细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒
细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒
简介：
细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒(Hoechst Staining Kit)是一种采用经典的Hoechst33258进行细胞凋亡检测的快速简便的试剂盒。
当细胞发生凋亡时，染色质会固缩，Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。
Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。
该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
(一)贴壁细胞
1、取洁净盖玻片在70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用无菌的PBS 或生理盐水洗涤3次，再用细胞培养液洗涤1次。
2、加入干预条件使细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入Hoechst 固定液0.5ml 。
3、去除固定液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动。
4、加入Hoechst 33258染色液0.5ml 孵育。
也宜用摇床，或手动晃动数次。
5、弃染色液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动。
6、滴一滴抗荧封片剂于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片剂，尽量避免气泡。
7、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。
激发波长350nm 左右，发射波长460nm 左右。
(二)悬浮细胞
1、离心收集细胞样品于1.5ml 离心管内并弃液，加入Hoechst 固定液0.5ml ，缓缓悬起细胞固定。
2、低速离心去除固定液，用PBS 或生理盐水洗。
洗涤时手动晃动数次。
3、低速离心离心后吸去大部分液体保留约50μl 液体，再缓缓悬起细胞，滴加至载玻片上， 编号 名称 DA0032 100T Storage 试剂(A): Hoechst 固定液 50ml RT 试剂(B): Hoechst 染色液 50ml -20℃ 避光 试剂(C): 荧光封片剂 5ml 4℃ 避光 使用说明书 1份
尽量使细胞分布均匀。
4、稍晾干，使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。
5、滴加Hoechst 33258染色液0.5ml孵育。
用吸水纸从边缘吸去液体，微晾干。
6、弃染色液，用PBS或生理盐水洗2次，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动。
7、滴一滴抗荧光封片剂于载玻片上，盖上一洁净的盖玻片，尽量避免气泡。
8、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。
激发波长350nm左右，发射波长460nm左右。
(三)组织切片
1、常规包埋切片。
2、用PBS或生理盐水洗2次。
洗涤时手动晃动数次。
3、均匀滴上Hoechst 33258染色液0.5ml孵育。
4、弃染色液，用PBS或生理盐水洗2次，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动。
7、将切片置于载玻片上，滴一滴抗荧光封片剂，盖上一洁净的盖玻片，尽量避免气泡。
8、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。
激发波长350nm左右，发射波长460nm左右。
注意事项：
1、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。
使用抗荧封片剂时也应避光操作。
2、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当
提高离心力或延长离心时间。
3、Hoechst 33258染色液对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Hoechst33342显微观察标记DNA
Hoechst33342显微观察标记DNA产品介绍：Hoechst 33342是⼀种可透过细胞膜并对DNA染⾊的细胞核染⾊试剂，它在嵌⼊双链DNA后释放强烈的蓝⾊荧光。
Hoechst 33342常⽤于细胞凋亡检测，染⾊后⽤荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
Hoechst染料是⼀类在显微观察中标记DNA的荧光染料。
因为这类荧光染料能标记DNA，所以它们也经常⽤于细胞核和线粒体的显像观察。
这类染料中两个相关的染料Hoechst 33258和Hoechst 33342经常使⽤。
这两种染料都在紫外光下350nm处被激发，都在461nm处最⼤发射光附近发射蓝/青⾊荧光。
