胃蛋白酶测定
胃蛋白酶效价测定实验方案
胃蛋白酶检验用试剂：盐酸、酪氨酸、胃蛋白酶、三氯醋酸、牛血红蛋白酪氨酸烘干至恒重（105C）、试管（16支/组，至少12支/组，最少8支试管）试液的配制：1mol/L盐酸溶液：90ml盐酸，加水稀释并定容至1000ml。
（配500ml）盐酸溶液：取1mol/L盐酸溶液65ml，加水至1000ml。
（每组各配1000ml）5%三氯醋酸溶液：配600ml血红蛋白试液：配600ml （每组至少20ml）血红蛋白试验取牛血红蛋白1g,加盐酸溶液（取1mol/L盐酸溶液65ml,加水至1000ml）使溶解成100ml，即得。
本液置冰箱中保存，2日内使用。
本品系自猪、羊或牛的胃黏膜中提取的胃蛋白酶。
每1g中含蛋白酶活力不得少于3800单位。
【效价测定】对照品溶液的制备精密称取经105 C干燥至恒重的酪氨酸适量，加盐酸溶液〔取1mol/L盐酸溶液65ml，加水至1000ml〕制成每1ml中含0.5mg的溶液。
供试品溶液的制备取本品适量，精密称定，用上述盐酸溶液制成每1ml中约含0.2〜0.4单位的溶液。
测定法取试管6支，其中3支各精密加入对照品溶液1ml ,另3支各精密加入供试品溶液1ml，置37C10.5C水浴中，保温5分钟，精密加入预热至37C ±）.5C的血红蛋白试液5ml，摇匀，并准确计时，在37C ±）5C水浴中反应10分钟。
立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml ,摇匀，滤过，取续滤液备用。
另取试管2支，各精密加入血红蛋白试液5ml , 置37C ±）.5C水浴中保湿10分钟，再精密加入5%三氯醋酸溶液5ml ,其中1支加供试品溶液1ml，另1支加上述盐酸溶液1ml，摇匀，滤过，取续滤液，分别作为供试品和对照品的空白对照，照分光光度法（附录W A）在275nm的波长处测定吸收度，算出平均值A S 和A,按下式计算。
A XWs Xn每1g含蛋白酶活力（单位）=A s W X10 X81.19 式中AS为对照品的平均吸收度；A为供试品的平均吸收度；Ws为对照品溶液每1ml中含酪氨酸的量，ygW为供试品取样量，g;n为供试品稀释倍数。
胃蛋白酶原1 Microsoft Word 文档
胃蛋白酶原Ⅰ测定（PG1）方法：1.实验前将试剂盒及样品平衡至室温（20℃-25℃），时间不少于30分钟。
2.加样：空白液、校准品、质控品及待测血清标本均100μl/孔加样(空白液、校准品、质控品建议进行复孔加样)，37℃孵育60分钟（加盖封板膜）。
3.洗板5次，洗液板后于吸水纸上扣干残余液体。
4.加酶：酶结合物加入量100μl/孔，37℃孵育60分钟（加盖封板膜）。
5.洗板5次，洗液板后于吸水纸上扣干残余液体。
6.显色：底物液加入量为100μl/孔，37℃避光显色15分钟。
7.450nm检测读数，确保终止后30分钟内进行测量读数。
注：1.操作前应仔细阅读使用说明书，严格按照说明书操作程序进行。
2.同一批试剂相同批号底物液、终止液和洗液可以混用，其它组分不能混用。
3.微孔板开封后，剩余要2-8℃密封干燥保存，并建议在半个月之内用完。
4.各试剂使用前应平衡到室温并摇匀后使用，严格控制反应温度和时间。
5.加样操作应快速、准确、手法一致，慢吸快打，缩短加样时间；。
6.为防止样品和试剂蒸发及避免污染，温育时将反应板覆盖一层封板膜。
7.冷冻保存的血清样本使用前需要在室温中完全融化并充分混合后再使用，并且要尽量避免血清反复冻融。
8.试剂和待测样本加样前要混匀后再加样，加样时避免产生气泡，吸头不要接触孔壁，并注意更换吸头，不用严重溶血和大量脂血样品；每块酶标板加样起始至结束时间严格控制在10分钟以内。
9.严禁使用自来水冲洗微孔板或用自来水稀释洗液。
10.数据分析（单波长450nm检测）。
11.试剂本底（空白液检测值）：OD450nm≤0.100。
12.建议PGI使用双对数拟合方法【ln（Y：浓度）-ln（X：1000×OD450）】。
线性：在规定的线性范围内，曲线相关系数r2应不低于0.9900。
13.体检者采血前十小时保持空腹。
14.采血前三天不要暴饮暴食、饮酒、不要吃腥辣等刺激性食物。
15.接受药物或其它方式治疗者，建议在疗程结束一周以后再检测。
