40倍以上。另外食用草莓对肠胃病和贫血病有一定的疗效，对促进智力发育有重要作用。深受国内外消费者的喜爱。草莓作为一种栽培周期短、结果早、见效快的经济作物，近15年来在我国发展迅猛，中国园艺学会草莓分会统计2003年底，我国草莓总面积和总产量均跃居世界第一位。在浆果中，草莓的总产量和总面积仅次于葡萄，成为我国发展农村经济，促进农民增收的重要经济作物。随着草莓在国内栽培面积的扩大和种植年限的延长，草莓的病毒病严重影响草莓的生产。作为高级浆果的草莓，在我国目前的生产栽培上多沿用无性繁殖种苗：主要方法是匍匐茎繁殖和分株繁殖，但这两种方法效率低、种苗易退化、易造成病毒蔓延。王国平（1988）等调查，我国栽培草莓带病毒植株率过80%以上，戴子林（1995）等调查，我国长江流域感染大面积植株感染率在50%以上；感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差、生长缓慢，一般减产30%-80%，并逐年加重；严重影响草莓的长势、品质和产量，对病毒病目前还没有药剂可以防治。通过草莓组织培养扩繁草莓脱毒苗，可以解决上述问题。近年来在草莓种苗生产中，有关草莓组培快繁技术的研究备受人们的重视，本文就草莓组织培养研究与应用作一综述。一、常见草莓组织培养类型目前，国内外在草莓品种快速繁殖上已有不少报道：常用的外植体主要有：茎尖（Adam，1972；庆子孝，1972；谭兰英等，1981）、腋芽（Boxus，1974、1977；杨乃博，1981）、叶片、叶柄、茎段，花药（Quak,1977；大泽，1972）。常见的草莓组织培养主要的类型：草莓茎尖组织培养、草莓叶片和叶柄组织培养、

多肉万象组培快繁技术实例分享 · 附配方

万象（Haworthia maughanii）又名毛汉十二卷，为百合科、十二卷属多年生肉质植物。万象形态非常奇特，叶半圆筒状，肉质叶肥厚，属典型的珍奇观赏多肉植物。试验以花葶为外植体，获得再生植株，并从芽诱导、芽增殖，到诱导生根的培养，已建立起完整的无性繁殖体系，本课题万象微型繁殖技术已应用于在企业生产中。 1 材料与方法 1.1 外植体材料及培养条件 1.1.1 外植体选择购得的万象成熟种苗在25℃环境下培养，浇少量水，待到其抽出花葶3-5厘米时切下。 1.1.2 外植体预处理及灭菌用洗衣粉水清洗并用毛笔刷洗；在超净工作台上用75%酒精快速浸泡30秒，然后用加有两滴吐温-80的0.1%氯化汞溶液浸泡8分钟，之后用无菌水冲洗4次，每次洗2分钟。 1.1.3 培养条件培养温度22℃-26℃之间，光照12小时/天，光照强度1500-2000lx。 2 结果与分析 2.1 初代诱导培养在超净工作台上把花葶切断，每段0.5-1厘米，接入诱导培养基（配方见文末，下同）中，培养20天左右，会诱导出愈伤组织，培养45-60天可诱导出丛生芽。 2.2 继代增殖培养愈伤组织形成后，会在愈伤组织上萌发丛生的不定芽。在超净台上，剥离不定芽，接种于增殖培养基，培养30-40天有新的丛生芽长出。 2.3 生根培养将长至2厘米以上的小苗，转接至生根培养基中，转接时，切净芽基部的愈伤组织。10天开始可以看到根的发生。 2.4 炼苗与移栽小苗根长1厘米时可以出苗，移栽前在培养室中打开瓶盖练苗3天，取出生根苗，在放有800-1000倍多菌灵溶液中清洗去基部培养基。

栽培基质用新鲜湿润的蛭石，植入后遮阴，第一次不浇水。1个星期后喷杀菌剂，浇少量水。小苗移栽成活率78%。附配方诱导培养基：MS + KT 2mg/L + NAA 0.2mg/L + Ad 5mg/L 增殖培养基：MS + KT 1mg/L + NAA 0.1mg/L + NaH2PO4 40mg/L 生根培养基：1/2MS + NAA 0.2mg/L 以上培养基均加琼脂0.7%，诱导愈伤组织和芽以及芽增殖时加蔗糖3%，生根时加蔗糖2.5%。pH值5.6-5.8，其中NaH2PO4主要起促进芽的分化的作用。

