(完整版)PDA培养基的配方及配制方法

合集下载

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法PDA(Potato Dextrose Agar)是一种富含淀粉和葡萄糖的琼脂培养基,广泛用于真菌和霉菌的培养和鉴定。

下面是PDA培养基的精确配制方法:原料准备:-250克马铃薯-20克葡萄糖-15克琼脂工具准备:-秤-剪刀-玻璃容器或烧杯-培养瓶或琼脂培养皿-灭菌器或压力锅-pH计或pH试纸-搅拌棒或吹球步骤:1.清洁工具:将玻璃容器、培养瓶、搅拌棒等工具用肥皂水洗净,并用自来水冲洗干净。

2.马铃薯的制备:先用清洁的剪刀将250克马铃薯去皮,然后切成均匀的小块。

3.煮马铃薯:将马铃薯块放入玻璃容器或烧杯中,并加入足够的自来水,使其覆盖马铃薯。

然后将容器放入灭菌器或压力锅中,煮沸30分钟杀灭马铃薯中的微生物。

4.过滤溶液:将煮熟的马铃薯溶液用细网过滤器过滤出来,以去除固体残渣。

5.加入琼脂:将过滤后的马铃薯溶液重新倒回玻璃容器或烧杯中,随后加入15克的琼脂。

将容器放入微波炉中,加热溶解至琼脂完全溶解为止。

6.加入葡萄糖:将20克葡萄糖加入琼脂溶液中,搅拌均匀。

7.均匀分配:将培养基溶液分装到培养瓶或琼脂培养皿中。

每瓶或皿中的溶液量应根据需要进行调整,一般为20-25毫升。

8.pH调节:使用pH计或pH试纸检测培养基的酸碱度。

PDA培养基的理想pH值为5.6、如果pH值高于或低于此值,则使用盐酸或碳酸氢钠溶液进行调节,直到达到理想的pH值。

9. 灭菌:将装有培养基的瓶或皿盖好,然后放入灭菌器或压力锅,进行高温高压灭菌。

通常在121℃下压力为15磅(或1.05kg/cm²)下灭菌20分钟。

10.存储:在灭菌后的培养基冷却到接近室温后,将其存储在冰箱中,以防止微生物生长。

注意事项:-所有使用的工具和培养基都必须经过彻底的消毒。

-在煮马铃薯时,要确保马铃薯块完全煮熟,以确保有效杀灭微生物。

-在加入琼脂和葡萄糖时,要确保琼脂完全溶解,葡萄糖均匀分散。

-在调节pH时要小心,因为pH调节对微生物的生长有重要影响。

pda培养基

pda培养基

pda培养基
PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的培养基,以马铃薯和葡萄糖为主要成分。

它适用于真菌和霉菌的培养和鉴定。

PDA培养基的配方如下:
- 马铃薯提取物:200 g/L
- 葡萄糖:20 g/L
- 洋葱提取液:1 g/L
- 干酪膜素:0.1 g/L
- 硫酸镁:0.5 g/L
- 琼脂:15 g/L
- 蒸馏水:1000 mL
1
制备PDA培养基的步骤如下:
1. 将马铃薯洗净去皮,切成小块。

2. 将马铃薯块放入大容器中,加入适量的蒸馏水,煮沸1
小时,然后离心取得汁液。

3. 将马铃薯汁液过滤。

过滤液为马铃薯提取物。

4. 在一烧瓶中加入马铃薯提取物和葡萄糖,搅拌溶解。

5. 在另一烧瓶中加入洋葱提取液和硫酸镁,搅拌溶解。

6. 将两个烧瓶中的溶液混合在一起,调整pH值为5.6-6.2。

7. 在溶液中加入干酪膜素和琼脂,搅拌溶解。

8. 将培养基加热至沸腾,然后倒入培养瓶中。

9. 灭菌培养瓶,通常以121°C高压蒸汽灭菌20-30分钟。

PDA培养基可以用于分离和培养真菌,如酵母菌、霉菌和
子囊菌等。

它提供了合适的营养物质和适宜的条件,促进
真菌的生长和繁殖。

2。

PDA真菌培养基

PDA真菌培养基

PDA培养基编辑词条PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Mediu m),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

