ALT和AST测定方法
转氨酶活性测定实验报告
一、实验目的1. 了解转氨酶在生物体内的重要作用及其在临床诊断中的意义。
2. 学习转氨酶活性测定的原理和方法。
3. 掌握分光光度法在测定转氨酶活性中的应用。
二、实验原理转氨酶是一类催化氨基酸与酮酸之间氨基转移的酶，广泛存在于生物体内。
其中，谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）是两种常见的转氨酶。
当肝细胞受损时，ALT和AST会释放到血液中，导致血液中这两种酶的活性升高。
因此，测定血液中ALT和AST的活性可以反映肝脏的功能状况。
本实验采用分光光度法测定血液中ALT的活性。
在实验中，ALT催化丙氨酸与α-酮戊二酸反应生成丙酮酸和谷氨酸，丙酮酸与2,4-二硝基苯肼反应生成丙酮酸2,4-二硝基苯腙，丙酮酸2,4-二硝基苯腙在碱性溶液中呈棕红色，通过测定其吸光度可以计算出ALT的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜动物肝脏、血清、丙氨酸、α-酮戊二酸、2,4-二硝基苯肼、磷酸盐缓冲液、NaOH、蒸馏水等。
2. 实验仪器：分光光度计、恒温水浴锅、移液器、试管等。
四、实验步骤1. 准备工作：将新鲜动物肝脏和血清分别置于冰浴中，制备肝匀浆和血清样品。
2. 样品处理：将肝匀浆和血清样品按照一定比例加入反应体系中，加入丙氨酸、α-酮戊二酸和磷酸盐缓冲液，混匀后置于恒温水浴锅中反应。
3. 测定吸光度：在反应结束后，取出反应体系，加入2,4-二硝基苯肼和NaOH，混匀后立即在分光光度计上测定吸光度。
4. 标准曲线绘制：以丙酮酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
5. 计算ALT活性：根据样品的吸光度，从标准曲线上查出对应的丙酮酸浓度，再根据公式计算ALT活性。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：绘制标准曲线后，发现线性关系良好，相关系数R²>0.99。
2. 样品处理：实验过程中，肝匀浆和血清样品均未出现明显的分层现象，说明样品处理得当。
3. 吸光度测定：实验过程中，分光光度计的吸光度读数稳定，说明仪器性能良好。
ALT和AST测定方法
ALT和AST测定方法ALT（Alanine Aminotransferase）和AST（Aspartate Aminotransferase）是两种常用的生物化学指标，用于评估肝脏功能和肝细胞损伤程度。
本文将详细介绍ALT和AST的测定方法。
一、ALT的测定方法1.酶动力学法：该方法是最常用的ALT测定方法。
原理是将肝脏组织或血浆样品与丙酮酸转氨酶（LDH）反应，通过测定产生的谷草转氨酶（AST）的酶活力来反映样品中ALT的含量。
该方法准确可靠，具有较高的灵敏度和特异性。
2.免疫测定法：ALT测定的另一种常用方法是免疫测定法，包括免疫比浊法、免疫荧光法和免疫酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
这些方法利用ALT特异性抗原和抗体的结合反应来测定ALT的浓度，具有高灵敏度和高特异性。
二、AST的测定方法1.酶动力学法：AST的测定方法类似于ALT的测定方法，也是通过与丙酮酸转氨酶（LDH）反应来测定AST的酶活力。
该方法较为简单快速，适用于大量样本的测定，但其灵敏度和特异性相对较低。
2.免疫测定法：AST的免疫测定法与ALT的免疫测定法类似，包括免疫比浊法、免疫荧光法和免疫酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