Hoechst染料可以⽤于活细胞或者固定化细胞，并且经常⽤来代替其它核酸染料如DAPI。
这两种染料关键的不同点在于，与DAPI相⽐，Hoechst 33342加有⼄基，这使它具有更强的亲脂性，因此能更好的透过完整的细胞膜。
在⼀些实验中，Hoechst 33258的渗透性明显⽐Hoechst 33342要弱些。
这些染料也可以⽤来检测样品中的DNA含量，通过绘制发射光强度与DNA含量的标准曲线。
技术资料：1.Ex(nm)：3502.Em(nm)：4613.分⼦量：561.934.溶剂：DMSO5.分⼦式：C27H28N6O · 3HCl6.外观：黄绿⾊粉末染⾊程序：(1) ⽤PBS或合适的缓冲液制备10～50µM Hoechst33342染料。
(2) 将1/10细胞培养基体积的Hoechst染料溶液加⼊细胞培养物中(可以⽤1/10浓度的Hoechst染料缓冲液代替培养基)。
(3) 在37℃培养细胞10～20分钟。
(4) ⽤PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
(5) ⽤带有350nm激发波长，460nm发射波长的滤光⽚的荧光显微镜观察细胞。
储存条件：-20℃⼲燥避光保存，有效期⼀年。
注意事项：(1) Hoechst 33342对⼈体有⼀定刺激性，请注意适当防护。
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)说明书
TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(显色法)产品编号 产品名称包装 C1098TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(显色法)50次产品简介：碧云天生产的显色法TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。
对于待检测的细胞或组织样品，经过生物素标记和后续的DAB 显色等步骤，即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA 内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA 。
细胞凋亡时抽提DNA 进行电泳检测，可以发现180-200bp 的DNA ladder 。
基因组DNA 断裂时，暴露的3'-OH 可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合，最后在HRP 的催化下通过DAB 显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点。
(1) 高灵敏度：背景染色极低，阳性染色强，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA 断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2) 特异性好：TUNEL 检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3) 快速：仅需约2-3个小时即可完成。
(4) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
(5) 实测效果好：参考图1。
图1. 本试剂盒的检测效果图。
A. HeLa 细胞未处理或用DNase I 室温孵育10分钟后的检测效果图。
诺唯赞凋亡检测试剂盒说明书
诺唯赞凋亡检测试剂盒说明书
一、试剂盒组成
1.死亡标记染料溶液：包含荧光染料，用于检测凋亡细胞。
2.细胞固定溶液：用于固定细胞，使其能够固定在载片上。
3.染色溶液：用于染色凋亡细胞。
二、试剂盒原理
该试剂盒通过染色其中一种特殊染料标记凋亡细胞，然后观察染色结果来检测凋亡细胞的存在与否。
凋亡细胞会通过特殊的途径引发染色发生改变，从而与正常细胞区分开来。
三、操作流程
1.收集待检测的细胞样品。
2.将细胞样品加入离心管中，并用生理盐水洗涤。
3.将洗涤后的细胞用细胞固定溶液固定在载片上。
4.加入足够的死亡标记染料溶液，使标记染料完全覆盖住细胞。
5.在黑暗条件下，孵育细胞片10-15分钟。
6.按照说明书的要求，用生理盐水洗涤细胞片。
7.加入足够的染色溶液，使细胞完全浸泡在溶液中。
8.孵育细胞片15-30分钟，然后用水冲洗。
9.将载片装入显微镜，观察细胞的染色情况。
四、结果解读
1.正常活细胞：无染色或轻微染色。
2.凋亡细胞：明显染色，通常呈现为亮蓝色。
3.有核碎片的细胞：染色核碎片呈现为绿色。
五、注意事项
1.所有操作必须在无菌环境下进行，以避免污染。
2.使用前请检查试剂是否过期，过期试剂禁止使用。
3.操作过程中应注意个人防护措施，如佩戴手套、口罩等。
4.染料溶液接触皮肤或眼睛应及时用大量水冲洗。
5.操作过程中尽量避免暴露在光线中，因为光线可能影响染色结果。
凋亡小体hoeschst染色试剂盒操作方法及步骤说明书
凋亡小体/hoeschst染色试剂盒目录号：DN18目录编号包装单位DN1801 100次❖试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存100次固定液4℃50 ml100×染色浓缩液4℃避光0.5 ml染色稀释缓冲液4℃或者室温50 ml本产品收到后按照上面指示温度存放各成份，6个月内有效。