目录基本介绍配制方法展开编辑本段基本介绍PDA培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基,是分离菌物和细菌的常用培养基。

一种常用的培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。

按物理性状划分:固体培养基按培养基成分划分:半合成培养基编辑本段配制方法配方马铃薯300克葡萄糖20克琼脂15~20克自来水1000毫升自然PH配制步骤其做法是先洗净去皮,再称取300g马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管或者锥形瓶,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀,冷却后贮存备用。

其他事项1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。

2.PDA培养基一般不需要调pH。

对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。

如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。

调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。

3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。

4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.1g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性干燥培养基的制造方法申请号/专利号:93104723本发明涉及用于培养真菌类微生物的马铃薯葡萄糖琼脂干燥培养基的制造方法。

马铃薯经匀浆、浸提、液化、糖化、胰酶消化、煮沸过滤、浓缩及喷雾干燥等生产工艺得到马铃薯营养提取粉,配以适量的葡萄糖和琼脂粉,就可制成PDA干燥培养基。

本发明从马铃薯中提取的营养物质数量是常规方法的5-7倍。

本发明生产的PDA干燥培养基具有使用方便、营养丰富、更宜于微生物生长发育、节省原料、便于贮运、适合工业化生产等优点。

培养基配方

培养基配方

培养基配方1、PDA培养基(用于分离、培养植物内生真菌):马铃薯(去皮)200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。

用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 μ g/ml,用于抑制细菌的生长。

2、NA培养基(用于分离、培养植物内生细菌):牛肉膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖2.5g,琼脂粉15g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。

用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50μg/ml,用于抑制真菌生长。

115℃,20min 灭菌。

3、LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;4、DSM1培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,胰蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;5、DSM2培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl5 g,细菌学蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;6、Msgg培养基:磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0),MOPs 100 mmoL/L(pH7.0),MgCl2 2 mmoL/L,CaCl2 700 mmoL/L,MnCl2 50 μM,FeCl3 50 μM,ZnCl2 1 μM,VB1 2 μM,甘油0.5 %,谷氨酸0.5 %,色氨酸50 μg/mL,苯丙氨酸50 μg/mL,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

7、N%NA培养基:牛肉膏3.0 g,细菌学蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂粉N*10 g,8、BGM1培养基:牛肉膏3 g,胰蛋白胨10 g,NaCl 5 g,磷酸三钾26.631 g(pH7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,葡萄糖1 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

pda培养基配方

pda培养基配方

PDA培养基配方及配制方法PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称。

宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。

下面就详细介绍了pda培养基的配方及配制方法及步骤。

1.PDA培养基的配方:马铃薯200克葡萄糖20克琼脂20克蛋白胨5克磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克水1000ml PH自然。

2.PDA培养基的制作工艺流程:设计培养基配方→材料煮汁→补水→琼脂溶解→再次补水→药品溶解→调PH值→分装→灭菌→摆斜面3.PDA培养基的制作步骤a 材料煮汁:1000ml水置于锅中,待烧开后加入200克去皮、切片的马铃薯煮20到30分钟,至薯片软而不烂,用八层纱布过滤,取滤液。

b 琼脂溶解和补水:将马铃薯滤液重新加入到锅中,补水至1000ml,继续加热沸腾而后加入琼脂,继续文火煮沸至琼脂完全溶解,再次补水至1000ml。

c 药品溶解:在琼脂溶解后加入葡萄糖20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,蛋白胨5克。

4 分装:a.试管培养基的分装分装所用的容器事先一定要清洗干燥,新购的试管内一般都残留烧碱,应先用稀硫酸在烧杯中煮沸,然后用清水洗干净,口朝下晾干后备用。

不能现洗现用,以免因管壁附有水膜导致培养基在试管口滑动。

分装试管时尽量避免培养液黏附试管口,以免培养基粘附棉塞,增加污染几率。

试管装量:制斜面培养基一般为试管高度的1/4—1/3。

b.平板培养基的分装将配制好的培养基倒入三角瓶,(三角瓶也一定要清洗干净),体积不要超过三角瓶的1/3(否则加热时液体沸腾易把棉塞冲开)5 加棉塞:棉塞要用普通棉花制作,不能用脱脂棉。