康乃馨植物组织培养(1)

《植物组培快繁技术》康乃馨植物组织培养实验设计小组成员：陈梅20141641044 郑莉20141641002 雷雨田20141641043

康乃馨植物组织培养一、实验目的掌握植物离体快速繁育原理、方法和完整过程。二、实验原理香石竹（学名Dianthuscaryophyllus）又名康乃馨，花色艳丽，开花时间长，装饰效果好，是世界上最畅销的切花之一，具有较高经济价值。由于病毒病侵害，常使植株矮化，花朵变小，花色产生斑点，退色甚至不开花，影响切花产量和质量。通过茎尖分生组织培养，能够获得“无病毒”的健康植株，对于引进的少而新的脱毒种苗，再进行一次茎尖培养，进一步降低基础苗中的病毒含量，并通过组织培养的方法快速繁殖，在短期内，就可以获得大量的脱毒试管苗，使引入材料迅速在生产上推广应用，取得明显的经济效益。三、实验仪器与材料仪器：超净工作台、酒精灯、电炉、烧杯、玻璃棒、镊子、解剖刀、接种盘、纱布、记号笔、标签纸试剂：75%乙醇、0.1%升汞、无菌水、MS培养基、IAA0.1mg/L、BA0.5mg/L、pH5.8-6.0、蔗糖、琼脂材料：康乃馨带芽外植体材料四、实验步骤（一）培养基的配方 1、康乃馨的生芽培养基 MS+IAA(0.1mg/L)+BA(2.0mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖30g/L+琼脂(8g/L) pH5.8-6.0,配制300ml,用培养瓶分装10~15瓶。另外需要制备无菌水10瓶，培养瓶每人3~4瓶。纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。

2、康乃馨的继代培养基 MS+BA(0.3mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖30g/L+琼脂(8g/L)，pH5.8-6.0,配制300ml,用培养瓶分装10-15瓶。另外需要制备无菌水10瓶，培养瓶每人3-4瓶。纱布、碟子若干后二者分别用报纸包好一同灭菌。 3、康乃馨的生根培养基 MS+生根培养基为1/2MS+NAA(0.075mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂(8g/L)， pH5.8-6.0,配制0.3L，用培养瓶分装10-15瓶。另外，需要制备无菌水10瓶，每人3-4培养瓶、纱布、碟子若干后二者分别用报纸包好一同灭菌。（二）康乃馨的生芽培养 1、无菌操作准备将培养基、无菌水、及各种接种用具放入超净工作台，开紫外灯照射消毒20-30min,开送风开关，关紫外灯，通风10min后，打开照明日光灯。洗手、换鞋，换实验服，戴口罩，进入接种室，开启超净工作台。用纱布吸取75%酒精擦手、擦拭超净台、擦拭培养基和无菌水瓶，点燃酒精灯，镊子、解剖刀、剪刀等接种工具放入灭菌锅灭菌，待冷却后使用。 2、外植体消毒选取康乃馨叶腋间生出的侧芽为外殖体，用自来水冲洗半小时，将材料上的泥土和灰尘及杂质冲洗干净，用解剖刀切取所需组织放入大烧杯中，用75%的酒精浸泡消毒30s，用无菌水冲洗3次，再将材料移入0.1%升汞溶液浸泡10分钟,然后在超净台内用无菌水冲洗6次。材料消毒完成。 3、外植体的制备将消毒好的材料用无菌滤纸吸去多余的水份,然后在无菌超净工作台上的接种盘内，借助解剖刀剥离茎尖，剥取茎尖大小通常在0.3mm左右。以上操作均