这些方法通过AST特异性抗原和抗体的结合反应来测定AST的浓度，具有高灵敏度和高特异性。
三、ALT和AST测定的注意事项1.样本的采集：ALT和AST的测定常用的样本是血浆或血清。
在采集样本时，应避免血液污染或其他杂质的干扰，以保证测定结果的准确性。
2.技术操作：在进行ALT和AST的测定过程中，需要严格遵守相关实验操作规范，确保实验条件的一致性和稳定性。
包括标本处理、试剂配制、反应时间和温度的控制等。
3.器材和试剂的选择：选择合适的测定仪器和试剂是保证测定结果准确性和重复性的重要因素。
一般情况下，空白对照组和阳性对照组的选取是测定中的重点之一4.数据解读：在进行ALT和AST的测定后，需要对测定结果进行合理的解读和分析。
生化实验报告血清转氨酶
生化实验报告血清转氨酶实验背景转氨酶（transaminase）是一类存在于细胞中的酶，主要存在于肝脏、心脏、骨骼肌等组织中。
转氨酶在氨基酸代谢中起着重要的作用，能够催化氨基酸之间的氨基基团转移。
转氨酶主要包括天冬氨酸氨基转移酶（AST，aspartate aminotransferase）和丙氨酸氨基转移酶（ALT，alanine aminotransferase），它们的活性在体内存在着一定的平衡。
血清转氨酶的检测可以用于评估肝功能，尤其是肝细胞受损程度。
因此，本次实验旨在通过检测血清中AST和ALT的活性，了解肝功能的情况。
实验材料与方法材料- 血清样品（待检测）- Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）- 天冬氨酸（AST底物）- 丙氨酸（ALT底物）- NADH（辅酶）- α-酮戊二酸（酶促进剂）方法1. 取一支离心管，标明为“AST底物”，加入5ml Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）；2. 加入2ml 10mM天冬氨酸溶液，并充分混合均匀，形成AST底物溶液；3. 取一支离心管，标明为“ALT底物”，加入5ml Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）；4. 加入2ml 10mM丙氨酸溶液，并充分混合均匀，形成ALT底物溶液；5. 取出待检测的血清样品，用离心机离心5分钟，得到血清；6. 取两个比色管，标明为“AST样品”和“ALT样品”，分别加入待检测的血清样品；7. 在AST样品管中，加入0.1ml AST底物溶液，并充分混合；8. 在ALT样品管中，加入0.1ml ALT底物溶液，并充分混合；9. 将AST样品管和ALT样品管分别放入37C水浴中孵育30分钟；10. 在AST样品管中，加入0.1ml NADH溶液，并充分混合；11. 在ALT样品管中，加入0.1ml NADH溶液，并充分混合；12. 同时开始计时，并记录每分钟NADH吸光度的变化；13. 通过计算AST和ALT的活性，得到相应的结果。
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)37℃参考测定程序的建立及其临床应用
图３ＡｓＴ线性范围预实验图４ＡＬＴ线性范围预实验从图３和图４可见，稀释点和测定值间的关系为抛物曲线，在第一个稀释点到第四稀释点之间，曲线近似上升的直线，第五点达到曲线的最高点，从第五点开始，曲线呈下降趋势。
可以推断ＡｓＴ、ＡＬＴ（３７℃）ｓ０Ｐ线性范围大致在Ｏ一３００ｕ几之问。
ＡｓＴ、ＡＬＴ（３７℃）ＳＯＰ线性确证实验分别使用第二组稀释样本，相应的测定原始结果分别见表１８、表１９。
按照ＮｃｃＬｓＥＰ一６中的数据处理方法”１，将每个标本（Ｘ１到ｘ４）四次测定的结果排列在Ｙ卜Ｙ４，进行离群点检查。
ＡｓＴ、ＡＬＴ（３７℃）ｓ０Ｐ离群点检查结果分别见表２０、表２１。