胃蛋白酶原检测
胃蛋白酶原分泌较少或胃粘膜细胞萎缩，建议复查PGII,计算PGI/PGII比值后确定是否进一步检查。
胃粘膜细胞分泌胃蛋白酶原减少或有发展为萎缩性胃炎、肠化生、异性增生、胃癌等的高风险倾向，若同时PGI/PGII<3，以萎缩性胃炎居多。
PGI<30
胃粘膜细胞萎缩，建议胃镜检查。
有萎缩性胃炎、肠化生、异性增生、胃癌等的高风险因素，也有胃粘膜细胞分泌胃蛋白酶原较少的可能，以萎缩性胃炎居多。
PGI<70，需参考PGI/II比值：若PGI<30，更应引起重视
PGI/II<3
胃粘膜细胞萎缩，建议胃镜检查。
有萎缩性胃炎、肠硬化、异性增生、胃癌等的高风险因素，以萎缩性胃炎居多。
PGI/II>3
胃蛋白酶原分泌较少,建议定期复查。
胃粘膜细胞分泌胃蛋白酶原较少或有萎缩性胃炎、肠化生等的高风险因素，以胃酸分泌少居多。
取报告单时间：正常上班时间,检验科接标本后1小时发出检验报告单。
附：“胃蛋白酶原”项目的临床意义
PG主要用于胃癌高风险性筛查，以PGI及PGI/PGII 降低作为阳性度界限判断标准。通常情况下PG结果及比值增高为胃粘膜受攻击时的反应。
1．参考值：PGI 70－240ng/ml； PGII 0-20ng/ml；PGI/PGII>3。
误区二：PG阳性就是“胃癌”：阳性只代表胃癌风险。PG适用于体检筛查早期胃癌，代替X光及超声波筛查胃癌，主要意义不在诊断，而在于早发现早预防。正常体检人群有15％PG阳性，PG阳性时具体患胃癌风险度，经追踪仅有1－2％患胃癌。
误区三：只看重PGI、PGII的参考范围值，不重视比值。因胃粘膜分泌PGI受炎症攻击分泌变动幅度大（70－800ng/ml以上），PGII分泌相对恒定。比值>3时，PGI增高程度确定胃病种类只能结合临床分析。比值<3时，建议内镜检查或病理取材确证，并且需近五年追踪，因PG阳性者在当年无胃癌者，追踪5年后的胃癌发病率有2％。
胃蛋白酶的检测方法
胃蛋白酶的检测方法哎呀，胃蛋白酶检测方法，这听起来就像是那种在实验室里，穿着白大褂，戴着护目镜，手里拿着试管晃来晃去的科学家们才会做的事情。
但别担心，我尽量用大白话给你讲讲。
首先，胃蛋白酶，这玩意儿，就是胃里的一种酶，它的作用就是帮助我们消化蛋白质。
想象一下，你吃了一块牛排，胃蛋白酶就开始工作了，它把牛排的蛋白质分解成小块，这样你的身体就能更容易吸收。
那么，怎么检测胃蛋白酶呢？这就需要用到一种叫做“酶联免疫吸附测定”（ELISA）的方法。
听起来很复杂，其实就像是给胃蛋白酶做个“相亲”。
具体来说，就是把胃蛋白酶的“相亲对象”——一种特殊的抗体，放在一个盘子里，然后让胃蛋白酶和抗体“相亲”。
如果胃蛋白酶和抗体“看对眼”了，它们就会结合在一起。
然后，我们再用一种特殊的试剂，让它们“亮起来”，这样我们就能知道胃蛋白酶是不是在那儿了。
记得有一次，我在实验室里做这个实验，那是一个阳光明媚的下午，实验室里充满了各种试剂的味道。
我按照步骤，小心翼翼地把胃蛋白酶样本滴到盘子里，然后等着它们“相亲”。
等待的时候，我看着窗外的蓝天，想象着胃蛋白酶和抗体在盘子里跳着华尔兹，然后突然“啪”的一声，它们就结合在一起了。
过了一会儿，我往盘子里加了那种能让它们“亮起来”的试剂，然后，哇塞，盘子里真的开始发光了！那一刻，我感觉自己就像是在看一场小小的烟花表演，胃蛋白酶和抗体的结合就像是烟花绽放的瞬间。
最后，我用一个叫做“酶标仪”的仪器来测量发光的强度，这样就能知道胃蛋白酶的量了。
整个过程就像是一场精心编排的舞蹈，每一个步骤都需要精确和耐心。
所以，胃蛋白酶的检测方法，虽然听起来很科学，但其实也挺有趣的。
它就像是一场小小的科学实验，让我们能够更了解我们自己的身体。
下次你再吃牛排的时候，也许可以想想，胃蛋白酶正在你的胃里忙碌着呢。
血清胃蛋白酶原的检测方法
血清胃蛋白酶原的检测方法血清胃蛋白酶原（PG I）的检测方法通常包括以下几种：
1. 酶联免疫吸附法（ELISA），这是一种常用的检测方法，通过将样本中的胃蛋白酶原与特定的抗体结合，然后使用酶标记的二抗来检测结合情况，从而定量测定血清中的胃蛋白酶原水平。
2. 放射免疫测定法（RIA），这种方法利用放射性同位素标记的抗体与胃蛋白酶原结合，然后通过放射性测定仪器来测定结合情况，从而定量测定血清中的胃蛋白酶原水平。