棉塞的大小,松紧要适度,过松达不到滤菌的目的,过紧妨碍空气流通,松紧度以于抓棉塞整个试管提起为宜。

标准的棉塞应是塞头略大,不易变形,一般塞入试管口2—3厘米。

占塞总长的2/3—1/3裸露在试管口外,比管口略大。

三角瓶棉塞同样松紧适中,一般塞入三角瓶3~4cm.6 装锅灭菌:将塞好棉塞的试管或三角瓶装进置物桶内,桶未装满用空试管填满以免试管倾倒,即可放入手提式高压灭菌锅中,盖好报纸,防止灭菌时棉塞被冷凝水淋湿,扭紧锅盖,排净锅内冷空气,待温度升至122—124℃之间开始计时30min,灭菌结束。

PDA LB培养基

PDA LB培养基

PDA培养基马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基是分离菌物和细菌的常用培养基,其做法是称取200g马铃薯,洗净去皮切成小块,加水1000ml煮沸半个小时或高压蒸煮20分钟,纱布过滤,再加10-20g葡萄糖和17-20g琼脂,充分溶解后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约5-10ml(视试管大小而定),15磅蒸气(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。

PDA培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。

小技巧:1、做PDA培养基用土豆应去皮,避免带入杂质,产生泡沫,影响通气。

PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

一种常用的培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。

分装于试管按物理性状划分:固体培养基按培养基成分划分:半合成培养基配方马铃薯200克葡萄糖20克琼脂15~20克自来水1000毫升自然PH配制步骤其做法是先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管或者锥形瓶,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀,冷却后贮存备用。

其他事项1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。

2.PDA培养基一般不需要调pH。

对于要调节pH的培养基,一般用pH 试纸测定其pH。

如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。

调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。

3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。

4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.1g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性LB培养基LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,其发明人为贝尔塔尼(Giuseppe Bertani),这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。

(完整版)PDA培养基的配方及配制方法

(完整版)PDA培养基的配方及配制方法

PDA培养基的配方及配制方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

它属于固体培养基、半合成培养基.PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛.PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值自然PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。

土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20—30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。

滤液补充水分到1000ml。

(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。

(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

PDA培养基的配方及配制方法

PDA培养基的配方及配制方法

PDA培养基的配方及配制方法
PDA(Potato Dextrose Agar)培养基是一种常用的微生物培养基,广泛用于真菌和霉菌的分离和培养。

它由马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂组成,营养丰富,pH较为中性,适合各种真菌和霉菌的生长。

以下是PDA 培养基的配方及配制方法。

配方:
1.马铃薯提取物:200克
2.葡萄糖:20克
3.琼脂:20克
4.蒸馏水:1000毫升
配制方法:
1.将200克马铃薯削皮并切成块。

2.将马铃薯块加入1000毫升蒸馏水中,煮沸30分钟。

3.将马铃薯块滤除,保留煮沸后的马铃薯水。

4.将200克煮沸后的马铃薯水搅拌均匀,加入20克葡萄糖和20克琼脂。

5.将培养基混合物加热至化解琼脂,并搅拌均匀。

6.将培养基装入培养瓶中。

7.用适当装置和工具对装有培养基的瓶子进行高压灭菌,常压培养2小时。

8.灭菌完成后,将培养基倒入培养皿中,密封。

以上是PDA培养基的配方及配制方法。

使用培养基时要注意,避免交叉污染和外界污染。

同时,根据需要可以调整配方中的成分浓度,以适应不同微生物的要求。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

PDA培养基的配方及配制方法
PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

它属于固体培养基、半合成培养基。

PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。

PDA培养基的配方
土豆 200g
葡萄糖 20g
琼脂 15~20g
水 1000mL
pH值自然
PDA培养基的配制
(1)称量和熬煮
按培养基配方逐一称取去皮土豆。

土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。

滤液补充水分到1000ml。

(2)加热溶解
把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

(3)分装
按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

(4)加棉塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。

(5)包扎
加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

相关文档
最新文档