ＡＳＴ、ＡＬＴ（３７℃）ＳＯＰ线性确证理论稀释值一测定值图分别见图５、图６。
图５ＡＳＴ线性确证实验表２０ＡＳＴ离群点检查结果４１表１９ＡＬＴ线性确证实验原始数据样品号理论稀释值———————————————壅型堕』坐旦Ｌ——＝—＿—————．＝ｉ＿（ｕ／Ｌ）第一次第二次第三次第四次爿０７５１５０２２５３０００．３８Ｏ．１９０．１９０．００Ｏ．１９７６．２３７５．９８７５．５６７５．２０７５．７４１５１．００１５０．９６１５０．５９１５０．２３１５０．７６２２５．３６２２５．２３２２４．２８２２４．９８２２４．９６３００．０６２９９．８５２９８．９８２９８．６８２９９．３９图６ＡＬＴ线性确证实验表２１ＡＬＴ离群点检查结果界限值Ｐ。
；＝０．７６５，Ｐ。
＝Ｏ．８８９４３。
ALT,AST测定方法
ALT,AST测定⽅法3.8.2.1⼩⿏肝、肾、⼼组织ALT含量测定1实验原理⾕丙转氨酶作⽤于由丙氨酸及α-酮戊⼆酸组成的基质，在⼀定的反应条件下，产⽣⼀定量的丙酮酸。
在酶反应到规定时间时，加⼊2,4-⼆硝基苯肼，在当量浓度的酸性条件下，终⽌了酶反应。
2,4-⼆硝基苯肼分别与反应产⽣的丙酮酸及剩余的基质α-酮戊⼆酸形成各⾃对应的2,4-⼆硝基苯腙。
在碱性条件下，虽然⼆种苯腙分别显出红棕⾊，但由于丙酮酸⽣成的颜⾊较深，以同等克分⼦计算，在480-530nm波长范围内其浓度约为α-酮戊⼆酸⽣成的颜⾊的3倍，利⽤这⼀差别可以反映出丙酮酸的⽣成量。
本实验设⾕草转氨酶活⼒为：样品液与ALT 基质液在37℃下反应60min时每⽣成1µmol丙酮酸所需的酶量为1个活⼒单位（U）。
2试剂配制（1）0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）称取NaH2PO4.2H2O 2.96495g，Na2HPO4.12H2O 29.0142g，溶解于蒸馏⽔中，定容到1000mL。
（2）20µmol/L丙酮酸钠标准溶液称取22mg丙酮酸钠，溶解于0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）100mL中。
现配现⽤。
（3）ALT基质液称取α-酮戊⼆酸29.2mg，DL-丙氨酸1.78mg（L-丙氨酸0.85mg）溶解于30mL 0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）中，溶解后校正pH⾄7.4，再⽤pH7.4的磷酸缓冲液定容⾄100mL，置冰箱中保存备⽤（可保存⼀周）。
可加⼊氯仿数滴防腐。
（4）0.02% 2，4—⼆硝基苯肼溶液称取20mg2，4—⼆硝基苯肼先溶解于10 mL纯盐酸中，电炉加热助溶，待2，4—⼆硝基苯肼全部溶解后，⽤蒸馏⽔稀释⾄100mL，过滤后盛于棕⾊中，置冰箱中保存备⽤。
（5）1mol/L NaOH溶液：称取4g NaOH溶解于蒸馏⽔后，定容到100mL。
（6）0.4 mol/L NaOH溶液称取16 g NaOH溶解于蒸馏⽔后，定容到1000mL。
双项目同测法测定ALT和AST
双项目同测法测定ALT和AST
钟方财;蒋维国;李顺康
【期刊名称】《川北医学院学报》
【年(卷),期】2003(018)004
【摘要】目的探讨双项目同测法与单项目测定法测定ALT和AST结果的差异.方法分别使用双项目同测法和单项目测定法测定定值血清和30例样本ALT和AST 含量,并将定值质控血清分别做日内、日间精密度测定.结果两方法测定结果相关性良好,γ=0.999,检测结果差异无显著性(P＞0.05),ALT和AST日内变异分别为
2.63%、2.47%,日间变异分别为
3.84%、3.77%.结论双项目同测法可以节约仪器通道,提高工作效率,节约资源,有一定推广应用价值.