3. 免疫荧光法（FIA），该方法利用荧光染料标记的抗体与胃蛋白酶原结合，然后使用荧光显微镜或荧光流式细胞仪来观察和测定结合情况，从而定量测定血清中的胃蛋白酶原水平。
4. 免疫层析法，这种方法利用免疫层析柱将血清中的胃蛋白酶原与特异性抗体结合，然后通过柱后检测来定量测定胃蛋白酶原的水平。
5. 质谱法，质谱法是一种高灵敏度的检测方法，通过质谱仪器
对血清中的胃蛋白酶原进行分析，可以准确地测定其水平。
这些方法各有优缺点，选择适合的检测方法需要根据实际情况和实验室条件进行综合考虑。
在进行血清胃蛋白酶原的检测时，需要严格按照操作规程进行，确保结果的准确性和可靠性。
胃蛋白酶原1检测
胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ（PGⅠ/PGⅡ）定量检测试剂盒（化学发光法）简介：胃蛋白酶原（pepsinogen，PG）是胃分泌的一种消化酶前体，是胃液中胃蛋白酶的无活性前体，为一由375个氨基酸组成的蛋白多肽链，平均相对分子质量为42,000，人胃粘膜中有7组胃蛋白同工酶原。
PG 在核糖体上合成，由高尔基体分泌出细胞，被盐酸激活后变成胃蛋白酶。
根据生化性质、免疫原性、细胞来源及组织内分布可分成PGⅠ、PGⅡ两个亚群，1～5组分免疫原性近似，称为PGⅠ(PGA)，主要由胃腺的主细胞的粘液颈细胞分泌。
利用化学发光分析法得出结果。
【包装规格】48人份/盒、96人份/盒【预期用途】用于血清中胃蛋白酶原Ⅰ的定量检测。
【样本要求】1.采用正确医用技术收集血清样本。
2.样本中的沉淀物可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。
3.严重溶血或脂血的样本不能用于测定。
4.样本在24h内测定，则应存放于2℃～8℃冰箱中，如果长期使用，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。
使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。
【检测步骤】1.取出一定量的包被孔，每孔分别加入20μl校准品或血清样品。
2.每孔分别加入酶结合物50μl。
3.在微型振荡器上振荡30秒使孔内液体混合均匀，置37℃温育60分钟。
4.洗板5次（推荐使用洗板机），最后在吸水纸上拍干。
5.每孔分别加入发光底物A和B各50μl，室温（18℃～25℃）避光反应5分钟。
6.化学发光检测仪检测发光强度。
【结果计算】选择适当的曲线拟合方式，本试剂盒推荐使用线性回归拟和方程建立标准曲线，但也可根据不同情况采用其他拟和方式。
以系列校准品浓度的对数值为横坐标（X轴），以系列校准品发光强度值的对数值为纵坐标（Y轴）建立标准曲线（log-log），进行计算。
【胃蛋白酶原试剂盒检测优势】优点：1.血清检测无创伤、更安全。
2.费用低廉，适用于普查体检。
3.操作简单，时间短，不会造成受检人员的长时间滞留。
胃泌素及胃蛋白酶原检测流程及注意事项
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胃蛋白酶原检测
胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ(PGⅠ/PGⅡ)·检出率高·操作简便·无痛苦、易耐受·检测费用低·方便快捷·胃癌筛查判定·胃癌切除术后复发判断·消化性溃疡复发判定·幽门螺杆菌(HP)肃除医治效果评价胃癌—病死率最高的恶性肿瘤之一·胃癌是世界第二大癌症死因·中国是胃癌的多发区，发病率和死亡率均为世界平均水平的2倍多·中国每一年新发胃癌患者约40万人，死亡人数近30万人·中国半数初期胃癌患者无任何症状，检出率低于5%·中国年轻人胃癌的发病率已由上世纪70年代的%上升至%·消化系统的肿瘤患者1/2死于胃癌·每一年新发胃癌患者中，约1/5年龄不足40岁·初期胃癌手术后五年生存率可达90%-95%胃癌的发生胃癌的发生并非是由正常胃粘膜上皮细胞骤然变成癌细胞，而是一个渐进的进程。
冰冻三尺非一日之寒，胃癌的发生也不是一朝一夕的事情。
在发展为胃癌之前，常经历一个相当长的癌前转变进程。