菊苣的组培快繁技术

菊苣(Cichorium intybus L.)菊科菊苣属多年生草本植物。根肉质、短粗；茎直立，有棱，中空，多分枝；叶互生，长倒披针形；头状花序，花冠舌状，花色青蓝。菊苣为药食两用植物，叶可调制生菜，根含菊糖及芳香族物质，可提制代用咖啡，促进人体消化器官活动；其地上部分及根可供药用，中药名分别为菊苣、菊苣根，具有清热解毒，利尿消肿，健胃等功效。该植物耐寒，耐旱，喜生于阳光充足的田边、山坡等地，具有较强的固土护坡与水土保持作用。为此，艾比蒂繁育大量菊苣组培苗，为大面积的沙漠和退化、沙化土地提供帮助。菊苣の快繁技术材料准备菊苣的种子为外殖体培养条件初代培养基 MS+BA0.5-1.0mg/L+IBA0.05-0.1 mg/L 愈伤组织诱导分化培养基

MS+BA1.0-1.5mg/L+IBA0.05-0.1 mg/L 生根培养基 1/2MS+NAA0.05-1.0 mg/L 以上培养基中加入2-3%的蔗糖和0.7%琼脂，pH 5.8-6.8，培养温度为25±2℃，光照时间12 h，光照强度为1000-2000LX。生长与分化情况 (1) 初代培养：挑选野生菊苣结实饱满的成熟种子，用纱布包好，在超净工作台内，用75% 乙醇消毒30s，再用0.1%的氯化汞浸泡3-5分钟，无菌水冲洗3-5次，种子用滤纸吸干，置于初代培养基上培养。15-20天，菊苣种子萌发生长2cm左右，切取0.5cm左右的叶片接种于诱导分化的培养基上。 (2) 愈伤组织诱导分化培养：15-20天叶片分化为疏松的愈伤组织，有绿点凸起的愈伤组织逐渐长出了小芽。芽生长较快，20天左右长成2-3cm的植株。 (3)生根培养：挑选3-4cm生长健壮的植株转接入生根培养基上，培养10天左右就有根的发生，根生长较快，须根较多。

植物组培快繁研究

（一）树型金银花组培快繁技术的研究实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌一、目的要求： 1．通过参观，了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。 2．通过实际操作，学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。二、材料用具：高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿（试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯），以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪，肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。三、说明：在进行各类具体的组培实验前，首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的，总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。植物组织培养是一项十分细致的工作，为了保证植物外植体不受污染，第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒，使它们保持无菌状态，做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧，因此每个学生必须学好这套基本功。四、方法和步骤：首先在老师带领下参观组培室，并听取讲解，然后配制洗液，称取工业用重铬酸钾40克，溶解在500ml在水中，然后徐徐加入450ml粗制浓硫酸（或废硫酸）配好的溶液呈红色，铬酸洗液是一种强氧化剂，去污能力强，但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效，铬酸洗液可反复使用，直到溶液呈青褐色为止。此溶液腐蚀性强，洗涤时需注意。每人清洗部分玻璃器皿，方法：清水洗净→泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷→清水反复冲洗→蒸馏水淋一遍→烘干备用。然后清洗部分较脏的玻璃器皿，方法：采用先碱后酸，即用洗衣粉洗刷后冲洗干净→晾干→侵入酪酸洗液，浸泡时间视器皿的肮脏程度而定→清水反复冲洗干净→蒸馏水淋洗一遍→烘干备用。带有石蜡或胶布的器皿：先将其除去，再用常规洗涤，石蜡用水煮沸数次即可去掉，胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时，再用水冲洗，凉干后浸入洗液，以后的步骤同前。对器皿和用具进行高压灭菌，即用手提式高压灭菌锅，在1.2个大气压下保持15~20分钟。解剖刀、手术剪、解剖针、镊子等用具在接种前还要用百分之七十的酒精棉球擦一下，再用酒精灯的火焰灭菌，冷却后即可应用。五、作业：试阐述为什么要对器皿和用具进行严格的洗涤和灭菌？实验二母液的制备及培养基的配制、灭菌一、目的要求：通过掌握培养基对母液制备及常用培养基的配制和灭菌方法，为植物组织培养准备合适的营养条件。二、材料用具：高压灭菌锅、冰箱、普通及精密天平、电炉、铝锅、玻璃器皿（烧杯、量微、容量瓶、移液管、试剂瓶、三角瓶、漏斗），化学试剂(CaCl2·2H2O，KNO3，MgSO4·7H2O， NH4NO3，KH2PO4，Na2—EDTA，FeSO4·7H2O，MgSO4·4H2O，Zn SO4·7H2O，H3BO3，