【总页数】3页(P94-96)
【作者】钟方财;蒋维国;李顺康
【作者单位】内江市第一人民医院检验科,四川,内江,641000;内江市第一人民医院检验科,四川,内江,641000;内江市第一人民医院检验科,四川,内江,641000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
【相关文献】
1.电子水准仪单程双测的一种方法——单程双测在大连庄河Ⅲ场海上风电场项目三等水准中的应用 [J], 张开
2.一测双评法测定咳特灵胶囊中牡荆苷与异牡荆苷的含量 [J], 员荣;孙丽丽;杨立伟
3.双项同测法测定血清丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶 [J], 蒋洪敏
4.溶血对速率法测定ALT／GPT和AST／GOT的影响 [J], 周美芬;赵岩
5.双波长微孔板赖氏法测ALT含量 [J], 刘玉振;陶玉生;温涛;王君
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ALTAST测定方法
ALTAST测定方法ALT（Alanine Aminotransferase）和AST（Aspartate Aminotransferase）是评估肝功能的常用酶学指标。
它们通常通过血液样本进行检测。
在本文中，我们将介绍ALT和AST的测定方法、应用以及血液样本的预处理。
首先，ALT和AST的测定方法主要是基于酶促反应原理。
当ALT和AST存在于细胞内时，它们通常以较低的浓度存在。
在细胞损伤或炎症发生时，细胞膜破裂，导致ALT和AST释放到血液中，使其浓度升高。
因此，通过测定血液中ALT和AST的浓度，可以评估肝脏的炎症程度和损伤程度。
目前，常用的ALT和AST测定方法主要有两种：荧光法和颜色反应法。
荧光法是利用荧光探针，例如NADH（尼克酸腺嘌呤二核苷酸还原型）或NADPH（尼克酸腺嘌呤二磷酸盐还原型），与ALT和AST进行反应，生成发射荧光信号。
该方法的优势是灵敏度高、特异性好，可以测定低浓度的ALT和AST。
颜色反应法是利用一些物质与ALT和AST进行反应后，形成可见光吸收的化合物。
这些化合物的光密度和ALT和AST的浓度成正比，可以通过比色法或分光光度法来测定。
在血液样本测定ALT和AST之前，还需要进行一些预处理步骤。
首先，采集血液样本时要注意避免氧化和污染。
其次，血液样本需要离心分离血清或血浆。
一般来说，血清是指凝结后，离心除去凝块，得到的液体部分；而血浆是指在血液凝结前，通过添加抗凝剂，离心除去细胞和凝块，得到的液体部分。
这是因为ALT和AST主要存在于细胞内，测定它们的浓度需要去除细胞成分的干扰。
因此，选择适当的分离方法非常重要。
最后，ALT和AST的应用非常广泛。
它们不仅用于评估肝脏疾病，还用于监测药物治疗的副作用，例如肝毒性。
此外，一些非肝脏疾病，如心肌梗死、肌肉炎等，也会导致ALT和AST的升高。
因此，ALT和AST的测定可以提供有关这些疾病的重要信息。
总结起来，ALT和AST的测定方法主要是基于酶促反应原理。
ALTAST测定方法
ALTAST测定方法ALT和AST是两种常用的肝功能指标，用于评估肝脏疾病和损伤程度。
本文将介绍ALT和AST的测定方法。
一、ALT（丙氨酸氨基转移酶）的测定方法：ALT是一种肝细胞特异性酶，主要存在于肝细胞的胞浆中。
当肝细胞受损或破坏时，ALT会释放入血液中，因此血液中ALT水平的升高通常与肝脏疾病相关。
ALT的测定方法一般采用酶动力学法或颜色反应法。
1.酶动力学法：这种方法是通过衡量ALT催化丙酮酸和谷氨酸互相转化的速率来测定ALT的活性。
这种方法的原理是ALT催化丙酮酸和谷氨酸生成谷草转氨酶和谷氧化酶，同时反应中NADH的消耗会导致光学密度的变化。
通过测量这种变化可以确定ALT的活性水平。
2.颜色反应法：颜色反应法是用于测定ALT浓度的常用方法，它基于谷氨酸和丙酮酸在特定条件下与ALT催化生成谷草转氨酶和谷氧化酶的反应。
这种方法通常使用的试剂盒包含了特定的底物和酶，当ALT存在时，底物与其催化生成产物，产物的浓度可以通过光度计测量。
二、AST（天冬氨酸氨基转移酶）的测定方法：AST也是一种肝脏酶，但它不仅存在于肝细胞中，还存在于心肌、肌肉、肾脏和红细胞等组织中。
因此AST的升高并不一定代表肝脏疾病，也可能与其他组织的损伤有关。
