现代药物分析答案

简答题

1.准确度、精密度、灵敏度、检测限的物理意义及之间的关系

准确度：指测量值和真实值接近的程度，测量值与真实值越接近，测量值越准确。

精密度：平行测量的各测量值之间的接近程度，各测量值之间越接近，测量的精密度越高。

灵敏度：指仪器测量最小量底物的测量能力，所测量越小，灵敏度越高。

检测限：指试样中被测物能被检测出的最低量。

准确度与精密度之间的关系：准确度高，一定精密度好；精密度高，不一定准确度好，可能存在系统误差。

灵敏度和检测限之间的关系：灵敏度高，检测限越低。

2.列举四种表征有机结构的方法

红外光谱法：根据分子内部原子之间相对振动和转动来确定有机分子结构

紫外光谱法：根据化合物吸收光谱的形状、吸收峰位置、数目、最大摩尔吸收系数进行定性

质谱：通过对谱图中各种碎片离子、亚稳离子、分子离子的化学式、M/Z、相对峰高等信息，根据各类有机化合物的分裂规律，找出个碎片离子产生的途径，从而拼凑出整个分子结构，或与已知化合物标准图谱对比进行鉴别

核磁共振法：通过谱图中化学位移值，偶合常数值、谱图峰相对强度等信息进行结构鉴定

3.最低检出限与定量限的物理意义及之间的关系

最低检出限：指产生一个能被检测出信号所需的最小浓度和含量

定量限：样品中被检测物被定量测定的最低量

检出限=3.3a/s 定量限=10a/s

a：响应标准差s：校正曲线斜率

定量限=3倍检出限

论述题

根据H=A+B/U+C*U，分析怎样提高HPLC的分离效率

A为我留扩散项系数，B为纵向扩散系数，C为流动相传传质阻力和固定相传质阻力系数之和，H为理论塔板高度。一般来说，柱效越高，色谱柱的分离效率就越高，柱效和塔板高度成反比H=L/n，因此想要提高柱色谱的分离效率就必须尽可能的降低塔板高度。

①对于涡流扩散项，若固定相颗粒不均匀，则组分在穿过颗粒间隙时，易在柱内形成涡流，使谱带展宽。固定相颗粒大小是影响涡流扩散的主要原因，减小涡流扩散的主要选择是采取细而均匀的颗粒，采用良好的填充技术和尽可能的使用短柱

②对于纵向扩散项，B=2rDm，在HPLC中组分在流动相中的扩散系数Dm很小，而流动相流速一般在最佳流速以上，这时B很小，可以忽略

③传质阻力项，包括固定相传质阻力、流动相传质阻力、静态流动相传质阻力；a，固定相传质阻力，由于在化学键合色谱中，键合相多位单分子层，厚度可以忽略，所以固定相传质阻力可以忽略；b，流动相传质阻力，由于流动相中组分分子还未来的及扩散进入流动相和固定相界面就被流动相带走，使谱峰展宽；c，静态流动相传质阻力，由于组分分子滞留在固定相微孔内的静态流动相中，与固定相再分配，未来得及回到流路中引起谱峰展宽。

所以要降低传质阻力项，应该降低流速，选用低粘度固定液，使用细颗粒固定相，适当提高柱温。

论述大气压化学电离质谱（APCI-MS）的原理

APCI-MS是高效液相色谱与质谱联用通过将HPLC分离的试样采用大气压化学电离的方式来离子化导入质谱分析仪中进行检测的一种联用手段。大气压化学离子化是将溶液中的组分分子转化为气态离子的过程。APCI-MS采用APCI接口，以喷雾探针为进样渠道，色谱柱后流出物经喷雾探针中心的毛细管流入，被其外部雾化气套管的氮气流雾化，形成气溶胶，并在毛细管出口前被加热管剧烈加热气化进入API源。在加热管端口用电晕放电针进行电晕尖端放电，使溶剂分子被电离，形成离子，溶剂离子再与组分的气态分子反应，生成组分的准分子离子。正离子通过质子转移，加合物形成或电荷抽出反应而形成；负离子则通过质子抽出，阴离子附着或电子捕获而形成。由此形成的正负离子再进入MS就可实现定性分析。APCI-MS适用于分析有一定挥发性的中等极性与弱极性，相对分子质量在2000一下的小分子化合物。

