双缩脲试剂配置
蛋白质测定方法之双缩脲法(Biuret法)
双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。
在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。
凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。
测定范围为1~10mg蛋白质。
干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris 缓冲液和某些氨基酸等。
此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。
主要的缺点是灵敏度差。
因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。
（二）试剂与器材1.试剂：（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml 的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。
如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。
牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制，酪蛋白用0．05N NaOH配制。
（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（CuSO4•5H2O）和6.0克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。
此试剂可长期保存。
若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。
2.器材：可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。
（三）操作方法1.标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。
充分摇匀后，在室温（20~25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。
用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。
高中生物常见试剂及变色反应
高中生物常见试剂及变色反应高中生物常见试剂大全1.斐林试剂：成分：0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。
用法：将斐林试剂甲液和乙液混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。
2.班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。
和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。
用于尿糖的测定。
3.双缩脲试剂：成分：0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。
用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。
如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。
4.苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。
用于检测脂肪。
可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。
5.二苯胺：用于鉴定DNA。
DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。
6.甲基绿：用于鉴定DNA。
DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。
吡罗红：检测RNA，呈红色7、50%的酒精溶液：用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。
8、70%的酒精溶液：用于医学临床上的消毒灭菌。
9、95%的酒精溶液：DNA不溶于酒精，尤其是体积分数为95%的冷冻酒精，而细胞中的某些物质可以溶解于酒精10、15%的盐酸：和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖，使细胞分离开来。
“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15％盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。
洗去卡诺氏液8％盐酸：（1）盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输；（2）盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合11. 龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色改良苯酚品红染液：检测染色体，红色健那绿：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色12.20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。
（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。
蛋白质测定方法之双缩脲法(Biuret法)
一）实验原理双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。
在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。
凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。
测定范围为1~10mg蛋白质。
干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris 缓冲液和某些氨基酸等。
此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。
主要的缺点是灵敏度差。
因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。
（二）试剂与器材1.试剂：（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml 的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。
如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。
牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制，酪蛋白用0．05N NaOH配制。
（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（CuSO4•5H2O）和6.0克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。
此试剂可长期保存。
若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。
2.器材：可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。
（三）操作方法1.标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。
充分摇匀后，在室温（20~25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。
用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。
双缩脲法蛋白质含量测定试剂盒使用说明
双缩脲法蛋白质含量测定试剂盒使用说明货号:PC0040产品简介:样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。
此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。
该方法测定范围为1~10mg蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。
自备仪器和用品:可见分光光度计、移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
标准品：液体×1瓶，5mg/mL，4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取:1.液体样品：澄清无色液体样品可以直接测定。
2.组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水））冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。
（动物样品常常需要稀释）3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
测定步骤:1.分光光度计预热30min以上，调节波长到540nm，蒸馏水调零。
2.空白管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL蒸馏水，1000μL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A空白管。
3.标准管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL标准液，1000μL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A标准管。
4.测定管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL待测液，1000μL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A测定管。
样品中蛋白质浓度计算：C待测（mg/mL）=C标准管×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)=5×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)注意事项：1.样品蛋白浓度须在1~10mg/ml范围内，低于1mg/ml不能用此法，高于10mg/ml须做相应稀释。
双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂
双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。
它是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。
会遇到蛋白质显紫色。
双缩脲试剂A是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液；
双缩脲试剂B硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液.