如慢性萎缩性胃炎、胃溃疡、胃息肉、手术后残胃、恶性贫血及庞大胃粘膜肥厚症等，就属于胃癌的“癌前疾病”，他们将使发生胃癌的危险性明显增加。
其中最多见的当数慢性萎缩性胃炎。
有资料显示，50岁以上人群慢性胃炎的发病率可达50%胃炎、胃癌的初期症状发现期初期信号主要有：上腹部疼痛占%；食欲消退占%；胃部闷涨占%；呕酸占%；上腹不适占36%；消瘦占%。
有一部份患者可能走上“慢性浅表性胃炎-慢性萎缩性胃炎-肠上皮化生-不典型增生-胃癌”这条路。
胃癌高危人群·感染过幽门螺杆菌·男性，尤其是超过正常体重20-25千克的男性·年龄在50岁-80岁之间·常吃加盐腌制蔬菜或烟熏肉和鱼等食物·抽烟·接受过胃部手术、胃息肉·家族肿瘤疾病、家族胃癌史·恶性贫血·A型血·长期工作在含有大量烟尘、石棉和镍的环境检出可根治的初期胃癌测定PG，特别是PGⅠ/PGⅡ比值和PGⅠ水平，对于诊断慢性萎缩性胃炎和肠化生有很高的价值，血清PG的转变可被以为是胃癌高危的亚临床指标(Farinati 1991)，一项回顾调查(Nomura 1980)确切地显示了胃癌与PGⅠ的联系，在被确诊的48例胃癌患者中，检测他们几年前为其他检查留下的血样品，发现有1/3，在那时还“健康”的情况下血清PGⅠ水平已经降低，对另一组胃癌患者检查发现有40%属于血清PGⅠ低水平。
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胃蛋白酶测定
文章目录*一、胃蛋白酶测定的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、胃蛋白酶测定的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、胃蛋白酶测定的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、胃蛋白酶测定的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、胃蛋白酶测定的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应
胃蛋白酶测定的基本信息
1、定义胃蛋白酶的前身是胃蛋白酶原,由胃底腺主细胞分泌,在胃酸中转化为胃蛋白酶。
后者将蛋白质在胃内进行初步消化。
胃蛋白酶测定胃液化学检查项目之一。
人类及哺乳动物胃液中的蛋白酶与凝乳酶为同一种酶,因此可利用胃蛋白酶使乳液发生凝固的速度,间接推算出胃蛋白酶的含量,此法简便、易操作。
2、专科分类消化
3、检查分类生化检查
4、适用性别男女均适用
5、是否空腹空腹
胃蛋白酶测定的正常值和临床意义
1、正常值40～60U/ml。
2、临床意义异常结果:胃溃疡时PP多为正常;十二指肠溃疡时明显升高;慢性十二指肠炎、胃扩张、慢性胃炎时活性减弱;
恶性贫血时极低或无活性。
PGⅠ、PGⅡ含量升高提示消化性溃疡发病的危险性增加,PGⅠ含量增高对判断溃疡活动有意义。
PGⅠ/PGⅡ比值在胃癌和萎缩性胃炎时均明显降低,提示此项检查可
作为萎缩性胃炎的一种追查指标和早期发现胃癌的筛选方法。
胃蛋白酶测定的检查过程及注意事项
1、检查过程取0.5mol/L醋酸缓冲液95ml,加入0.2mol/L
氯化钙溶液5ml,再加入脱脂乳20g液体,即为基质液。
取基质液5ml,用0.05mol/L枸橼酸盐缓冲液稀释至6倍,加入胃液0.2ml混合。
立即置于35.5℃水浴中,立即用力摇动使其混合,并同时开动秒表,然后将试管反复倾斜、直立,同时注意铅管壁流下的乳液,当出现小片状干酪样物时,停止秒表,观察凝乳开始附着于管壁
的时间,记录时间。
胃蛋白酶单位的计算:在上速条件下,使5毫升牛乳一醋酸
混合液于60秒钟发生凝固的蛋白酶为一个单位。
计算1毫升胃液内胃蛋白酶的单位数。
2、注意事项检查前禁忌:食用大量食物,影响检查过程。
检查时要求:血液中胃蛋白酶同工酶原水平能更准确地反映胃黏膜的情况。
患者服从医生指示,做好相关检查。
胃蛋白酶测定的相关疾病和症状
1、相关疾病胃炎,急性化脓性胃炎,胃病
2、相关症状胃寒疼痛,胃部隐痛,食欲缺乏
胃蛋白酶测定的不适宜人群和不良反应
1、不适宜人群胃穿孔患者禁止抽取胃液。
2、不良反应一般无并发症及危害。