第四章-定量分析

固体制剂------1. 容量分析法
（1）直接滴定法
TVF 平均片重 ms 标示量 % 100 % 标示量
（2）剩余滴定法
T（V0 V）F 平均片重 ms 标示量 % 100 % 标示量
2. 紫外分光光度法
（1）吸收系数法
A n V 1% E1cml 100 平均片重 ms 示量% 100 标示量
利用溶液中不同离子与离子交换剂间的交换能力 的不同而进行分离的方法。
Mobile phase flow
COOH COOCOOCOOCOOH COOCOOCOOH COOCOO-
nHmLj-

REE3+
+
REE3+
n
REE(HmL)n(3-nj)+
空间排阻色谱 (Size Exclusion Chromatography)
溶液中，直到所加滴定液与被测药物按化学计量反应完全为止，
然后根据滴定液的浓度和消耗的体积可以计算出被测物的含量。
化学计量关系
特点：
所用仪器价廉、易得；操作简便、快速、测定结果准确（相对标
准差一般应不大于0.2％)；专属性较差，适用于含量较高的样品
指示剂指示反应化学计量点的到达
容量分析的相关计算 1. 滴定度－指每1mL规定浓度的滴定液所相当的被测药物的质量
第四章 药物的含量测定方法与验证
主要内容
3 1 2 3 定量分析方法的分类与特点
定量分析样品的前处理方法
药品分析方法的验证
定量分析？
药品定量分析－定量分析是依据统计数据，建立
数学模型，并计算出分析对象的各项指标及其数值的 一种方法。
定性分析与定量分析是统一的，相互补充的；定性分析是定量分析的基本前提， 没有定性的定量是一种盲目的、毫无价值的定量；定量分析使之定性更加科学、 准确，它可以促使定性分析得出广泛而深入的结论。
校正因子（f）


（C x） f

Ax AS / C 'S
外标法
Ax 含量（Cx）＝CR────── AR
气相色谱法(略）
以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法。不适用于难挥 发和热稳定性差的物质分析。
原理：各组分在固定相与载气(流动相)间分配系数不等， 按大小依次被载气带出色谱柱，小先流出。


3. HPLC测定复方SMZ片中SMZ含量，以SG为内标，测得标准液中： SMZ峰高14.90cm，浓度8.0mg/mL，SG峰高13.80cm，浓度4.0mg/mL。样 品液中SMZ峰高11.92cm，SG峰高16.20cm，浓度4.0mg/mL。 （进样量均 为5μl）,样品液中SMZ的浓度为：
2. 滴定度（T）的计算 (mg/mL)：P144-145 aA+bBcC+dD
T(mg/mL) = m(a/b) M
WA= T VB
m-滴定液的摩尔浓度（mol/L）；a-被测药物的摩尔数； b-滴定液的摩尔数； M-被 测药物的摩尔毫摩尔质量（mg/mmol）；
含量计算
（1）直接滴定法
Ax Cx( g / 100ml ) 1% E1cm
1
含量％＝
A ×D
E
% cm
×100 ×W
×100%
示例4-6
定量计算复习
对照法
A供 A对 A供 A对

1% E1cm c供 l 1% E1cm c对l
c供 c对 A供 A对
c供 c对
A供 c对 n V A对 百分含量 % ms
(VBo- VBs )x TA x FB
含量（%）= W x 100%
实例－溴量法
凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，
故可采用溴量法进行测定。如司可巴比妥钠的测定原理为：
课堂练习1
精密量取维生素C注射液4mL（相当于维生素C 0.2g），加水 15mL与丙酮2mL，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4mL与淀粉 指示液1mL，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显蓝色，并 持续30秒钟不退。已知：注射液规格2mL:0.1g，消耗 0.05mol/L碘滴定液（F=1.005）22.45mL，维生素C的分子量 为176.12，反应摩尔比为1:1，问：
课堂习题
非那西丁含量测定：精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流1小 时后，放冷，用亚硝酸钠液（0.1010mol/L）滴定，用去 20.00mL。每1ml亚硝酸钠液（0.1mol/L）相当于17.92mg的 C10H13O2N。计算非那西丁的含量为（ ） A. 95.55% B. 96.55% C. 97.55% D. 98.55% E. 99.72%
（1）每1mL碘滴定液(0.05mol/L)相当于多少mg的维生素C？ （2）求本品相当于标示量的百分含量？
维生素C
CH2OH H C OH O O HO OH H
+
CH2OH H C OH O O O O
+ I2
+
2HI
1摩尔维生素C与1摩尔碘相当 T＝0.05×176.12×1/1=8.806mg/ml 标示量%=T×F×V/W×标示量×100% 8.806×22.45×1.005 = 0.2×1000 ×100% =99.34%