先将双缩脲试剂A 3mL加入组织样液3mL，振荡均匀（必须营造碱性环境），再加入2~3滴双缩脲试剂B，振荡均匀。
如果组织里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。
具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。
蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的络合物。
颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。
(若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液，再加入氢氧化钠[NaOH]溶液，则无法充分制造碱性环境，此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜[Cu(OH)2]沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。
双缩脲法测定蛋白质的浓度
然ห้องสมุดไป่ตู้置于 1000ml容量瓶中，加入300ml浓氨水、300ml冰
冷的蒸馏水和200ml饱和氢氧化钠溶液，摇匀，室温放置 2小时，再加蒸馏水至刻度，摇匀备用。
四、实验步骤 1、标准曲线的绘制：取7支干燥的试管，按下表加入试剂：
0 2mg/ml 牛血清白蛋白液（ml） 0 蒸馏水（ml） 3 双缩脲试剂（ml） 2.0 OD540 0 1 0.3 2.7 2.0 2 0.6 2.4 2.0 3 0.9 2.1 2.0 4 1.2 1.8 2.0 5 1.5 1.6 2.0 6 1.8 1.2 2.0
将上述溶液混合后，试管中即有紫红色出现，在540nm下测 的各管的吸光度，以蛋白质浓度为横坐标，OD值为纵坐标作出标 准曲线。 2、 样液的测定 取未知浓度的蛋白质溶液 3.0ml 置试管中，加入双缩脲试剂 2.0ml，混匀，测其540nm的吸光度，对照标准曲线求得未知液蛋 白质浓度。
蛋白质分子中含有肽键与缩脲结构相似，故也能进行 此反应。双缩脲反应可作为蛋白质定量测定的依据。
二、实验仪器
1、 试管 2、 吸管 3、 7200分光光度计
三、实验试剂
1 、 2mg/ml 牛 血 清 白 蛋 白 液 ： 将 1g 牛 血 清 白 蛋 白 溶 于
0.9%NaCl溶液并稀释至1000ml.
实验五
一、实验原理
双缩脲法测定蛋白质的浓度
具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应。 蛋白质在碱性溶液中可与 CU2+ 形成紫色化合物，在一定 浓度的范围内，蛋白质浓度与生成的紫色化合物颜色的
深浅成正比，可用比色法测定。
双缩脲反应
双缩脲试剂(AB液)使用说明
双缩脲试剂(AB液)使用说明货号：PC0041保存：室温保存。
有效期12个月。
试剂盒组成：规格Storage名称试剂(A):Biuret Reagent A100ml RT避光试剂(B):Biuret Reagent B10ml RT避光产品说明：双缩脲是一种用于分析蛋白质的方法，双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下，铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物，呈紫色。
所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例，可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。
双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响，对于血清总蛋白的双缩脲分析，胆红素、脂类、血红蛋白、葡聚糖具有一定干扰作用。
双缩脲试剂(AB液)由Biuret Reagent A、Biuret Reagent B组成，如组织里含有蛋白质或具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应，颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
该试剂是较为粗略的验证蛋白质存在的方法，多用于定性检测蛋白质。
操作步骤(仅供参考)：1、先将Biuret Reagent A3ml加入待测样品3ml，振荡均匀，以便产生碱性环境。
2、加入2~3滴Biuret Reagent B，振荡均匀，如果组织里含有蛋白质或具有两个或两个以上肽键的化合物皆可不双缩脲试剂产生紫色反应，颜色深浅不蛋白质浓度成正比。
3、如果想采用分光光度计或酶标仪测定，应于540nm波长处的吸光值，如无540nm，520～562nm之间的波长也可，根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。