定量分析中分离与富集的主要目的是什么？你了解哪些分离与富集的方法？列举三种分离与富集方法的原理寄应用范围

在定量分析中，中心任务是测量样品中有关组分的含量，但实际样品都含有多种杂质，不可避免的会产生干扰。因此，分离与富集的主要目的是分离干扰组分，提高分析方法的专一性，同时提高分析方法的灵敏度。

常见的分离与富集的方法：沉淀分离法，萃取分离法，离子交换分离法和液相色谱分离法。

沉淀分离利用沉淀反应将待测组分与干扰组分分离，依据不同化合物在溶液中溶度积的不同，通过控制一定的反应条件，在试样中加入适当的沉淀剂，使待测组分或者干扰组分沉淀下来，从而达到分离的目的。沉淀分离要求生成的沉淀溶解度小、纯度高、稳定，但该方法耗时较长，加入的沉淀剂有时会影响下一步的操作，一般只适用于常量组分的分离而不适用于微量组分的分离。

萃取分离是利用物质在互不相溶的溶剂中分配系数不同进行的，将待测物质从一种液相转移到另一种液相，以达到分离的目的。该方法能用于大量元素的分离，也适用于微量元素的分离。

离子交换发是利用离子交换剂与溶液中的离子发生交换反应而是离子分离的方法，它是基于物质在固相与液相之间的分配来实现离子的分离。离子交换法既可用于带相反电荷的离子间的分离，也可用于带相同电荷或性质相近的离子之间的分离。同时还可广泛的应用于微量组分的富集和高纯度物质的制备。

叙述毛细管电泳的基本组成部分？电渗在毛细管电泳分离中起到重要的作用，叙述毛细管中产生的电渗流的原理和影响电渗流大小的因素？

基本结构：高压电源、电解液槽和进样系统、毛细管及温度控制系统、检测器、记录/数据处理系统

电渗是一种液体相对于带电管壁移动的现象。由于毛细管电泳通常一石英和玻璃毛细管作为分离通道，毛细管表面的硅羟基在缓冲溶液中发生电离，使管壁带负电，溶液中的抗衡离子靠静电吸附和扩散作用，在毛细管内壁表面固液界面形成双电层。双电层包括紧密层和扩散层。在电场的作用下，固液两相的相对运动发生在紧密层和扩散层之间的滑动面上，此处的电动电势为Zeta电势。由于离子是溶剂化的，当扩散层的离子在电场中发生迁移时，将携带溶剂一起移动，就形成了电渗流。

影响因素：①pH，pH越高，表面硅羟基的解离程度越大，电荷密度越大，电渗流越大；

②离子强素，双电层理论认为，增加离子强度可以使双电层压缩，降低Zeta电势，减少电渗流；③温度，温度升高，可降低介质粘度，增大电渗流；④电场强度，电场强度不影响电渗淌度，但可改变电渗流速率，电场强度越大，电渗流速度越大。

简述毛细管区带电泳和胶束电动毛细管色谱的异同点

答：①毛细管区带电泳是利用被分离离子在电场作用下移动的速率不同（电泳淌度差异）而实现分离的一种高效分离技术。毛细管中电解质溶液的移动是电渗引起的。

②胶束电动毛细管色谱是在毛细管区带电泳的基础上派生出的一种高效分离技术。在毛细管区带电泳的缓冲溶液中添加浓度高于胶束临界浓度的表面活性剂，使其形成胶束相；因此，被分离对象在电场作用下的移动速度不仅取决于受电渗流和自身电泳，而且与它们在胶束相与水相之间的分配系数有关。

③应用范围

毛细管区带电泳只适合于离子或可电离物质的分离。

胶束电动毛细管色谱可用于离子、可电离物质以及中性化合物的分离。