花组培快繁技术在实际生产中的应用

菊花组培快繁技术在实际生产中的应用陈喜林陈晓彬陈琦磊（广东省汕头市海滨华侨公园管理处汕头 515041）摘要：为了去除病害复壮菊花，采用侧芽和花序轴两种外植体，分别在MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+3%蔗糖培养基上经过一段时间的培养均可诱导产生不定芽，不定芽继续培养长大切成茎段微插于MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+3%蔗糖培养基，再经过30 天左右培养增殖4.6倍。1/2MS+2%蔗糖培养14 天后100%生根。移栽基质采用泥炭与椰糖各半的混合基质，28 天后成活率98%以上。上盆后长势旺盛，翠绿健壮。花朵直径略大，且花色更加洁白，观赏价值更高。关键词：菊花侧芽培养花序轴培养组培快繁中图分类号：Q943.1;S682.1+1 文献标识码：A 文章编号：1006—2327—（2009）04—0029—02 菊花Dendranthema morifolium是菊科菊属的多年生宿根草本植物，原产于中国。菊花栽培历史悠久，现栽培的为高度杂交种，已成为世界广泛栽培的名花之一。生产上主要采用扦插方法繁殖，一般名贵品种扦插不仅成活率低，满足不了生产上的需要，而且栽培过程中病害（如黑斑病、褐斑病、炭疽病等）有逐年加重趋势，长势渐弱。为复壮几年前开展了针对菊花十几个品种的组织培养工作，现以“汉白吐玉”品种为例，探讨组培快繁及规模化育苗方法，以解决生产上实际问题。 1材料与方法 1.1外植体及处理 10月下旬从汕头市海滨路尾华侨公园苗圃内选择“汉白吐玉”优良单株（几天前喷杀菌剂），轻取带1～2片叶的侧芽和绿豆大小的花蕾，带回实验室，先用洗洁精饱和溶液浸泡4－5min后，流水冲洗20min后置于洁净工作台上，用1%硝酸银消毒10min，然后用无菌水漂洗并不断搅动5～6次，每次3min ，滤纸吸干水分后，用手术刀切取长0.3～0.5cm侧芽（A）。剥离花蕾得到直径0.2～0.3cm花序轴（B）。这样就获得A、B两种外植体。 1.2培养基 a.MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+3%蔗糖； b.MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+3%蔗糖； c.1/2MS+2%蔗糖。以上培养基是经过预备性试验，逐步添加逐步排除的方法并参考前人的研究成果筛选出来的，均以MS为基本培养基，加入0.7%琼脂，pH值5.8；121℃条件下蒸汽高压灭菌20min，培养过程中温度保持在25℃±1℃，光照12 h·d-1，光照度3000 lx。 2结果与分析 2.1诱导产生不定芽将A、B分别接种于培养基a，5 天后观察外植体明显长大，9天后在外植体周围产生黄白色致密的愈伤组织，转瓶一次（相同培养基）到18天后，A的愈伤组织开始分化出绿色芽点，B的愈伤组织20天转瓶一次（相同培养基），到第55天才开始分化出浅绿色不定芽。不定芽再经过15天左右培养长成高1～2cm，粗0.1～0.2cm 的芽苗。 2.2 继代增殖培养将分化出芽苗茎段切成1cm左右且带有2～3片叶作为插穗转接培养基b，4天后见0.1cm左右腋芽产生，21天后腋芽长至0.5～1.0cm，28 天后腋芽长至1.0～1.5 cm，35天后长至1.5～2.5cm，这样每30 天左右转瓶一次，其增殖达4.6倍，即可获得大量苗。 2.3生根培养将经过大量繁殖的芽苗切成1～1.5cm茎段转瓶接培养基c，经15 天左右培养，生根率达100%，根长0.5～ 3.0cm，白色不定根3～7条，到28天时平均根数8.5条，平均根长5.0cm。 2.4试管苗的移栽和基质的选择经14天生根培养，根长至1.0～2.0cm，叶片舒展，叶色浓绿时即出室炼苗，洗苗移栽。采用四种移栽基质做对比试验，结果表明泥炭与椰糠各半混合基质优于纯泥炭土、珍珠岩与河沙各半混合基质，更优于纯河沙基质[1]。在泥炭与椰糠各半混合基质经28天精心养护移栽成活率在98%以上，萌出新叶生出新根，就可以上盆,按菊花生产要求进行正常的田间管理了。 2.5试管苗与同期扦插苗比较通过田间观测比对株高、茎粗、叶片数、叶片完整度，试管苗均明显好于扦插苗，且叶片翠绿，不易感染病害，花朵直径略大，花色更加洁白。观赏期相应更长，达到了预期目的。（下转第28页） 29