注意事项：1、待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂后，如果収现检测效果丌佳，可以室温放置1h或60℃放置15min，颜色会随着时间的延长丌断加深。
显色反应也会随温度升高而加快。
2、检测中収现所有孔都呈暗紫色，可能原因是样品含有还原剂，应适当透析或稀释样品。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验报告
蛋白质含量测定——双缩脲试剂法-实验报告生物化学实验报告姓名：学号：专业年级：组别：生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验日期实验地点合作者指导老师评分教师签名批改日期一、实验目的二、实验原理三、材料与方法：.实验试剂：①小牛血清；②6.0mol/LNaOH溶液；③双缩脲试剂:硫酸酮、酒石酸钾钠、碘化钾；④蛋白质标准液（70g/L）；⑤0.9%NaCl；⑥蒸馏水。
.实验器材：①试管；②烧杯；③容量瓶；④加样枪；⑤刻度吸管；⑥玻璃棒；⑥1100分光光度计；⑦电子天平；⑧水浴锅。
小牛血清（1:10） - - 0.5蛋白质标准液（1:10） - 0.5 -0.9%Nacl 0.5 - -双缩脲试剂 4.0 4.0 4.0四、结果与讨论：①选取三支洁净无损的试管，从左往右依次加入0.9%氯化钠溶液、蛋白质标准液、相应的小牛血清各0.5ml，分别命名为B试管、S试管和U试管，再分别向三支试管内加入4ml的双缩脲试剂，溶液均成蓝色透明状。
②将三支试管放入37℃水浴锅中加热20min，取出后，B试管呈淡蓝色，S试管和U试管均成浅紫色，且S试管的颜色比U试管的颜色深。
（如图一）测定次数1 2 3 平均吸光度图一水浴后三支试管颜色图二分光计读数S 0.185 0.184 0.185 0.1847U 0.152 0.151 0.152 0.1517结果计算：代入公式：血清总蛋白（g/L)=(Au/As)X蛋白质标准液浓度（g/L)，得出结果：血清总蛋白=57.493g/L。
经查阅资料得：正常成人血清总蛋白含量为60～80g/L，而小牛血清总蛋白含量比正常成人血清总蛋白含量略低一点，本次结果得出小牛血清总蛋白含量为57.493g/L，符合情况。
.成功原因：①本次试验的试剂混合水浴后出现了预期效果：B试管呈淡蓝色，S试管和U试管均成浅紫色，且S试管的颜色比U试管的颜色深。
B试管呈淡蓝色是因为B试管中没有发生任何反应，所以呈现双缩脲试剂本来的淡蓝色，而S试管和U试管呈浅紫色是因为试剂中的蛋白质和双缩脲发生了双缩脲反应而呈浅紫色。
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(一) 方法学评价试验双缩脲试剂配置
摘要
目的：掌握双缩脲法的试剂的配置，并熟悉和掌握分光光度计的使用方法掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理与操作
方法：标准管法测物质含量的方法、双缩脲法测定蛋白质含量的方法、双缩脲反应法
结果：成功的配置双缩脲试剂，血清总蛋白的量是38.27g/l.
结论：能够按照正确的方法配置双缩脲试剂，并测定出血清总蛋白量。
英文翻译
Abstract Master configuration Biuret reagent，and Familiar with and master the use of the spectrophotometer。
Master the principle and operation of the determination of total proteins by Biuret Method。
Methods Standard tube method to measure the material content，
Double deflation urea method for the determination of protein content and Biuret reaction.
Result configuration of biuret reagent Successfully ,The serum total protein amount of 38.27g/l.
Conclusion We can use the correct way to configured Biuret reagent,
and we know determination of serum total protein.
关键词：双缩脲法配置血清总蛋白
前言
双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物，在碱性溶液中与硫酸铜反应生
成紫红色络合物，此反应即为双缩脲反应。
含有两个或两个以上肽键的化合物
都具有双缩脲反应。
蛋白质含有多个肽键，在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红
色化合物。
其颜色深浅与蛋白质的浓度成正比，可以用比色法进行测定，这种紫
红色络合物在540nm处有明显吸收峰，吸光度在一定范围内与血清蛋白含量呈正