❖产品介绍：凋亡中晚期细胞形态学变化为染色质在局部区域凝集，固缩，继而核碎裂出现凋亡小体。
在Hoeschst染色下，细胞核或者凋亡小体的DNA会呈现致密浓染或者碎块状致密浓染。
本试剂盒Hoechst染料紫外光激发波长350-370 nm；发射波长465 nm，在荧光显微镜下DNA发出蓝色荧光。
❖注意事项：1.需可以观察蓝色荧光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2.需PBS或0.9%NaCl溶液，盖玻片与载玻片。
3.荧光容易淬灭，应该尽量避光操作和保存。
❖操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）1.贴壁细胞1)取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养级PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。
将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。
2)刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0.5ml固定液，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。
本试剂盒使用固定液主要为4％多聚甲醛，如果不适合您的细胞或者效果不佳，很多种固定配方如细胞固定液『甲醇：冰乙酸（3∶1 ）现配』，都可以使用，可以根据自己细胞特点选用适合的固定方法。
3)去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。
4)取5μl 100×染色浓缩液与0.5ml染色稀释缓冲液混合后加入染色5-10分钟，也宜用摇床，或手动晃动数次。
5)用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。
6)滴一滴封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，尽量避免气泡。
Hoechst 染色
本人收集的激光共聚焦常见荧光染料染色方法zuohy(2008-09-19 17:33:43)一、Hoechst 33258染色1、试剂盒组成固定液 50 mlHoechst 33258染色液 50 ml抗荧光淬灭封片液 5 ml说明书 1 份保存条件：4℃保存，Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。
本试剂盒自订购之日起六个月内有效。
2、注意事项：需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
需PBS或0.9%NaCl溶液。
需盖玻片与载玻片。
荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜避光保存。
在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光。
3、使用说明：1）贴壁细胞A. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养级PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。
将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。
B. 刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0.5ml固定液，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。
C. 去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。
D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分钟。
也宜用摇床，或手动晃动数次。
E. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。
F. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，尽量避免气泡。
使细胞接触封片液，切勿弄反。
G. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。
激发波长在350nm左右，发射波长在460nm左右，详细图谱请参考下图。
2）悬浮细胞A. 离心收集细胞样品于1.5ml离心管内，加入0.5ml固定液，缓缓悬起细胞，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。
B. 离心去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。
洗涤期间手动晃动。
C. 最后一次离心后吸去大部分液体保留约50ml液体，再缓缓悬起细胞，滴加至载玻片上，尽量使细胞分布均匀。
hoechst PI染色
2008/11/09 09:55PI、Hoechst33342均可与细胞核DNA（或RNA）结合。