草莓组培实习报告

草莓组培实习华南农业大学李志真一、实习意义植物脱毒苗在农业生产中广泛使用对于降低农业生产成本、提高农产品的品质、改善农业的产业结构、提高农民经济收入都有重要的作用。草莓属多年生草本植物，靠生长出的匍匐茎进行营养繁殖，经多年种植后极易感染多种病毒，致使品质及产量降低，经济效益明显下降。利用组培快繁技术可对草莓脱毒苗进行快速繁殖及推广，出苗整齐，可进行周年生产，不受季节限制，实现新品种的工厂化育苗，并迅速推广。因此在草莓组织培养中，掌握草莓脱毒苗的培养与移栽有重要意义。二、实习内容实习主要掌握草莓脱毒苗的培养及大田移栽方法。移栽的适宜温度为15度到25度。环境温度太高，炼苗不易成活，而环境温度太低，则幼苗生长缓慢。因此，炼苗宜在春秋两季温度适宜时进行。冬季也可以在温室内进行炼苗。炼苗时最好使用由透气性能好、保水能力强的蛭石作为基质配制成的培养体系。蛭石无菌无毒，但亦无营养，因此应定期浇以稀释1倍的MS培养液作为营养液代替水进行浇灌，保证脱毒苗营养及水分的供给。移栽时，先将草莓生根培养瓶上的扎口绳或皮筋松开使组培苗初步接触空气，让植株开始长出角质层。时间约为2～3d。然后移去瓶口包扎物，让组培苗充分接触空气，2～3d后，组培苗对外界环境已逐渐适应，且培养基已开始长出菌类，此时进行组培苗的出瓶炼苗。首先，小心地用镊子夹持组培苗将苗从瓶中移出，用流水慢慢冲净植株根部的培养基，注意切勿伤及根部的根毛，小心地将洗净的脱毒苗移栽到事先已经灭菌处理过的苗床上。栽苗的深度要做到，浅不露根，深不埋心，浇足水，并用塑料膜进行覆盖使棚内的相对湿度保持在80%左右，以后定期放风，逐渐降低棚内的相对湿度，直至将塑料膜去掉。于4月上旬选择透气性良好、疏松肥沃的土壤种植脱毒草莓苗，行距、株距各为1m，浇足水，并用防虫网进行覆盖，防止病虫害感染传毒。于9月上旬取健壮的匍匐茎苗进行大田移栽。三、实习收获

植物快繁技术

植物快繁技术/植物克隆技术/植物傻瓜克隆技术/植物非试管高效快繁技术减小字体增大字体作者：本站来源：本站整理发布时间： 2008-1-1 18:33:32 植物快繁技术简介所谓植物非试管高效快繁技术也就是植物克隆技术，也有人称之为植物非试管快繁技术、植物快繁技术、植物全光照喷雾育苗技术、全光雾插技术、微材料或微组织扦插育苗技术，喷雾育苗技术、喷雾扦插育苗技术、傻瓜克隆。无论叫做植物快繁还是植物克隆其原理和方法是一样的。植物克隆技术（植物快繁技术）的关键是喷雾，十几年前就有权威单位推广全光照喷雾育苗技术，实际上也就是后来有人称之为植物非试管高效快繁技术，而现今更多被称为植物克隆、傻瓜克隆等时髦词汇。过去开发的喷雾全套设备是机械式，成本高达数万元，且容易锈蚀和损坏，一段时间后就没人再使用，而自从引进以色列微喷（头）技术后，微喷雾问题顺利以低成本形式解决，于是植物克隆技术（植物快繁技术）得以在全国迅速推广普及。植物快繁技术（植物克隆技术）的推广的另一障碍就是自动控制仪的问题，进口的温湿控制设备好用但价格高，所谓的农业智能化计算机系统除了价格更高之外还总是不能成熟，使用起来问题百出，经常造成育苗的失败，笔者使用两年后才不得已开发了国产育苗仪，其低廉