比关系，经与同样处理的蛋白质标准液比较，即可求得蛋白质含量。
1.材料和方法
1.1材料硫酸铜（CuSO4·5H2O）、酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O）、KI固体
NoOH晶体标准蛋白质溶液可见光分光光度计、钥勺、试管、烧杯、玻璃棒、旋涡混合器
1.2 方法（操作过程）
（1）6mol/L NaOH溶液25ml：用烧杯称取NaOH 6 g，量取蒸馏水25 ml加入烧杯溶解NaOH，备用。
（2）双缩脲试剂，称取以0.75克硫酸铜（CuSO4·5H2O）溶于新鲜制备的
500ml的蒸馏水，加入2.25克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O），【用于结合Cu2+,用于防止CuO在碱性条件下沉淀】并加入KI 1.5g【防止碱性酒石酸铜自动还原并防止Cu
2
O的离析】，等到完全溶解后，在搅拌下加入6g/lNaOH溶液25ml，并用水定容到250ml，放置塑料瓶中盖紧保存。
（3）取三支试管按下表进行操作
试管号空白管B 标准管S 测定管T
血清（mL）0 0 0.06
标准蛋白（mL）0 0.06 0
蒸馏水（mL）0.06 0 0
双缩脲试剂（mL） 3 3 3
旋涡混合器摇匀，37℃水浴10分钟,后用分光光度计于540nm波长处比色，以空白管调零点，测得各管吸光度。
2.结果
标准管是0.185，待测管是0.118，
血清总蛋白（g/l）=A
u /A
s
x C
标准
（g/l）=0.118/0.185x60g/l=38.27g/l
3、讨论
3.1 实验结果讨论
3.1.1 我的结果是：S / Abs. T=0.185/0.118=1.568/与参考范围接近，说
明实验误差不是很大本次实验的结果参考范围应该是
Abs. S≈0.140 – 0.160，
Abs. T≈0.090 – 0.110， Abs. S / Abs. T≈ 1.5,
对部分同学结果进行讨论：
3.1.2 同学甲 Abs. S=0.259，Abs. T=0.211，此同学的结果偏大，原来是该同学加样的是误把蛋白质标准溶液加了0.1ml.把双缩脲试剂加5ml，做实验不够认真和细心。
3.1.3 同学乙 Abs. S=0.088，Abs. T=0.061，这个同学的结果偏低，是他加样
的时候，由于加样枪的枪头已经部分老化，封密性不够好，导致加的蛋白质标准溶液不够0.6ml。
以后做实验时候一定要注意实验仪器造成的误差。
3.1.4同学丙 Abs. S=0.113，Abs. T=0.096,是由于此同学在操作加样枪的时候，
按针筒的时候用力过度，导致每一次加样都是超过0.6ml，是操作不规范造成的实验误差。
3.2 实验过程中的讨论
3.2 .1 加试剂时候按不同的顺序会出现不同的溶液颜色的变化。
实验中，加的试剂要先硫酸铜结晶（CuSO
4·5H
2
O）溶于新鲜制备的
蒸馏水，然后加酒石酸钾钠（NaKC
4H
4
O
6
·4H
2
O，接着加KI，班上有同学是加
了硫酸铜结晶CuSO
4·5H
2
O）然后加KI，最后才加酒石酸钾钠（NaKC
4
H
4
O
6
·4H
2
O，
结果颜色是咖啡色，变成咖啡带绿色，实验需要重新做，
3.2 .2 加入的氢氧化钠是为了提供碱性环境，向试剂中加入碘化钾，是为了
延长试剂的使用。
3.2 .3 蛋白质定量测量方法除双缩脲法外,还有如下几种测定方法：寿凯氏定氮
法、紫外吸收法、folin-酚试剂法、考马斯亮蓝法。
4.方法学评价
双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物，在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。
优点：双缩脲法测定蛋白质测定范围能够是1~10mg蛋白质，操作简单、快捷。
既适合手工操作，又适合自动化分析，重复性好、线性关系好，双缩脲试剂可以长期保存（若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制）。
缺点：灵敏度差，测定范围窄，样品需要量大，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。
干扰测定的物质包括有：在性质上是氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性呈色反应，铜离子也容易被还原，有时出现红色沉淀。
5.临床意义：
用双缩脲法测定蛋白质含量，假如血浆蛋白质浓度增高，临床上主要见于因各种原因引起的血浆浓缩；假如血浆蛋白浓度降低，临床上主要见严重肝病、肾病、营养不良、血液稀释等，对有关疾病的早期诊断预后观察具有一定的参考价值。
参考文献
[1] 叶应妩, 王毓三. 全国临床检验操作规程[M] . 第2 版. 南京: 东南大学出
版社,1997: 155～156.
[2] 赵丽丽,等. 不受高脂血症影响的双缩脲试剂[ J].临床检验杂志, 1993;11:4.
[3] 刘新光，临床检验生物化学实验指导[M].第一版.高等教育出版社，2006；111-113.。