但是PI不能通过正常的细胞膜，Hoechst则为膜通透性的荧光染料，故细胞在处于坏死或晚期调亡时细胞膜被破坏，这时可为PI着红色。
正常细胞和中早期调亡细胞均可被Hoechst着色，但是正常细胞核的Hoechst着色的形态呈圆形，淡兰色，内有较深的兰色颗粒；而调亡细胞的核由于浓集而呈亮兰色，或核呈分叶，碎片状，边集。
故PI着色为坏死细胞；亮兰色，或核呈分叶状，边集的Hoechst着色的为调亡细胞。
电子天平准确称取1mg 碘化丙啶（propidium iodide，PI）溶于10ml PBS（PH 7.2），成100ug/ml 的储备液，用前等量混合（注意避光）protocol:1、收集细胞，数量需1－2×10E6个（悬浮细胞直接吹起即可，对于贴壁细胞用胰酶消化时，最好用DMEM+胰酶消化,且消化过程中不要去移动瓶子，防止消化所形成的细胞团影响后面的染色及分析），离心，11,000rpm，5min。
2、用1ml 冰冷的PBS重悬后，离心：11,000rpm，5min。
3、用200μl冰冷的PBS重悬后，用加样器混匀后，缓慢的加入含有4ml冰冷的70％乙醇的10ml离心管中，边加边摇匀。
－20℃，过夜。
（或者置4℃，1h后进行下一步）4、1,500rpm，10min，小心弃上清后，用1ml冰冷的PBS重悬，1,500rpm，5min。
小心弃上清。
5、加入含有40μg/ml 的PI，100μg/ml的RNase的PBS溶液500μl，37℃，培养30min －1h。
混匀。
溶液配方：PBS 910μlPI 80μlRNase 10μl共1ml6、过滤，供流式检测。
Hoechst 33342/PI双染色法紫外光激发, Hoechst-PI双染在荧光显微镜下可见4 种细胞形态:活细胞(VN) ,染成蓝色,核呈正常结构;早期凋亡细胞(V A) ,染成蓝色,核呈固缩状或圆珠状;晚期凋亡细胞(NV A) ,也被染成红色,但可见明显的染色质凝集。
hoechst PI染色
2008/11/09 09:55PI、Hoechst33342均可与细胞核DNA（或RNA）结合。
但是PI不能通过正常的细胞膜，Hoechst则为膜通透性的荧光染料，故细胞在处于坏死或晚期调亡时细胞膜被破坏，这时可为PI着红色。
正常细胞和中早期调亡细胞均可被Hoechst着色，但是正常细胞核的Hoechst着色的形态呈圆形，淡兰色，内有较深的兰色颗粒；而调亡细胞的核由于浓集而呈亮兰色，或核呈分叶，碎片状，边集。
故PI着色为坏死细胞；亮兰色，或核呈分叶状，边集的Hoechst着色的为调亡细胞。
电子天平准确称取1mg 碘化丙啶（propidium iodide，PI）溶于10ml PBS（PH 7.2），成100ug/ml 的储备液，用前等量混合（注意避光）protocol:1、收集细胞，数量需1－2×10E6个（悬浮细胞直接吹起即可，对于贴壁细胞用胰酶消化时，最好用DMEM+胰酶消化,且消化过程中不要去移动瓶子，防止消化所形成的细胞团影响后面的染色及分析），离心，11,000rpm，5min。
2、用1ml 冰冷的PBS重悬后，离心：11,000rpm，5min。
3、用200μl冰冷的PBS重悬后，用加样器混匀后，缓慢的加入含有4ml冰冷的70％乙醇的10ml离心管中，边加边摇匀。
－20℃，过夜。
（或者置4℃，1h后进行下一步）4、1,500rpm，10min，小心弃上清后，用1ml冰冷的PBS重悬，1,500rpm，5min。
小心弃上清。
5、加入含有40μg/ml 的PI，100μg/ml的RNase的PBS溶液500μl，37℃，培养30min －1h。
混匀。
溶液配方：PBS 910μlPI 80μlRNase 10μl共1ml6、过滤，供流式检测。
Hoechst 33342/PI双染色法紫外光激发, Hoechst-PI双染在荧光显微镜下可见4 种细胞形态:活细胞(VN) ,染成蓝色,核呈正常结构;早期凋亡细胞(V A) ,染成蓝色,核呈固缩状或圆珠状;晚期凋亡细胞(NV A) ,也被染成红色,但可见明显的染色质凝集。
HO33342-PI双染
Hoechst33342/PI双染细胞凋亡检测试剂盒产品组成：产品编号BB-4131规格100 -200THoechst33342染色液A 1000ulPI染色液B 1000ul试剂C 10ml产品简介：贝博Hoechst33342/PI双染细胞凋亡检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。
Hoechst33342染色液A可以透过正常细胞膜，而细胞凋亡后，细胞膜对Hoechst33342染色液A的通透性增加，PI染色液B不能透过细胞膜，对正常细胞和凋亡细胞不能染色，而对坏死细胞可以染色。
用两种染色液对细胞进行双染后，使用流式细胞仪或荧光显微镜即可对细胞状态进行检测。
在双变量流式细胞仪的散点图上，这三群细胞表现分别为：正常细胞为低蓝色/低红色（A+/B+），凋亡细胞为高蓝色/低红色（A++/B+），坏死细胞为低蓝色/高红色（A+/B++）。
使用方法：1、染色缓冲液的配制：根据样品数按下列比例配制染色缓冲液。
取100μL试剂C加900μL无菌去离子水稀释，混匀即成染色缓冲液。
2、收集样本细胞，细胞数量在10X105个以内。
3、用PBS洗涤细胞两次。
4、用500μL-1ml 染色缓冲液将细胞重悬。
5、加入5-10ul Hoechst33342染色液A。