AST的测定方法与ALT类似，也有酶动力学法和颜色反应法两种常见方法。
1.酶动力学法：该方法是通过测量AST催化天冬氨酸和α-酮戊二酸互相转化的速率来测定AST的活性。
反应中，NADH或NADPH的消耗导致光学密度的变化，可以用于测量AST的活性水平。
2.颜色反应法：AST的颜色反应法原理与ALT的相似，使用特定的底物和酶，当AST存在时，底物与其催化生成产物，产物的浓度可以通过光度计测量。
这些方法虽然有一定的差异，但一般都基于底物与酶的反应原理，通过测量底物与产物的光学密度变化或者测量酶活性来确定血液中ALT和AST的水平。
综上所述，ALT和AST的测定方法主要有酶动力学法和颜色反应法两种。
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3.8.2.1小鼠肝、肾、心组织ALT含量测定
1实验原理
谷丙转氨酶作用于由丙氨酸及α-酮戊二酸组成的基质，在一定的反应条件下，产生一定量的丙酮酸。
在酶反应到规定时间时，加入2,4-二硝基苯肼，在当量浓度的酸性条件下，终止了酶反应。
2,4-二硝基苯肼分别与反应产生的丙酮酸及剩余的基质α-酮戊二酸形成各自对应的2,4-二硝基苯腙。
在碱性条件下，虽然二种苯腙分别显出红棕色，但由于丙酮酸生成的颜色较深，以同等克分子计算，在480-530nm波长范围内其浓度约为α-酮戊二酸生成的颜色的3倍，利用这一差别可以反映出丙酮酸的生成量。
本实验设谷草转氨酶活力为：样品液与ALT 基质液在37℃下反应60min时每生成1μmol丙酮酸所需的酶量为1个活力单位（U）。
2试剂配制
（1）0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）
称取NaH2PO4.2H2O 2.96495g，Na2HPO4.12H2O 29.0142g，溶解于蒸馏水中，定容到1000mL。
（2）20μmol/L丙酮酸钠标准溶液
称取22mg丙酮酸钠，溶解于0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）100mL中。
现配现用。
（3）ALT基质液
称取α-酮戊二酸29.2mg，DL-丙氨酸1.78mg（L-丙氨酸0.85mg）溶解于30mL 0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）中，溶解后校正pH至7.4，再用pH7.4的磷酸缓冲液定容至100mL，置冰箱中保存备用（可保存一周）。
可加入氯仿数滴防腐。
（4）0.02% 2，4—二硝基苯肼溶液
称取20mg2，4—二硝基苯肼先溶解于10 mL纯盐酸中，电炉加热助溶，待2，4—二硝基苯肼全部溶解后，用蒸馏水稀释至100mL，过滤后盛于棕色中，置冰箱中保存备用。
（5）1mol/L NaOH溶液：
称取4g NaOH溶解于蒸馏水后，定容到100mL。
（6）0.4 mol/L NaOH溶液
称取16 g NaOH溶解于蒸馏水后，定容到1000mL。
3实验方法
（1）样品的处理按 3.5方法进行。
（2）ALT标准曲线的制作
○1将测定所用试剂除氢氧化钠溶液外全部置于水浴箱内，预温37℃至然后使用．取6支试管，按表4进行配制
表4 ALT标准曲线的配制
20μmol/L丙酮酸
0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25
钠标准溶液
ALT基质液0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25
0.1mol/L磷酸缓
0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
冲液（pH7.4）
混匀，将各管置于37℃水浴中保温60min
2,4-二硝基苯肼0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
混匀，将各管置于37℃水浴中保温20min
0.4 mol/L NaOH
5 5 5 5 5 5
溶液
混匀，将各管置于37℃水浴中保温10min
○2冷却后以0为对照用分光光度计比色测定吸光值OD520nm。
○3以丙酮酸含量为纵坐标，吸光值OD520nm为横坐标绘制标准曲线(见图3)。
图3
ALT标准曲线见图3，建立回归方程为：