色谱系统适用性问题
同高效液相色谱
测定法
加入对照品溶液前后校正因子应相同，即： Ais/Ax=（Cx+△Cx）/Cx 则待测组分的浓度Cx可通过如下公式进行计算：
Cx= △Cx/(Ais/Ax)-1
第二节、定量分析样品的前处理方法
前处理的主要目的
净化 浓缩 增强响应、提高选择性（比如化学衍生）
三、色谱分析法
色谱分析法是基于 混合 物 各组 分在体系中 两相 的物 理化学性能差异（如吸附、分配差异 等）而进行分离和分析的方法

色谱法分类
分离原理：吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法与 排阻色谱法
分离方法：纸色谱、薄层色谱法、柱色谱、纸色谱、气相 色谱法、高效液相色谱法。
高效液相色谱法




3. 对检测器要求 紫外检测器 荧光检测器 示差检测器 蒸发光散射检测器 电化学检测器 质谱检测器

4. 流动相要求
紫外检测器：溶剂无干扰 蒸发光散射检测器、质谱检测器：不含不挥发性盐 C18：水、甲醇、乙腈、缓冲液
离子色谱 (Ion Chromatography)
紫外分光光度法（UV-VIS）
基于物质分子对紫外光谱区（200-400 nm）和可见光区（400760 nm）的单色光辐射的吸收特性建立的光谱分析法。 朗伯－比耳定律：单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的 浓度范围内被该物质吸收光的量与该物质的浓度和液层的厚度 （光程）成正比。
吸光度A一般在0.3～0.7（误差最小） 浓度点n＝5，用浓度c对A作线性回归处理，得一直线方程， r应大于0.999(n＝5)，方程的截距应近于零。
含量测定方法＊
对照品比较法
Ax Cx CR AR
原料药百分含量
Cx D 含量（%） 100% W

D：为稀释体积
固体制剂含量
Cx D W 标示量（%） 100% W B Cx D V 标示量（%） 100% V B

液体制剂含量
吸收系数法
Ax Cx( g / ml ) 1% E1cm 100
V x T
含量（%）=
W
x 100%
实际滴定度－药典给出的是规定浓度下，实际滴定度要乘以校正因子 F = 实际摩尔浓度/规定摩尔浓度
V x T x F
含量（%）=
W
x 100%
间接滴定法
生成物滴定法
药物
药物+AB （定量反应）
剩余量滴定法（回滴定法）
滴定剂
B
例：P146
先加入过量的滴定液A，使其与药物定量反应，但反应完全后，再用另一滴 定液来回滴反应后剩余的滴定液A
特点：高压、高效、高速
高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。

1. 仪器要求：高效液相色谱仪
Agilent HP1100

2. 对色谱柱要求
高效液相色谱：硅胶和化学键合硅胶（C18，CN，苯基） 离子色谱：离子交换填料 分子排阻色谱：凝胶或高分子多孔小球


色谱柱是HPLC的心脏部件，它包括柱管与固定相两部分。
固定相为化学情性多孔物质——凝胶，它类似于分子筛，但孔径比分子筛大。凝 胶内具有一定大小的孔穴，体积大的分子不能渗透到孔穴中去而被排阻，较早地 被淋洗出来；中等体积的分子部分渗透；小分子可完全渗透入内，最后洗出色谱 柱。这样，样品分子基本上按其分子大小，排阻先后由柱中流出。
利用多孔性物质对不同大小的分子的排阻作用进行分离的方法。
2013-12-10 12
课堂练习2

烟酸片的含量测定：取本品20片，精密称定重量为 7.1680g，研细，取片粉0.3729g，加新沸放冷的水 50mL，加热使溶解，放冷，用氢氧化钠滴定液（ 0.1mol/L）滴定，消耗25.20mL，每1mL NaOH滴定 液（0.1mol/L）相当于12.31mg烟酸，已知烟酸片规 格0.3g，NaOH滴定液（0.1mol/L）的F=1.005，计算 每片含烟酸的量。
浓缩痕量的被测组分，提高方法的灵敏度，降低检测限； 去除样本中的基体与其他干扰物质； 通过衍生化，使被测物转化成为检测灵敏度更高的物质或转化为与样本中干扰组分能
够分离的物质，提高方法的灵敏度和选择性
保护下游分析仪器以及测试系统、避免影响整机性能及寿命