6、加入5-10ul PI染色液B。
7、轻轻混匀后4℃避光孵育10-20分钟。
8、用PBS洗涤细胞。
9、用流式细胞仪或荧光显微镜检测结果。
HO33342用紫外光激发，PI用蓝光激发。
Hoechst33342-DNA复合物的最大激发波长为350nm，最大发射波长为460nm，PI-DNA复合物的最大激发和最大发射波长分别为488nm和615nm。
结果分析 ：正常细胞为低蓝色/低红色（A+/B+），凋亡细胞为高蓝色/低红色（A++/B+），坏死细胞为低蓝色/高红色（A+/B++）。
形态学：正常细胞核形态呈圆形，淡蓝色，内有较深的蓝色颗粒；凋亡细胞的核呈亮蓝色，或核呈分叶状，碎片状。
凋亡小体hoeschst染色试剂盒操作方法及步骤说明书
凋亡小体/hoeschst染色试剂盒目录号：DN18目录编号包装单位DN1801 100次❖试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存100次固定液4℃50 ml100×染色浓缩液4℃避光0.5 ml染色稀释缓冲液4℃或者室温50 ml本产品收到后按照上面指示温度存放各成份，6个月内有效。
❖产品介绍：凋亡中晚期细胞形态学变化为染色质在局部区域凝集，固缩，继而核碎裂出现凋亡小体。
在Hoeschst染色下，细胞核或者凋亡小体的DNA会呈现致密浓染或者碎块状致密浓染。
本试剂盒Hoechst染料紫外光激发波长350-370 nm；发射波长465 nm，在荧光显微镜下DNA发出蓝色荧光。
❖注意事项：1.需可以观察蓝色荧光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2.需PBS或0.9%NaCl溶液，盖玻片与载玻片。
3.荧光容易淬灭，应该尽量避光操作和保存。
❖操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）1.贴壁细胞1)取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养级PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。
将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。
2)刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0.5ml固定液，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。
本试剂盒使用固定液主要为4％多聚甲醛，如果不适合您的细胞或者效果不佳，很多种固定配方如细胞固定液『甲醇：冰乙酸（3∶1 ）现配』，都可以使用，可以根据自己细胞特点选用适合的固定方法。
3)去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。
4)取5μl 100×染色浓缩液与0.5ml染色稀释缓冲液混合后加入染色5-10分钟，也宜用摇床，或手动晃动数次。
5)用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。
6)滴一滴封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，尽量避免气泡。
Hoechst_33258荧光染色观察药物诱导细胞凋亡
SOP13广东药学院药科学院新药筛选与药效评价中心Standard Operation Protocol（SOP）●技术方法名称:Hoechst33258荧光染色观察药物诱导细胞凋亡●基本原理:Hoechst 33258，也称bisBenzimide H33258或HOE33258。
分子式为C25H24N6O·3HCl，分子量为533.88，CAS Number 23491-45-4。
Hoechst 33258溶于水，溶解度可达10mg/ml。
Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。
用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。
Hoechst 33258 为特异性DNA 染料，与 A-T 键结合，这种染料对死细胞或经 70% 冷乙醇固定的细胞可立即染色。
而活细胞的着色是渐进性的，在 10min 内可达饱和。
在荧光显微镜下，活细胞核呈弥散均匀荧光，出现细胞凋亡时，细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒块状荧光。
Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
●试剂与器材1. Hoechst 33258 贮存液：称取 Hoechst 33258 试剂1mg ，用 20ml 蒸馏水溶解后，滤过，4℃ 避光保存。
用时蒸馏水 10 倍稀释成染色液。
2. 封片液（ pH5.5 ）： 20mmol/L 柠檬酸； 50mmol/L 磷酸氢二钠； 50% 甘油，3. 细胞固定液 4%多聚甲醛，现配。
操作步骤1. 将贴壁细胞以5×105 /ml或其他适宜的密度接种于用35mm培养皿或其他培养器具中，35mm培养皿每孔1.5- 2ml，37℃ 、 5%CO 2孵箱中培养至细胞贴壁，加入实验药物，继续培养过夜。