y =1.4149x (线性相关系数：R＝0.9965)
其中：x－吸光度；
y－丙酮酸含量(μmol/L)
(3) 小鼠肝、肾、心组织ALT含量测定
○1将测定所用试剂除氢氧化钠溶液外全部置于水浴箱内，预温至然后使用．取2支试管，按表5进行配制
表5 ALT含量测定
样品0.10 0.10 ALT基质液- 0.50
混匀，将各管置于37℃水浴中保温60min
ALT基质液0.50 - 2，4—二硝基苯肼0.5 0.5
混匀，将各管置于37℃水浴中保温20min
0.4 mol/L NaOH溶液 5 5
混匀，将各管置于37℃水浴中保温10min
○2冷却后以0为对照用分光光度计比色测定吸光值OD520nm。
○3在标准曲线中读出样品丙酮酸的生成量(见图3) 。
3.8.2.2小鼠肝、肾、心组织谷草转氨酶（AST）含量测定
1实验原理
AST作用于门冬氨酸和α-酮戊二酸组成的基质，在一定的反应条件下，产生一定量的草酰乙酸，草酰乙酸在反应过程中又自行脱羧成为丙酮酸。
在酶反应到规定时间时，加入2,4-二硝基苯肼，在当量浓度的酸性条件下，终止了酶反应。
2,4-二硝基苯肼分别与反应产生的丙酮酸及剩余的基质α-酮戊二酸形成各自对应的2,4-二硝基苯腙。
在碱性条件下，虽然二种苯腙分别显出红棕色，但由于丙酮酸生成的颜色较深，以同等克分子计算，在480-530nm波长范围内其浓度约为α-酮戊二酸生成的颜色的3倍，利用这一差别可以反映出丙酮酸的生成量。
本实验设谷草转氨酶活力为：样品液与AST基质液在37℃下反应60min时产生的草酰乙酸自行脱羧成为1μmol丙酮酸所需的酶量为1个活力单位。
2试剂配制
(1) 0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）
称取NaH2PO4.2H2O 2.96495g，Na2HPO4.12H2O 29.0142g，溶解于蒸馏水中，定容到1000mL。
(2) 20μmol/L丙酮酸钠标准溶液
称取22mg丙酮酸钠，溶解于0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）100mL中。
现配现用。
(3) AST基质液
称取α-酮戊二酸29.2mg，DL-门冬氨酸2.66 g，置于亦小烧杯中，加入1N 氢氧化钠溶解，并校正pH至7.4，再用pH7.4的磷酸缓冲液定容至100mL，置冰箱中保存备用（可保存一周）。
(4) 0.02% 2，4—二硝基苯肼溶液
称取20mg2，4—二硝基苯肼先溶解于10 mL纯盐酸中，电炉加热助溶，待2，4—二硝基苯肼全部溶解后，用蒸馏水稀释至100mL，过滤后盛于棕色中，
置冰箱中保存备用。
(5) 1mol/L NaOH溶液：
称取4g NaOH溶解于蒸馏水后，定容到100mL。
(6) 0.4 mol/L NaOH溶液
称取16 g NaOH溶解于蒸馏水后，定容到1000mL。
3实验方法
(1) 样品的处理按 3.5 方法进行。
(2) AST标准曲线的制作
○1将测定所用试剂除氢氧化钠溶液外全部置于水浴箱内，预温至然后使用．取6支试管，按表6进行配制
表6AST标准曲线的配制
20μmol/L丙酮酸
0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25
钠标准溶液
AST基质液0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25
0.1mol/L磷酸缓
0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
冲液（pH7.4）
混匀，将各管置于37℃水浴中保温60min
2,4-二硝基苯肼0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
混匀，将各管置于37℃水浴中保温20min
0.4 mol/L
5 5 5 5 5 5
NaOH溶液
混匀，将各管置于37℃水浴中保温10min
○2冷却后以0管为对照用分光光度计比色测定吸光值OD520nm。
○3以丙酮酸含量为纵坐标，吸光值OD520nm为横坐标绘制标准曲线(见图4)。
图4 AST标准曲线见图4，建立回归方程为：
y =1.3294x (线性相关系数：R＝0.9992)其中：x－吸光度；
y－丙酮酸含量(μmol/L)
(3) 样品AST含量测定
测定方法同ALT含量测定。