的价格和丰富实用的功能很快被全国同行赏识。植物克隆技术（植物非试管高效快繁技术）现在的投入只需2000余元，大力推广植物克隆技术、植物快繁技术利国利民。植物非试管高效快繁技术的起源、应用和进展植物傻瓜克隆技术是20年前从国外引进，又经过我国众多农业专家花费二十余年时间，逐步完善并成熟运用于规模生产一个系统配套，用于多种经济植物大规模无性快繁产业化生产的实用技术，又称非试管快繁技术、喷雾快繁技术等。此技术是一项崭新经济植物苗木快繁技术体系，它将植物组织培养快繁苗从试管培养基中解放到田间大地，是一场无性繁殖快速育苗的革命！是现代农业生物技术研究的一大创举！该技术育苗生产成本低，适用于国内外苗木交易市场和经济植物种苗繁殖工程。绿色快繁产业是一个永久性高效益产业，它可以带动制药产业、林纸产业、林草产业、园林绿化等其它产业，进而促进农业产业化、林业产业化、制药产业化和农业现代化的快速发展。还有利于生态城市、园林城市、森林公园、自然保护区的建设、生态环境改善、城市生态系统的改变、无性系造林、天然林保护工程、城市绿化工程以及与人们生活息息相关的如粮食作物、花卉、蔬菜、无公害蔬菜、野生蔬菜、濒危野生植物、果树、山野菜、药用植物、珍稀植物等高效经济植物以及新经济资源的开发利用。植物快繁技术是古今中外人们十分关注的问题。从传统的扦插繁

植物非试管高效快繁技术

植物非试管高效快繁技术植物非试管高效快繁技术的特点总结植物非试管高效快繁技术(TERNPC)与植物组培快繁(plant tissue culture)和传统育苗技术相比的先进性，及其在技术生产运用中的特点总结如下: 一、用植物0.3-1.0厘米长的微小外植体作为繁殖单位材料，极大的节约了种质材料，所用外植体繁殖单位材料用量比常规育苗用量少3-8倍;接种速度极快，是组织培养的3-5倍。直接接种在大田沙床或营养袋中，一次成苗直至供应生产，不需任何移动，成活率高。完全离开组培大楼和全部试管快繁的条件，育苗设施简易比组织培养快繁投入低几十倍，比常规育苗也低。二、在独创的简易条件下，无论南方北方、不同纬度、不同土壤、不同气候，一年四季(包括极端温度:低温-35度和高温42度)都可用此法连续快繁，多数品种均可达6--12代。该技术育苗较少受季节影响，一年365天均可接种繁殖。实现每代在原种植物基数上按几何级数高效增殖。一年中任何一天都可用此快繁技术启动生产。极大的拓展了技术应用的时间和空间。三、普及率高。普通人员每天(8小时)可接种3000-5000个单位材料。一个培养四个月的生产技术工人每月可成功培育单一植物品种30,000-10,0000株纯种苗。对人才素质要求适应性极广，生产技术易于推广;二是个人操作速度比组织培养快繁和常规育苗快得多，当达到一定育苗规模以上时，生产投资效益比可达 1:5-1:10以上。它非常节约植物种质材料，一天就可以接种数十万株至上百万株(这是组织培养在世界范围内难以想象的事)，易于大面积快繁各种苗木。，易于大面积育苗产业化规模快繁各种种苗。四、操作步骤少，生产技术工艺简单，经特殊培训较容易掌握，可广泛应用于生产。适宜大规模工厂化育苗。普通人员可参加快繁全部生产操作，且速度极快，